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泊三醇诱导的特应性皮炎小鼠模型的建立

泊三醇诱导的特应性皮炎小鼠模型的建立

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：王璨于曦刘海亮王晓钰陶羽王燕包凯帆季律洪敏南京中医药大学药学院国家规范化中药药理实验室江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京 210046

目的:探讨卡泊三醇(MC903)致小鼠特应性皮炎模型的建立方法. 方法:从第0天起,于Balb/c小鼠右耳涂布20μL 2nmol MC903(溶于95％乙醇),连续给药至第14天,并于左耳涂布等体积无水乙醇作为对照.每天观察小鼠耳肿胀程度并测量双耳耳厚,... 详细信息

目的:探讨卡泊三醇(MC903)致小鼠特应性皮炎模型的建立方法. 方法:从第0天起,于Balb/c小鼠右耳涂布20μL 2nmol MC903(溶于95％乙醇),连续给药至第14天,并于左耳涂布等体积无水乙醇作为对照.每天观察小鼠耳肿胀程度并测量双耳耳厚,分别于第3、7、11、15天获取小鼠右耳组织进行病理组织学检查.制备小鼠右耳耳组织匀浆,检测匀浆中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、IL-33、IL-4表达水平. 结果:从第3天起,小鼠右耳耳肿胀明显,耳厚逐渐增加,并于第14天达到峰值;小鼠耳组织病理组织学检查显示,从第7日起,小鼠右耳耳组织红肿,毛细血管扩张,炎性细胞浸润明显,耳部炎性症状维持并逐渐加重至第15日;与正常小鼠相比,MC903使右耳耳组织匀浆中TSLP水平于第3日显著升高,随后逐渐下降,IL-4、IL-33水平于第7天显著升高,随后逐渐降低. 结论:连续接触MC903可使过敏性炎症发生早期关键因子TSLP、IL-33表达增加,并使小鼠局部组织中炎性细胞因子IL-4显著升高,产生明显炎症反应.

关键词：特应性皮炎泊三醇病理机制炎症反应

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南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响

南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响

引用

中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：曹玲钱亚云刘延庆朱耀东杨林陈珏顾昊白云飞金凤扬州大学医学院中西医结合学系江苏扬州 225009

目的:利用高表达抑癌基因maspin的人胃癌MGC-803细胞探讨南蛇藤提取物对其凋亡的影响. 方法: MTT法检测南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞增殖的影响;TUNEL法检测南蛇藤提取物对细胞凋亡的影响;Western blot检测对maspi... 详细信息

目的:利用高表达抑癌基因maspin的人胃癌MGC-803细胞探讨南蛇藤提取物对其凋亡的影响. 方法: MTT法检测南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞增殖的影响;TUNEL法检测南蛇藤提取物对细胞凋亡的影响;Western blot检测对maspin、Bcl-2、Bcl-2L12及Bax蛋白表达的影响. 结果:南蛇藤提取物(20,40,80,160,320μg·mL-1)能明显抑制高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞的增殖,呈现时间及剂量依赖性;不同浓度的南蛇藤提取物(20,40,80μg·mL-1)作用24h后,镜下显示,随着药物浓度升高,细胞数目减少,形态变圆,胞浆浓缩,出现凋亡小体;TUNEL结果表明南蛇藤提取物(20,40,80μg·mL-1)能促进细胞凋亡;Western blot结果显示南蛇藤提取物(20,40,80,160μg·mL-1)可呈剂量依赖性地增加抑癌基因maspin蛋白的表达,降低Bcl-2、Bcl-2L12的表达. 结论:南蛇藤提取物能够抑制高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与南蛇藤提取物促进抑癌基因maspin的表达以及抑制Bcl-2、Bcl-2L 12的表达有关.

关键词：胃癌南蛇藤提取物中药药理丝氨酸蛋白酶基因细胞凋亡

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SNX10在小鼠结肠炎中的作用及其机制研究

SNX10在小鼠结肠炎中的作用及其机制研究

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：游艳周春彭锦李东沈晓燕中山大学药学院药理与毒理学实验室广东广州 510006 中山大学药学院药理与毒理学实验室广东广州 510006 复旦大学药学院药理教研室上海 201203

目的：溃疡性结肠炎(UC)是一种肠道慢性、反复发作性的非特异性炎症,目前仍缺乏特异有效的治疗药物.肠巨噬细胞对共生菌的耐受性丧失而产生的异常炎症应答是UC发病中最根本的环节.通过调控巨噬细胞向抗炎的M2型极化改善炎症性肠病已在... 详细信息

目的：溃疡性结肠炎(UC)是一种肠道慢性、反复发作性的非特异性炎症,目前仍缺乏特异有效的治疗药物.肠巨噬细胞对共生菌的耐受性丧失而产生的异常炎症应答是UC发病中最根本的环节.通过调控巨噬细胞向抗炎的M2型极化改善炎症性肠病已在动物实验中得到证实.SNX10是SNXs(Sorting nexins)家族结构最简单的一类蛋白,目前它的功能尚不十分清楚.已报道SNX10参与调节膜转运及内体的稳态.本文主要研究SNX10在小鼠结肠炎中的作用及其具体机制. 方法：采用SNX10基因敲除鼠经葡聚糖硫酸钠诱导建立小鼠结肠炎模型,进行HE染色及免疫组化分析;流式及q-PCR检测巨噬细胞分型;激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能;庆大霉素保护法检测巨噬细胞杀菌能力;q-PCR及ELLSA检测TNF-α等相关细胞因子的表达;Western Bolt检测V-ATPase等蛋白表达. 结果：缺失SNX10促使巨噬细胞向M2型极化，且其杀菌能力也明显增强;SNX10敲除鼠外周血中M2型前体单核细胞比例明显增加;参与调控V-ATPase转运;减轻DSS诱导的小鼠结肠炎炎症。结论：SNX10很可能是调控巨噬细胞功能的新分子，通过调控巨噬细胞表型转化，在结肠炎发生发展过程中发挥重要作用。

关键词：溃疡性结肠炎分选链接蛋白巨噬细胞表型转化

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苍耳亭通过调节GSTP1诱导siha细胞凋亡

苍耳亭通过调节GSTP1诱导siha细胞凋亡

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：任淑珍张蕾姜玲魏伟安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室安徽合肥230032 安徽省立医院药剂科安徽合肥230001

目的:苍耳亭,作为天然药物衍生的一类倍半萜化合物,对多种癌细胞都有显著的抗肿瘤作用,但对于宫颈癌细胞机制研究较少.本文研究苍耳亭对宫颈癌细胞siha增殖和凋亡的影响及谷胱甘肽S-转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)的影响... 详细信息

目的:苍耳亭,作为天然药物衍生的一类倍半萜化合物,对多种癌细胞都有显著的抗肿瘤作用,但对于宫颈癌细胞机制研究较少.本文研究苍耳亭对宫颈癌细胞siha增殖和凋亡的影响及谷胱甘肽S-转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)的影响. 方法:通过MTS法检测不同浓度的苍耳亭对siha细胞体外生长的抑制作用,流式细胞术检测苍耳亭对siha细胞凋亡的影响,荧光显微镜观察苍耳亭作用下的siha细胞形态学变化,酶标仪和细胞免疫组化检测不同浓度苍耳亭对siha细胞中GSTP1酶活性及蛋白表达的影响. 结果:苍耳亭对siha细胞的体外抑制作用呈时间-剂量依赖性，siha细胞在10μM苍耳亭作用下已出现较为明显的凋亡小体。不同浓度的苍耳亭作用24h后宫颈癌Siha细胞的凋亡率，结果分别为8.08％、14.27%、25.45%、34.62%和50.32%。与对照组凋亡率相比，苍耳亭实验组Siha细胞凋亡率明显增高，且随浓度增加凋亡率也随之增加。苍耳亭作用下的siha细胞中GSTP1酶活性及蛋白表达均呈剂量性降低。结论:苍耳亭对宫颈癌siha细胞有明显的抑制增殖及促凋亡作用，对GSTP1的活性及表达有一定下调作用提示苍耳亭有可能通过抑制GSTP1来达到抗宫颈癌的作用。

关键词：子宫颈癌苍耳亭细胞凋亡谷胱甘肽S-转移酶P1

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莫诺苷通过ephrin B2促进缺血性脑损伤大鼠血管新生的作用机制研究

莫诺苷通过ephrin B2促进缺血性脑损伤大鼠血管新生的作用机制研究

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：孙芳玲郭心磊艾厚喜张丽王文首都医科大学宣武医院药物研究室教育部神经变性病学重点实验室北京市老年病医疗研究中心北京100053中国

血管新生是指从已有的血管形上芽生和生成新生血管,从而扩大和重塑现有的血管网的过程,这在发育和各种病理过程中具有重要作用.缺血性脑损伤后,在梗塞灶周围的脑组织有被称为的半暗带的区域.半暗带区虽然部分功能受损,但仍为可逆性修复... 详细信息

血管新生是指从已有的血管形上芽生和生成新生血管,从而扩大和重塑现有的血管网的过程,这在发育和各种病理过程中具有重要作用.缺血性脑损伤后,在梗塞灶周围的脑组织有被称为的半暗带的区域.半暗带区虽然部分功能受损,但仍为可逆性修复的脑组织.该区域血管的新生增强,可以加快损伤的修复,血管神经稳态的重构,以及功能的恢复.Eph受体酪氨酸激酶及其配体ephrin是一种重要的信号通路,在生理或疾病状态下具有广泛的作用.研究证明ephrin B2在血管内皮细胞内表达,并且在血管的发育和血管的新生中具有重要作用.ephrin B2与Eph受体结合激活下游通路.ephrin B2反向信号通过Abl、STAT3、FAK等通路调节内皮增殖、分化和迁移等.敲除ephrin B2基因会造成血管畸形导致胎儿死亡.截断其细胞内部分或阻断ephrin B2反向信号会产生类似的效果.说明ephrin B2的反向信号对于血管新生的过程极其重要.莫诺苷是一种山茱萸环烯醚帖苷类化合物,具有广泛的生物学活性,能够抗炎、抗肿瘤等.莫诺苷能够促进大鼠缺血性脑损伤后损伤区域的血管新生及血管网重塑,研究莫诺苷通过ephrin B2的促血管作用机制,可以帮助找到新的促进缺血性脑损伤后恢复的靶位点.

关键词：缺血性脑损伤莫诺苷中药药理血管新生酪氨酸激酶配体

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肥大细胞在炎症免疫性疾病中的作用

肥大细胞在炎症免疫性疾病中的作用

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：贾云莉李世刚柳蔚喻玲玲曾小威三峡大学医学院湖北宜昌 443002

众所周知肥大细胞是速发型变态反应的靶细胞,是与IgE有关的免疫调节细胞,而且在某种程度上参与先天性和获得性免疫反应.现在越来越多的证据表明肥大细胞亦参与非过敏性刺激引发的炎症免疫性疾病,如类风湿性关节炎,肠易激综合征,多发硬化... 详细信息

众所周知肥大细胞是速发型变态反应的靶细胞,是与IgE有关的免疫调节细胞,而且在某种程度上参与先天性和获得性免疫反应.现在越来越多的证据表明肥大细胞亦参与非过敏性刺激引发的炎症免疫性疾病,如类风湿性关节炎,肠易激综合征,多发硬化症,偏头痛,特异性皮炎等疾病与肥大细胞活化密切相关.随着对肥大细胞研究的不断深入,发现肥大细胞可通过介质的选择性释放参与和诱导炎症疾病.肥大细胞作为主要的免疫调节细胞之一,在以上所述炎症疾病中扮演一个重要角色.它的分化、成熟、激活和介质的释放都受到严格的调控.故对肥大细胞的深入研究既可以使人们更加透彻地了解过敏、炎症和免疫性疾病的机理,也可以为此类疾病的预防和治疗提供有价值的参考和借鉴.鉴于肥大细胞产生介质的多样性及肥大细胞功能的复杂性,从病原体结构及肥大细胞表面受体来研究不同病原刺激肥大细胞时释放不同介质的特点和作用机制,将为改善局部免疫给予有效措施.通过对肥大细胞的生物学特性和功能更充分,更深入的关注,以期以肥大细胞为切入点,解决目前无法解决的许多医学难题,诸如慢性炎症、过敏性疾病等的预防和治疗,对于相关炎症免疫性疾病的防治有着深远的意义.

关键词：炎症免疫性疾病肥大细胞病理机制临床治疗

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不同品系小鼠心肌肥厚模型标志性基因表达变化的比较

不同品系小鼠心肌肥厚模型标志性基因表达变化的比较

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：阚红卫司文文汪春彦何灿尹艳艳杨雁梁燕安徽医科大学基础医学院药理教研室合肥 230022 安徽省药物研究所药理室合肥 230032 安徽省食品药品审评认证中心合肥 230051 安徽省药物研究所药理室合肥 230032 安徽医科大学基础医学院药理教研室合肥 230022

目的:探索不同品系小鼠心肌肥厚模型间肥厚性标志基因ANP、BNP、β-MHC基因表达的差异. 方法:将KM、BALB/c、ICR和C57BL/6小鼠用肾上腹主动脉缩窄法建立心肌肥厚模型.造模后,称取各小鼠体重、心脏重量和左室重量,计算心脏重量指数和... 详细信息

目的:探索不同品系小鼠心肌肥厚模型间肥厚性标志基因ANP、BNP、β-MHC基因表达的差异. 方法:将KM、BALB/c、ICR和C57BL/6小鼠用肾上腹主动脉缩窄法建立心肌肥厚模型.造模后,称取各小鼠体重、心脏重量和左室重量,计算心脏重量指数和左心室指数;组织HE染色,观察心肌病理变化;免疫组织化学染色,观察心肌ANP、BNP和β-MHC蛋白表达;Real-time PCR检测心肌ANP、BNP和β-MHC基因表达. 结果:与对照组比较,KM、BALB/c和C57BL/6心肌肥厚小鼠心脏重量指数和左心室指数升高(P＜0.01～0.05),光镜下各模型小鼠心肌呈现不同程度的肥厚性变化,ANP、BNP和β-MHC在蛋白和基因表达水平均不同程度增加.与C57BL/6心肌肥厚小鼠比较,KM、ICR和C57BL/6小鼠心肌组织ANP、BNP和β-MHC在蛋白和基因表达水平均降低(P＜0.01). 结论:KM、BALB/c和C57BL/6小鼠心肌肥厚模型造模成功,C57BL/6小鼠在腹主动脉缩窄心肌肥厚模型心肌组织在同时表达肥厚性标志基因ANP、BNP和β-MHC时具有一定的相对优势.

关键词：心肌肥厚心房利钠肽基因脑钠肽基因 β-主要组织相容性复合体基因表达差异性

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钙池调控钙通道在类风湿性关节炎中的重要参与

钙池调控钙通道在类风湿性关节炎中的重要参与

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：高兴华胡慧娟戴岳中国药科大学中药药理教研室江苏南京 210009 Drexel University College of Medicine Philadelphia PA 19104 Drexel University College of Medicine Philadelphia PA 19104 中国药科大学中药药理教研室江苏南京 210009

目的:钙池调控钙通道在免疫应答、炎症及慢性疼痛中发挥着重要的作用,本文旨在考察SOCs在类风湿性关节炎及其疼痛中的参与. 方法:采用胶原诱导的关节炎模型考察SOCs抑制剂YM-58483对RA及其疼痛的影响.采用Hargreaves热辐射及yon Fre... 详细信息

目的:钙池调控钙通道在免疫应答、炎症及慢性疼痛中发挥着重要的作用,本文旨在考察SOCs在类风湿性关节炎及其疼痛中的参与. 方法:采用胶原诱导的关节炎模型考察SOCs抑制剂YM-58483对RA及其疼痛的影响.采用Hargreaves热辐射及yon Frey纤维丝检测小鼠后足的热痛及机械痛痛觉过敏反应.并通过ELISA检测小鼠足跖中炎症因子的含量,苏木精-伊红染色考察小鼠膝关节的组织病理学变化,Westem blot检测小鼠脊髓中蛋白的表达. 结果:YM-58483(5,10mg/kg)预处理可降低CIA的发病率,抑制小鼠的炎症反应、痛觉敏感化及临床症状.CIA出模后再连续灌胃给予YM-58483 10d,亦能剂量依赖性降低小鼠的临床评分、足肿胀,改善小鼠的自发活动.YM-58483能显著降低CIA小鼠已有的热痛及机械痛痛觉过敏反应,高剂量下甚至完全逆转CIA小鼠的热痛觉敏感性.CIA继发反应出现10d后,小鼠膝关节出现滑膜炎症、增生及骨坏死等病理变化,YM-58483剂量依赖性减轻小鼠的关节组织损伤,并显著降低小鼠足跖中炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的含量.另外,Western blot结果显示,CIA小鼠脊髓中ERK、P38 MAPK及CaMKIIα活化显著增加,YM-58483高剂量可显著抑制ERK及CaMKIIα的活化. 结论:首次发现SOCs抑制剂具有抗RA及疼痛的作用,其机制可能与降低外周炎症因子释放、脊髓中枢ERK及CaMKIIα活化有关.SOCs可能成为治疗RA的有效靶标.

关键词：类风湿性关节炎钙池调控钙通道痛觉敏感性炎症因子

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肾上腺素受体调控内皮细胞和滑膜细胞功能介导胶原性关节炎小鼠的作用和机制以及CP-25的作用

肾上腺素受体调控内皮细胞和滑膜细胞功能介导胶原性关节炎小鼠的...

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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：王颖陈镜宇吴华勋罗学霞魏伟安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室安徽合肥 230032

目的:肾上腺素受体(AR)属于G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)家族,分为α1-AR、α2-AR、β-AR.β-AR分为3个亚型,即β1-AR、β2-AR、β3-AR,激活通过Gs蛋白刺激AC,导致细胞内cAMP水平增加,进一步激活PKA,PKA催化底物蛋白磷酸化发挥效应.其中β2-AR在炎症反应细胞因子网络中发挥抗炎作用.RA患者外周血单核细胞(PBMCs),特别是B细胞和CD8+T细胞上β2-AR表达明显下降.类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA),是一种慢性进行性的自身免疫性疾病.其主要以关节的炎症损害为主.RA病人滑膜组织分泌促血管生成物质,促进血管新生.新血管生成被认为是形成和维持RA血管翳的一个重要因素.β2-AR是否在类风湿关节炎血管形成中发挥作用以及其调节的可能机制. 方法:异丙肾上腺素作用于正常和TNF处理的内皮细胞和滑膜细胞，观察药物对内皮细胞增殖、划痕、体外成管实验以及滑膜细胞增殖和趋化实验的影响。通过流式，western，免疫共沉淀等方法探讨β2-AR参与调节内皮细胞的可能机制。结果:异丙肾上腺素明显抑制TNF刺激的滑膜细胞的增殖作用，并且异丙肾上腺素10-6剂量组明显使滑膜细胞表面β2-AR表达增加。结论:异丙肾上腺素可以通过β2-AR抑制滑膜细胞增殖。

关键词：类风湿性关节炎肾上腺素受体内皮细胞滑膜细胞调控机制

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靶向PEA-PPAR-α通路的新型NAAA抑制剂的抗炎镇痛作用及机制研究

靶向PEA-PPAR-α通路的新型NAAA抑制剂的抗炎镇痛作用及机制研究

引用

中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议

作者：任杰杨隆河李燕婷陈会霞高崎厦门大学医学院厦门市翔安南路厦门大学翔安校区成义楼厦门福建 361102

目的：研究新型抗炎镇痛类靶标NAAA的抑制剂噁唑烷酮酰亚胺类化合物A3药效学作用及初步作用机制. 方法：建立TPA(12-O-Tetradecanoylphorbol-13-acetate)诱导昆明小鼠耳肿胀模型,H&E染色及称重评价A3抗肿胀程度,选用PPAR-α敲除... 详细信息

目的：研究新型抗炎镇痛类靶标NAAA的抑制剂噁唑烷酮酰亚胺类化合物A3药效学作用及初步作用机制. 方法：建立TPA(12-O-Tetradecanoylphorbol-13-acetate)诱导昆明小鼠耳肿胀模型,H&E染色及称重评价A3抗肿胀程度,选用PPAR-α敲除鼠为对照,LC-MS检测小鼠耳组织内源性大麻素的含量变化,观察PEA-PPAR-α通路的介导作用.建立醋酸诱发小鼠腹腔疼痛模型,观察小鼠扭体次数,评估A3的镇痛作用,应用吲哚美辛作为阳性对照.选用PPAR-α拮抗剂MK886和PPAR-α敲除鼠评估A3可能的作用机制. 结果：H&E染色显示,A3给药组剂量依赖性地抑制TPA引起的昆明小鼠耳肿胀.与背景鼠129s相比,A3的抗肿胀作用在PPAR-α敲除鼠中完全消失.A3给药组显著抑制PEA的降解(1.8±0.2vs 2.8±0.2nmol/g组织,p＜0.05),而不改变其它内源性大麻素的含量.醋酸诱发的小鼠腹腔疼痛模型中,A3给药使小鼠扭体次数明显下降(27.0±1.7次vs 9.5±2.3次,p＜0.001),与阳性对照药物吲哚美辛作用相当(27.0±1.7次vs 11.2±2.6次,p＜0.001).PPAR-α拮抗剂MK886可完全拮抗A3的镇痛作用.与背景鼠129s相比(18.8±4.6 vs 3.8±2.1;p＜0.01),A3在PPAR-α敲除鼠中的镇痛作用也完全消失(19.7±2.1 vs 19.4±2.7;p=0.93). 结论：A3能够抑制TPA诱导的炎症及醋酸诱发的小鼠腹腔疼痛,其抗炎镇痛活性通过PEA-PPAR-α途径起作用.

关键词：噁唑烷酮酰亚胺类化合物A3 药理活性抗炎镇痛作用过氧化物酶体增殖物激活受体-α 信号通路靶向调控

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