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杜仲叶绿原酸提取物抑制脂肪酶活性的研究

杜仲叶绿原酸提取物抑制脂肪酶活性的研究

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：李文娜肖苑遵义医学院珠海校区药理学教研室

目的:研究杜仲叶绿原酸提取物对脂肪酶活性的影响。方法:体外实验在胰脂肪酶催化反应体系中加入不同浓度的绿原酸提取物、绿原酸标准品、奥利司他,比色法710nm测定吸光度值。SD大鼠50只,随机分为5组,每组10只,以高脂乳剂和绿原酸提取物... 详细信息

目的:研究杜仲叶绿原酸提取物对脂肪酶活性的影响。方法:体外实验在胰脂肪酶催化反应体系中加入不同浓度的绿原酸提取物、绿原酸标准品、奥利司他,比色法710nm测定吸光度值。SD大鼠50只,随机分为5组,每组10只,以高脂乳剂和绿原酸提取物、奥利司他定量灌胃大鼠3天,定时采集粪便,测定粪便所含总脂量,来计算脂肪吸收抑制率。结果:体外实验中杜仲叶绿原酸提取物（含量42.43%）抑制胰脂肪酶活性随浓度的增加而增强,奥利司他IC（0.0017mg/m1）<杜仲叶绿原酸提取物（含量42.43%）IC（0.0026mg/m1）<绿原酸标准品IC（0.0040mg/ml）。杜仲叶绿原酸提取物（含量22%和42.43%）均可降低肠道对脂肪的吸收,且高含量提取物（含量42.43%）的抑制作用强于胰脂肪酶抑制剂奥利司他（P<0.05）。结论:杜仲叶绿原酸提取物体内体外均对脂肪酶有抑制作用,为开发杜仲叶作为新型减肥药物提供了理论基础。

关键词：杜仲叶绿原酸脂肪酶奥利司他

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一群多能成体小鼠胰腺干细胞的分离、鉴定和分化研究

一群多能成体小鼠胰腺干细胞的分离、鉴定和分化研究

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：王法张立新冯锐成张振武赵冶梁洋张彦龙安铁洙滕春波东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室东北林业大学野生动物资源学院

本研究通过部分消化结合连续转孔方法从成体小鼠胰腺中分离筛选出了具有强增殖能力、能连续形成单细胞集落的上皮细胞:RT-PCR分析结果表明,这群细胞表达胰腺干/祖细胞相关分子CAⅡ,Cpα-1,Nestin,C-met,CD133及侧群细胞标志分子4bcg2,... 详细信息

本研究通过部分消化结合连续转孔方法从成体小鼠胰腺中分离筛选出了具有强增殖能力、能连续形成单细胞集落的上皮细胞:RT-PCR分析结果表明,这群细胞表达胰腺干/祖细胞相关分子CAⅡ,Cpα-1,Nestin,C-met,CD133及侧群细胞标志分子4bcg2,不表达分化细胞的标志分子;免疫荧光染色发现,这群细胞为E-cadherin阳性、C-met阳性,表明这是一群未分化的胰腺上皮细胞;离体条件下,这群细胞经特定诱导条件的培养,能分化为Insulin、Glucagon、Somatostatin、Amylase阳性的细胞;将这群细胞移植入胚胎胰腺中进行外植体培养,它们能自发向内分泌和外分泌细胞方向分化;定向诱导向内分泌分化的细胞能够对葡萄糖浓度变化发生应答,释放C-Peptide量在高糖刺激下上升1.8倍(5mM葡萄糖为1.63pg/μg.h,25mM葡萄糖为2.93 pg/μg.h);诱导向内分泌分化的细胞移植到糖尿病小鼠中能够治疗糖尿病。这群胰腺干细胞的分离和扩增为进一步研究胰腺干/祖细胞特异的标志性分子及其增殖与定向分化调控机制等问题打下基础。

关键词：胰腺干细胞分离鉴定诱导分化胰岛素分泌糖尿病

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血管内皮细胞生长因子受体1参与*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：赵伟东刘东鑫刘巍方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室

从细胞分子水平探讨病原体与宿主细胞相互作用的机理逐渐成为细胞生物学领域的新兴热点。研究表明,新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌是带有K1抗原的大肠杆菌(即***1),*** K1导致脑膜炎的前提条件是播散入血的*** K1能够穿过... 详细信息

从细胞分子水平探讨病原体与宿主细胞相互作用的机理逐渐成为细胞生物学领域的新兴热点。研究表明,新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌是带有K1抗原的大肠杆菌(即***1),*** K1导致脑膜炎的前提条件是播散入血的*** K1能够穿过血脑屏障进入脑内。我们利用分离培养的人脑微血管内皮细胞(HBMEC)构建了体外血脑屏障模型,在此基础上探讨*** K1侵袭血脑屏障的分子机制。我们首次发现,HBMEC上的血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR1)参与了***1侵袭HBMEC。VEGFR受体抑制剂和针对VEGFR1的siRNA可以明显阻断***1侵袭所导致的HBMEC肌动蛋白微丝的重排,并可抑制*** K1侵袭HBMEC。在*** K1侵袭HBMEC时,VEGFR1和*** K1有明显的共定位。VEGFR1能够与PI3K的p85亚单位形成复合物,导致PI3K下游的Akt的活化。此外,Src激酶作为PI3K/Akt上游的信号分子也参与了Ecoli K1侵袭HBMEC。这些结果进一步揭示了大肠杆菌侵袭血脑屏障的分子机制。

关键词：大肠杆菌K1株人脑微血管内皮细胞信号转导

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N-糖链在肿瘤干细胞中的功能和调控

N-糖链在肿瘤干细胞中的功能和调控

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：魏湲颜江建海复旦大学上海医学院卫生部糖复合物重点实验室

肿瘤干细胞是是肿瘤发生、扩散、复发和耐药等过程中的"起始细胞"或"动力细胞",具有高致瘤性、血管内皮细胞分化和耐药等特性。糖链是继核酸、蛋白质后的重要的生命大分子链,参与细胞识别、分化、信号转导、免疫应... 详细信息

肿瘤干细胞是是肿瘤发生、扩散、复发和耐药等过程中的"起始细胞"或"动力细胞",具有高致瘤性、血管内皮细胞分化和耐药等特性。糖链是继核酸、蛋白质后的重要的生命大分子链,参与细胞识别、分化、信号转导、免疫应答等重要生命活动。研究表明肿瘤干细胞的标志蛋白、耐药蛋白均有N-糖链修饰,肿瘤干细胞的信号通路有N-糖链修饰的蛋白质参与,提示肿瘤干细胞的研究离不开N-糖链的研究。我们采用糖生物学的策略对肿瘤干细胞相关过程中糖链、糖蛋白及糖基转移酶的作用进行阐明。研究发现:1)N-糖链合成酶β-1,4半乳糖基转移酶V调控胶质瘤干细胞自我更新、成瘤和血管内皮细胞分化;2)N-糖链合成酶抑制剂有效抑制胶质瘤干细胞自我更新、成瘤和干细胞标志物Sox2蛋白表达;3)解析肿瘤干细胞标志物CD133糖蛋白的糖链结构特点,发现CD133存在betal,4半乳糖基化修饰、alpha2,3唾液酸化修饰和高甘露糖型修饰,alpha2,3唾液酸化修饰调控CD133糖蛋白的稳定性。这些研究都提示了糖链及相关的糖基转移酶在调控肿瘤干细胞的特性中起重要作用。

关键词： N-糖链肿瘤干细胞

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诱导人表皮干细胞向成釉质细胞分化

诱导人表皮干细胞向成釉质细胞分化

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：王冰梅葛香连林程琳宋颖楠张彦定福建师范大学生命科学学院

哺乳动物的牙齿发育依赖于外胚层来源的上皮和颅神经嵴来源的间充质之间相互作用、相互诱导。诱导成牙潜能,即诱导非牙齿组织发育形成牙齿的能力,开始存在于牙胚上皮,随后转移至牙胚间充质。目前研究表明,多种间充质源性的成体干细胞与... 详细信息

哺乳动物的牙齿发育依赖于外胚层来源的上皮和颅神经嵴来源的间充质之间相互作用、相互诱导。诱导成牙潜能,即诱导非牙齿组织发育形成牙齿的能力,开始存在于牙胚上皮,随后转移至牙胚间充质。目前研究表明,多种间充质源性的成体干细胞与具有诱导成牙潜能的牙胚上皮重组,嵌合体均能够发育形成具有生物功能的牙齿。然而迄今为止,仍未找到合适的上皮源性成体干细胞作为牙齿再生的组成之一。本研究显示,人表皮干细胞膜片与小鼠牙胚间充质重组构建嵌合体时,能够支持牙齿的形成发育。更重要的是,在小鼠牙胚间充质成牙信号的协同作用下,外源添加FGF8可诱导嵌合体表达牙上皮分子标志物PITX2以及WNT信号通路的核转录因子LEF1,诱导人表皮干细胞向成牙釉质细胞分化,即发育形成完整结构的牙齿。同时发现,外源添加组合生长因子等方法可提高诱导人鼠嵌合体的成牙效率。研究表明,在合适的成牙信号存在下,人表皮干细胞可被诱导成为牙齿的组成部分,参与牙冠的形态发生并且分化为成釉质细胞。结果证实,人表皮干细胞可作为一种潜在的上皮细胞来源成分在体外再生生物工程牙齿,这种再生牙齿将来有望应用于代替治疗。

关键词：牙齿再生成釉质细胞人表皮干细胞

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PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程

PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：李艳王晓钰王丽京徐涛卢晓晔蔡冬青耿建国杨雪松暨南大学医学院组织与胚胎学系再生医学教育部重点实验室广东药学院血管生物学实验室

PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在绌胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构... 详细信息

PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在绌胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构,表明PTEN可能参与胚胎早期发育过程的细胞迁移、增殖和分化。应用在体改变早期胚胎PTEN的表达水平可以观察其对上胚层至中胚层细胞转换-EMT(Epithelial-mesenchymal transition)的作用。首先,整体胚胎的原位杂交结果提示,内源性PTEN表达在原条以及之后的中胚层绌胞结构如体节等。在体PTEN转染实验,体外培养至HH3期的鸡胚胎,转染Wt PTEN-GFP或移植Wt PTEN-GFP原条组织至未转染的同时期的宿主胚胎相同部位后,观察到PTEN转染细胞大都由上胚层迁移至原条并滞留于原条,不冉参与中胚层细胞形成。移植实验也得到相似结果,发现在Wt PTEN-GFP阳性原条组织移植后很少细胞迁移山原条。另外在原肠胚期PTEN siRNA降调胚胎一侧PTEN基因后,降调侧中胚层细胞数明显少于正常侧。上述研究结果均提示PTEN基因在胚胎原肠胚期三胚层形成过程中可能具有抑制EMT的作用。

关键词： EMT PTEN 基因表达细胞迁移原肠胚形成

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纤毛虫酸性核糖体蛋白的磷酸化分析

纤毛虫酸性核糖体蛋白的磷酸化分析

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：胡苗清肖瑞琳赵亚琴王伟柴宝峰梁爱华山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室

酸性核糖体蛋白(真核生物中为P0、Pl和P2)位于核糖体的活性部位,维持着核糖体的稳定性和活性,同时通过与延伸因子相互作用参与蛋白合成的调节,而且酸性核糖体蛋白还与肿瘤的发生、发展、细胞凋亡以及许多疾病有关。本研究从单细胞真核... 详细信息

酸性核糖体蛋白(真核生物中为P0、Pl和P2)位于核糖体的活性部位,维持着核糖体的稳定性和活性,同时通过与延伸因子相互作用参与蛋白合成的调节,而且酸性核糖体蛋白还与肿瘤的发生、发展、细胞凋亡以及许多疾病有关。本研究从单细胞真核生物嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophilia)和八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)中克隆了5种酸性核糖体蛋白基因,对其基因序列以及拟编码的氨基酸序列进行了分析。结果表明,纤毛虫P0与其他生物的P0序列相似性为48-54%。纤毛虫P2与其他生物的P2序列相似性在50%-65%之间。序列比对发现纤毛虫酸性核糖体蛋白的C端序列与其他生物的相应区域序列有很大不同。将人和八肋游仆虫的P2在大肠杆菌中进行表达纯化,获得电泳纯蛋白。利用酪氨酸激酶(CKII)对蛋白进行处理,通过电泳行为和质谱对P2蛋白的磷酸化位点进行了研究。为进一步探讨酸性核糖体蛋白C末端在蛋白质翻译过程中的调控作用,以及真核生物酸性核糖体蛋白磷酸化对核糖体功能的影响奠定了基础。

关键词：酸性核糖体蛋白纤毛虫磷酸化

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线粒体铁蛋白对MPTP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡保护机制的研究

线粒体铁蛋白对MPTP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡保护机制的研究

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：石振华李真武文双聂广军白雪常彦忠赵保路段相林河北师范大学生命科学学院中国科学院国家纳米研究中心中国科学院生物物理研究所

越来越多的证据表明,神经系统内铁平衡被打破和由此产生的氧化应激和帕金森氏病(Parkinson's disease PD)的发病机理有着密切的关系。由MPTP(ethy1-4-pheny1-1,2,3,6-tetra-pyridine)诱导的脑内铁水平的升高、氧化还原水平的失衡可... 详细信息

越来越多的证据表明,神经系统内铁平衡被打破和由此产生的氧化应激和帕金森氏病(Parkinson's disease PD)的发病机理有着密切的关系。由MPTP(ethy1-4-pheny1-1,2,3,6-tetra-pyridine)诱导的脑内铁水平的升高、氧化还原水平的失衡可以造成多巴胺能神经元的死亡,这些实验结果显示铁通过氧化应激机制参与了类似PD的细胞凋亡。我们以前的工作也证实了线粒体铁蛋白(itochondrialferritin MtFt)可以保护由6-OHDA诱导的铁紊乱参与的细胞凋亡。本论文中我们研究了线粒体铁蛋白(MtFt)过表达对由MPTP诱导的神经细胞SH-SY5Y的凋亡保护作用的机制,结果显示,过表达MtFt可以造成细胞质内铁缺乏及铁在线粒体和细胞质的重新分布,抑制了LIP的增加,其机制主要是通过TrR途径而非DMT1途径实现的,显著抑制了MPTP诱导的线粒体损伤,降低了活性氧ROS的产生和GSH/GSSG比率,抑制了线粒体膜电位的下降和细胞凋亡。调节MtFt的表达可能为今后预防和治疗PD等神经退行性疾病的提供了一种新的策略。

关键词：线粒体铁蛋白细胞凋亡神经退行性疾病

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CDKL1在衣藻鞭毛解聚过程中可能的作用机制

CDKL1在衣藻鞭毛解聚过程中可能的作用机制

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：胡长峰梁银文潘俊敏清华大学生命科学学院细胞与信号转导实验室

CDKL超家族是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该超家族蛋白主要包括CDKL1-5五个蛋白家族,这类蛋白在调控细胞周期、信号转导、性别分化、神经发育等生物学过程中发挥着重要的作用。该家族的基因缺失或突变会导致相应的生理疾病的发生,如CDKL... 详细信息

CDKL超家族是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该超家族蛋白主要包括CDKL1-5五个蛋白家族,这类蛋白在调控细胞周期、信号转导、性别分化、神经发育等生物学过程中发挥着重要的作用。该家族的基因缺失或突变会导致相应的生理疾病的发生,如CDKL1和CDKL4基因不能够正常表达就会使细胞对外界的信号无法感知或信号转导缓慢,CDKL3和CDKL5缺陷则会导致精神发育迟滞,而CDKL2主要与学习和记忆相关。在高等生物中CDKL1主要与细胞周期、信号转导和神经细胞功能等相关,而在衣藻中CDKL1可能与鞭毛内运输(IFT)相关。我们采用插入突变的方法筛选了一系列的衣藻突变体,用一种化学药物NaPPi处理野生型衣藻鞭毛会在90分钟内解聚成2um左右,我们得到了用NaPPi处理3小时后鞭毛不解聚或解聚很缓慢的衣藻突变体,并且该过程中CALK不发生磷酸化或相对于野生型磷酸化过程较为缓慢,通过RESDA-PCR我们得到了两个该类型的突变体被破坏的基因都属于CDKL1蛋白家族,并且得到了相应的全长cDNA或部分cDNA,对于这两个基因的具体功能还有待进一步研究。

关键词： CDKL CALK IFT

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《细胞生物学》课程教学过程中的创新思维的培养与实践

《细胞生物学》课程教学过程中的创新思维的培养与实践

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：杨超英魏明钱森和王洲薛正莲安徽工程大学生物与化学工程学院

本文通过调整和更新教学大纲,及时地反映出该领域内的最新研究成果和应用技术,优化了课程教学内容;依据教学内容不同和要求、采用启发式、讨论式、提问式等的教学方式,改变单一的教学模式,课程教学方法的多样化;根据学生生活经验的积累... 详细信息

本文通过调整和更新教学大纲,及时地反映出该领域内的最新研究成果和应用技术,优化了课程教学内容;依据教学内容不同和要求、采用启发式、讨论式、提问式等的教学方式,改变单一的教学模式,课程教学方法的多样化;根据学生生活经验的积累和网络传媒等途径,寻求有利于教学的生活案例,找到学科教学与生活教育的结合点,提高学生学习兴趣,激发学生的学习兴趣;采取有问题式教学,引导学生探索式学习,鼓励学生独立思考、大胆质疑,多方位、多角度的发现问题和解决问题,结合自己感兴趣的专题,通过查阅中英文文献,引导学生归纳和综述,并对课程(综述)论文建立了考核指标评分体系,经过论文答辩,重点是对学生报告内容自述是否清楚;重点是否突出;语言组织和表达能力;回答问题是否简明、扼要、准确。特别是能够在前人工作的基础上进行科学的分析与归纳,提出自己的问题和观点进行了考评。这对学生的创新性思维方式的培养,特别是对学生今后的科研思维的培养尤为重要。也使课程教学从讲授型逐渐向研究型转变。经过几年的教学改革和实践,启发了学生的创新思维,提高了学生的科研素质。

关键词：课程教学创新思维培养与实践

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