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Complete mitochondrial genome of a hybrid strain of the domesticatedsilkworm(Qiufeng×Baiyu)

Complete mitochondrial genome of a hybrid strain of the dome...

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者： Fengbo Li Huixian Zhang Peigang Liu Yongqiang Wang Zhiqi Meng State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Pest and Disease Control Sericulture Research Institute Zhejiang Academy of Agricultural Sciences College of Chemistry and Life Sciences Zhejiang Normal University Sericulture Research Institute Zhejiang Academy of Agricultural Sciences

The hybrid strain of the domesticated silkworm(Qiufeng×Baiyu) is one of the most popular commercial silkworm varieties in China. In this study, we reported its complete mitochondrial genome sequence for the first time. The 15,680 bp long genome contains 37 genes(13 protein-codinggenes [PCGs], 2 rRNA genes, and 22 tRNA genes) and 1 major non-coding A+T-rich region, with the typical arrangement found in Lepidoptera. All PCGs started with typical ATN codons except for COI, which began with CGA. Eleven PCGs have complete stop codons,whereas COI and COII end with a single T. The 495 bp long A+T-rich region harbors the conserved sequence features typically found in lepidopteran insects. The complete mitochondrialgenome sequence of Qiufeng×Baiyu provides an important data source for further study on the mechanism of silkworm domestication.

关键词： Bombyxmori domestication Lepidoptera mitogenome

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MnTEdb, a collective resource for mulberry transposable elements

MnTEdb, a collective resource for mulberry transposable elem...

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者： Ma B Li T Xiang Z He N State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology Southwest University

Mulberry has been used as an economically important food crop for the domesticated silkworm for thousands of years, resulting in one of the oldest and well-known plant-herbivore interactions. The genome of Morus notabilis has now been sequenced and there is an opportunity to mine the transposable element(TE) data. To better understand the roles of TEs in structural, functional and evolutionary dynamics of the mulberry genome, a specific, comprehensive and user-friendly web-based database, Mn TEdb, was constructed. It was built based on a detailed and accurate identification of all TEs in mulberry. A total of 5925 TEs belonging to 13 superfamilies and 1062 families were deposited in this database. Mn TEdb enables users to search, browse and download the mulberry TE sequences. Meanwhile, data mining tools, including BLAST, Get ORF, HMMER, Sequence Extractor and JBrowse were also integrated into Mn TEdb. Mn TEdb will assist researchers to efficiently take advantage of our newly annotated TEs, which facilitate their studies in the origin, amplification and evolution of TEs, as well as the comparative analysis among the different species.

关键词： MnTEdb a collective resource for mulberry transposable elements

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Molecular cloning, Purification, characterization of a novel cellulase gene(Ph-EGaseⅠ) in the yellow-spotted longicorn beetle, Psacotheahilaris

Molecular cloning, Purification, characterization of a novel...

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者： Ding-Guo Xia Hui-Zhen Mei Qiao-Ling Zhao Guo-Zheng Zhang Cheng Lu Jiangsu University of Science and Technology Sericultural Research Institute Chinese Academy of Agricultural Sciences Institute of Sericulture and System Biology Southwest University

We cloned a β-1, 4-endoglucanase（Ph-EGase Ⅰ） gene belonging to the glycoside hydrolase family（GHF） 45 from the yellow-spotted longicorn beetle, Psacotheahilaris（Pascoe）.This was the first report of a family 45 cellulase from Psacotheahilaris. Ph-EGase Ⅰ was 714 bp long and encoded a protein with 237 amino acids. Tissues expression analysis found that Ph-EGase Ⅰ transcript was most abundantly expressed in gut, weakly expressed in head. Ph-EGase Ⅰ wasexpressed in silkworm using the Bm NPV expression system and purified using the Ni-NTA columns. Analysis of the purified Ph-EGase Ⅰ by western blotting showed a single band at 25 *** purified Ph-EGase I was active and the optimum temperature and p H for Ph-EGase I activity were 50 °C and pH 4, ***-EGase Ⅰ is significantly inhibitedby Cu, but not by Ga, Mg and Na+.

关键词： Psacotheahilaris Ph-EGase Ⅰ cellulase enzyme activity

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家蚕杂交组合芳·绣×白·春的选配

家蚕杂交组合芳·绣×白·春的选配

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者：张友洪沈以红肖文福周安莲肖金树四川省农业科学院蚕业研究所西南大学农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点实验室

为提高高品质茧丝蚕品种蜀绣×渝春的健康性和繁殖性能,同时保留其高品质茧丝特性,与6个强健性夏秋蚕品种组配成9对四元杂交组合,筛选出优良杂交组合芳·绣×白·春。经实验室鉴定表明,新杂交组合生产性能有了显著提高... 详细信息

为提高高品质茧丝蚕品种蜀绣×渝春的健康性和繁殖性能,同时保留其高品质茧丝特性,与6个强健性夏秋蚕品种组配成9对四元杂交组合,筛选出优良杂交组合芳·绣×白·春。经实验室鉴定表明,新杂交组合生产性能有了显著提高,杂交种虫蛹生命率96.57%,万蚕收茧量21.72kg,原种公斤茧制种量4.95张,克蚁制种量17.60张,分别比蜀绣×渝春提高5.81个百分点,11.67%,51.07%,97.75%;茧丝质成绩除纤度增加了0.217D,鲜毛茧出丝率降低了1.44个百分点以外,均达到或超过了蜀绣×渝春水平。四川省家蚕品种室内联合鉴定表明,春季虫蛹生命率96.77%,万蚕收茧量19.79kg,万蚕茧层量4.888kg,鲜毛茧出丝率18.78%,万蚕产丝量3.716kg,分别比对照种菁松×皓月提高3.54个百分点,2.27%,7.64%,0.89个百分点,7.34%;茧丝纤度2.604D,洁净94.71分。秋季虫蛹生命率94.98%,万蚕茧层量4.451kg,鲜毛茧出丝率18.50%,万蚕产丝量3.415kg,分别比对照种夏芳×秋白提高0.94个百分点,2.46%,1.42个百分点,6.68%;茧丝纤度2.478D,洁净94.74分,比对照种提高2.80分。与四川省家蚕品种审定标准比较,春、秋季鉴定成绩均超过了审定指标,于2014年通过四川省家蚕品种审定委员会审定,适宜于长江中下游流域春季和中、晚秋蚕期以及在气候条件和养蚕条件较好的早秋蚕期使用。

关键词：家蚕品种芳·绣白·春选配

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柞蚕蛹解除滞育过程中海藻糖酶基因的表达变化分析

柞蚕蛹解除滞育过程中海藻糖酶基因的表达变化分析

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者：黄伶汝玉涛孙良振王勇姜义仁秦利沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心辽宁省蚕业研究所

滞育(Diapause)是昆虫重要的生理状态,主要表现为生长发育的停滞和生理活动的降低。研究滞育的调控对了解昆虫的生物学特性,害虫的综合治理及经济昆虫的合理利用具有重要意义。柞蚕是我国特有的泌丝昆虫,以蛹滞育。柞蚕蛹进入滞育后代... 详细信息

滞育(Diapause)是昆虫重要的生理状态,主要表现为生长发育的停滞和生理活动的降低。研究滞育的调控对了解昆虫的生物学特性,害虫的综合治理及经济昆虫的合理利用具有重要意义。柞蚕是我国特有的泌丝昆虫,以蛹滞育。柞蚕蛹进入滞育后代谢活动降低,但随着滞育的解除,柞蚕蛹体内代谢变化显著。海藻糖(Trehalose)作为昆虫的血糖,是一种非还原性双糖,对于生物的能量代谢和抗逆等方面具有重要的作用。海藻糖酶(Trehalase,简称Treh)可将海藻糖水解为葡萄糖,参与昆虫体内的能量代谢。目前,昆虫体内已发现两类海藻糖酶,分别是可溶性海藻糖酶(Treh1)和膜结合型海藻糖酶(Treh2)。本研究重点关注Treh2在柞蚕蛹滞育解除过程中表达量的变化,为揭示滞育解除过程中糖类物质的调控提供数据支持。以柞蚕蛹脂肪体mRNA为模板,采用RT-PCR技术扩增获得了柞蚕膜结合型海藻糖酶基因Ap-Treh2。采用半定量PCP检测该基因在5龄柞蚕幼虫的组织分布,并进一步采用qPCR技术分析该基因在柞蚕滞育蛹解除滞育过程中的表达变化。结果表明,Ap-Treh2的开放阅读框长为1932 bp,编码643个氨基酸,推测其蛋白分子量为74 kD,等电点(pI)为5.82,具有15个氨基酸的信号肽序列,在线跨膜结构域预测显示,Ap-Treh2的3′端有一段约23 aa的跨膜区,蛋白质亚细胞定位预测该蛋白定位于细胞质中。多重序列比对结果显示柞蚕Treh2与来自甜菜夜蛾(Spodoptera exigua),棉铃虫(Helicoverpa armigera),斜纹夜蛾(Spodoptera litura),家蚕(Bombyx mori)及大红斑蝶(Danaus plexippus)的同源海藻糖酶氨基酸序列具有较高的相似度。组织特异性分析发现该基因在柞蚕幼虫多个组织中均有表达,脂肪体和马氏管中的表达量较高;长光照(17 hL︰7 hD)处理柞蚕滞育蛹,检测表明Ap-Treh2基因在滞育期表达量较低,随着滞育的解除表达量逐渐升高且显著高于自然光对照组(P<0.05),后期逐渐降低并稳定,雄蛹中表达量的升高滞后于雌蛹。柞蚕海藻糖酶是调控海藻糖代谢的重要酶,研究Treh在柞蚕滞育蛹解除过程中的作用,有助于从分子水平揭示昆虫解除滞育过程中碳水化合物的代谢调控规律。

关键词：柞蚕海藻糖酶滞育基因表达

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茧色限性蚕品种蚕蛹带壳自然羽化蜕茧性状研究及其杂交组合筛选

茧色限性蚕品种蚕蛹带壳自然羽化蜕茧性状研究及其杂交组合筛选

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者：张友洪肖文福周安莲肖金树四川省农业科学院蚕业研究所

为将家蚕蛹带壳自然羽化蜕茧的行为性状应用于蚕种生产中,对10个家蚕茧色限性蚕品种的带壳自然羽化蜕茧能力进行了比较分析。结果表明:在蚕品种茧层量较重或茧层较厚的情况下,其蚕蛹带壳自然羽化蜕茧能力与茧层量的大小没有相关性;日、... 详细信息

为将家蚕蛹带壳自然羽化蜕茧的行为性状应用于蚕种生产中,对10个家蚕茧色限性蚕品种的带壳自然羽化蜕茧能力进行了比较分析。结果表明:在蚕品种茧层量较重或茧层较厚的情况下,其蚕蛹带壳自然羽化蜕茧能力与茧层量的大小没有相关性;日、华系不同系统、不同性别蚕蛹的带壳自然羽化蜕茧能力差异较大,其中日本系统雌蛹的带壳自然羽化蜕茧率比中国系统雌蛹高20.40个百分点,日本系统雄蛹的带壳自然羽化蜕茧率比中国系统雄蛹高9.47个百分点;日、华系雄蛹的带壳自然羽化蜕茧能力比雌蛹高15.09个百分点;蚕品种之间的带壳自然羽化蜕茧能力存在不同程度的差异,4个华系蚕品种的带壳自然羽化蜕茧率以限15、997最高,6个日系蚕品种的自然羽化蜕茧率以限4最高,并对同系统蚕品种的带壳自然羽化蜕茧率达到极显著水平。将限15、997、限4组配成杂交组合限15×限4、997×限4,经实验室鉴定表明,限15×限4的综合经济性状优于997×限4,其虫蛹生命率94.32%,万蚕收茧量20.56kg、万蚕茧层量5.003kg,分别比997×限4高4.79个百分点、6.53%、6.22%;其雄茧茧丝长、解舒丝长、鲜毛茧出丝率分别为1362m、1096m、20.46%,分别比997×限4高198m、212m、1.40个百分点,其雄茧丝纤度2.799D,洁净97.50分,是一对带壳自然羽化蜕茧能力较高以及综合经济性状优良的杂交组合。

关键词：家蚕茧色限性蚕蛹带壳自然羽化蜕茧行为性状

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Molecular cloning and expression of a nitrite reductase gene from mulberry(Morus L.)

Molecular cloning and expression of a nitrite reductase gene...

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者： Xi-ling Wang Ya-sheng Yu Yan Yang Chang-ying Liu Jun Li Mao-de Yu College of Biotechnology Southwest University

Nitrite reductase(NiR) is a critical enzyme involved in nitrogen metabolism in plants. A full-length cDNA sequence of 1,764 bp for the NiR gene was isolated from mulberry(Morus L.) using reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR). This NiR cDNA encodes a protein of 587 amino acids with a theoretical molecular weight of 65.4 kDa. The predicted Morus alba NiR(MaNiR) protein includes a repeated hemoprotein ferredoxin-like beta-component together with a 4Fe-4Sbinding domain and a siroheme-binding site, which could be expressed in a recombinant prokaryotic expression system. Nitrite reductase activity was exhibited only when both of the repeat functional domains were expressed together. Both glutamic acid and gibberellins promoted MaNiR expression in mulberry leaves, but inhibited its expression in roots and stems. Following dedifferentiation of mulberry hypocotyls and cotyledons, Ma NiR expression decreased strongly. This suggests that NiR could play an important role in the in vitro regeneration of mulberry hypocotyls and cotyledons.

关键词： Morus Nitrite reductase Prokaryotic expression Real-time qPCR

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A Comparative Proteomic Analysis of Parthenogenetic Lines and Amphigenetic Lines of Silkworm

A Comparative Proteomic Analysis of Parthenogenetic Lines an...

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者： Peigang Liu Yongqiang Wang Xin Du Fangxiong Shi Zhiqi Meng College of Animal Science and Technology Nanjing Agricultural University Sericulture Research Institute Zhejiang Academy of Agricultural Sciences

Parthenogenetic strains of silkworm serve as an effective system for sex-control in silkworms. To determine the molecular mechanism of silkworm parthenogenesis, protein profiles from newly hatched silkworm of a parthenogenetic lines with high pigmentation rate and hatching rate were compared with amphigenetic lines using proteomics approach, including by two-dimensional electrophoresis(2-DE), matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry(MALDI-TOF/TOF MS), and bioinformatics analysis. Several proteins were expressed differentially between the parthenogenetic and amphigenetic lines, and seven of nine interesting proteins were identified successfully using MALDI-TOF/TOF MS analysis. The identified proteins were muscular protein-20, odorant binding protein-LOC100301497, glutathione S-transferase delta, translationally controlled tumor protein homolog, cuticular protein RR-1 motif 19, beta-actin, actins, and muscle-type A1 actins. These proteins may be associated with the regulation of growth, development, and reproductive processes of silkworm parthenogenetic lines.

关键词： comparative proteomic analysis new-hatched silkworm parthenogenetic lines amphigenetic lines

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Expression of the B Subunit of Escherichia coli Heat-labile Enterotoxin in Transformed Bombyx mori BmN Cells

Expression of the B Subunit of Escherichia coli Heat-labile ...

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者： Wen-Lin.Zhou Jin-Ru Cao Ai-Hong Ye Cheng-Liang Gong Hong-Biao Weng Li-Hua He Ren-Yu Xue Guang-Li Cao Yong-Qiang Wang Sericulture Research Institute Zhejiang Academy of Agricultural Sciences College of Pre-clinical Medical and Biological Science Soochow University National Engineering Laboratory for Modern Silk

The non-toxic B subunit of Escherichia coli heat-labile enterotoxin（LTB）is a potent mucosal immunogen and immunoadjuvant for coadministered antigens. To obtain transformed silkworm cell line stably expressing LTB, we fused the LTB coding sequence, neomycin- resistance gene（NeoR）, and gfp gene into piggy Bac-based transponson vector, and transduced into silkworm BmN cells. After screening against antibiotic G418, The positive rate of cells emitting green fluorescence was 70.79%. PCR detection indicates the existence of exogenous LTB coding sequence, NeoR, and gfp in the transformed cell genome. Western blot analysis also confirms the predicated 0 kDa band of LTB protein. These results demonstrated that our strategy was practicable.

关键词： Escherichia coli Heat-labile Enterotoxin piggyBac transposon Bombyx mori BmN cell Genetic transformation

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Germline Transformation of the Silkworm Bombyx mori L. by Sperm-Mediated Gene Transfer

Germline Transformation of the Silkworm Bombyx mori L. by Sp...

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者： Wenlin Zhou Chengliang Gong Renyu Xue Guangli Cao Jinru Cao Aihong Ye HongbiaoWeng Yongqiang Wang Sericulture Research Institute Zhejiang Academy of Agricultural Sciences Preclinical Medical and Biological Science College Soochow University National Engineering Laboratory for Modern Silk

The domesticated silkworm Bombyx mori L. has important roles in basic biological research and applied science. To explore the practical use of transgenic technology in agricultural silkworm varieties, we fused the neomycin-resistance gene(NeoR)and the green fluorescent protein gene(gfp)into the piggy Bac-based transposon vector and transduced it into silkworms by sperm-mediated gene transfer(SMGT). Fluorescence observation indicated the positive rate of G0 egg-batches is 72.7%. After screening against the antibiotic G418, development of individual larvae in the same brood showed significant size differences. PCR detection indicated the existence of gfp and Neo R and confirmed the positive rate of transgenesis as 0.47%. Southern blot analysis confirmed the presence of the exogenous genes in the genome of G7 larvae. These results show that our strategy is practical and markedly improves the efficiency of SMGT.

关键词： Bombyx mori L. piggyBac transposon sperm-mediated gene transfer transgenesis

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