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骨髓基质细胞对胶质瘤生长的影响

骨髓基质细胞对胶质瘤生长的影响

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：何秋萍徐群渊首都医科大学神经科学研究所

骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）属中胚层多能干细胞,可以在哺乳动物体内分化为内胚层、中胚层和外胚层的终末细胞。脑胶质瘤（glioma）是原发性脑肿瘤中发病率最高且预后最差的肿瘤,其病因和发病机理还不清楚。大量...

骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）属中胚层多能干细胞,可以在哺乳动物体内分化为内胚层、中胚层和外胚层的终末细胞。脑胶质瘤（glioma）是原发性脑肿瘤中发病率最高且预后最差的肿瘤,其病因和发病机理还不清楚。大量研究证实,BMSCs在脑内具有向脑胶质瘤趋向的能力。BMSCs向脑胶质瘤迁徙的具体机制并不明确。迁移至肿瘤组织内的BMSCs对肿瘤的生长有何影响结论不一。分析以前的文献,推测研究结果的差异可能源于BMSCs标记方法的不同。因此,建立更有效的标记BMSCs的技术方法是解决上述问题的关键。本研究通过建立C6胶质瘤动物模型,运用体外GFP基因标记BMSCs,体内外GFP荧光和Y染色体荧光原位杂交方法观察和检测供体细胞,来探讨BMSCs对胶质瘤生长的影响。结果显示经尾静脉移植的BMSCs能够向脑胶质瘤迁移。后续工作将针对胶质瘤组织中BMSCs来源细胞的特性进行研究。骨髓基质细胞能够向脑胶质瘤迁移。在机体组织受损伤时,骨髓源干细胞可经骨髓动员自发到达损伤部位,并在局部微环境诱导下分化为特异的组织细胞,充当各组织干细胞的角色参与受损组织的功能重建。骨髓干细胞分化为各组织细胞的机制目前还不清楚,但是有一点是很明确的,外部环境可以调节骨髓干细胞的分化方向及程度。

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背根神经节神经干细胞的分离培养和分化的研究

背根神经节神经干细胞的分离培养和分化的研究

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：顾芸顾晓松南通大学江苏省神经再生重点实验室

周围神经的再生修复一直是临床治疗的难点。现今的组织工程（Tissue engineering）研究领域中,寻找能够替代雪旺细胞的种子细胞的工作逐渐受到重视。神经嵴干细胞是周围神经系统的原基,因此将神经干细胞应用于神经组织工程具有良好的应...

周围神经的再生修复一直是临床治疗的难点。现今的组织工程（Tissue engineering）研究领域中,寻找能够替代雪旺细胞的种子细胞的工作逐渐受到重视。神经嵴干细胞是周围神经系统的原基,因此将神经干细胞应用于神经组织工程具有良好的应用前景。我们首先体外分离培养背根节神经干细胞,然后体外诱导其沿雪旺氏细胞方向分化及对其功能鉴定;在此基础上对bFGF体外诱导神经干细胞沿雪旺氏细胞分化的机制进行研究。实验结果显示我们成功地分离培养获得背根节源的神经干细胞,并建立了向雪旺氏细胞方向分化的方法。分化所获得的细胞具有雪旺氏细胞的细胞学特征和功能学特征。由此认为我们已经为周围神经再生组织工程神经找到了合适的种子细胞。在此基础上,我们利用这体外培养系统,从生物功能、信号转导和基因调控三方面对bFGF在背根节神经干细胞分化过程中的作用进行了深入研究。bFGF通过FGFR1受体完成其在神经干细胞分化过程中的信号转导和生物功能。bFGF特异性地通过Erk1/2信号通路调控转录因子c-Jun和的基因表达水平来调控背根节来源的神经干细胞向雪旺氏细胞分化。

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NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用

NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：吴翠莹李树基胡洪海朱心红梅林高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的以往研究表明神经调节蛋白1(NRG-1)对缺血性神经元有显著的保护作用,但NRG1发挥神经保护作用的机制目前尚不清楚。我们之前的研究发现NRG-1可促进GABA的释放。因而本研究探讨了NRG1是否通过GABA能机制而发挥神经保护作用。方法建立... 详细信息

目的以往研究表明神经调节蛋白1(NRG-1)对缺血性神经元有显著的保护作用,但NRG1发挥神经保护作用的机制目前尚不清楚。我们之前的研究发现NRG-1可促进GABA的释放。因而本研究探讨了NRG1是否通过GABA能机制而发挥神经保护作用。方法建立培养皮层神经元的氧-葡萄糖剥夺(OGD)/复氧(R)模型,通过细胞计数检测各组神经元死亡率。结果在氧-葡萄糖剥夺模型上,NRG-1具有明显的神经保护作用;单独给予ecto-erbB4以中和内源性NRG-1可使神经元死亡率升高;ecto-erbB4可明显减弱外源性NRG-1的神经保护作用;ErbB4受体敲除的神经元对OGD损伤更敏感。分别给予GABA受体激动剂muscimol、baclofen或同时给予baclofen和muscimol,均可降低神经元的死亡率,表明GABA受体激动剂对神经元有显著的保护作用。GABA受体阻断剂bicucullin可部分取消NRG-1的神经保护作用,并且NRG-1与GABA受体激动剂(muscimol+baclofen)的保护作用无协同作用。结论 NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用。

关键词：氧-葡萄糖剥夺/复氧模型皮层神经元 NRG-1 GABA

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ZGF-2-130抑制小胶质细胞活化并保护脑缺血大鼠海马神经元死亡

ZGF-2-130抑制小胶质细胞活化并保护脑缺血大鼠海马神经元死亡

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：宣爱国李树基方莹莹张猛刘吉红钟桂发朱心红胡文辉高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室中国科学院广州生物医药与健康研究院

目的探讨不同剂量ZGF-2-130抑制小胶质细胞活性,观察ZGF-2-130对大鼠全脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用。方法参照改良的Pulsinelli四血管闭塞法建立全脑缺血模型。Wistar大鼠50只,随机分为假手术组、生理盐水+模型组、模型组+ZGF-2-13... 详细信息

目的探讨不同剂量ZGF-2-130抑制小胶质细胞活性,观察ZGF-2-130对大鼠全脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用。方法参照改良的Pulsinelli四血管闭塞法建立全脑缺血模型。Wistar大鼠50只,随机分为假手术组、生理盐水+模型组、模型组+ZGF-2-130低、中、高剂量组(1 mg/kg,5 mg/kg,12.5 mg/kg),每组10只。采用Nissl染色观察并计数双侧海马CA1区存活的神经元数目,免疫组化单/双标技术和激光共聚焦扫描技术观察小胶质细胞的活性和星形胶质细胞的数量。结果缺血前2小时给药,ZGF-2-130中剂量组明显抑制小胶质细胞的活性,海马CA1区神经元得到显著保护(P<0.01),而低、高剂量组抑制小胶质细胞的活性和神经保护作用均不显著(P>0.05)。与模型组相比,ZGF-2-130对星形胶质细胞的数目无明显作用(P>0.05)。结论 ZGF-2-130选择性抑制小胶质细胞的活性,并可显著保护脑缺血后大鼠海马神经元的死亡。

关键词：小胶质细胞脑缺血神经保护星形胶质细胞

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缓激肽对豚鼠小肠粘膜下神经丛的作用

缓激肽对豚鼠小肠粘膜下神经丛的作用

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：邹飞三峡大学医学院生理教研室

应用微电极细胞内记录法研究缓激肽（bradykinin,BK）对豚鼠小肠粘膜下神经丛神经元电活动的影响;用免疫组织化学方法对小肠粘膜下神经丛的BK受体亚型进行定位分析。研究表明BK可使AH型多极神经元和S型单轴突神经元的膜去极化而增强其... 详细信息

应用微电极细胞内记录法研究缓激肽（bradykinin,BK）对豚鼠小肠粘膜下神经丛神经元电活动的影响;用免疫组织化学方法对小肠粘膜下神经丛的BK受体亚型进行定位分析。研究表明BK可使AH型多极神经元和S型单轴突神经元的膜去极化而增强其兴奋性;选择性缓激肽B受体阻断剂HOE-140和WIN64338可抑制BK所诱导的去极化作用,但选择性缓激肽B受体阻断剂des-arg10-HOE-140和des-arg9-leu8-BK无此效应。选择性B受体激动剂胰激肽（kallidin）能有效模拟出BK样作用,但选择性B受体激动剂des-arg9-BK无BK样作用。Westernblot分析和RT-PCR证实了B受体蛋白和mRNA的表达。用荧光标记的B受体拮抗剂进行分析,证实粘膜下神经丛的大多数神经节细胞有B受体表达。其中对神经肽Y（NPY）、血管活性肠肽（VIP）、P物质（SP）、乙酰胆碱转移酶（ChAT）和calbindin表现出免疫反应阳性的神经元表达B受体的比例分别为80%、73%、82%、70%和100%。实验结果表明BK对小肠粘膜下神经丛神经元具有兴奋作用,且此作用主要由缓激肽B受体所介导。BK兴奋促分泌神经元的病理生理意义可能是刺激粘膜分泌,是导致肠炎患者出现分泌性腹泻的主要原因。

关键词：缓激肽豚鼠粘膜下神经丛

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实验性缺血性脑损伤与NRG1-ErbB4通路关联性研究

实验性缺血性脑损伤与NRG1-ErbB4通路关联性研究

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：卢应梅韩峰李可心陈晓娟陶蓉蓉黄继云李晓明浙江大学医学院卫生部神经生物学重点实验室浙江大学药理毒理与生化药学研究所

目的神经调节素Neuregulin 1（NRG1）和它的受体ErbB信号通路在神经元的生长、分化和存活中具有重要作用。但是NRG1-ErbB4在缺血性脑损伤中迟发性神经元死亡中的作用和机制并不清楚。本研究的目的是探讨NRG1-ErbB4关联信号对缺血性脑损... 详细信息

目的神经调节素Neuregulin 1（NRG1）和它的受体ErbB信号通路在神经元的生长、分化和存活中具有重要作用。但是NRG1-ErbB4在缺血性脑损伤中迟发性神经元死亡中的作用和机制并不清楚。本研究的目的是探讨NRG1-ErbB4关联信号对缺血性脑损伤引起的迟发性神经元死亡的保护作用及其机制。方法综合应用多种分子生物学、形态学和行为学等多种研究手段展开研究,应用Western blotting技术定量检测脑组织中ErbB4蛋白表达的经时变化,应用激光共聚焦免疫荧光技术验证缺血性脑损伤后ErbB4蛋白在神经元细胞的表达变化。结果 NRG1对原代培养小鼠皮层神经元细胞结合缺氧缺糖条件下诱发的神经元细胞损伤有一定保护作用。NRG1脑室给药（ALZET（?） MICRO-OSMOTIC PUMP）可以有效减少脑梗塞灶的体积,NRG1的脑保护作用与ErbB4受体调控机制关联。结论 NRG1的神经保护作用可能是通过干预ErbB4关联信号途径来实现的。

关键词：神经调节素 ErbB4 缺血性脑损伤神经保护

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蛋白激酶D1对突触形态发育的调控作用

蛋白激酶D1对突触形态发育的调控作用

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：李文琪李刚郑歌朱彦兵张弛王韵北京大学神经科学研究所北京大学医学部基础医学院教育部及卫生部神经科学重点实验室

目的蛋白激酶D（Protein Kinase D,PKD）是一类新发现的蛋白激酶,其在中枢神经系统中作用远未阐明。我们课题组前期研究工作表明,PKD1和PKD2参与神经元发育早期极性的形成,随后其他研究者分别发现在神经元发育的中期PKD1参与树突囊泡转... 详细信息

目的蛋白激酶D（Protein Kinase D,PKD）是一类新发现的蛋白激酶,其在中枢神经系统中作用远未阐明。我们课题组前期研究工作表明,PKD1和PKD2参与神经元发育早期极性的形成,随后其他研究者分别发现在神经元发育的中期PKD1参与树突囊泡转运过程或者树突分叉过程的调控,而关于PKD家族在神经元发育晚期或成熟神经元中的功能,目前尚无任何报道。因此,在本研究中,我们将重点探讨PKDl对神经元晚期发育中突触形态的影响。方法采用免疫荧光技术、基因干扰技术、分子生物学及生物化学等多种技术,以原代培养的海马神经元为研究对象。结果 PKD1参与神经元发育晚期突触数目的调控,过表达PKD1使树突棘数目明显增多,敲低PKD1或抑制其激酶功能使树突棘数目减少,并且在数目变化的同时诱发树突棘大小的改变。电生理研究结果提示PKD对于维持突触传递效能具有重要作用。PKD1参与突触形态发育调控作用机制之一可能是通过直接磷酸化及与神经型钙粘素相互作用来实现。结论 PKD1在突触形态发育过程中发挥重要作用。

关键词：突触发育树突棘神经钙粘素蛋白激酶D 磷酸化

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终纹床核内源性NRG1对焦虑样行为的调节

终纹床核内源性NRG1对焦虑样行为的调节

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：张杰毕琳琳刘吉红王珏梅林朱心红高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的终纹床核(bed nucleus of stria terminalis,BNST)是大脑内情绪情感调节环路中各核团的中继站,在焦虑症的发病中发挥着极为重要的作用。BNST含有丰富的GABA能神经元。我们之前的研究表明,NRG1能够调节内源性GABA释放,因而我们探讨... 详细信息

目的终纹床核(bed nucleus of stria terminalis,BNST)是大脑内情绪情感调节环路中各核团的中继站,在焦虑症的发病中发挥着极为重要的作用。BNST含有丰富的GABA能神经元。我们之前的研究表明,NRG1能够调节内源性GABA释放,因而我们探讨了内源性NRG1对焦虑样行为的调节。方法采用立体定位埋管技术向小鼠BNST内注射NRG1、NRG1受体特异性阻断剂AG1478、Ecto-ErbB4(中和内源性NRG1)、GABA受体阻断剂(阳性对照)并进行小鼠的焦虑样行为(高架十字迷宫、旷场实验、新环境下压力进食实验和社会交往实验)检测。结果在高架十字迷宫、旷场实验、新环境下压力进食实验和社会交往实验中,注射bicuculline的小鼠产生了焦虑样行为,注射ecto-ErbB4或AG1478同样均可诱导小鼠发生焦虑样行为,而给予外源性NRG1的小鼠则未表现出焦虑样行为。结论阻断终纹床核内源性的NRG1-ErbB4通路可导致动物产生焦虑样行为,提示终纹床核NRG1-ErbB4信号通路可能在焦虑症的发病中发挥重要的作用。

关键词：焦虑症终纹床核 GABA能系统 NRG1

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鱼藤酮所致帕金森氏病动物模型的优化

鱼藤酮所致帕金森氏病动物模型的优化

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：刘岩孙建栋苑玉和陈乃宏中国医学科学院药物研究所

目的帕金森氏病（Parkinson’s disease,PD）是严重影响人类健康的神经退行性疾病之一,其发病机制尚不明确。长期系统给予鱼藤酮能在实验动物身上产生帕金森病的典型病理改变。由于鱼藤酮具有明显的外周毒性,系统给药模型存在着高死亡... 详细信息

目的帕金森氏病（Parkinson’s disease,PD）是严重影响人类健康的神经退行性疾病之一,其发病机制尚不明确。长期系统给予鱼藤酮能在实验动物身上产生帕金森病的典型病理改变。由于鱼藤酮具有明显的外周毒性,系统给药模型存在着高死亡率的不足。通过对帕金森病环境因素作用的分析理解,本实验模拟环境接触方式给与鱼藤酮,为研究帕金森氏病的发病机理提供更加可靠的动物模型。方法本实验采用雄性C57小鼠,分为模型组和油溶液对照组。将溶有鱼藤酮的橄榄油置于无垫料鼠笼中,放入C57小鼠,将鼠笼至于暗处,使小鼠自由活动2 h。模型组给药浓度为每天0.1 mg/只。给药2周后检测小鼠行为学,并取材,采用免疫组化方法检测中脑TH阳性细胞数。结果给药两周后,爬杆评分结果显示,与溶剂对照组相比,模型组小鼠爬杆能力显著降低（P＜0.01）。免疫组化结果显示,与溶剂对照组相比,模型组小鼠中脑TH阳性细胞数显著减少（P＜0.05）。结论实验结果表明,采用接触给药造模方式使小鼠产生类帕金森病的行为学改变的同时也能产生相应的病理学改变,是有效的帕金森氏病的动物模型。

关键词：帕金森氏病动物模型鱼藤酮

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基于序列特征预测HIF靶向的铁代谢相关蛋白

基于序列特征预测HIF靶向的铁代谢相关蛋白

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：甘祝军李伍举应晓敏朱玲玲范明首都医科大学神经生物学系军事医学科学院基础医学研究所

目的低氧是常见的病理生理状态,铁代谢紊乱是脑卒中等低氧损伤的重要病理过程。近年来研究发现越来越多的与铁代谢相关的蛋白,并陆续发现多种铁代谢相关蛋白通过低氧反应元件（hypoxia-responseelement,HRE）,受到低氧诱导因子（hypoxia... 详细信息

目的低氧是常见的病理生理状态,铁代谢紊乱是脑卒中等低氧损伤的重要病理过程。近年来研究发现越来越多的与铁代谢相关的蛋白,并陆续发现多种铁代谢相关蛋白通过低氧反应元件（hypoxia-responseelement,HRE）,受到低氧诱导因子（hypoxia inducible factor,HIF）的直接调节。本研究目的是基于基因表达数据整合和现有HRE序列特征,寻找新的受HIF直接调节的铁代谢相关蛋白。方法根据高通量基因表达数据（gene expression omnibus）,建立铁代谢相关蛋白库。以已知HRE为阳性训练集,构建碱基频率矩阵,对铁代谢相关蛋白基因组数据进行扫描,并对阳性结果进行保守性分析。结果（1）所构建的碱基频率矩阵模型在训练集上的敏感性和特异性分别为40.28%和100.0%,此时训练集中含有74个HRE阳性数据和3 000个长为20 000nt的阴性数据。（2）基于模型的人基因组（人NCBI Build 36.2）扫描,获得了2 178个阳性基因。（3）建立了铁代谢相关蛋白库,拟进一步对其HRE扫描结果进行保守性分析。结论这一方法将为发现新的HIF靶向的铁代谢相关蛋白提供较好的生物信息学支持和进一步进行实验研究的依据。

关键词： HIF HRE 铁低氧

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