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雷帕霉素改善黏菌素肾毒性及其分子机制

雷帕霉素改善黏菌素肾毒性及其分子机制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：代重山汤树生李道稳周延肖希龙中国农业大学动物医学院

【目的】黏菌素是治疗临床多重耐药革兰氏阴性细菌感染的最后一线治疗希望,但其肾毒性临床发生率高达60%,严重限制了其临床剂量及治疗指数,本研究通过动物实验及体外细胞模型探究雷帕霉素对黏菌素肾毒性的影响。【方法】人胚胎肾细胞(HE... 详细信息

【目的】黏菌素是治疗临床多重耐药革兰氏阴性细菌感染的最后一线治疗希望,但其肾毒性临床发生率高达60%,严重限制了其临床剂量及治疗指数,本研究通过动物实验及体外细胞模型探究雷帕霉素对黏菌素肾毒性的影响。【方法】人胚胎肾细胞(HEK293)作为体外细胞模型,通过在黏菌素处理(600μM)前预处理或不处理雷帕霉素(150 nM)观察对HEK293细胞活力、氧化应激指标、线粒体功能、凋亡及自噬相关蛋白表达等指标,检测雷帕霉素对黏菌素对HEK293细胞毒性的影响;同时,30只C57小鼠随机分为对照组,雷帕霉素组(2.5 mg/kg/d),黏菌素模型组(24 mg/kg/d)和雷帕霉素(2.5 mg/kg/d)+黏菌素组(24 mg/kg/d),连续处理7天后,检测肾功能参数、氧化应激标志物、自噬及凋亡相关信号通路的蛋白表达,进一步评价雷帕霉素的保护作用。【结果】体外细胞模型研究发现,与黏菌素模型组相比,雷帕霉素预处理能明显增加黏菌素诱导的HEK293细胞活力,同时,可抑制黏菌素诱导的ROS的产生、线粒体膜电位下降及细胞凋亡;同时,雷帕霉素预处理可明显抑制黏菌素诱导的P53、bax、CytC的释放;动物实验进一步证实,与黏菌素模型相比,雷帕霉素共处理能明显降低小鼠尿素氮(Cre)及血清肌酐(BUN)及肾毒性病理损伤,进一步研究发现,与黏菌素模型组相比,雷帕霉素共处理可明显降低小鼠肾脏P53、bax表达及caspase-3活力。【结论】体外实验及动物模型均表明,雷帕霉素可明显改善黏菌素诱导的肾毒性,可能与ROS及p53介导的线粒体信号通路相关。

关键词：黏菌素肾毒性雷帕霉素 ROS p53

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猪源肠球菌新型非接合转移质粒携带lsa(E)基因

猪源肠球菌新型非接合转移质粒携带lsa(E)基因

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张万江董志民王秋东华欣刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队吉林农业大学动物科学技术学院

【目的】获得携带lsa(E)基因肠球菌新型接合转移质粒pY13的全核酸序列,并分析lsa(E)基因在其他肠球菌中的遗传背景和传播方式。【方法】2013年从猪场分离到7猪lsa(E)阳性肠球菌菌(粪肠球菌n=5,屎肠球菌n=1,鸡肠球菌n=1),通过S1-PFGE、So... 详细信息

【目的】获得携带lsa(E)基因肠球菌新型接合转移质粒pY13的全核酸序列,并分析lsa(E)基因在其他肠球菌中的遗传背景和传播方式。【方法】2013年从猪场分离到7猪lsa(E)阳性肠球菌菌(粪肠球菌n=5,屎肠球菌n=1,鸡肠球菌n=1),通过S1-PFGE、Southem杂交、电击转化和重叠PCR等方法对lsa(E)基因的定位和基因环境进行分析;同时采用454 GS-FLX测序仪对pY13质粒进行序列全测定。【结果】最终获得了一个来自屎肠球菌全长为28489bp的pY13质粒。序列分析显示,pY13质粒携带一个新型的耐药簇,该耐药簇包含lnu(B)、lsa(E)、spw、aadE、aphA3和两个拷贝的erm(B)基因。含有该耐药基因簇的质粒可介导林克酰胺类、大环内酯类、截断侧耳素、链阳菌素、壮观霉素和卡那霉素/新霉素等药物耐药。序列分析结果显示,在耐药基因簇的形成过程中插入元件ISEfa8和IS1256可能发挥了作用。另外,以pY13质粒为模板设计了9对重叠引物,对其他6株lsa(E)基因阳性菌进行PCR扩增,结果证实这6株菌携带的lsa(E)基因均位于pY13类似质粒上。【结论】首次获得了携带lsa(E)的肠球菌质粒pY13,虽然为非接合转移性质粒,但该类型的质粒仍然在多重耐药基因簇的传播中发挥了重要作用。

关键词：耐药基因肠球菌接合转移 lsa

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一种高灵敏度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备方法研究

一种高灵敏度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备方法研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张西亚温凯王战辉江海洋于雪芝沈建忠中国农业大学

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxyniv1eno1,DON）又称呕吐毒素,它是单端孢霉烯B类毒素的一种,具有急性毒性、免疫毒性、细胞毒性、致畸等毒性,广泛存在于污染的小麦、玉米等谷物及其制品中,在全球范围内污染发生率较高,拒报道,我国抽查的样品... 详细信息

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxyniv1eno1,DON）又称呕吐毒素,它是单端孢霉烯B类毒素的一种,具有急性毒性、免疫毒性、细胞毒性、致畸等毒性,广泛存在于污染的小麦、玉米等谷物及其制品中,在全球范围内污染发生率较高,拒报道,我国抽查的样品中,DON的检出率为95.8%,超标率达17.7%。因此,建立快速筛选的免疫学分析方法,十分必要,抗原-抗体反应是免疫分析方法的基础,而目前我国关于DON抗体的制备文献报道较少,抗体灵敏度较低,不足以满足快速筛选分析方法检测的要求。因此本研究旨在报道一种高灵敏度的DON单克隆抗体的制备方法,为DON的快速免疫学分析方法的建立提供原料。为此,经过对DON位点的改造,合成了4种免疫原,分别是3-HS-DON-KLH,CDI-DON-KLH,HS.-DON-KLH和8.-CMO-DON.-KLH,每个免疫原免疫6只SPF雌性Ba1b/c小鼠,经-过动物免疫、检测和细胞融合筛选亚克隆,最终在3-HS-DON-KLH-2小鼠获得了一株单克隆抗体,细胞株编号为12E8,该细胞株能分泌针对游离DON特异性的抗体,选取3-t-HS-DON-BSA作为包被原,采用间接竞争ELISA方法建立了标准曲线,它针对DON,3-AC-DON,15-AC-DON的IC值分别是5.73ng/nL,0.25ng/mL,66.32ng/mL,与其它真菌毒素结构类似物,如T-2毒素、玉米赤霉烯酮、雪腐镰刀菌烯醇等几乎没有交叉反应,是目前文献报道较为灵敏的抗体。DON特异性抗体的获得,为DON快速免疫学筛选分析方法的建立打下了基础。

关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体间接竞争ELISA

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福氏志贺菌中质粒介导耐药性的检测

福氏志贺菌中质粒介导耐药性的检测

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：朱阵张吉丽郭肖司鸿飞周绪正李冰魏小娟张继瑜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所兽药重点开放实验室

【目的】检测福氏志贺菌中质粒介导的耐药性相关基因的流行情况,了解不同耐药基因在福氏志贺菌耐药性中发挥的作用。【方法】首先,运用微量肉汤稀释法测定实验室中保存的38株福氏志贺菌对临床常用的环丙沙星、头孢曲松、头孢哌酮等15种... 详细信息

【目的】检测福氏志贺菌中质粒介导的耐药性相关基因的流行情况,了解不同耐药基因在福氏志贺菌耐药性中发挥的作用。【方法】首先,运用微量肉汤稀释法测定实验室中保存的38株福氏志贺菌对临床常用的环丙沙星、头孢曲松、头孢哌酮等15种不同耐药机理的抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)。然后,使用PCR法扩增喹诺酮类耐药基因:qnr、qnrA、qnrB、qnrD、qnrS;β-内酰胺类耐药基因:ctx-M、ctx-M-1、ctx-M-2、ctx-M-8、ctx-M-9、ctx-M-25、TEM、SHV、OXA;四环素类耐药基因:tetA、tetB;氯霉素类耐药基因:catA、catP:甲氧苄啶耐药基因:sull、sul2;氨基糖苷类耐药基因:aac(3)-I、strAB、aadA;大环内酯类耐药基因ereA、ereB,分析耐药基因与耐药性的关系。【结果】所检测的38株福氏志贺菌对临床常用的15中抗生素均呈现不同程度耐药,其中氯霉素、红霉素、甲氧苄啶、四环素基本失效,多重耐药菌占90%以上。经PCR扩增出qnrD(23株)、ctx-M-1(18株)、ctx-M-9(11株)、ctx-M-25(5株)、SHV(3株)、tetA(36株)、catA(35株)、sul1(38株)、aac(3)-I(23株)、aadA(25株),同时含有qnrD、ctx-M、tetA、catA、sul1、aac(3)-I基因的细菌有20株,超过52%。【结论】本实验对实验室保存的38株福氏志贺菌耐药性及耐药基因检测发现,福氏志贺菌对15种抗菌药物的耐药性已十分严重,多重耐药菌也广泛存在。耐药菌株中普遍存在各种耐药基因,耐药性与耐药基因之间有明显的对应关系。

关键词：福氏志贺菌抗菌药物耐药基因多重耐药性

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苘麻叶不同提取物体外抗氧化和抗菌活性研究

苘麻叶不同提取物体外抗氧化和抗菌活性研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：田春莲张德显宏伟牛生吏杨彩霞范芮铭刘明春沈阳农业大学畜牧兽医学院

【目的】苘麻为锦葵科苘麻属植物,具有较好的清热利湿、解毒开窍的功效。本研究旨在考察苘麻叶不同提取物体外抗氧化和抗菌活性,为兽医临床中兽药的研究和开发奠定一定的基础。【方法】采用溶剂提取法制备苘麻叶水提取物、石油醚萃取物... 详细信息

【目的】苘麻为锦葵科苘麻属植物,具有较好的清热利湿、解毒开窍的功效。本研究旨在考察苘麻叶不同提取物体外抗氧化和抗菌活性,为兽医临床中兽药的研究和开发奠定一定的基础。【方法】采用溶剂提取法制备苘麻叶水提取物、石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物等6个提取物;采用DPPH自由基和羟基自由基清除能力测定试验评价苘麻叶不同提取物的抗氧化活性;采用液体二倍稀释法和琼脂扩散法测定苘麻叶提取物对金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的作用。【结果】DPPH自由基清除能力测定试验中,石油醚萃取物(1.62mg/m1)和乙酸乙酯萃取物(1.07mg/m1)的抗氧化活性较好,其清除率分别为80.6%和76.8%;羟基自由基清除能力测定试验中,乙酸乙酯萃取物(0.06mg/m1)和水提取物(0.12mg/m1)的抗氧化活性较好,其清除率分别为77.8%和81.4%;苘麻叶6种提取物对金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌均具有一定的抑制作用,MIC范围分别为17.13-142.09、8.74-539.74、4.28-568.35和8.74-539.74mg/ml,其中苘麻水提取物和乙酸乙酯萃取物抑菌效果较好,石油醚萃取物次之。【结论】本研究表明,苘麻叶不同提取物均具有一定的体外抗氧化和抗菌活性,为临床中兽药的研制提供了思路和方法。

关键词：苘麻叶中药提取物抗氧化作用抗菌作用中兽药

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异鼠李素通过下调NF-κB通路缓解炎症反应

异鼠李素通过下调NF-κB通路缓解炎症反应

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李扬沈冰玉田野邓旭明冯海华吉林大学动物医学学院药理与毒理实验室

异鼠李素,来源于胡颓子科植物沙棘的果实,属于黄酮类物质。有关报道指出异鼠李素具调节免疫反应,抗氧化等多种治疗作用。本实验从体外和体内两个方面对异鼠李素的抗炎作用进行了研究。体外试验在LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞... 详细信息

异鼠李素,来源于胡颓子科植物沙棘的果实,属于黄酮类物质。有关报道指出异鼠李素具调节免疫反应,抗氧化等多种治疗作用。本实验从体外和体内两个方面对异鼠李素的抗炎作用进行了研究。体外试验在LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)内,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测异鼠李素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达量的影响。体内试验通过建立LPS诱发的小鼠急性肺损伤模型,采用ELISA法测定小鼠支气管肺泡灌洗液(BAIF)中的TNF-α,IL-6和IL-1β的浓度。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)测定异鼠李素对p65和IκBα的磷酸化作用的影响。此外,为了进一步检验异鼠李素是否是通过NF-κB信号通路来减缓LPS引起的炎症,我们运用了NF-κB通路的抑制剂PDTC。体外试验结果表明:在LPS刺激的RAW264.7细胞内,异鼠李素显著地降低了LPS诱导细胞产生的TNF-α,IL-6及IL-1β的表达水平。体内试验结果表明:异鼠李素显著地抑制了小鼠肺泡灌洗液内TNF-α,IL-6及IL-1β的产生,Western blot检测结果表明异鼠李素也抑制了LPS刺激引起的p65和IκB的磷酸化作用。特定抑制剂的干扰表明异鼠李素介导的细胞因子和蛋白的抑制确实是通过NF-κB信号通路产生的。此外,异鼠李素还减弱了由LPS刺激导致的小鼠肺部组织的病理变化。以上试验结果综合表明异鼠李素在体外和体内均具有一定的抗炎作用,并且在未来可能作为新的抗炎药物来发挥对各种炎症的治疗作用。

关键词：异鼠李素细胞因子 NF-κB 小鼠急性肺损伤抗炎作用

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莱克多巴胺在猪可食性组织中残留的定量确证方法研究

莱克多巴胺在猪可食性组织中残留的定量确证方法研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：陶燕飞朱方伟陈冬梅谢书宇王旭潘元虎刘振利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品安全评价重点开放实验室华中农业大学

莱克多巴胺作为克仑特罗的主要替代品在很多国家使用情况不同,我国以及欧盟等都将其列为违禁药物,而美国以及加拿大等则允许其作为促生长剂使用。因为各国之间贸易往来而莱克多巴胺使用的差异存在贸易争端。目前,对于莱克多巴胺在猪中... 详细信息

莱克多巴胺作为克仑特罗的主要替代品在很多国家使用情况不同,我国以及欧盟等都将其列为违禁药物,而美国以及加拿大等则允许其作为促生长剂使用。因为各国之间贸易往来而莱克多巴胺使用的差异存在贸易争端。目前,对于莱克多巴胺在猪中残留消除规律的评估也被再次提及。本研究在建立β-受体兴奋剂类药物多残留定量确证方法的同时,对莱克多巴胺在猪可食性组织中的定量确证方法进行单独研究,目的是为研究莱克多巴胺在猪中的残留消除规律提供手段,并可作为检测工具监测其在畜牧生产中是否有滥用的现象,保障食品安全。各组织样品经过酶解、提取和净化,高效液相色谱-串联质谱ESI正离子和负离子模式同时进行检测,采用C色谱柱（150mm×2.1nm,粒径5μm,或相当者）,流动相为0.1%甲酸+5mmol/L乙酸铵溶液+甲醇（%）,喷雾电压为4000V,离子传输管温度为330℃,鞘气压力为40arb,辅助气压力为6arb。实验结果表明该方法测定可食性组织中的莱克多巴胺残留量准确可靠,各组织中,莱克多巴胺检测限为0.25μg/kg,定量限为0.5μg/kg,在猪各组织中分别添加莱克多巴胺0.5μg/kg、1μg/kg和2μg/kg获得平均回收率为96.4%8.9%,变异系数≤2.6%。该法分析时间短,有机试剂用量少,前处理简单,回收率高,可用于猪各组织中莱克多巴胺残留定量测定。

关键词：莱克多巴胺可食性组织残留检测固相萃取液相色谱串联质

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大肠杆菌中染色体编码的CMY-2转移到内源性ColE1-like小质粒上的传播特征研究

大肠杆菌中染色体编码的CMY-2转移到内源性ColE1-like小质粒上的...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：方亮星孙坚李亮李幸萍廖晓萍刘雅红华南农业大学兽医学院

【目的】本实验旨在研究3株猪源ST641型大肠杆菌染色体编码的bla基因转移到内源性的类似ColE1小质粒上并伴随着对3代头孢菌素耐药程度提高的机制。【方法】2012年从猪场分离到3株携带blaST641型的大肠杆菌。首先,通过MIC、电转化、SI-P... 详细信息

【目的】本实验旨在研究3株猪源ST641型大肠杆菌染色体编码的bla基因转移到内源性的类似ColE1小质粒上并伴随着对3代头孢菌素耐药程度提高的机制。【方法】2012年从猪场分离到3株携带blaST641型的大肠杆菌。首先,通过MIC、电转化、SI-PFGE、I-Ceul-PFGE、Southern杂交、PCR-mapping和引物步移等实验,对分离的菌株以及电转子进行耐药表型的测定、bla基因的电转效率测定、基因定位以及基因环境的分析。然后,分析携带bla类似的ColE1质粒的稳定性及二次转化效率。最后采用qPCR和qRT-PCR分别对原菌和电转子中的bla基因的相对拷贝数和表达量进行分析。【结果】3株ST641大肠杆菌携带的bla基因均位于染色体上,但原菌和电转子的基因环境表明染色体上bla保守区转移到内源性的大小为4,661pb的类似ColE1小质粒的不同位点上,形成大小为14,845pb较大的类似ColE1质粒,后者以较低的电转效率(10-10)转移到感受态细胞中。相对野生菌,电转子对头孢噻肟、头孢噻呋以及头孢他啶的MICs均提高2-8倍。qRT-PCR分析表明第三代头孢菌素耐药程度提高与电转子中bla表达量的增加相关。二次电转效率试验表明携带bla的类似ColE1质粒能够以较高的转化效率(10-10)发生转移。但是质粒稳定性试验表明携带bla的类似ColE1质粒在无抗菌药物选择作用下,连续培养100代（10天）,出现质粒的丢失现象。【结论】染色体上编码的bla基因能够转移到内源性的类似ColE1小质粒上,并随之一起发生转移,这可能是细菌在选择压力下的一种适应性生存机制的体现。

关键词： blaCMY-2 染色体 ColE1质粒超广谱β-内酰胺酶

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六种脂肪酸对Nrf2和I相代谢酶CYP7A1表达的影响

六种脂肪酸对Nrf2和I相代谢酶CYP7A1表达的影响

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张金铭张秀英郝丽红齐悦李广亮孙晓琦东北农业大学大学动物医学学院

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是目前常发的慢性疾病,在NAFLD的发病过程中会引起脂肪酸代谢紊乱,各脂肪酸浓度会发生改变。Nrf2是细胞抗氧化反应的中枢调节者,可作为治疗多种肝脏疾病的药物作用靶点,如非酒... 详细信息

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是目前常发的慢性疾病,在NAFLD的发病过程中会引起脂肪酸代谢紊乱,各脂肪酸浓度会发生改变。Nrf2是细胞抗氧化反应的中枢调节者,可作为治疗多种肝脏疾病的药物作用靶点,如非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、急性肝损伤以及肝癌等。细胞色素P4507A1酶是CYP450家族成员之一,在维持机体的糖、脂及能量代谢方面具有重要作用。CYP7A1是胆汁酸经典合成途径的限速酶,其表达量和活性对胆汁酸的合成起制约作用。本实验旨在研究脂肪酸对核转录因子Nrf2和I相代谢酶CYP7A1的mRNA和蛋白质表达的影响。实验分别用1mM软脂酸(PA)、硬脂酸(SA)、油酸(OA)、亚油酸(LA)、亚麻酸(ALA)、花生四烯酸(AA)诱导人肝癌细胞系(HepG2)24h之后,采用Realtime PCR法、Western blot法检测HepG2细胞内Nrf2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量。研究结果表明,六种脂肪酸作用24h后均能显著提高HepG2细胞中Nrf2 mRNA和蛋白的表达量(P<0.05或P<0.01),同时,除ALA组CYP7A1 mRNA和蛋白的表达量极显著高于对照组外,其他脂肪酸诱导后CYP7A1 mRNA和蛋白的表达量则显著或极显著地低于对照组(P<0.05或P<0.01)。综上所述,处理组的HepG2细胞Nrf2和CYP7A1 mRNA和蛋白表达水平相一致,结果呈正相关或负相关。

关键词：脂肪酸 CYP7A1 Nrf2 HepG2

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养猪场废水及周边土壤中氟苯尼考耐药菌的初步研究

养猪场废水及周边土壤中氟苯尼考耐药菌的初步研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：赵琴汪洋吴聪明沈建忠

为调查养猪场周边环境中氟苯尼考耐药菌的流行情况,我们采集了北京市某猪场的养殖的废水及周边土壤等样品,利用传统的可培养的方法分离纯化得到86株耐氟苯尼考(MIC≥16mg/L)的抗性菌株。通过16S RNA测序进行菌株鉴定,结果显示含有假单... 详细信息

为调查养猪场周边环境中氟苯尼考耐药菌的流行情况,我们采集了北京市某猪场的养殖的废水及周边土壤等样品,利用传统的可培养的方法分离纯化得到86株耐氟苯尼考(MIC≥16mg/L)的抗性菌株。通过16S RNA测序进行菌株鉴定,结果显示含有假单胞菌属46株,气单胞菌属18株,不动杆菌属6株,芽孢杆菌菌属6株,肠杆菌科5株,栖冷克吕沃尔菌2株,粪肠球菌2株以及肺炎杆菌1株。采用常规PCR检测已知氟苯尼考耐药基因在抗性菌中的存有情况,发现fexA的分离率为7.0%(6/86),cfr为3.5%(3/86),有趣的是含有cfr的菌株均含有fexA,而floR阳性菌的分离率高达39.5%(34/86),但是fexB的阳性率较低,仅有1株分离自猪场周边土壤中的烘肠球菌中有检出,然而还有44株未检测到任何已知的氟苯尼考特异性耐药基因。这是首次在土壤中发现含有fexB的阳性菌株,而目通过全基因组测序及序列比对结果发现,该菌中含有的fexB片段(约4kb)与之前本实验室刘河冰等人所报道的序列致(相似性为99%),也是定位于质粒上,但是否为同一个质粒还不得而知。对于其他的阳性菌株我们尚未进行下一步研究,在这些菌株中可能存在的氟苯尼考耐药基因,由此可见,随着养猪业发展,氟苯尼考耐药基因不仅在动物体内被不断发现,而且在猪场周边环境中的传播也是愈发严重,目各个氟苯尼考耐药基因的分布情况越来越呈现多样化,甚至可能会通过一定途径由环境传播至人人类,影响人类公众健康康。

关键词：猪场环境氟苯尼考 fexB 耐药基因

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