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10 篇 流行病学
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9 篇 中国动物学会
9 篇 文物藏品
9 篇 市场经济
8 篇 药动学

机构

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11 篇 福建农林大学
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作者

25 篇 邓旭明
20 篇 沈建忠
19 篇 汪洋
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14 篇 李剑勇
14 篇 杨亚军
14 篇 肖希龙
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12 篇 刘雅红
12 篇 王战辉
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12 篇 江善祥
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11 篇 黄一帆
11 篇 秦哲
11 篇 李世宏

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猪细胞色素P450氧化酶3A29对黄曲霉毒素B1的生物激活和区域选择性

猪细胞色素P450氧化酶3A29对黄曲霉毒素B1的生物激活和区域选择性

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：吴骏陈若虹张财辉李康柏徐慰盈王利娟陈庆梅母培强蒋珺文继开邓诣群广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室华南农业大学生命科学学院

黄曲霉毒素作为一种极强的肝致癌物严重威胁动物和人体的健康,日益引起更多的食品安全关注。由于不可避免的饲料污染,猪极其遭受黄曲霉毒素的危害,其有毒有害产品潜在威胁人类健康。然而,到目前为止,人们对黄曲霉毒素B（AFB）在猪体内... 详细信息

黄曲霉毒素作为一种极强的肝致癌物严重威胁动物和人体的健康,日益引起更多的食品安全关注。由于不可避免的饲料污染,猪极其遭受黄曲霉毒素的危害,其有毒有害产品潜在威胁人类健康。然而,到目前为止,人们对黄曲霉毒素B（AFB）在猪体内的代谢过程,特别是对AFB活化的关键细胞色素P450氧化酶仍缺乏了解。在这项研究中,我们首先在大肠杆菌中表达纯化了来源于猪肝脏的细胞色素P450氧化酶3A29（CYP3A29）,通过CO还原光谱和尼福地平氧化证实了其具有代谢活性。膜重构孵育实验证实该重组CYP3A29能在体外氧化AFB形成其活化产物AFB-8,9-外环氧化物。这一结果表明该酶可能在猪体内发挥活化AFB的功能。我们进一步探讨了3A29对AFB区域选择性激活的结构基础。T309A对AFB的激活显著降低,而F304A则表现出对AFB增强的激活。与突变研究结果一致的是,分子对接模拟表明Thr309通过形成氢键稳定AFE的结合。此外,Phe304侧链大的苯环对AFB形成了潜在的空间位阻,并非以前人3A4研究所认为的π-π相互作用。这项研究首次证明了猪体内CYP3A29对AFB的生物活化作用,对于理解3A29对AFB的区域选择性提供了参考。

关键词： P450 3A29 AFB1 生物激活区域选择性

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大肠杆菌O157:H7新型液相蛋白芯片检测方法的建立

大肠杆菌O157:H7新型液相蛋白芯片检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：董晓琳夏志平吴永魁樊宏超军事医学科学院军事兽医研究所

【目的】大肠杆菌O157:H7（*** O157:H7）引起的食物中毒是一种常见的动物食源性疾病。液相蛋白芯片技术主要是通过单抗和多抗的夹心ELISA或者竞争ELISA方法以实现对目标分子的检测,实验过程（以夹心ELISA为例）包括单抗偶联微球、捕获... 详细信息

【目的】大肠杆菌O157:H7（*** O157:H7）引起的食物中毒是一种常见的动物食源性疾病。液相蛋白芯片技术主要是通过单抗和多抗的夹心ELISA或者竞争ELISA方法以实现对目标分子的检测,实验过程（以夹心ELISA为例）包括单抗偶联微球、捕获靶分子、加入多抗、以及荧光标记的二抗等多个步骤,除此之外,方法中还涉及了多次重悬、洗涤等过程。本研究建立Ecoli O157:H7新型液相蛋白芯片技术,以实现对*** O157:H7的快速检测。【方法】分离培养*** O157:H7至OD=1.0（约1×10～9 CFU/mL）,甲醛灭活后PI染色,应用流式细胞术对染色细菌进行荧光强度的稳定性评价。同时,将Ecoli O157:H7单克隆抗体通过SMCC共价偶联技术偶联于微球,应用FACS Array对捕获微球的特异性和亲和性进行评价。【结果】细菌甲醛灭活条件:4/‰终浓度,37℃30min。PI染色条件:100μg/mL、4℃下30min。应用流式细胞术对染色后的细菌进行不同时间段的荧光值测定,1.5h内荧光中值未发生显著变化且染色后的阳性细菌百分比始终处于95%以上。90μL 1mg/mL *** O157:H7单克隆抗体与75μL荧光微球（约6×10～6个）进行偶联。在建立的方法中,微球使用量约3×10～4个,菌量在1×106CFU/mL×10～3 CFU/mL时,捕获微球呈现良好的特异性和亲和力。【结论】与常规液相蛋白芯片不同,该方法直接将染色后的菌体荧光作为报告分子,能够较为快速的实现对Ecoli O157:H7的检测。

关键词：大肠杆菌O157:H7 液相蛋白芯片菌体荧光

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免疫亲和搅拌棒吸附微萃取高效液相色谱荧光法测定牛奶中的11种喹诺酮类药物

免疫亲和搅拌棒吸附微萃取高效液相色谱荧光法测定牛奶中的11种喹...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：姚凯张伟杨琳燕李存天津农学院动物科学与动物医学学院

【目的】喹诺酮类药物属于人工合成的抗菌药物,由于抗菌谱广、抗菌活性强、口服吸收好等特点,被广泛用于预防和治疗食品动物的多种感染性疾病,也被用作饲料添加剂。由于喹诺酮类药物的滥用现象普遍,导致其在动物性食品中残留,严重危害... 详细信息

【目的】喹诺酮类药物属于人工合成的抗菌药物,由于抗菌谱广、抗菌活性强、口服吸收好等特点,被广泛用于预防和治疗食品动物的多种感染性疾病,也被用作饲料添加剂。由于喹诺酮类药物的滥用现象普遍,导致其在动物性食品中残留,严重危害人体健康。本研究旨在建立一种环境友好的牛奶中喹诺酮类药物的提取、净化和检测方法。【方法】将牛奶在10000 rpm下离心10 min,除去脂肪层。将免疫亲和搅拌棒放入处理后的牛奶中提取,甲醇:PBS（v/v,8:2）作为洗脱液洗脱,洗脱液经过氮吹,复溶和0.22μm滤膜过滤后进样,采用高效液相色谱-荧光检测器检测。流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,程序波长,外标法定量。【结果】11种喹诺酮类药物标准工作液在0.1～100 ng/mL范围内,浓度与响应值之间线性关系良好（R>0.999）。由于免疫亲和搅拌棒柱容量有限,故牛奶样品中喹诺酮类药物的添加浓度只采用0.1 ng/g,回收率为11.8%0.0%,日内变异系数和日间变异系数分别为3.2%1.9%和5.2%-12.5%。检测限为0.1ng/g,定量限为0.3 ng/g。【结论】本研究建立了一种环境友好且灵敏的净化与检测方法,虽然回收率偏低,但精密度良好,适用于牛奶中喹诺酮类药物的残留检测,随后的研究中有待于进一步增加搅拌棒的柱容量来提高回收率。

关键词：免疫亲和搅拌棒喹诺酮牛奶高效液相色谱残留检测

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LC-MS/MS测定鸡肉(蛋)中氟虫腈残留研究

LC-MS/MS测定鸡肉(蛋)中氟虫腈残留研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张媚玉卞愧刘清颖孟辰颖贺利民华南农业大学兽医学院兽医药理研究室

【目的】氟虫腈原本是农业生产上使用的一种苯基吡唑类新型高效杀虫剂,但近年来有不法分子在禽类生产中违规使用。环境中残留的氟虫腈通过生物富集可以进入食物链,在禽类和蛋鸡上的非法使用,会导致禽肉和鸡蛋中氟虫腈残留,最终都会给人... 详细信息

【目的】氟虫腈原本是农业生产上使用的一种苯基吡唑类新型高效杀虫剂,但近年来有不法分子在禽类生产中违规使用。环境中残留的氟虫腈通过生物富集可以进入食物链,在禽类和蛋鸡上的非法使用,会导致禽肉和鸡蛋中氟虫腈残留,最终都会给人类健康带来潜在的危害。本研究建立了鸡肉（蛋）中氟虫腈农药残留的液相色谱-电喷雾串联质谱分析方法,为快速、准确检测和监控鸡肉（蛋）氟虫腈残留提供依据。【方法】鸡肉（蛋）试样匀浆,称取5 g于50 mL离心管中,加入10 mL乙腈、4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠,超声、振荡,离心后移取上清液;残渣重复提取一次,合并上清液,水浴中旋蒸浓缩至5 mL以下,于-20℃冷冻除脂,离心后的上清液用水适当稀释,采用Bond Elut-C固相萃取小柱净化;固相萃取小柱预先用3 mL甲醇、3 mL水依次活化平衡,将上述提取溶液过柱,过柱完成后,依次用3 mL水、3 mL20%甲醇水溶液淋洗小柱,抽真空5 mmin,最后用6 mL甲醇洗脱;收集洗脱液,并在40℃水浴条件下,氮气吹至近干,残渣用1 mL40%乙腈水溶液复溶后过膜上机检测。以水和乙腈为流动相,氟虫腈经Zorbax SB-Aq色谱柱（150 mm×2.1 mm i.d.,3.5μm）分离,梯度洗脱,采用电喷雾离子源,负离子扫描,利用三重四极杆质谱仪进行多反应监测分析,基质匹配外标法定量。【结果】在0.01～2.0 g kg浓度范围内,氟虫腈色谱峰面积与相应质量浓度具有良好的线性关系（r>0.999）;在0.01,0.1及1.0 g kg三个浓度添加水平,氟虫腈的平均回收率在79.7%8.0%之间,变异系数小于8.8%;在鸡肉（蛋）试样中检测限和定量限均分别为0.002 g kg与0.01 g kg。【结论】本方法操作简单,提取效率高,方法灵敏、可靠,可用于鸡肉（蛋）中氟虫腈农药残留的日常分析和监测。

关键词：氟虫腈鸡肉鸡蛋液相色谱-串联质谱法残留

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氟苯尼考-β-环糊精包合物的研制

氟苯尼考-β-环糊精包合物的研制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：马可张平龚琪邓桦蒲文珺杨鸿佛山科学技术学院生命科学学院广东养宝生物制药有限公司

(目的)氟苯尼考是酰胺醇类动物专用广谱抗生素,广泛应用于敏感菌所致的畜禽及鱼的细菌性疾病的治疗。为提高氟苯尼考的溶解度、溶出速度和生物利用度,方便给药,采用β-环糊精包含技术制备氟苯尼考水溶性粉。（方法）采用正交设计法对影... 详细信息

(目的)氟苯尼考是酰胺醇类动物专用广谱抗生素,广泛应用于敏感菌所致的畜禽及鱼的细菌性疾病的治疗。为提高氟苯尼考的溶解度、溶出速度和生物利用度,方便给药,采用β-环糊精包含技术制备氟苯尼考水溶性粉。（方法）采用正交设计法对影响包合率的主要因素投料比、包合温度、包合时间等进行正交试验,以包合率和包合物产率为评价指标,筛选最佳包合处方工艺,以β-环糊精为包合材料,取氟苯尼考25 g,β-环糊精50 g,包合温度100℃,包合时间30min,采用饱和水溶液法制备氟苯尼考-β-环糊精包合物;以红外分光光度法对包合物进行确证,用高效液相色谱法,紫外分光光度法测定溶解度和溶出度,并计算包合率和包合物产率。结果显示:包合物中氟苯尼考和β-环糊精的特征峰消失,在3430 cm处出现新的特征峰,证明形成了氟苯尼考-β-环糊精包合物;紫外分光光度法测得包合物产率为95.32%,包合率为84.90%;高效液相色谱法测得氟苯尼考-β-环糊精包合物30 min最大溶解度为0.45～0.5g/100mL,15 min溶出率为94.7%,30 min溶出率为100%。（结论）氟苯尼考-β-环糊精包合物制备方法简单,可显著提高氟苯尼考水溶性,便于临床饮水给药。

关键词：氟苯尼考 β-环糊精包合物研制

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城市河水中产KPC-2酶大肠杆菌的分子特征研究

城市河水中产KPC-2酶大肠杆菌的分子特征研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：徐国锋王宏栋矫薇薇张秀英东北农业大学动物医学学院

【目的】从城市河水中分离到三株产KPC-2酶大肠杆菌（E1、E2和E3）,对三株产KPC-2酶大肠杆菌的分子特征及传播特点进行研究。【方法】2013年5月至2013年9月从哈尔滨市城市河水中分离鉴定出三株产KPC酶大肠杆菌,微量肉汤法测定三株菌的... 详细信息

【目的】从城市河水中分离到三株产KPC-2酶大肠杆菌（E1、E2和E3）,对三株产KPC-2酶大肠杆菌的分子特征及传播特点进行研究。【方法】2013年5月至2013年9月从哈尔滨市城市河水中分离鉴定出三株产KPC酶大肠杆菌,微量肉汤法测定三株菌的耐药情况;PCR、PFGE、MLST、系统进化类型方法分析三株菌的分子特征;接合实验、质粒复制子分型分析传播特点;PCR及测序测定KPC-2基因的基因环境。【结果】三株菌对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、氨曲南、头霉菌素类抗菌药物有相似的耐药性,都呈现耐药,对其他类药物呈现不同程度耐药;PCR检测结果显示,E1菌株携带bla、bla、bla、bla和qnrB2基因,属于ST410-A型;E2菌株携带bla、bla、bla、bla、aac（6'）-Ib-cr和qnrS1基因,属于ST131-B2型;E3菌株携带bla、blabla、bla、armA和aac（6'）-Ib-cr基因,属于ST648-D:三株菌有不同的PFGE型,说明三株菌不存在传播关系;三株菌都能接合成功,bla基因都发生了水平转移,且在三株接合子中检测出IncA/C和IacN型质粒;三株菌携带的bla基因具有相同的基因环境Tn3-tnpA/Tn3-tnpR/ISKpn8/bla/ISKpn6。【结论】环境水源产KPC-2酶大肠杆菌具有与临床上传播的产KPC-2大肠杆菌具有相似的分子特征,环境源中碳青霉烯酶的流行情况需要进-步的开展。

关键词： KPC-2 分子特征基因环境大肠杆菌

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抛锚式教学在兽医药理学教学中的应用探索

抛锚式教学在兽医药理学教学中的应用探索

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：姜中其楼程富马晓丹浙江大学动物科学学院

目的抛锚式教学也称基于问题的教学、情境性教学,是指教师在教学时为学生提供一个学习情景,使教学建立在生动的事件或问题情景的基础上(确定这类真实事件或问题的过程被形象地比喻为"抛锚"),通过师生间互动交流与探讨,使学生... 详细信息

目的抛锚式教学也称基于问题的教学、情境性教学,是指教师在教学时为学生提供一个学习情景,使教学建立在生动的事件或问题情景的基础上(确定这类真实事件或问题的过程被形象地比喻为"抛锚"),通过师生间互动交流与探讨,使学生亲身体验从识别学习目标、提出学习目标到实现学习目标的教学过程。实施改革的目的在于更好调动学生的学习动机,发展学生的迁移能力,提高学生观察分析和解决问题的能力。方法采用真实和虚拟方式,设情景主题,提出相关的若干问题(鼓励学生提出更多问题)并通过资料查阅理解先独立学习,再小组协作学习,应用云盘较大空间特点,上传各位同学及小组作业(包括文字doc、音频和视频材料)全班分享交流和讨论。具体做法是在课前1周教师已将要讨论的情景和问题(部分)上传到平台,让学生课外学习,查阅资料,每位学生都对案例进行思考,独立完成情景包含的问题及回答并整理成文字,然后小组在一起讨论分析各自的观点,分析整理,上传云盘分享。最后精选一组在课堂展示,进一步讨论和提问,在课堂上,学生和教师将对本案例的疑问都提出来,并且一起运用所学的知识来解决。最后老师简要点评。结果:建立了10个情景主题及若干问题,准备了相应的点评要点和问题及参考答案,经五个环节的学习讨论分享和交流,取得了较好的教学效果。这种教学方法调动了全体同学的学习积极性和主动性,不但培养查阅资料开展探究式学习的良好习惯,而且培养他们积极思考和表达能力和批判性思维能力和勇气。同学们提出的问题十分丰富多彩,也促进了教学相长。但同时也看到,要改革过程中也需对一些因素进行认真分析,如在总评成绩中的比例、评价体系的完善,师生之间的更好沟通等。结论基于问题的抛锚式教学有利于提高学习的自动性和自觉性,提高理解力和观察分析和解决问题能力,使学生明白所学知识的现实意义,有利于培养学生的问题意识,更好适行业发展要求。

关键词：抛锚式教学兽医药理学教学改革基于问题情景建构

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六种脂肪酸对Nrf2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响

六种脂肪酸对Nrf2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张金铭张秀荚郝丽红齐悦李广亮孙晓琦东北农业大学大学动物医学学院哈尔滨150030

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是目前常发的慢性疾病,在NAFLD的发病过程中会引起脂肪酸代谢紊乱,各脂肪酸浓度会发生改变.Nrf2是细胞抗氧化反应的中枢调节者,可作为治疗多种肝脏疾病的药物作用靶点,如非酒精... 详细信息

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是目前常发的慢性疾病,在NAFLD的发病过程中会引起脂肪酸代谢紊乱,各脂肪酸浓度会发生改变.Nrf2是细胞抗氧化反应的中枢调节者,可作为治疗多种肝脏疾病的药物作用靶点,如非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、急性肝损伤以及肝癌等.细胞色素P4507A1酶是CYP450家族成员之一,在维持机体的糖、脂及能量代谢方面具有重要作用.CYP7A1是胆汁酸经典合成途径的限速酶,其表达量和活性对胆汁酸的合成起制约作用.本实验旨在研究脂肪酸对核转录因子Nrf2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1的mRNA和蛋白质表达的影响.实验分别用1mM软脂酸(PA)、硬脂酸(SA)、油酸(OA)、亚油酸(LA)、亚麻酸(ALA)、花生四烯酸(AA)诱导人肝癌细胞系(HepG2) 24h之后,采用Real time PCR法、Western blot法检测HepG2细胞内Nrf2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量.研究结果表明,六种脂肪酸作用24h后均能显著提高HepG2细胞中Nrf2 mRNA和蛋白的表达量(P＜0.05或P＜0.01),同时,除ALA组CYP7A1 mRNA和蛋白的表达量极显著高于对照组外,其他脂肪酸诱导后CYP7A1 mRNA和蛋白的表达量则显著或极显著地低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).综上所述,处理组的HepG2细胞Nrf2和CYP7A1 mRNA和蛋白表达水平相一致,结果呈正相关或负相关.

关键词：脂肪酸 CYP7A1 Nrf2 HepG2

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杆菌肽类耐药基因bcrABDR在鸡源粪肠球菌中的流行性分布以及分子传播机制的研究

杆菌肽类耐药基因bcrABDR在鸡源粪肠球菌中的流行性分布以及分子...

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：陈慕雅孙坚邓辉方亮星廖晓萍刘雅红华南农业大学兽医学院/广东省兽药研制与安全评价重点实验室广州510642

[目的]本实验研究旨在研究鸡源粪肠球菌中介导杆菌肽类耐药的基因bcrABDR基因簇的流行性分布和分子传播机制.[方法]2014年间在广州市活禽交易市场分离的来自在广东、广西、湖南、海南,浙江,江西等六个省分的鸡源粪肠球菌109株,采用PCR... 详细信息

[目的]本实验研究旨在研究鸡源粪肠球菌中介导杆菌肽类耐药的基因bcrABDR基因簇的流行性分布和分子传播机制.[方法]2014年间在广州市活禽交易市场分离的来自在广东、广西、湖南、海南,浙江,江西等六个省分的鸡源粪肠球菌109株,采用PCR和测序方法筛选产携带bcrABDR基因簇的阳性肠球菌,采用琼脂稀释法测定阳性菌株对抗菌药物的敏感性,采用脉冲产凝胶电泳(PFGE)分析携带bcrABDR基因阳性菌株的亲缘关系.采用接合转移及质粒酶切等方法对携带bcrABDR基因的可接合性质粒特征进行分析.运用S1-PFGE以及Southern杂交对于接合子以及接合转移转移不成功的菌株中bcrB基因进行基因定位,并用PCR-mapping和引物步移法分析bcrABDR基因簇的侧翼序列基因环境.[结果]109株中检测到37株携带bcrABDR的阳性粪肠球菌,检测率为33.9％.药敏试验表明阳性菌株中杆菌肽MIC值均大于256μg/ml,同时PFGE分析表明阳性粪肠球菌株之间亲缘关系较远,基本无克隆传播现象.S1-PFGE以及Southern杂交结果显示在37株阳性菌中,bcrABDR基因簇均位于质粒上.bcrABDR的基因环境分析表明结果显示该基因簇的转移主要是由插入序列ISEnfa1介导,并且在其两侧携带同向的插入序列ISEnfa1时,可形成环状中间体,促进耐药基因的传播.[结论]本研究首次在全国范围内调查鸡源粪肠球菌中bcrABDR基因簇的流行分布情况进行调查,并发现其具有较高的流行率,而且多位于不可接合性质粒上,插入序列ISEnfa1很可能是介导其散播的主要的传播机制.

关键词：粪肠球菌杆菌肽 ISEnfa1 bcrABDR

来源：评论

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异鼠李素通过下调NF-KB通路缓解炎症反应

异鼠李素通过下调NF-KB通路缓解炎症反应

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：李扬沈冰玉田野邓旭明冯海华吉林大学动物医学学院药理与毒理实验室吉林长春130062

异鼠李素,来源于胡颓子科植物沙棘的果实,属于黄酮类物质.有关报道指出异鼠李素具调节免疫反应,抗氧化等多种治疗作用.本实验从体外和体内两个方面对异鼠李素的抗炎作用进行了研究.体外试验在LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)内... 详细信息

异鼠李素,来源于胡颓子科植物沙棘的果实,属于黄酮类物质.有关报道指出异鼠李素具调节免疫反应,抗氧化等多种治疗作用.本实验从体外和体内两个方面对异鼠李素的抗炎作用进行了研究.体外试验在LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)内,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测异鼠李素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达量的影响.体内试验通过建立LPS诱发的小鼠急性肺损伤模型,采用ELISA法测定小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中的TNF-α,IL-6和IL-1β的浓度.应用免疫蛋白印迹法(Western blot)测定异鼠李素对p65和IκBα的磷酸化作用的影响.此外,为了进一步检验异鼠李素是否是通过NF-κB信号通路来减缓LPS引起的炎症,我们运用了NF-κB通路的抑制剂PDTC.体外试验结果表明：在LPS刺激的RAW264.7细胞内,异鼠李素显著地降低了LPS诱导细胞产生的TNF-α,IL-6及IL-1β的表达水平.体内试验结果表明：异鼠李素显著地抑制了小鼠肺泡灌洗液内TNF-α,IL-6及IL-1β的产生,Western blot检测结果表明异鼠李素也抑制了LPS刺激引起的p65和IκB的磷酸化作用.特定抑制剂的干扰表明异鼠李素介导的细胞因子和蛋白的抑制确实是通过NF-κB信号通路产生的.此外,异鼠李素还减弱了由LPS刺激导致的小鼠肺部组织的病理变化.以上试验结果综合表明异鼠李素在体外和体内均具有一定的抗炎作用,并且在未来可能作为新的抗炎药物来发挥对各种炎症的治疗作用.

关键词：异鼠李素细胞因子 NF-κB 小鼠急性肺损伤抗炎作用

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