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排序：

人参皂苷Rg1调节CaSR改善生精障碍模型小鼠精子质量的研究

人参皂苷Rg1调节CaSR改善生精障碍模型小鼠精子质量的研究

引用

中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：姚观平何方李玉香张萌余丽梅贵州省细胞工程重点实验室遵义医学院附属医院生殖医学中心

目的:探讨人参皂苷Rg1对生精障碍模型小鼠生精保护作用及睾丸组织中钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)表达变化情况。方法:将40只雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、Rg1低剂量组(5 mg/kg)和Rg1高剂量组(10 mg/kg)。除空... 详细信息

目的:探讨人参皂苷Rg1对生精障碍模型小鼠生精保护作用及睾丸组织中钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)表达变化情况。方法:将40只雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、Rg1低剂量组(5 mg/kg)和Rg1高剂量组(10 mg/kg)。除空白组外,其余3组均采用BU+CY方案处理,即先用白消安(BU)混悬液16mg/kg/d连续灌胃4天后,再用环磷酰胺(CY)溶液100mg/kg/d连续3天腹腔注射造成小鼠生精障碍模型,空白组小鼠给予等量灌胃和腹腔注射生理盐水。低、高剂量组小鼠分别给予人参皂苷Rg1相应剂量腹腔注射,剩余组小鼠给予等体积生理盐水,每天1次,连续30d。本实验以人参皂苷Rg1为研究对象,CaSR为靶点,采用ELISA法测定小鼠血清、睾丸组织匀浆中性激素(卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T))的水平变化;通过半自动精液质量分析仪对各组小鼠睾丸游离出精子进行质量检测分析(包括小鼠精子密度、活率及畸形率);同时采用HE染色、透视电镜来观察睾丸组织形态及超微结构变化;采用免疫荧光方法检测各组小鼠睾丸组织细胞(支持细胞、间质细胞及精子)CaSR表达情况。结果:与对照组比较,模型组小鼠精子密度和精子活率降低(P<0.01),精子畸形率升高(P<0.01),睾丸组织匀浆中睾酮水平降低(P<0.05),CaSR蛋白表达有明显降低(P<0.01);与模型组比较,人参皂苷Rg1高、低剂量组小鼠精子密度和精子活率均有升高(P<0.05),精子畸形率降低(P<0.05),睾丸组织匀浆中睾酮水平升高(P<0.05),CaSR蛋白表达均有明显升高(P<0.01);HE染色及透视电镜组织学观察,模型组小鼠睾丸生精小管萎缩、退化,生精上皮明显变薄、生精细胞排列紊乱,腔内精子数目减少;而人参皂苷Rg1高、低剂量组小鼠睾丸生精上皮层数有不同程度增多,层次分明,生精细胞排列整齐、紧密、规则,管腔内可见精子。结论:人参皂苷Rg1对BU+CY方案所致小鼠生精障碍具有明显的保护作用,其机制可能与激活睾丸组织中CaSR表达及提高睾酮水平有关。

关键词：人参皂苷Rg1 钙敏感受体白消安+环磷酰胺睾丸 Balb/c小鼠

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调节精子功能的生殖道胞外囊泡

调节精子功能的生殖道胞外囊泡

引用

中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：李坤倪崖浙江省医学科学院生殖生理实验室

哺乳动物精子从发生开始到达受精部位,在雄性及雌性生殖道均会经历一段漫长的旅程。在此过程中,精子所处的雄性和雌性生殖道环境,存在膜囊泡、外泌体和微泡等胞外囊泡(extracellular vesicles),可与精子发生相互作用,并调节精子功能。... 详细信息

哺乳动物精子从发生开始到达受精部位,在雄性及雌性生殖道均会经历一段漫长的旅程。在此过程中,精子所处的雄性和雌性生殖道环境,存在膜囊泡、外泌体和微泡等胞外囊泡(extracellular vesicles),可与精子发生相互作用,并调节精子功能。胞外囊泡是由真核细胞和原核细胞产生的具有膜结合特征的磷脂双层结构,可携带并传递各种调节分子,如蛋白质、miRNA、m RNA和脂质等,它们可作为信息交流的一种模式,向靶细胞提供各种调节分子。生殖道胞外囊胞还可根据所在部位不同进行命名为小体(-some),如存在于生殖道内的附睾、前列腺、阴道、子宫及输卵管中的胞外囊泡可分别称之附睾小体(epididymosome)、前列腺小体(prostasome)、阴道小体(vaginosome)、子宫小体(uterosome)和输卵管小体(oviductosome)。雄性生殖道内可调节精子功能的胞外囊泡包括前列腺小体和附睾小体两类。前列腺小体是第一个被确定的生殖道胞外囊泡,首次在精浆中检测到,其具有高比率的胆固醇/磷脂的特征,与膜硬度相关的。前列腺小体可向精子运送鞘磷脂、胆固醇和饱和糖磷脂等物质以降低其膜的流动性,防止过早或自发的顶体反应和过早获能;前列腺小体还抑制和刺激顶体反应和活力,但是依赖于环境条件;在体外培养微酸性时,人精子能融合前列腺小体,导致精子细胞膜的流动性下降。附睾上皮细胞中的主细胞分泌,携带多种蛋白质,包括酶、黏附分子、转运和信号传递蛋白质,对精子功能有多方面的生物学作用。雌性生殖道内胞外囊泡研究较晚,目前研究主要包括三类:子宫小体、阴道小体和输卵管小体。子宫小体是第一个被证明的雌性生殖道胞外囊泡,2008年首次被报道存在于小鼠子宫腔液中。子宫小体通过共孵育可被精子获取,其携带的物质可受雌激素调节,在怀孕和未怀孕期间存在显著差异,在调节精子功能方面具有多种作用。输卵管小体携带有影响精子功能的蛋白,可改善胚胎质量,并在体外培养诱导冷冻保护。阴道小体已证明存在小鼠阴道管腔液中,但相关研究尚未深入,目前正在进行相关研究。精子摄取生殖道胞外囊泡是通过膜融合机制发生,在前列腺小体、附睾小体和输卵管小体中已观察到,并被证明是通过整合素αvβ3和α5β1的受体/配体相互作用而融合。加深对生殖道胞外囊泡携带分子的组成及其对精子功能作用的理解,可为靶向药物设计、不育不孕病因查找及诊治、辅助生殖技术的改进提供有价值的线索,具有重要的理论意义和实践意义。

关键词：精子功能生殖道

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组织蛋白酶在宫颈癌转移中的作用及小分子抑制剂的发现

组织蛋白酶在宫颈癌转移中的作用及小分子抑制剂的发现

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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：马恩龙李艳春刘禹彤赵松坤何文慧沈阳药科大学药理教研室

宫颈癌的发病率在女性生殖系统恶性肿瘤中居第二位,仅次于乳腺癌。就宫颈癌的发病率来说,宫颈癌每年全球发病45万人左右,80%在发展中国家,而我国每年新增病例13.6万人左右,占全球患者总数的1/4-1/3,不仅如此,每年有2-3万的妇女死于宫颈... 详细信息

宫颈癌的发病率在女性生殖系统恶性肿瘤中居第二位,仅次于乳腺癌。就宫颈癌的发病率来说,宫颈癌每年全球发病45万人左右,80%在发展中国家,而我国每年新增病例13.6万人左右,占全球患者总数的1/4-1/3,不仅如此,每年有2-3万的妇女死于宫颈癌。宫颈癌转移扩散是宫颈癌晚期经常出现的问题,可出现各个不同脏器的转移,宫颈癌转移会引起相

关键词：宫颈癌细胞侵袭转移组织蛋白酶小分子抑制剂

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西地那非致前列腺增生的验证性研究

西地那非致前列腺增生的验证性研究

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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：吴建辉黄冬妍苏欣吴双双潘琦闫晗陈丽芬李雷孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理学检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

目的:利用大鼠前列腺增生模型和老年大鼠,观察长期使用临床剂量西地那非对大鼠前列腺是否具有促进增生作用。方法:(1)去势雄性SD大鼠60只,随机分成阴性对照、模型对照组和三个西地那非组,每组12只动物。除阴性对照组外,其余各组动物sc 1... 详细信息

目的:利用大鼠前列腺增生模型和老年大鼠,观察长期使用临床剂量西地那非对大鼠前列腺是否具有促进增生作用。方法:(1)去势雄性SD大鼠60只,随机分成阴性对照、模型对照组和三个西地那非组,每组12只动物。除阴性对照组外,其余各组动物sc 1.0 mg/kg睾酮造模,同时西地那非组分别ig 5.0、10.0和20.0 mg/kg枸橼酸西地那非,连续4周。(2)1.5岁龄以上雄性SD大鼠32只,适应性饲养后按体重随机分成4组,依次分设对照组和三个西地那非组,每组8只动物。对照组ig 10ml/kg溶媒,西地那非组分别ig 5.0、10.0和20.0mg/kg枸橼酸西地那非,连续3个月。(3)动物每周称量体重一次,于末次给药24h后,麻醉后采血,ELISA法检测血清和前列腺组织中睾酮(T)、雌二醇(E2)和胰岛素(Ins)等水平,处死动物,剖取前列腺,测量前列腺体积、各叶前列腺湿重和总湿重,计算前列腺指数,组织切片后,利用显微图像分析系统分析前列腺上皮高度及腺腔面积大小。结果:(1)大鼠前列腺增生模型结果显示,与模型对照相比,枸橼酸西地那非能够增大良性前列腺增生(BPH)模型大鼠的前列腺体积(P<0.05),明显增加模型大鼠前列腺湿重(P<0.01)和前列腺脏体系数(P<0.01),且对BPH模型大鼠前列腺作用表现出剂量-依赖关系。病理分析结果显示,与模型对照组相比,BPH大鼠给予西地那非后,背侧叶前列腺上皮呈增高趋势;血清分析结果显示,与模型对照组相比,BPH大鼠给予西地那非后,血清中前列腺结合蛋白(PBP)呈升高趋势。(2)老年大鼠结果显示,与对照组相比,枸橼酸西地那非能明显提高老年大鼠血清中E2(P<0.05)、T(P<0.05)和背侧叶前列腺组织中T(P<0.05)水平,并且,西地那非对T水平的影响呈现出剂量-效应关系;病理分析结果显示,与对照组相比,西地那非剂量组前列腺总湿重(P<0.05)、前列腺体积(P<0.05)、前列腺脏体系数(P<0.05)、腹侧叶前列腺湿重及脏体系数、背侧叶前列腺湿重及脏体系数均明显增大,且表现出剂量-效应关系;显微图像分析结果进一步显示,西地那非各剂量组腹侧叶前列腺上皮细胞高度和背侧叶前列腺上皮细胞高度均大于对照组(P<0.05),且各剂量组背侧叶前列腺腺腔面积较对照组明显增大(P<0.05)。结论:临床使用剂量范围内,西地那非对BPH模型大鼠和老年大鼠前列腺具有促进增生作用,提示西地那非长期使用可能加重前列腺增生患者症状。

关键词：西地那非前列腺增生 BPH模型老年大鼠

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17β-HSD1 siRNA小核酸药物对乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤的抑制作用

17β-HSD1 siRNA小核酸药物对乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤的抑制作用

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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：张婷贺婉红严大为薛嫚李芳俸灵林国家人口计生委计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市计划生育科学研究所

目的:探讨17β-HSD1siRNA小核酸药物对乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制效果和来曲唑的联用抑癌效果。方法:在裸鼠右侧腋窝注射人乳腺癌MCF-7细胞悬液0.2 ml(2×108个/ml),接种后皮下注射苯甲酸雌二醇激素0.02 ml,隔天注射1次,建立乳腺癌MCF-... 详细信息

目的:探讨17β-HSD1siRNA小核酸药物对乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制效果和来曲唑的联用抑癌效果。方法:在裸鼠右侧腋窝注射人乳腺癌MCF-7细胞悬液0.2 ml(2×108个/ml),接种后皮下注射苯甲酸雌二醇激素0.02 ml,隔天注射1次,建立乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤模型,将造模成功的裸鼠随机分为阴性对照组、制剂对照组、17β-HSD1 siRNA较低剂量组(0.1 mg/kg)、低剂量组(0.2 mg/kg)、中剂量组(0.4 mg/kg)、高剂量组(0.8 mg/kg);他莫昔芬组(50mg/kg)、来曲唑组(2 mg/kg)、17β-HSD1 siRNA低剂量(0.2 mg/kg)+来曲唑(2 mg/kg)联用组和17β-HSD1 siRNA中剂量(0.4 mg/kg)+来曲唑(2 mg/kg)联用组;17β-HSD1 siRNA各组和制剂对照组均为小鼠尾静脉给药,每周2次,连续4周;他莫昔芬、来曲唑和1%CMC阴性对照组均为灌胃给药,每天1次,每周5次,连续4周;联合用药组按单药各自的给药周期给药。每天观察裸鼠的生长状况,每周测量2次体重和肿瘤体积,实验终点安乐死裸鼠,并取肿瘤组织称重。结果:裸鼠接种后成瘤率为95%,各组均为6只裸鼠。裸鼠的体重在给予17β-HSD1 siRNA小核酸药物后并未出现明显的下降,阴性对照组、制剂对照组和来曲唑组裸鼠体重下降比较明显,但均无统计学差异。他莫昔芬组和阴性对照组比较,实验终点的瘤体积有显著性差异(p=0.0488, p<0.05),最佳T/C比出现在给药第24天,T/C=0.38;来曲唑组和阴性对照组相比无显著性差异。17β-HSD1 siRNA在0.1 mg/kg、0.2 mg/kg、0.4 mg/kg和0.8 mg/kg剂量和制剂对照组比较均有显著性差异(p=0.0198, p<0.05;p=0.0091, p<0.01;p=0.0263, p<0.05;p=0.0223, p<0.05),最佳T/C比均出现在给药第24天,T/C比分别为0.36、0.25、0.40、0.40。联用组中剂量组和制剂对照组相比有显著性差异(p=0.0231, p<0.05),最佳T/C比出现在给药的第24天,T/C=0.43;但联用中剂量组与17β-HSD1 siRNA单药组比较无显著性差异,联用效果不明显。他莫昔芬组瘤组织重量明显低于阴性对照组,17β-HSD1 siRNA 0.1 mg/kg、0.2 mg/kg、0.4 mg/kg和0.8 mg/kg单药组、联用中剂量组瘤组织重量明显低于制剂对照组,但均无统计学差异。结论:17β-HSD1 siRNA药物在0.1 mg/kg、0.2 mg/kg、0.4 mg/kg和0.8 mg/kg剂量下均能显著性抑制乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤的生长,与临床一线雌激素依赖性乳腺癌治疗药物来曲唑无联用效果。

关键词：核酸药物 HSD1 siRNA MCF-7 移植瘤乳腺癌 siRNA 抑制作用

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人参皂甙Rg3通过VEGFR-2介导的PI3K/Akt/mTOR信号通路抗子宫内膜异位症血管生成机制研究

人参皂甙Rg3通过VEGFR-2介导的PI3K/Akt/mTOR信号通路抗子宫内膜...

引用

中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：曹阳叶青庄梦斐谢淑武钟瑞华崔金刚周洁芸朱焰张婷婷曹霖上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院妇科上海中医药大学附属龙华医院脑病科上海市计划生育科学研究所生殖药理组上海中医药大学中西医结合临床研究所

目的:阐明人参皂甙Rg3抑制异位内膜生长的作用机制与VEGFR-2介导的PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制血管新生,诱导异位内膜细胞凋亡有关。方法:本研究将造膜成功的子宫内膜异位症大鼠随机分成5组,即本研究将造膜成功的子宫内膜异位症大鼠随机... 详细信息

目的:阐明人参皂甙Rg3抑制异位内膜生长的作用机制与VEGFR-2介导的PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制血管新生,诱导异位内膜细胞凋亡有关。方法:本研究将造膜成功的子宫内膜异位症大鼠随机分成5组,即本研究将造膜成功的子宫内膜异位症大鼠随机分成5组,即人参皂甙Rg3低剂量组(A组)、人参皂甙Rg3高剂量组(B组)、孕三烯酮组(C组)、模型组(D组)及去势组(E组)。分别给予模型对照组及去势组仅给予药物溶剂0.5%CMC-Na,孕三烯酮组0.5 mg/kg/d,人参皂甙Rg3 5mg/kg/d、10mg/kg/d,每天灌胃给药,3周后处死大鼠,测量异位内膜的体积,计算抑制率。ECLI法测定血清E2和P水平,并取下大鼠异位子宫内膜,运用免疫组化、westernblot法检测人参皂甙Rg3对VEGF、VEGFR-2、p-Akt及p-mTOR蛋白表达的影响,实时定量PCR法检测人参皂甙Rg3对VEGF、VEGFR-2、Akt及mTOR基因表达的影响结果:用药后,B组、C组及E组对异位内膜体积抑制率比较均显著低于D组(P<0.05);组织学观察可见,异位内膜呈退化趋势,B、C、E组间大鼠血清E2值水平与D组相比有明显下降(P<0.05)。C组及E组的P值水平与D相比有明显下降(P<0.05),但A、B组P水平与模型组相比无显著性差异。免疫组化显示,VEGF、VEGFR-2、p-Akt及p-mTOR在大鼠子宫腺上皮细胞、腔上皮细胞及间质细胞内均有表达,其中以腺上皮细胞表达为强。用药后,B、C、E组VEGF、p-Akt及p-mTOR的表达与D组相比有统计学差异(P<0.05)。除E组外,VEGFR-2平均灰度值与D组比较无显著性差异(P>0.05)。westernblot及实时定量PCR检测均显示,用药后大鼠异位内膜除VEGFR-2外,VEGF、p-Akt及p-mTOR各组表达下调,B、C、E组与D组间有统计学差异(P<0.05),与免疫组化结果基本一致。Tunel法检测各组异位细胞的凋亡率,结果显示与D组相比,B组异位内膜的荧光细胞明显增多,即凋亡细胞数增多,有统计学差异(P<0.05)。结论:人参皂甙Rg3能抑制大鼠异位子宫内膜血管生成,其可能是通过调节VEGFR-2介导的PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制血管新生,诱导异位内膜细胞凋亡。

关键词：子宫内膜异位症人参皂甙Rg3 PI3K/Akt/mTOR信号通路

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玉米赤霉烯酮抑制大鼠睾丸间质细胞干细胞的发育

玉米赤霉烯酮抑制大鼠睾丸间质细胞干细胞的发育

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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：马磊凯连庆泉葛仁山温州医科大学附属第二医院育英儿童医院

研究目的:玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)是目前全球范围内广泛存在的谷物内污染物。已有研究表明ZEA对睾丸间质细胞(Leydigcell,LC)有明显毒性作用,但其机制尚不清楚。本研究旨在探究ZEA对大鼠睾丸间质干细胞(StemLeydigCell,SLC)的影... 详细信息

研究目的:玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)是目前全球范围内广泛存在的谷物内污染物。已有研究表明ZEA对睾丸间质细胞(Leydigcell,LC)有明显毒性作用,但其机制尚不清楚。本研究旨在探究ZEA对大鼠睾丸间质干细胞(StemLeydigCell,SLC)的影响。方法:在体外,分离SLC并予以ZEA(0、0.05、0.5、5、50uM)处理24小时,收集培养基测定睾酮。在体内,60日龄雄性SD大鼠EDS 75mg/kg单次腹腔注射消除LC;处理后第7天,给予ZEA(0、150、300ng/睾丸)睾丸注射,连续注射21天后处死大鼠,取血、睾丸、附睾,称睾丸重量,血清用于测定黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和睾酮。通过测定雄激素水平和雄激素合成相关基因的m RNA和蛋白水平来研究ZEA对SLC的影响。结果:在体外,ZEA对SLC的半数抑制浓度(IC50)为67.05±22.57nM,并降低了培养基睾酮及Hsd3b1、Cyp11a1、Srd5a1基因水平。在体内,ZEA抑制睾丸发育(在ZEA浓度为0、150、300ng/睾丸组睾丸重量分别为3.04、2.77、2.10g),并降低血清睾酮(在ZEA浓度为0、150、300ng/睾丸分别为2.062、1.2822、1.3388ng/ml),并下调了睾丸间质细胞的Lhcgr、Scarb1、Cyp11a1、Hsd3b1、Cyp17a1和Hsd17b3基因的m RNA以及LHCGR、SCARB1、CYP11A1和HSD3B1蛋白质的表达水平。ZEA可抑制雄激素的产生和类固醇生成酶活性,影响SLC增殖分化。结论:ZEA可能通过下调Cyp11a1从而延缓睾丸间质细胞的发育。

关键词：睾丸间质细胞大鼠睾丸玉米赤霉烯酮

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