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脂多糖刺激小胶质细胞分泌Pro-cathepsin L及对神经元凋亡的影响

脂多糖刺激小胶质细胞分泌Pro-cathepsin L及对神经元凋亡的影响

引用

中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：张辉刘桂冬楼跃肖勤陈生弟上海交通大学附属瑞金医院

目的观察脂多糖刺激对小胶质细胞系BV-2细胞分泌Pro-cathepsin L和神经元凋亡的影响。方法通过脂多糖刺激BV-2细胞产生炎性反应建立炎性细胞模型,Western blotting法分别观察脂多糖刺激前后BV-2细胞条件培养液中Pro-cathepsin L表达水平... 详细信息

目的观察脂多糖刺激对小胶质细胞系BV-2细胞分泌Pro-cathepsin L和神经元凋亡的影响。方法通过脂多糖刺激BV-2细胞产生炎性反应建立炎性细胞模型,Western blotting法分别观察脂多糖刺激前后BV-2细胞条件培养液中Pro-cathepsin L表达水平,以及经Cathepsin L抑制剂预理前后多巴胺能神经元细胞系PC-12活化Caspase-3表达变化。结果脂多糖刺激BV-2细胞1h和3 h后,Pro-cathepsin L表达水平显著增加,与刺激前比较差异均有统计学意义(P=0.015,0.021)。与BV-2细胞共培养并经脂多糖刺激1 h和3 h后,PC-12细胞活化Caspase-3表达水平升高,且显著高于刺激前水平(均P=0.000);经Cathepsin L抑制剂预处理及脂多糖刺激1 h和3 h后,PC-12细胞活化Caspase-3表达水平下降,且显著低于单纯脂多糖刺激组(P=0.005,0.001)。结论小胶质细胞在炎性反应条件下可向细胞外释放Pro-cathepsin L,促进神经元表达活化型Caspase-3,在神经变性疾病发生发展中发挥重要作用。

关键词：小胶质细胞细胞活化 Caspase 神经元凋亡 Pro-cathepsin L

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PLD1参与海马神经元树突发育的调节

PLD1参与海马神经元树突发育的调节

引用

中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：朱彦兵康凯殷东敏王韵北京大学神经科学研究所乔治亚医学院分子医学和遗传学研究所神经病学系

目的磷脂酶D(PLD)是一种磷脂水解酶,能够水解卵磷脂产生磷脂酸和胆碱。PLD参与多种细胞功能的调节,包括细胞的增殖与分化,胞吞和胞吐过程以及细胞骨架的重排等。PLD主要包含两种亚型,PLD1和PLD2,并广泛存在于哺乳动物的细胞和组织中。... 详细信息

目的磷脂酶D(PLD)是一种磷脂水解酶,能够水解卵磷脂产生磷脂酸和胆碱。PLD参与多种细胞功能的调节,包括细胞的增殖与分化,胞吞和胞吐过程以及细胞骨架的重排等。PLD主要包含两种亚型,PLD1和PLD2,并广泛存在于哺乳动物的细胞和组织中。有研究表明PLD1可以调节H19-7细胞系和神经干细胞突起的生长。但是PLD1在神经系统发育中的作用尚不明确。本研究的目的是探讨PLD1在海马神经元树突发育中的作用。方法体外培养分离的海马神经元作为研究的模型。分别从抑制剂、过表达体系和小干扰RNA三个层次探讨压抑或者提高PLD1活性后,对海马神经元树突数量的影响。结果 (1)PLD的抑制剂正丁醇,显著地增加了海马神经元树突的数量;(2)过表达野生型PLD1后,海马神经元的树突数量明显减少,过表达显性突变型PLD1后,海马神经元的树突数量明显增加;(3)共表达野生型PLD1和PLD1的小干扰RNA,海马神经元的树突数量恢复到正常水平。结论 PLD1在海马神经元树突的发育过程中发挥重要作用。

关键词：树突发育磷脂酶D1 磷脂树突分支树突数目

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甘丙肽2型受体受泛素化调控的初步探讨

甘丙肽2型受体受泛素化调控的初步探讨

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：宫夏霓路雅静李天翊徐舒杨予涛徐志卿首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京神经再生修复研究重点实验室

甘丙肽(Galanin)是一个广泛分布于神经系统和外周组织中的神经肽。通过与其受体结合,Galanin参与调节认知、觉醒、摄食、生殖等生理过程。目前已克隆出甘丙肽受体的三种亚型,它们都属于G蛋白耦联受体(GPCR)。本研究在瞬时转染人甘丙肽2... 详细信息

甘丙肽(Galanin)是一个广泛分布于神经系统和外周组织中的神经肽。通过与其受体结合,Galanin参与调节认知、觉醒、摄食、生殖等生理过程。目前已克隆出甘丙肽受体的三种亚型,它们都属于G蛋白耦联受体(GPCR)。本研究在瞬时转染人甘丙肽2型受体(GalR2)的HEK293细胞系中给予蛋白酶体抑制剂MG132共同培养,发现GalR2在细胞中发生积累。这提示GalR2在降解过程中可能涉及泛素-蛋白酶体途径。在前人对GPCR的研究中显示,泛素修饰的GPCR既可能经蛋白酶体途径降解,也有可能作为分选信号调控囊泡的转运。在酵母双杂交的工作中,我们用人GalR2的C端作为bait,人脑cDNA文库作为prey筛选与GalR2-C端相互作用的蛋白。在酵母双质粒转化验证成功的相互作用蛋白中,有部分是与催化泛素化相关的蛋白。这些蛋白中除了典型的蛋白-蛋白相互作用区域之外,还都存在一个具有E3泛素连接酶特征的结构域,如SOCS-box,F-box等。这从另一个侧面也提示GalR2可能受泛素化调控。

关键词：甘丙肽2型受体(GalR2) G蛋白耦联受体(GPCR) 泛素酵母双杂交

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多受体平衡紊乱导致的CRH过度驱动与抑郁症发病的新机制

多受体平衡紊乱导致的CRH过度驱动与抑郁症发病的新机制

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：周江宁中国科学技术大学生命科学学院

近年来抑郁症发病的应激假说受到高度关注。下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）神经元是调节应激反应的中枢驱动因子。我们的工作以核受体家族对下丘脑室旁核CRH神经元的调控为切入点,发现CRH神经元上存在有雌激素受体（ERα...

近年来抑郁症发病的应激假说受到高度关注。下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）神经元是调节应激反应的中枢驱动因子。我们的工作以核受体家族对下丘脑室旁核CRH神经元的调控为切入点,发现CRH神经元上存在有雌激素受体（ERα）,在抑郁症患者ERα与CRH共存的神经元数目明显高于对照组,为雌激素调控CRH的活性,提供了细胞受体水平的结构基础（Brain,2005）。我们进一步观察到视黄酸受体（RAR）也与室旁核内CRH神经元共表达,CRH基因启动子部位存在RAR反应单元（RARE）,视黄酸通过RARα与RARE结合并促进CRH的基因表达（Biol Psychiatry,2009）。体内给予视黄酸的活性成分-全反式视黄酸（ATRA）可以诱导动物产生抑郁样行为改变,并伴有视黄酸信号通路和CRH的改变（Eur Neuropsyehopharmacol,2010）。雄激素的代谢产物3β-diol可通过ER通路显著增加CRH和AVP启动子的活性（Neuropharmacology,2008）。糖皮质激素受体的拮抗剂mifepristone治疗抑郁的机制可能与快速恢复应激诱导的海马突触可塑性变化有关（Neuropsychopharmacology,2007）。根据抑郁症患者下丘脑室旁核激光显微切割和多组受体基因表达的结果 ,我们提出关于抑郁症发病的一种新观点:调控下丘脑CRH神经元活性的多组兴奋性和抑制性受体间的平衡紊乱可能是抑郁症发病的最后共同通路（Mol Psychiatry,2008）。

关键词：

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Ywhag和Sept-9在脊髓源神经干细胞诱导分化为胆碱能神经元过程中的表达

Ywhag和Sept-9在脊髓源神经干细胞诱导分化为胆碱能神经元过程中...

引用

中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：李鹏飞王春芳呼钟理蔚洪恩刘彩玉龙志晶山西医科大学生物技术实验室太原市中医医院

目的本实验通过观察Ywhag和Sept-9在脊髓源神经干细胞诱导分化为胆碱能神经元过程中的表达变化情况,了解Ywhag和Sept-9神经干细胞分化过程中可能发挥的作用。方法从孕17天的Wistar胚胎大鼠脊髓提取出神经干细胞,接种到含EGF和bFGF的无... 详细信息

目的本实验通过观察Ywhag和Sept-9在脊髓源神经干细胞诱导分化为胆碱能神经元过程中的表达变化情况,了解Ywhag和Sept-9神经干细胞分化过程中可能发挥的作用。方法从孕17天的Wistar胚胎大鼠脊髓提取出神经干细胞,接种到含EGF和bFGF的无血清限定性培养基,待原代克隆球形成后,联合使用RA、SHH、NT-3和BDNF对神经干细胞进行诱导分化,观察脊髓源神经干细胞的分化情况,应用荧光定量PCR技术分析Ywhag和Sept-9基因在脊髓源神经干细胞诱导分化为胆碱能神经元的过程中的表达变化情况。结果神经干细胞在诱导分化为胆碱能神经元后,呈ChAT免疫荧光表达阳性;Ywhag基因的表达量在胆碱能神经元较神经干细胞低,是未分化NSCs的0.354倍（P＜0.05）;Sept-9基因的表达量在诱导分化后也较神经干细胞低,是未分化NSCs的0.586倍（P＜0.05）。结论 Ywhag和Sept-9基因参与了神经干细胞分化为胆碱能神经元的过程,可能对神经干细胞的干性维持有一定作用。

关键词：神经干细胞胆碱能神经元分化 Ywhag Sept-9

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功能性脑成像的信号理解与信息挖掘

功能性脑成像的信号理解与信息挖掘

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：李晟心理学系北京大学机器感知与智能教育部重点实验室北京大学

随着近年来认知神经科学的快速发展,功能性脑成像技术得到了越来越广泛的关注。这其中,功能性磁共振成像（fMRI）成为发展最快应用最广的一种成像技术。从初级感知觉的神经机制到高级社会认知功能的大脑网络,fMRI技术帮助研究者在不同... 详细信息

随着近年来认知神经科学的快速发展,功能性脑成像技术得到了越来越广泛的关注。这其中,功能性磁共振成像（fMRI）成为发展最快应用最广的一种成像技术。从初级感知觉的神经机制到高级社会认知功能的大脑网络,fMRI技术帮助研究者在不同领域取得了许多突破性的进展。但是由于fMRI是基于血液动力学与神经血管耦合对大脑的神经活动进行间接的记录,如何理解fMRI信号以及在此基础上如何发掘有用的信息一直都是研究者争论的焦点。这里我将介绍领域内关于fMRI信号来源与理解的一些最新研究进展,以及在此基础上如何更加合理的解释现有研究的实验结果。同时,我将介绍近几年我们在利用机器学习算法对fMRI信号进行信息挖掘方面所取得的进展,以及这些方法在视觉分类研究中的应用。最后,我们通过结合fMRI与脑电（EEG）技术,通过两种成像手段的同步采集提高fMRI信号的有效时间分辨率,进而得到传统分析方法无法获取的fMRI信号在时间维度上的精细信息。我们将这一多模态成像手段应用到视知觉学习的研究中,通过将EEG信号中所包含的信息与fMRI信号进行关联,发现不同的皮层区域分别参与到早期知觉整合和后期分类决策过程当中,从而为探索学习在视觉识别过程中所起的关键作用提供了最新的证据。

关键词：脑成像 fMRI 机器学习

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神经干细胞临床转化应用

神经干细胞临床转化应用

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：徐如祥北京军区总医院附属八一脑科医院北京军区总医院神经外科研究所

神经干细胞作为种子细胞用于移植修复创伤后中枢神经功能缺失具有十分重要的科学意义和临床转化应用前景。近10多年,我们课题组在国家、军队等科研基金的资助下,开展了一系列研究,取得了一些结果。通过研究发现,神经干细胞移植的成功与... 详细信息

神经干细胞作为种子细胞用于移植修复创伤后中枢神经功能缺失具有十分重要的科学意义和临床转化应用前景。近10多年,我们课题组在国家、军队等科研基金的资助下,开展了一系列研究,取得了一些结果。通过研究发现,神经干细胞移植的成功与否,除了选择合适来源的干细胞以及移植途径之外,最重要的是干细胞移植入体内后的分化命运,是否朝所需的神经细胞类型分化。由于目前临床干细胞移植后缺乏有效的体内干预干细胞分化的有效手段,干细胞往往大部分得到胶质细胞,不能定向分化成所需的神经元。鉴于此,我们开展了基于小RNA、信号通路、表观遗传以及转录因子调控的干细胞定向分化研究,意在阐明控制干细胞定向分化为神经细胞的三维调控网络机制,建立干细胞体内定向分化的干预策略,以开发适于临床应用的新技术。目前,神经干细胞移植在细胞移植剂量、途径以及有效性、安全性评价方面,对于不同的疾病,国家尚无统一标准。2010年10月21日国家863计划发布了《干细胞治疗技术临床转化及应用》的指南。希望通过多中心、多专业合作研究制定出干细胞治疗的国家统一标准。我们神经外科专业,必须根据本专业的特点制定出中枢神经创伤后细胞功能缺失的干细胞治疗指南和规范。

关键词：神经干细胞神经干细胞移植临床转化

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骨髓基质细胞对胶质瘤生长的影响

骨髓基质细胞对胶质瘤生长的影响

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：何秋萍徐群渊首都医科大学神经科学研究所

骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）属中胚层多能干细胞,可以在哺乳动物体内分化为内胚层、中胚层和外胚层的终末细胞。脑胶质瘤（glioma）是原发性脑肿瘤中发病率最高且预后最差的肿瘤,其病因和发病机理还不清楚。大量...

骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）属中胚层多能干细胞,可以在哺乳动物体内分化为内胚层、中胚层和外胚层的终末细胞。脑胶质瘤（glioma）是原发性脑肿瘤中发病率最高且预后最差的肿瘤,其病因和发病机理还不清楚。大量研究证实,BMSCs在脑内具有向脑胶质瘤趋向的能力。BMSCs向脑胶质瘤迁徙的具体机制并不明确。迁移至肿瘤组织内的BMSCs对肿瘤的生长有何影响结论不一。分析以前的文献,推测研究结果的差异可能源于BMSCs标记方法的不同。因此,建立更有效的标记BMSCs的技术方法是解决上述问题的关键。本研究通过建立C6胶质瘤动物模型,运用体外GFP基因标记BMSCs,体内外GFP荧光和Y染色体荧光原位杂交方法观察和检测供体细胞,来探讨BMSCs对胶质瘤生长的影响。结果显示经尾静脉移植的BMSCs能够向脑胶质瘤迁移。后续工作将针对胶质瘤组织中BMSCs来源细胞的特性进行研究。骨髓基质细胞能够向脑胶质瘤迁移。在机体组织受损伤时,骨髓源干细胞可经骨髓动员自发到达损伤部位,并在局部微环境诱导下分化为特异的组织细胞,充当各组织干细胞的角色参与受损组织的功能重建。骨髓干细胞分化为各组织细胞的机制目前还不清楚,但是有一点是很明确的,外部环境可以调节骨髓干细胞的分化方向及程度。

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背根神经节神经干细胞的分离培养和分化的研究

背根神经节神经干细胞的分离培养和分化的研究

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：顾芸顾晓松南通大学江苏省神经再生重点实验室

周围神经的再生修复一直是临床治疗的难点。现今的组织工程（Tissue engineering）研究领域中,寻找能够替代雪旺细胞的种子细胞的工作逐渐受到重视。神经嵴干细胞是周围神经系统的原基,因此将神经干细胞应用于神经组织工程具有良好的应...

周围神经的再生修复一直是临床治疗的难点。现今的组织工程（Tissue engineering）研究领域中,寻找能够替代雪旺细胞的种子细胞的工作逐渐受到重视。神经嵴干细胞是周围神经系统的原基,因此将神经干细胞应用于神经组织工程具有良好的应用前景。我们首先体外分离培养背根节神经干细胞,然后体外诱导其沿雪旺氏细胞方向分化及对其功能鉴定;在此基础上对bFGF体外诱导神经干细胞沿雪旺氏细胞分化的机制进行研究。实验结果显示我们成功地分离培养获得背根节源的神经干细胞,并建立了向雪旺氏细胞方向分化的方法。分化所获得的细胞具有雪旺氏细胞的细胞学特征和功能学特征。由此认为我们已经为周围神经再生组织工程神经找到了合适的种子细胞。在此基础上,我们利用这体外培养系统,从生物功能、信号转导和基因调控三方面对bFGF在背根节神经干细胞分化过程中的作用进行了深入研究。bFGF通过FGFR1受体完成其在神经干细胞分化过程中的信号转导和生物功能。bFGF特异性地通过Erk1/2信号通路调控转录因子c-Jun和的基因表达水平来调控背根节来源的神经干细胞向雪旺氏细胞分化。

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NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用

NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用

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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五次会员代表大会

作者：吴翠莹李树基胡洪海朱心红梅林高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的以往研究表明神经调节蛋白1(NRG-1)对缺血性神经元有显著的保护作用,但NRG1发挥神经保护作用的机制目前尚不清楚。我们之前的研究发现NRG-1可促进GABA的释放。因而本研究探讨了NRG1是否通过GABA能机制而发挥神经保护作用。方法建立... 详细信息

目的以往研究表明神经调节蛋白1(NRG-1)对缺血性神经元有显著的保护作用,但NRG1发挥神经保护作用的机制目前尚不清楚。我们之前的研究发现NRG-1可促进GABA的释放。因而本研究探讨了NRG1是否通过GABA能机制而发挥神经保护作用。方法建立培养皮层神经元的氧-葡萄糖剥夺(OGD)/复氧(R)模型,通过细胞计数检测各组神经元死亡率。结果在氧-葡萄糖剥夺模型上,NRG-1具有明显的神经保护作用;单独给予ecto-erbB4以中和内源性NRG-1可使神经元死亡率升高;ecto-erbB4可明显减弱外源性NRG-1的神经保护作用;ErbB4受体敲除的神经元对OGD损伤更敏感。分别给予GABA受体激动剂muscimol、baclofen或同时给予baclofen和muscimol,均可降低神经元的死亡率,表明GABA受体激动剂对神经元有显著的保护作用。GABA受体阻断剂bicucullin可部分取消NRG-1的神经保护作用,并且NRG-1与GABA受体激动剂(muscimol+baclofen)的保护作用无协同作用。结论 NRG-1通过GABA能机制发挥神经保护作用。

关键词：氧-葡萄糖剥夺/复氧模型皮层神经元 NRG-1 GABA

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