目的研究α-synuclein的毒性机制,建立PD治疗药物的评价模型。方法利用分子克隆技术构建α-synuclein真核表达载体并转染PC12和SH-SY5Y细胞,建立稳定高表达细胞株;MTT法检测细胞存活率;Western blot法、ELISA法和Confocal检测的蛋白表达及蛋白磷酸化的改变;双荧光素酶报告系统检测转录因子的活性;免疫共沉淀技术检测蛋白之间的相互作用及。结果α-synuclein过表达使BDNF表达明显减弱,而调控BDNF表达的转录因子NFκB（Nuclear factorκB）、NFAT（nuclear factor of activated T cells）、CREB(cAMP/Caresponse element binding protein)的转录活性明显受抑制,但并不影响Nurrl的转录活性;同时发现α-synuclein能够与PKC（protein kinase C）相互作用并抑制其活性。结论α-synuclein具有细胞毒性,已建立的模型能够对PD治疗药物的活性进行评价。
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