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荧光磁性纳米粒子桥联前列腺癌单链抗体在鼠肿瘤模型中分布及靶向治疗研究

荧光磁性纳米粒子桥联前列腺癌单链抗体在鼠肿瘤模型中分布及靶向...

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全国第十一届生化与分子药理学学术会议

作者：崔大祥韩月东李智铭刘贺亮宋华高峰贺蓉上海交通大学微纳科技研究院生物纳米工程研究室微纳制造技术国家重点实验室薄膜微细教育部重点实验室第四军医大学西京医院影像科西京医院泌尿外科

目的:调查荧光磁性纳米粒子桥联前列腺癌特异性抗原单链抗体片段作为前列腺癌核磁共振靶显像剂与治疗剂的可行性。方法:荧光磁性纳米粒子(FMCNPs)与前列腺癌特异性单链抗体片段(ScFv)制备成纳米复合探针(FMCNPs-ScFv),并用高分辨电镜、... 详细信息

目的:调查荧光磁性纳米粒子桥联前列腺癌特异性抗原单链抗体片段作为前列腺癌核磁共振靶显像剂与治疗剂的可行性。方法:荧光磁性纳米粒子(FMCNPs)与前列腺癌特异性单链抗体片段(ScFv)制备成纳米复合探针(FMCNPs-ScFv),并用高分辨电镜、荧光光谱仪进行表征;然后与前列腺癌细胞共培养,观察进入癌细胞的靶向性;采用MTT法评价纳米探针细胞毒性;建立裸鼠前列腺癌模型并采用免疫组化方法鉴定;通过尾静脉注射纳米

关键词：前列腺癌纳米探针核磁共振单链抗体磁性纳米粒子肿瘤模型靶向治疗

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HH-GV-678抗慢性粒细胞白血病活性的临床前药效学研究

HH-GV-678抗慢性粒细胞白血病活性的临床前药效学研究

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：罗海山楼丽广中国科学院上海药物研究所

目的:Bcr-Ab1是慢性粒细胞白血病(CML)的致病蛋白,imatinib能够抑制它的自磷酸化,阻断细胞转化,目前用于CML的一线治疗。但是治疗过程中imatinib耐药频繁发生,因此,寻求新的Bcr-Ab1抑制剂以克服imatinib耐药是CML研究的新热点。我们获得... 详细信息

目的:Bcr-Ab1是慢性粒细胞白血病(CML)的致病蛋白,imatinib能够抑制它的自磷酸化,阻断细胞转化,目前用于CML的一线治疗。但是治疗过程中imatinib耐药频繁发生,因此,寻求新的Bcr-Ab1抑制剂以克服imatinib耐药是CML研究的新热点。我们获得了Bcr-Ab1的酪氨酸激酶抑制剂HH-GV-678。本研究旨在对该化合物对野生型以及imatinib耐药型的Bcr-Ab1的作用进行体内体外的综合评价。方法:通过计算机辅助设计,化学合成,和药物高通量筛选,获得该化合物。用ELISA法检测HH-GV-678对c-Ab1等一系列酪氨酸激酶活性的作用。用逆转录病毒转染法构建表达突变型Bcr-Ab1的细胞株。用MTT法检测HH-GV-678抑制细胞增殖的能力。用Western blot法检测HH-GV-678对Bcr-Ab1激酶自磷酸化的抑制程度。用体内白血病裸鼠模型评价HH-GV-678的体内抗白血病效果。用免疫沉淀法检测HH-GV-678对瘤组织中Bcr-Ab1激酶的自磷酸化抑制程度。通过计算机模拟HH-GV-678与c-Ab1蛋白的作用方式,并解释其抗耐药的机制。结果:HH-GV-678有效地抑制c-Ab1酪氨酸激酶活性。通过抑制野生型以及imatinib耐药型的细胞株内的Bcr-Ab1激酶自磷酸化,HH-GV-678能显著地抑制野生型以及imatinib耐药型的细胞株的增殖。通过抑制白血病裸鼠瘤组织中的Bcr-Ab1激酶的自磷酸化,HH-GV-678抑制肿瘤生长,甚至能使白血病裸鼠瘤消退,并明显延长裸鼠存活时间。HH-GV-678分子中的三氟甲基结构是其与c-Ab1具有强结合力并抗耐药的重要原因。结论:HH-GV-678具有显著的体内外抗慢性粒细胞白血病活性,并且能有效克服imatinib产生的耐药。HH-GV-678有望成为imatinib耐药型的CML治疗的候选药物。

关键词：慢性粒细胞白血病磷酸化 HH-GV-678 抗耐药临床前

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鼻咽癌患者外周血血浆可的松水平和全血还原型谷胱甘肽含量的昼夜节律

鼻咽癌患者外周血血浆可的松水平和全血还原型谷胱甘肽含量的昼夜...

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：吴明玮曾昭蕾李苏郭灵张晋昕邱枋冼励坚华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心实验研究部中山大学肿瘤防治中心内科中山大学肿瘤防治中心鼻咽癌科中山大学医学统计与流行病学系

背景与目的:谷胱甘肽与细胞对抗癌药物的解毒作用以及对放射性损伤的保护机制密切相关。本文通过对鼻咽癌患者和健康志愿者外周血血浆可的松水平和全血还原型谷胱甘肽含量的昼夜节律进行研究,从而为鼻咽癌患者进行肿瘤的时间治疗提供参... 详细信息

背景与目的:谷胱甘肽与细胞对抗癌药物的解毒作用以及对放射性损伤的保护机制密切相关。本文通过对鼻咽癌患者和健康志愿者外周血血浆可的松水平和全血还原型谷胱甘肽含量的昼夜节律进行研究,从而为鼻咽癌患者进行肿瘤的时间治疗提供参考资料。方法:13名鼻咽癌患者(实验组)和14名健康志愿者(正常对照组)参加本项研究。每位受试者均从中午12点开始抽取外周静脉血4.5mL,以后每隔4个小时抽血一次,在24小时内共抽血6次。血浆可的松水平的检测采用放射免疫法。全血还原型谷胱甘肽含量则采用高效液相色谱法进行检测。结果:鼻咽癌患者组和正常对照组的血浆可的松水平均呈现出明显的昼夜节律的特征,且节律特性相似。两组的血浆可的松水平的峰值均出现在早晨,而谷值均出现在午夜。不同时间点时,两组的全血还原型谷胱甘肽含量不同,且均具有显著性差异(重复测量的方差分析,F=5.182,P=0.024)。余弦分析表明,鼻咽癌患者组呈现出昼夜节律变化趋势(P=0.064),峰值出现在早晨(05:02),正常对照组也呈现出明显的昼夜节律的特征,峰值出现在07:44±01:56(P<0.0001)。鼻咽癌患者组外周全血中还原型谷胱甘肽的节律调整均值为19.60±1.11 nmol mg-1 protein,正常对照组为8.95±0.46 nmol mg-1 protein。结论:包括晚期患者在内的鼻咽癌患者仍然具有正常的生物节律。鼻咽癌患者全血中还原型谷胱甘肽水平呈现出昼夜节律变化的趋势,与正常对照组节律特性相似。这为临床上选择恰当的时间对患者进行化疗和放疗提供了有价值的参考资料。

关键词：时间治疗昼夜节律可的松谷胱甘肽鼻咽癌

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血管阻断剂Combretastatin A4类似物M410抗肿瘤活性研究

血管阻断剂Combretastatin A4类似物M410抗肿瘤活性研究

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：蔡于琛邹永叶燕丽冼励坚华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心实验研究部中科院广州化学研究所

目的:观察血管阻断剂CombretastatinA4类似物M410的体内外抗肿瘤活性。方法:微管蛋白聚合抑制实验检测对微管功能的影响;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪和Gimsa染色观察细胞周期变化和G/M期阻滞;荷瘤裸鼠模型检测M410体内抑瘤效果。... 详细信息

目的:观察血管阻断剂CombretastatinA4类似物M410的体内外抗肿瘤活性。方法:微管蛋白聚合抑制实验检测对微管功能的影响;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪和Gimsa染色观察细胞周期变化和G/M期阻滞;荷瘤裸鼠模型检测M410体内抑瘤效果。结果:M410体外能明显抑制纯化微管蛋白的聚合,8μM作用50min的抑制率为53.7%。阳性对照秋水仙碱8μM抑制率为62.0%。M410对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用,72h IC分别为口腔上皮癌细胞（KB-3-1）54.3±6.6nM,胃癌细胞（MGC803）414.1±46.9nM,乳腺癌细胞（MCF-7）57.7±6.0nM,肝癌细胞（HepG2）43.0±2.6nM,结肠癌细胞（LoVo）39.0±3.2nM。M410对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的72h IC为17.5±1.4nM。流式细胞仪分析20nMM410处理HUVEC48h后的G/M期百分比为32.9±3.7%,对照组为11.0±2.0%。同时进行Gimsa染色也观察到明显的细胞G/M期阻滞。体内抑瘤实验表明:25mg/kgM410（腹腔注射）对LoVo结肠癌的抑瘤率为44.3%（P<0.01）,小鼠没有明显的毒性反应。阳性对照组CA4P（25mg/kg）为42.1%（P<0.01）。对肿瘤组织的HE染色和CD31免疫组化分析表明,M410能阻断肿瘤组织的血管,使血管数目减少。50mg/kgM410（瘤内注射）对HepG肝癌的抑瘤率为61.9%（P<0.01）,未见明显的毒性反应。CA4P（25mg/kg）为32.4%（P<0.01）。结论:M410能抑制微管蛋白聚合,对多种肿瘤细胞和人脐静脉内皮细胞HUVEC具有不同程度的抗增殖活性。在体内能抑制LoVo结肠癌和HepG肝癌的生长。其抗肿瘤作用可能与抑制微管蛋白聚合及血管阻断有关。

关键词：血管阻断剂抗肿瘤微管聚合

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抗肿瘤活性化合物G对血管生成的影响

抗肿瘤活性化合物G对血管生成的影响

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：张慧陈静波张洪彬卿晨昆明医学院药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南大学教育部自然资源药物化学重点实验室

目的研究抗肿瘤活性化合物G对血管生成的影响。方法以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）株为模型,采用改良MTT法测定化合物G对血管内皮细胞增殖的影响;通过Boyden chamber Transwell细胞培养小室法检测化合物G对内皮细胞迁移能力的影响;采用Tub... 详细信息

目的研究抗肿瘤活性化合物G对血管生成的影响。方法以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）株为模型,采用改良MTT法测定化合物G对血管内皮细胞增殖的影响;通过Boyden chamber Transwell细胞培养小室法检测化合物G对内皮细胞迁移能力的影响;采用Tube formation assay测定化合物G对内皮细胞小管形成的影响。以小鼠移植性肝癌H22为模型,在肿瘤接种24 h后将荷瘤动物随机分为阴性对照组（等体积生理盐水-N.S.）、阳性对照组1（环磷酰胺-CTX）、阳性对照组2（反应停-Thalidomide）和化合物G低（0.5 mg/kg）、中（2.5 mg/kg）、高（12.5 mg/kg）各剂量组,每天给药1次连续10天。实验结束后取瘤称瘤重、计算抑瘤率。采用免疫组化技术检测小鼠肿瘤组织微血管密度（microvessel density,MVD）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达情况;以人肺癌A549裸小鼠移植瘤为模型,接种后第6天随机分组（同上）,每周给药6天,连续3周,实验中用游标卡尺测量瘤径每周2次,计算肿瘤体积（tumor volume,TV）、相对肿瘤体积（relative tumor volume,RTV）和相对肿瘤增殖率T/C%,实验结束称瘤重、计算抑瘤率,同时采用免疫组化技术检测肿瘤组织MVD,以此评价化合物G对肿瘤组织血管生成的影响。结果化合物G显著抑制HUVEC的生长增殖,其半数抑制浓度IC为3.71μg/ml;1.25μg/ml浓度时显著抑制HUVEC的迁移（与对照组比较,p<0.01）、并在此浓度下完全抑制HUVEC形成小管的功能。化合物G明显抑制小鼠肝癌H22的生长,在0.5、2.5和12.5mg/kg剂量的抑瘤率分别为51.54、76.07和92.64%,呈现明显的量效关系;对人肺癌A549裸鼠异种移植瘤的生长亦具有一定的抑制作用,在2.5和12.5 mg/kg剂量,A549的相对增殖率（T/C%）分别为44.87和48.33%。与阴性对照组相比,化合物G各剂量组肿瘤组织的MVD明显减少（与对照组比较,p<0.05）,并呈现一定的剂量依赖性,但VEGF的表达无明显变化（p>0.05）。结论化合物G体外明显抑制HUVEC的增殖、迁移和小管形成功能;明显减少肿瘤组织的MVD,并明显抑制肿瘤的生长,提示化合物G的抗肿瘤活性与抑制肿瘤血管生成有关,但与肿瘤组织VEGF的表达无明显关系。

关键词：化合物G 抗肿瘤血管生成

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NGR肽与力达霉素强化融合蛋白的制备及抗肿瘤活性

NGR肽与力达霉素强化融合蛋白的制备及抗肿瘤活性

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：郑艳波李毅尚伯杨吴淑英甄永苏中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所

目的NGR肽（CNGRC）能与肿瘤血管内皮细胞表达的CD13异构体特异结合,以NGR肽为靶向分子具有分子量小、靶点特异的优点;力达霉素（lidamycin,LDM）是强效的抗肿瘤抗生素,由辅基蛋白（LDP）和活性发色团（AE）构成。本研究制备NGR肽与力... 详细信息

目的NGR肽（CNGRC）能与肿瘤血管内皮细胞表达的CD13异构体特异结合,以NGR肽为靶向分子具有分子量小、靶点特异的优点;力达霉素（lidamycin,LDM）是强效的抗肿瘤抗生素,由辅基蛋白（LDP）和活性发色团（AE）构成。本研究制备NGR肽与力达霉素的强化融合蛋白NGR-LDP-AE,并研究其体内外抗肿瘤活性。方法PCR扩增获得含信号肽pelB、NGR肽和LDP编码序列的融合基因,将融合基因克隆到表达载体,转化大肠杆菌。融合蛋白NGR-LDP的N端加入分泌信号肽,C端加入His-tag标签。IPTG诱导融合蛋白的表达,硫酸铵沉淀发酵液,Ni-NTA柱亲和纯化融合蛋白。冷甲醇抽提LDM发色团,与融合蛋白体外组装,分离纯化获得强化融合蛋白;测定A/A,计算组装效率。ELISA检测融合蛋白与CD13细胞的结合特性;MTT检测强化融合蛋白的细胞毒活性;人纤维肉瘤HT-1080细胞接种裸鼠,取瘤组织石蜡切片,免疫组化检测融合蛋白与肿瘤血管的结合特性;小鼠皮下移植性肝癌H22模型检测强化融合蛋白的体内抗肿瘤活性,测定瘤体积计算抑瘤率,并观察动物的生存期。结果构建了融合蛋白NGR-LDP的表达载体,融合蛋白以可溶形式分泌到培养基中,纯化后每升发酵液可获得纯度在95%以上的融合蛋白约20mg,发色团组装效率约为65%。ELISA结果显示融合蛋白与体外培养的CD13细胞有较强的结合。强化融合蛋白NGR-LDP-AE对体外培养的肿瘤细胞有强烈的杀伤作用,对人纤维肉瘤HT-1080细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的IC值为1.94×10M和2.67×10M。免疫组化表明NGR-LDP能与肿瘤血管特异结合,结合模式与CD13类似;而不含NGR肽的辅基蛋白结合较弱。体内实验显示强化融合蛋白对小鼠皮下移植性肝癌H22有显著抑制作用,接种16天后0.8mg/kg剂量组的强化融合蛋白抑瘤率达94.8%,显著强于0.05mg/kg（耐受剂量）游离力达霉素（66.9%）;动物的生存期得到显著延长,中位生存时间由27天延长至58天。结论获得了分泌表达的NGR肽与力达霉素辅基蛋白的融合蛋白NGR-LDP,融合蛋白能与肿瘤血管特性结合;强化融合蛋白NGR-LDP-AE的抗肿瘤活性强于游离力达霉素,可望成为一种小型化、高效化的靶向抗肿瘤药物。

关键词：力达霉素 NGR 抗肿瘤活性生存期 LDP

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反义微小RNA-21联合药5-氟尿嘧啶共同作用抑制乳腺癌的生长

反义微小RNA-21联合药5-氟尿嘧啶共同作用抑制乳腺癌的生长

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：梅玫任玉苏征祁艳斌张灏姚智天津大学药物科学与技术学院天津医科大学(天津市)基础医学研究中心天津大学材料学与工程学院天津医科大学基础医学院

研究背景:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率占全身各种恶性肿瘤的7-10%,化疗是综合治疗乳腺癌的重要步骤之一,能够有效地减少早期患者的复发率和死亡率,5-氟尿嘧啶作为治疗乳腺癌的常用一线化疗药物,但高剂量化疗对人体免疫... 详细信息

研究背景:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率占全身各种恶性肿瘤的7-10%,化疗是综合治疗乳腺癌的重要步骤之一,能够有效地减少早期患者的复发率和死亡率,5-氟尿嘧啶作为治疗乳腺癌的常用一线化疗药物,但高剂量化疗对人体免疫功能损害非常大,此外,相当一部分肿瘤对药物耐药而大大影响了化疗效果。因此,如何增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性是临床上化学治疗的关注焦点。研究方法:微小RNA(microRNA或miRNA)是一类约有18-24个核苷酸的非编码小RNA分子,通过与其靶mRNA的3'UTR"种子序列"结合并促进靶mRNA的降解和/或抑制翻译过程而发挥负性调控基因表达的作用,进而调节机体的基本生物学过程。M-L Si等发现在乳腺癌组织中,miR-21表达量显著上调,体内外转染miR-21的反义寡聚核苷酸(Antisense Oligonucleotide,ASODN)能明显抑制乳腺癌细胞的生长并诱导凋亡。为了探讨As-miR-21在增加乳腺癌细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶敏感性效果及其可能的机制,我们采用As-miR-21基因治疗联合5-氟尿嘧啶传统治疗策略共同作用抑制乳腺癌的生长。结果:在MCF-7乳腺癌细胞中,联合治疗组较单独化疗组和单独基因治疗组在观察的5天内都有更好的肿瘤抑制效果;MCF-7乳腺癌细胞中联合治疗组的凋亡数为20.12%,单独化疗组6.14%,单独基因治疗组14.32%,联合治疗组的凋亡数明显提高。人乳腺癌细胞中联合组透过细胞数仅为19.342±1.098,明显低于对照组(46.132±2.008),单独5-氟尿嘧啶化疗组(39.231±2.221)和单独反义微小RNA-21基因治疗组(23.409±1.864)透过细胞数。结论:与单独5-氟尿嘧啶化疗和单独反义微小RNA-21基因治疗相比,运用反义微小RNA-21基因治疗联合5-氟尿嘧啶化疗共同治疗能更好的抑制乳腺癌细胞的生长。

关键词：乳腺癌细胞 MCF 氟尿嘧啶 RNA-21

来源：评论

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白花败酱草的抗宫颈癌作用及其机制的研究

白花败酱草的抗宫颈癌作用及其机制的研究

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：张涛黑龙江省佳木斯大学基础医学院生物化学教研室

目的败酱草属植物药中白花败酱草,黄花败酱草和异叶败酱三个物种的药理作用有很多报道,但有关白花败酱草抗宫颈癌的作用及机制的研究尚未见报道。本课题采用体外培养瘤细胞株和体内荷瘤动物模型的方法,探讨白花败酱草抗宫颈癌的作用与... 详细信息

目的败酱草属植物药中白花败酱草,黄花败酱草和异叶败酱三个物种的药理作用有很多报道,但有关白花败酱草抗宫颈癌的作用及机制的研究尚未见报道。本课题采用体外培养瘤细胞株和体内荷瘤动物模型的方法,探讨白花败酱草抗宫颈癌的作用与机制。方法本课题体内观察白花败酱草水提物和总皂苷对U14宫颈癌荷瘤鼠肿瘤的抑瘤率、对瘤组织肿瘤细胞周期的影响;HE染色观察总皂苷诱导肿瘤组织细胞分化的程度;免疫组织化学SP法检测白花败酱草总皂苷诱导肿瘤组织细胞PCNA(细胞增殖核抗原)、P53(突变型P53蛋白)和Bcl-2(B细胞淋巴瘤/白血病-2)蛋白的表达情况;放射免疫法(RIA)检测总皂苷对U14荷瘤鼠血清TNF-α(肿瘤坏死因子)和IL-2(白细胞介素-2)水平的影响;比色分析法检测总皂苷对荷瘤鼠血清T-AOC(总抗氧化能力)、SOD(超氧化物歧化酶)活性和MDA(丙二醛)含量的影响;考察白花败酱草水提物对U14荷瘤小鼠生存期的影响;体外观察白花败酱草水提物、醇提液、总皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物对人宫颈癌Hela细胞生长增殖的抑制作用;光镜和透射电镜观察总皂苷和乙酸乙酯提取物诱导Hela细胞发生凋亡的情况;采用端粒重复序列扩增的方法利用银染技术(TRAP银染法)检测白花败酱草水提液、皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物诱导Hela细胞端粒酶活性的改变,观察总皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物对Hela细胞Caspase-3(半胱天冬酶)活性的影响;Western blot技术检测白花败酱草总皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物诱导Hela细胞Bcl-2蛋白质的表达情况。结果白花败酱草在体内剂量依赖性地抑制U14宫颈癌细胞增殖,并延长U14荷瘤鼠的生存时间;白花败酱草可提高血清INF-α、IL-2水平,下调凋亡调控分子Bcl-2、p53和PCNA的表达,干扰肿瘤细胞的增殖周期,促进肿瘤细胞的凋亡。白花败酱草总皂苷在体外剂量依赖性地抑制Hela细胞的增殖,诱导Hela细胞的凋亡,抑制Bcl-2蛋白的表达,激活Caspars-3活性,抑制Hela细胞端粒酶活性。结论白花败酱草皂苷在体内通过下调Bcl-2、突变型p53和PCNA的表达,干扰肿瘤细胞的增殖周期,促进肿瘤细胞凋亡实现抑制U14宫颈癌细胞的增殖;在体外通过抑制Bcl-2的表达,激活Caspase-3活性,抑制端粒酶的活性;诱导Hela细胞的凋亡,达到抑制其增殖。

关键词：白花败酱草皂苷抗肿瘤细胞凋亡

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黄芪总黄酮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

黄芪总黄酮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

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2016第十一届心血管药理专业委员会全国心脑血管药理学术会议

作者：曾诚邢建国刘婷婷孙芳玲郭德玉艾厚喜田欣祝自新郑文荣王宇峰王文新疆医科大学中药学院新疆维吾尔自治区药物研究所首都医科大学宣武医院实验动物室

目的:研究黄芪总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用及其机制.方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,缺血60min,再灌注120 min,建立心肌缺血再灌注损伤模型.通过透射电镜和光镜观察心...

目的:研究黄芪总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用及其机制.方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支,缺血60min,再灌注120 min,建立心肌缺血再灌注损伤模型.通过透射电镜和光镜观察心肌病理变化,检测血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量和活性,采用酶联免疫法(ELISA)检测白介素-1 (IL-1)、白介素-6(IL-6)和大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.用氢化三苯基四氮唑(TTC)对心肌染色,观察心肌梗死面积,探讨黄芪总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用.

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新型Src激酶抑制剂PH006的抗肿瘤作用研究

新型Src激酶抑制剂PH006的抗肿瘤作用研究

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2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：马金贵黄河蒙凌华柳红丁健中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室肿瘤药理组中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室DDDC药物化学合成研究室

目的:以酪氨酸激酶为靶点的药物研发是目前抗肿瘤研究领域的热点。PH006是中国科学院上海药物研究所设计合成的新型选择性Src酪氨酸激酶抑制剂。本研究主要探讨了PH006的体内外抗肿瘤作用及其初步的作用机制。方法:利用建立的基于酶联... 详细信息

目的:以酪氨酸激酶为靶点的药物研发是目前抗肿瘤研究领域的热点。PH006是中国科学院上海药物研究所设计合成的新型选择性Src酪氨酸激酶抑制剂。本研究主要探讨了PH006的体内外抗肿瘤作用及其初步的作用机制。方法:利用建立的基于酶联免疫反应（ELISA）的蛋白酪氨酸激酶抑制剂的分子筛选模型检测PH006在分子水平上对各种酪氨酸激酶的抑制作用;Western Blot方法检测PH006对MDA-MB-231细胞中的Src及下游信号分子FAK,Paxillin的磷酸化的影响;采用磺酰罗丹明B蛋白染色（SRB）法和克隆形成法检测PH006对MDA-MB-231细胞增殖的影响;流式细胞术（FACS）检测PH006对MDA-MB-231细胞周期的影响;利用细胞黏附实验、划痕实验和Transwell实验检测PH006对MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞黏附、迁移和侵袭的影响;采用明胶酶谱实验和ELISA方法分别检测PH006对MDA-MB-231细胞MMP2/9和HGF分泌的影响;以人乳腺癌MDA-MB-435裸小鼠移植瘤为模型,研究PH006的体内抗肿瘤生长和抗转移作用。结果:PH006是一个选择性的Src激酶抑制剂,对Src酪氨酸激酶催化活性抑制的IC值为0.38μM,对c-Abl和c-kit也有一定的抑制能力,IC分别为1.9和5.5μM,而对其他10种酪氨酸激酶活性的抑制作用较弱。PH006能显著下调MDA-MB-231细胞中Src及其下游信号分子FAK、Paxillin的磷酸化水平。PH006剂量依赖性地抑制MDA-MB-231细胞的增殖,并诱导其阻滞于G1期。此外,PH006能有效抑制MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞的黏附、迁移和侵袭,下调MDA-MB-231细胞MMP2/9和HGF的分泌。体内实验结果显示PH006能明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-435裸小鼠移植瘤的生长和肺转移。结论:PH006是一个新型的选择性Src激酶抑制剂,具有良好的抗肿瘤转移作用和一定的抑制肿瘤生长作用,其抗肿瘤作用及机制研究为此类化合物作为Src激酶抑制剂的研究和开发提供了重要的实验证据和思路。

关键词： PH006 Src酪氨酸激酶抑制剂抗转移抗肿瘤

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