在几乎所有生物体中,生物钟和细胞周期两个最重要的有节律事件。生物钟掌握着时间信息并且使生物体维持24小时的生理周期,而细胞周期主要影响生长和分裂。生物钟对细胞分裂的影响,在各种生物中都观察到。然而,这种作用是否影响哺乳类的生理还未知。时钟蛋白PER2上的一个突变（S662G）是引起家族性早睡早起综合症（FASPS）的原因,该综合症的表现是病人在傍晚就要睡觉,早上很早就要起床。这篇文章中,我们的证据表明PER2突变能抵抗X-射线诱导凋亡,并增加E1A和RAS介导的肿瘤转化。与此相一致的,在肿瘤敏感的p53小鼠背景上,PER2突变能够影响肿瘤发生。通过分析时钟控制的细胞周期基因p21,c-Myc,Cyclin D1和p27,我们发现p21 and Cyclin D的相对表达相位在PER2突变的MEFs中有明显的变化。我们相信,这种由Per2介导的p21的相位变化是细胞周期和肿瘤发生的新机制。
人类WNK4(Human With No lysine[K]kinase 4,hWVK4)基因编码一种特殊类型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该基因的错义突变可导致一种遗传性高血压——Ⅱ型假性低醛固酮血症(Pseudohypoaldosteronism typeⅡ,PHAⅡ,OMIM,No.145260),其主要临...
详细信息
人类WNK4(Human With No lysine[K]kinase 4,hWVK4)基因编码一种特殊类型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该基因的错义突变可导致一种遗传性高血压——Ⅱ型假性低醛固酮血症(Pseudohypoaldosteronism typeⅡ,PHAⅡ,OMIM,No.145260),其主要临床表现为高血压和高血钾。研究表明WNK4激酶主要表达在肾脏,通过调节肾脏远曲小管和集合管上的多种离子转运体和离子通道参与机体水盐代谢和血压调节。目前关于hWK4基因的研究主要集中在功能方面,而hWNK4基因表达调控机制研究较少。生物信息学分析显示hWNK4基因近端启动子区未见典型的TATA盒,但富含GC序列和一些潜在的转录因子作用元件,如Sp1、AP-1和C/EBP等。为检验转录因子Sp1是否参与hWNK4基因表达调控,本研究选用人胚肾细胞系HEK293细胞为细胞模型,应用不同浓度的Sp1特异性抑制剂Mithramycin A处理细胞,24小时后收集细胞,提取RNA,紫外分光光度计检测标本RNA纯度和浓度后,利用试剂盒将mRNA反转录成cDNA,采用Real-time PCR技术检测处理前后HEK293细胞中WVK4基因mRNA表达水平变化情况。结果显示Mithramycin A负性调节HEK293细胞中WNK4基因mRNA表达,且随着Mithramycin A作用浓度增大,下调效应增强,具有浓度依赖性。该结果提示转录因子Sp1可能参与WNK4基因表达调控。
暂无评论