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High-frequency plant regeneration frbm Astragalus melilotoides via somatic embryogenesis or organogenesis

High-frequency plant regeneration frbm Astragalus melilotoid...

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中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会

作者：侯岁稳贾敬芬兰州大学生命科学学院西北大学生命科学学院

Astragalus melilotoides pall, is widely cultivated in many arid and desert regions of northChina for improving pasture because it is very nutritious to livestock. The plant can also be utilized as windbreaks or for crop rotation, sand-fixation and desalination because of its tolerance to drought, coldness, salinity and disease. Biotechnological approaches such as somatic hybridization and genetic transformation can be used for not only improving this crop, but also transferring its favorable resistant characters to other legumes. Here we reported a highly efficient and reproducible procedure developed for plant regeneration from hypocotyl or hypocotyl- and stem-derived calli of Astragalus melilotoides via somatic embryogenesis or organogenesis. High frequency of somatic embryos was induced directly from hypocotyl explants on MS supplemented with NAA (2.69 μM) and BA (4.44 μM) within 5 weeks. The development of somatic embryos was asynchronous and the globular, heart, torpedo and cotyledonary somatic embryos could be observed in the course. All of the somatic embryos developed in a single state and could be separated from hypocotyls easily. Some somatic embryos developed directly into whole plantlets with well-formed shoots and roots on the same medium. Three types of calli were induced when hypocotyl and stem segments were cultured on MS medium containing 2,4-D (9.05 μM) and BA (2.22 or 4.44 μM). Indirect somatic embryos or adventitious buds were initiated from hypocotyl-derived calli and only adventitious buds were formed from stem-derived calli on MS added 2.69 μM NAA with 4.44 or 8.89 μM BA. Many plantlets developed from somatic embryos or organogenetic buds when they were transferred on growth hormone-free MS medium or MS with 14.78 μM IBA after 3 weeks in culture, respectively. Somatic embryos induced directly from hypocotyls are more desirable because they can produce genetically stable plantlets and this is most suitable for plant genetic transformation. This

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SNAP29对致密核心大囊泡(LDCVs)释放的调节作用

SNAP29对致密核心大囊泡(LDCVs)释放的调节作用

引用

中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第八届全国学术会议

作者：林琳杭勤朱慧琴金建强盛祖杭上海交通大学医学院神经生物学实验室

目的神经系统中SNARE复合物介导神经递质囊泡在突触前膜的搭靠与融合过程,该复合物的调节一直都是突触传递研究中的热点。SNAP29作为t-SNARE蛋白,参与细胞内SNARE依赖的膜转运过程。我们前期的研究结果显示,SNAP29在神经递质释放过程中... 详细信息

目的神经系统中SNARE复合物介导神经递质囊泡在突触前膜的搭靠与融合过程,该复合物的调节一直都是突触传递研究中的热点。SNAP29作为t-SNARE蛋白,参与细胞内SNARE依赖的膜转运过程。我们前期的研究结果显示,SNAP29在神经递质释放过程中是一个负向调节分子,它通过抑制突触囊泡(SV)融合后SNARE复合物的解聚,阻碍SNARE蛋白参与到新的囊泡融合过程中,从而减慢囊泡循环翻新效率,最终对突触传递起到抑制作用。参与突触传递的囊泡有两种,突触囊泡(SV)和致密核心大囊泡(LDCVs)。本研究的目的是观察SNAP29对LDCVs释放的调节作用。方法通过使用FM4-64荧光染料标记囊泡的形态学方法和直接测定囊泡所释放递质的生化方法,观察过表达外源性SNAP29及使用RNAi方法下调内源性SNAP29表达后,PC12细胞中LDCV释放的变化。结果 (1)在PC12细胞中,SNAP29与LDCVs有共定位。(2)SNAP29通过其羧基端)195-257)的卷曲螺旋功能区(coiled-coil domain,CCD)与syntaxin1A结合。(3)在PC12细胞中过表达SNAP29可抑制LDCVs的钙离子依赖性可调控分泌途径的释放。(4)内源性SNAP29表达下调会促进PC12细胞中LDCVs的钙离子依赖性可调控分泌途径的释放。

关键词： SNAP29 LDCVs 胞吐 SNARE复合物

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游戏成瘾与毒品成瘾者奖赏系统的fMRI初步比较研究

游戏成瘾与毒品成瘾者奖赏系统的fMRI初步比较研究

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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第八届全国学术会议

作者：马宁刘影张浩傅先明胡小平张达人中国科学技术大学脑功能与医学成像联合实验室和神经生物学与生物物理学系安徽省立医院磁共振室和安徽省立体定向神经外科研究所安徽省戒毒康复中心美国Emory大学生物医学工程系

网络游戏可以给人们带来快乐,但是大量青少年因为沉溺于游戏,严重影响他们的身心健康与学习,这已经成为社会关注的大问题。我们利用fMRI,探测了网络游戏成瘾者(至今游戏成瘾还没有统一的分类与诊断标准。本实验游戏成瘾分数来自网络成... 详细信息

网络游戏可以给人们带来快乐,但是大量青少年因为沉溺于游戏,严重影响他们的身心健康与学习,这已经成为社会关注的大问题。我们利用fMRI,探测了网络游戏成瘾者(至今游戏成瘾还没有统一的分类与诊断标准。本实验游戏成瘾分数来自网络成瘾问卷(中译版),7分或以上为成瘾组,3分或以下为对照组)。在3种不同的与奖赏有关的任务中的脑活动,分别与海洛因成瘾者、非成瘾者进行了对比。初步结果显示:成瘾(游戏/吸毒)相关录像,可以分别诱发游戏成瘾者和海洛因成瘾者相关欲望,并且使其脑奖赏系统(reward system)活动增强。在观看自然奖赏录像时,与非成瘾者相比,两组成瘾者的奖赏系统中被激活的脑区都有所减少,不过游戏组的减少相对较小。而在金钱奖赏预期任务(Monetary Incentive Delay)中,与非成瘾者相比,网络游戏成瘾者奖赏系统的活动无显著差别,而海洛因成瘾者奖赏系统活动却有所降低。这提示,网络游戏成瘾和毒品成瘾可能存在某些类似之处,同时也有所差别。

关键词：成瘾者奖赏系统游戏成瘾比较研究

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安慰剂镇痛的神经影像学研究

安慰剂镇痛的神经影像学研究

引用

中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第八届全国学术会议

作者：秋云海吴心音徐昊 David Sackett 中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所神经工程研究中心山东大学控制学院生物医学工程系密西根大学LSA学院

许多文献资料报道了安慰剂对疼痛的镇痛效果。人体大脑功能影像技术可以在无创条件下研究安慰剂镇痛的大脑功能解剖结构及其神经生物学机制。功能磁共振成像和正电子发射断层扫描(PET)的脑血流测定表明大脑前扣带回喙部(rACC)、脑岛、... 详细信息

许多文献资料报道了安慰剂对疼痛的镇痛效果。人体大脑功能影像技术可以在无创条件下研究安慰剂镇痛的大脑功能解剖结构及其神经生物学机制。功能磁共振成像和正电子发射断层扫描(PET)的脑血流测定表明大脑前扣带回喙部(rACC)、脑岛、丘脑和脑干的中脑导水管周围灰质(PAG)和延髓头端腹侧部的神经兴奋性降低与安慰剂镇痛调节有关。内源性吗啡肽系统及激活吗啡肽μ受体参与安慰剂的镇痛作用。利用吗啡肽μ受体标记的PET影像研究提示安慰剂镇痛伴随着与疼痛相关的大脑部位(如rACC、前额叶皮层、脑岛、丘脑、杏仁核、伏隔核、PAG等)内源性吗啡肽活性的降低。此外,标记多巴胺D2/D3受体的PET实验证明基底核包括伏隔核的多巴胺活性与安慰剂镇痛相关。安慰剂镇痛引起伏隔核的多巴胺释放与安慰剂期待相关。因此,以上结果提示上述大脑区域和内源性吗啡肽及多巴胺在安慰剂镇痛方面有重要作用。

关键词：安慰剂疼痛功能磁共振成像(fMRI) 正电子发射断层扫描术(PET) 吗啡肽多巴胺

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A Single Amino Acid Change(Asp 53→Ala53) Converts Survivin from anti-apoptotic to proapoptotic

A Single Amino Acid Change(Asp 53→Ala53) Converts Survivin ...

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中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会

作者： Zhiyin Song, Shixin Liu, He He, Yi Wang, Shanshan Feng and Mian Wu Department of Molecular and Cell Biology, Key Laboratory of Structural Biology, School of Life Sciences, University of Science and Technology of China, Hefei, Anhui, PR China 230027

Survivin is a member of the inhibitor of apoptosis protein (IAP) family that has been implicated in both apoptosis inhibition and cell cycle control. Recently, growing attentions have been attracted due to its tumor-specific expression and potential applications in tumor therapy. However, its inhibitory mechanism and subcellular localization remain controversial. Here, we report a novel Survivin mutant Surv-D53A, which displays opposing function and distinctive subcellular distribution compared with its wild type counterpart. Surv-D53A was shown to induce apoptosis in a p53-independent fashion, indicating that tumor suppressor p53 is not involved in its apoptosis pathway. Surv-D53A was shown to markedly sensitize apoptosis induced by TRAIL, doxorubicin and RIP3. We also demonstrated that Surv-D53A localizes in cytoplasm in interphase and to midbody at telophase similar to wild-type Survivin, however, it fails to co-localize with Aurora B to centromere in metaphase as wt-Survivin. Surv-D53A mutant is less stable than wt-Survivin and is degraded by ubiquitin-proteasome pathway more rapidly. Additionally, we found that Surv-D53A could interact with wt-Survivin to form heterodimer, which may account for the loss of anti-apoptotic function of wt-Survivin. Finally, unlike wt-Survivin, Surv-D53A is unable to bind to Smac/DIABLO, which may explain the underlying mechanism for its abolishment of anti-apoptotic activity of Survivin.

关键词： Survivin A Single Amino Acid Change Ala53 Asp 53 Converts Survivin from anti-apoptotic to proapoptotic

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CRM197通过PI3K/AKT途径上调caveolin-1的表达水平

CRM197通过PI3K/AKT途径上调caveolin-1的表达水平

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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第八届全国学术会议

作者：王萍薛一雪中国医科大学神经生物学教研室

目的血脑屏障的存在限制了大分子药物向脑组织内的转运。血脑屏障上的内源性受体介导的药物转运是一种有效的药物转运途径。最近有研究表明,白喉毒素受体能够转运大分子物质通过血脑屏障,但相关的转运机制还不明确。本研究的目的是探讨... 详细信息

目的血脑屏障的存在限制了大分子药物向脑组织内的转运。血脑屏障上的内源性受体介导的药物转运是一种有效的药物转运途径。最近有研究表明,白喉毒素受体能够转运大分子物质通过血脑屏障,但相关的转运机制还不明确。本研究的目的是探讨质膜微囊蛋白caveolin-1在白喉毒素受体介导的转运过程中的作用以及可能参与caveolin-1蛋白表达的信号调节机制。方法给予白喉毒素的无毒突变体CRM197后,western blot和RT-PCR法检测caveolin-1的表达水平;免疫荧光技术观察caveolin-1在脑微血管内皮细胞中的分布;给予质膜微囊形成抑制剂indomethacin分析对胞吞转运作用的影响。Western blot方法比较分析CRM197对PI3K/AKT途径以及对FOXO1转录因子磷酸化水平的调节作用。结果 CRM197作用后,caveolin-1在内皮细胞胞浆内的蛋白表达水平上升,同时其mRNA表达水平也增加。胞浆内的caveolin-1与白喉毒素受体存在一致分布。给予in-domethacin有效减少了内皮细胞对CRM197-HRP的摄取。CRM197通过抑制AKT的磷酸化水平,减少了FOXO1的磷酸化。结论 Caveolin-1参与白喉毒素受体介导的转运过程。CRM197能够抑制PI3K/AKT途径,减少FOXO1的磷酸化,增加caveolin-1的表达水平。

关键词：白喉毒素受体 caveolin-1 血脑屏障 PI3K/AKT途径 FOXO1

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Roles of tissue plasminogen activator in epidermal stratification

Roles of tissue plasminogen activator in epidermal stratific...

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中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会

作者：连小华杨恬 Department of Cell Biology Third Military Medical University Chongqing 400038 Dept.of Cell Biology Third Military Medical Univ

Epidermal stratification has a primary role in the epidermal barrier formation and in wound reepithelialization, and abnormal keratinocyte stratification is a consistent feature of several cutaneous disorders. In the process of keratinocyte stratification, proteolysis plays a crucial role. The tissue plasminogen activator (tPA) expressed predominantly both in the lesional epidermis and in the epidermis during wound repair, and is localized focally in the suprabasal keratinocytes, so it suggests that tPA may be related to epidermal keratinocyte stratification, but roles of tPA in regulating epidermal stratification remain unknown. In present study, using synthetic tPA and monoclonal tPA antibody, we examined the importance and mechanism of tPA in modulating of keratinocyte stratification. Histological investigation of the stratified fetal skin revealed that after continually maintained at the interface of air-liquid for 7d, the addition of tPA resulted in a significant increase in epidermal stratification, more suprabasal layers with flattened and organized orderly keratinocytes were formed, and the stratum corneum was anucleated. The immunocytochemical localization of KIO by confocal laser scanning revealed that after 7d in high Ca 2+ medium , the addition of tPA severely enhanced high Ca2+-induced stratification, the epidermis piece of the keratinocyte stratification became thicker and wider, most of stratified keratinocytes expressed KIO intensely. The infrastructure of desmosomes in cultured keratinocytes was examined by electron microscopy. When cultures were incubated with high Ca2+ plus tPA antibodies, the structure of desmosomes became loosened and tended to be disassembled, however, some neighboring keratinocytes else showed no *** results indicated that in cultures in high Ca2+ medium, intense staining for E-cadherin antigen was detected in most keratinocytes and appeared concentrating on the cell surfaces. After incubation with tP

关键词： tissue plasminogen activator epidermal stratification epidermal differentiation

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非编码RNA在低氧促神经干细胞增殖中的表达与调控

非编码RNA在低氧促神经干细胞增殖中的表达与调控

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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第八届全国学术会议

作者：熊雷刘朝晖杨光赵彤曹国军夏伟黄欣吴丽颖朱玲玲邵宁生范明军事医学科学院基础医学研究所武汉大学生命科学学院

目的非编码RNA（ncRNA）在神经发育、细胞存活和细胞分化等多种细胞进程中发挥着重要作用。我们前期的研究表明适度的低氧可以促进体外培养的大鼠中脑神经干细胞的存活与增殖,而低氧诱导因子HIF-1在其中发挥着关键作用。这里,我们将探... 详细信息

目的非编码RNA（ncRNA）在神经发育、细胞存活和细胞分化等多种细胞进程中发挥着重要作用。我们前期的研究表明适度的低氧可以促进体外培养的大鼠中脑神经干细胞的存活与增殖,而低氧诱导因子HIF-1在其中发挥着关键作用。这里,我们将探索在低氧促神经干细胞增殖的过程中,相关ncRNAs的表达及调控。方法通过芯片筛选低氧（3%O）对神经干细胞中非编码RNA表达谱的影响,并对表达变化的ncRNAs进行实时定量PCR鉴定。进一步通过生物信息学的方法预测了受低氧诱导因子调控的miRNAs,并将其调控区构建到荧光素酶载体进行荧光素酶活性分析,以及CHIP分析研究低氧及HIF-1对miRNAs表达的调控。结果 ncRNAs芯片的结果分析表明有15种小RNA在低氧后出现了三倍以上的表达上调,而有11种小RNA低氧后出现下调。实时定量PCR证明了在低氧促神经干细胞增殖过程中,mir-210表达上调最为明显,且HIF-1可以直接结合到mir-210的启动子区并上调其表达。结论以上结果表明:ncRNSs在低氧促神经干细胞增殖中可能发挥着一定的作用,其中mir-210受低氧影响最为明显,并且其表达受到HIF-1的直接调控。

关键词：非编码RNA 低氧神经干细胞 HIF-1

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B7-1/B7-H1等共刺激分子在特异性抗肿瘤免疫应答中的表达效应研究

B7-1/B7-H1等共刺激分子在特异性抗肿瘤免疫应答中的表达效应研究

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湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会

作者：王小红张桂梅冯作化华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系

目的研究HSP70-肽复合物对脾淋巴细胞的激活作用和对脾细胞上B7-1/B7-H1等共刺激分子的诱导作用。方法HSP70-肽复合物体外刺激和体内免疫小鼠,MTT比色法检测其诱导脾细胞CTL活性,半定量RT-PCR方法检测分析脾细胞上B7-1、PD-1及其配体(B7... 详细信息

目的研究HSP70-肽复合物对脾淋巴细胞的激活作用和对脾细胞上B7-1/B7-H1等共刺激分子的诱导作用。方法HSP70-肽复合物体外刺激和体内免疫小鼠,MTT比色法检测其诱导脾细胞CTL活性,半定量RT-PCR方法检测分析脾细胞上B7-1、PD-1及其配体(B7-H1、B7-DC)的表达变化。结果HSP70-肽复合物体内免疫和体外刺激均能诱导特异性的CYL。免疫活化的脾细胞上PD-1及其配体的基因表达较未免疫脾细胞升高,免疫活化的脾细胞上PD-1基因的相对表达量由正常小鼠的0.057±0.002升高到0.104±0.007;B7-H1基因的相对表达量由0.051±0.003升高至0.215±0.004:B7-DC基因的相对表达量由0.048±0.004升高至0.145±0.003。HSP70-肽复合物体外刺激的小鼠脾细胞上B7-1和B7-H1基因的表达均升高,而B7-1/B7-H1比值随刺激时间长度而变化,在刺激第3天时达到高峰。体内免疫小鼠的脾细胞在免疫1周时B7-1基因的表达最高,随后下降;B7-H1基因的表达在免疫1周时升高,此后一直维持在较高水平:B7-1/B7-H1比值在免疫工周时最高,在免疫2周+停止免疫1周时降至对照组以下。不同免疫时间长度的小鼠脾细胞的杀伤率不同,在体内免疫两周时CTL活性最高,在免疫2周+停止免疫2周时脾杀伤活性与正常对照组无差别。结论HSP70-肽复合物一方面能诱导脾细胞产生特异性CTL,另一方面引起脾细胞上B7-1和B7-H1共刺激分子表达量和比例改变,免疫负调控共刺激分子PD-1及其配体表达升高。而且这种共刺激表达的变化与脾淋巴细胞的杀伤活性的改变有一定的关系。

关键词：共刺激分子 B7-1 PD-1 B7-H1 B7-DC HSP70-肽复合物

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环二鸟苷酸(c-di-GMP)作为潜在免疫佐剂的研究进展

环二鸟苷酸(c-di-GMP)作为潜在免疫佐剂的研究进展

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：丛晓燕孙文博时建立于江赵鹏伟李俊杜以军吴家强陈蕾陈智王金宝山东省农科院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东师范中国农业大学动物医学院

环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,c-di-GMP)是在细菌中普遍存在的第二信使分子,参与调节多种生理功能,近年来研究发现环二鸟苷酸作为免疫调节剂作用于真核细胞可产生很好的免疫调节作用,一系列的体内、体外实验研究表明其有可能成为具有... 详细信息

环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,c-di-GMP)是在细菌中普遍存在的第二信使分子,参与调节多种生理功能,近年来研究发现环二鸟苷酸作为免疫调节剂作用于真核细胞可产生很好的免疫调节作用,一系列的体内、体外实验研究表明其有可能成为具有潜力的疫苗佐剂。本文宗述了c-di-GMP的结构,生物学功能、免疫特性和作为疫苗佐剂研究等方面的最新研究进展。

关键词：环二鸟苷酸疫苗佐剂免疫

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