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广州流溪河沉积物反硝化细菌群落结构与环境因子相关性研究

广州流溪河沉积物反硝化细菌群落结构与环境因子相关性研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：丁雪瑶王勉之孙静孙永学华南农业大学兽医学院国家兽药安全评价(环境评估)实验室(华南农大)

(目的)本文研究了广州流溪河底泥沉积物中反硝化细菌群落结构、narG和nirS基因丰度与环境因子间的相关性,为其生态系统中氮素循环研究提供了基础依据。（方法）经对流溪河流域从上至下游10个位点进行沉积物采样,进行环境因子（温度、pH... 详细信息

(目的)本文研究了广州流溪河底泥沉积物中反硝化细菌群落结构、narG和nirS基因丰度与环境因子间的相关性,为其生态系统中氮素循环研究提供了基础依据。（方法）经对流溪河流域从上至下游10个位点进行沉积物采样,进行环境因子（温度、pH、氨态氮、硝态氮、亚硝态氮、总氮、COD）理化数据测定,对narG基因和nirS基因构建文库分析并采用RT-PCR法进行了丰度研究,通过主坐标分析和冗余度分析等多变量统计分析方法研究了反硝化细菌群落结构、基因丰度与环境因子间相关性。（结果）结果显示:作为反消化作用母体物质,10个采样位点的硝态氮（NO-N）含量变化不大,而亚硝态氮（NO-N）浓度均很低;不同位点沉积物中反硝化菌群落结构表现出差异性;反硝化细菌nirS基因拷贝数范围为7.89×10～3.34×10～4 copies/g,narG基因拷贝数为5.97×10～2 copies/g.64×10～4 copies/g,nirS基因丰度变化范围为0.01%.1%,narG基因丰度变化范围为0.01%.5%;构建系统发育树发现,沉积物样品中大多数nirS基因克隆与目前已知可培养的反硝化细菌的亲缘关系较远,大部分为未被认知的微生物类群,其中已知的nirS型反硝化菌属于变形菌Alphaproteobacteria、Betaproteobacteria、Gammaproteobacteria,其中大部分属于Betaproteobacteria。（结论）研究表明:亚硝态氮（NO-N）生化因子对反硝化细菌群落结构起着决定性的作用,与环境因子的相关性大小依次表现为NO-N>TN>NH-N>COD>NO-N>pH>Temp;河流沉积物中总细菌16S rDNA基因丰度与环境因子之间无显著相关性,而nirS基因型反硝化细菌数量与NH-N和TN因子浓度之间差异极显著（P<0.01）,与NO-N因子差异显著（P<0.05）,narG基因型反硝化菌数量与NO-N因子浓度差异显著（P<0.05）,但与其它环境因子差异不显著（P>0.05）。

关键词： narG nirS 反硝化细菌群落结构丰度多样性环境因子

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食品动物源沙门菌中fOSA3流行分布及其传播特征

食品动物源沙门菌中fOSA3流行分布及其传播特征

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：张文慧谷茜茜蒋红霞曾振灵华南农业大学兽医学院

【目的】研究食品动物源沙门菌中磷霉素耐药基因fosA的流行与传播特征。【方法】从实验室保存的288株沙门菌中用PCR扩增磷霉素耐药基因fosA,fosA,fosC,阳性菌株用琼脂稀释法测定菌株对抗生素的敏感性,PCR检测其他相关耐药基因,脉冲场凝... 详细信息

【目的】研究食品动物源沙门菌中磷霉素耐药基因fosA的流行与传播特征。【方法】从实验室保存的288株沙门菌中用PCR扩增磷霉素耐药基因fosA,fosA,fosC,阳性菌株用琼脂稀释法测定菌株对抗生素的敏感性,PCR检测其他相关耐药基因,脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分型（MLST）分析菌株间的克隆关系。接合转移/转化、复制子分型、S1-PFGE和杂交进行质粒分析。【结果】从288株沙门菌中筛选得到5株（1.7%）fosA阳性菌,没有检测到fosA,fosC。5株阳性菌均为多重耐药菌株,对磷霉素,环丙沙星,恩诺沙星,萘啶酸,氯霉素,头孢噻呋,头孢噻肟,头孢曲松等都耐药,对头孢他啶,头孢西丁,阿米卡星敏感。5株菌中都扩到了bla基因,均为bla(其中bla有4株,bla有1株)。5株菌有3株是来自同一地方鼠伤寒沙门菌,2株为来自不同地方的印第安纳沙门菌。PFGE结果显示3株鼠伤寒沙门菌图谱相同,另外2株印第安纳沙门菌虽分离自不同地方,但图谱也极为相似,说明存在菌株间的克隆传播。MLST分型结果表明5株菌全部为ST17型。5株菌全部成功接合转移,对质粒分析结果显示fosA和bla基因位于同一IncN或IncA/C质粒上,大小约为130kb。【结论】本研究对动物源沙门菌磷霉素耐药基因进行研究,并首次在不同地方的鸡直肠拭子分离得到的5株ST17沙门菌中发现了fosA基因;fosA阳性菌株不仅存在克隆传播,而且fosA与bla基因可以通过IncN型或IncA/C型的可接合性质粒协同进行传播扩散。磷霉素作为人医临床用药,其耐药性可以随头孢类药物的选择压力而在动物源沙门菌中传播,因此应当广泛密切的关注磷霉素耐药基因的传播趋势。

关键词：沙门菌 fosA3 blaCTX-M

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宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌的毒力基因检测及耐药性分析

宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌的毒力基因检测及耐药性分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：杨慧君李晓娜王艺晖王桂琴宁夏大学农学院

【目的】为了了解宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌毒力基因的分布情况以及耐药性情况。【方法】从宁夏不同地区规模化奶牛场采集临床型和隐性乳房炎乳样,用科码嘉金黄色葡萄球菌显色培养基进行初步的筛选,并结合16S rDNA、nuc基因的PCR测序... 详细信息

【目的】为了了解宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌毒力基因的分布情况以及耐药性情况。【方法】从宁夏不同地区规模化奶牛场采集临床型和隐性乳房炎乳样,用科码嘉金黄色葡萄球菌显色培养基进行初步的筛选,并结合16S rDNA、nuc基因的PCR测序结果鉴定金黄色葡萄球菌。采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法,对分离鉴定出的金黄色葡萄球菌菌株进行了12种抗菌药物(红霉素、环丙沙星、林可霉素、万古霉素、多西环素、四环素、青霉素、替米考星、诺氟沙星、头孢唑林、氨苄西林、磺胺甲噁唑、磺胺间甲氧苄啶)的敏感性试验,测定其最小抑菌浓度(MIC);运用PCR.扩增技术对金黄色葡萄球菌的毒力基因(hla、hlb、Clfa)进行检测。【结果】从乳样中共分离鉴定出的154株金黄色葡萄球菌。药敏结果显示,154株金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类的抗生素氨苄西林和青霉素的耐药率都超过了80%;对磺胺类药物复方新诺明的耐药率为67%;对四环素类抗生素较敏感,多西环素的敏感率高达92%;对大环内酯类的红霉素和替米考星敏感率为68%和76%;氟喹诺酮类的敏感率在80%以上。毒力基因检测结果显示,154株金黄色葡萄球菌携带毒力基因hla、hlb和clfa的检出率分别为97.4%(150/154)、97.4%(150/154)、96.75%(149/154)。【结论】宁夏地区乳房炎乳样中分离出的金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类的抗生素和磺胺类药物的耐药率较高,而对四环素类和氟喹诺酮类药物则比较敏感,检出毒力基因hla、hlb、ClFa的频率很高。

关键词：金黄色葡萄球菌毒力基因耐药性

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冻干马抗H7N9精制抗体F（ab′）2的急性毒性和溶血性试验

冻干马抗H7N9精制抗体F（ab′）2的急性毒性和溶血性试验

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：吴永魁李乾学董晓琳赵永坤军事医学科学院军事兽医研究所

【目的】冻干马抗H7N9精制抗体F（ab'）是H7N9禽流感治疗性中和抗体,为评价其临床用药的安全性,进行了小鼠急性毒性试验和对兔红细胞的溶血性试验。【方法】冻干马抗H7N9精制抗体F（ab'）单次腹腔注射分别给予昆明种小鼠和BALB/... 详细信息

【目的】冻干马抗H7N9精制抗体F（ab'）是H7N9禽流感治疗性中和抗体,为评价其临床用药的安全性,进行了小鼠急性毒性试验和对兔红细胞的溶血性试验。【方法】冻干马抗H7N9精制抗体F（ab'）单次腹腔注射分别给予昆明种小鼠和BALB/c小鼠,给药容量为0.2mL/10g体重,给药剂量为300mg/kg,对照组腹腔注射等容量的生理盐水。每组10只小鼠,雌雄各半,药后连续观察14d,考察其对小鼠的急性毒性;采用体外试管法,浓度为15.0mg/mL的冻干马抗H7N9精制抗体F（ab'）按不同容量（0.1mL.5mL）加入已有不同容量（2.0mL.4mL）生理盐水和2.5mL的2%红细胞混悬液的玻璃试管中,同时以氯化钠注射液和注射用水分别作为阴性和阳性对照品,考察其对兔红细胞溶血及凝集的影响。【结果】小鼠给药后和连续14d观察,各组动物临床表现、采食量、生长发育、营养状况、对外界刺激反应均无异常改变,各组动物无死亡,大体解剖未见异常;冻干马抗H7N9精制抗体F（ab'）无溶血作用,不引起红细胞凝聚,氯化钠注射液阴性对照无溶血无凝聚,注射用水阳性对照全部溶血。【结论】在本试验条件下,马抗H7N9精制抗体F（ab'）对小鼠生长发育无影响,无急性中毒表现;浓度为15.0mg/mL冻干马抗H7N9精制抗体F（ab'）体外对兔红细胞无溶血作用,不引起红细胞凝聚。

关键词：马抗H7N9精制抗体F(ab′)2 急性毒性溶血性

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磺胺类-截短侧耳素衍生物杂合药物的体外抗菌活性研究

磺胺类-截短侧耳素衍生物杂合药物的体外抗菌活性研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：赖丽虹周巧仪余鹏灵王琴蒋攀文李艳芹陈良柱方炳虎华南农业大学兽医学院兽医药理毒理研究室

【目的】杂合药物是指将两种药物或它们的衍生物通过化学合成形成杂合体,以扩大药物的抗菌谱、增强对耐药菌的有效性、改善药代动力学和减少副作用。本文通过体外抑菌试验,评价了4种磺胺类-截短侧耳素衍生物杂合药物的抗菌活性,以期筛... 详细信息

【目的】杂合药物是指将两种药物或它们的衍生物通过化学合成形成杂合体,以扩大药物的抗菌谱、增强对耐药菌的有效性、改善药代动力学和减少副作用。本文通过体外抑菌试验,评价了4种磺胺类-截短侧耳素衍生物杂合药物的抗菌活性,以期筛选出抗菌活性强的化合物。【方法】按照CLSI标准,采用微量肉汤稀释法（Broth Microdilution Method）测定磺胺类-截短侧耳素衍生物对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（Methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）、猪链球菌（CVCC3307）及鸡毒支原体S6的最小抑菌浓度（Minimal inhibitory concentration,MIC）,沃尼妙林、截短侧耳素和磺胺作为对照药物。【结果④4种磺胺类-截短侧耳素衍生物对金黄色葡萄球菌的MIC值范围为0.06128ug/ml,其中B3的MIC值最小（0.06ug/m1）;对照药截短侧耳素的MIC值为0.5～2ug/ml、磺胺的MIC值为>128ug/ml、沃尼妙林的MIC值为0.25～8ug/ml。对猪链球菌的MIC值范围为0.25～2ug/ml,其中B3的MIC值最小（0.25ug/ml）;对照药截短侧耳素的MIC值为4ug/ml、磺胺的MIC值为32ug/ml、沃尼妙林的MIC值为0.5ug/ml。对鸡毒支原体的MIC值范围为0.008～0.25ug/ml,其中B3的MIC值最小（0.008ug/m1）;对照药截短侧耳素的MIC值为0.016ug/ml、磺胺的MIC值为>128ug/ml、沃尼妙林的MIC值为0.008ug/ml。【结论】B3对金黄色葡萄球菌、链球菌及鸡毒支原体均具有良好的抗菌活性,抗菌能力明显强于截短侧耳素及磺胺,与沃尼妙林相当。

关键词：磺胺类药物截短侧耳素杂合抗菌药物抗菌活性

来源：评论

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对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对免疫应激仔猪NLRP3炎性小体信号通路的影响

对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对免疫应激仔猪NLRP3炎性小体信号...

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：徐俊姚文旭曹芳元李洒丽杨胜杨海兰刘宇邱银生武汉轻工大学动物科学与营养工程学院

【目的】在研究发现对乙酰氨基酚(AAP)和乙酰半胱氨酸(NAC)单用或联合使用都能抑制TLR4-NF-κB信号通路从而缓解仔猪的免疫应激性炎症的基础上,进一步研究了AAP和NAC对LPS诱导的仔猪外周血单核细胞NLRP3炎性小体信号通路的作用及机制。... 详细信息

【目的】在研究发现对乙酰氨基酚(AAP)和乙酰半胱氨酸(NAC)单用或联合使用都能抑制TLR4-NF-κB信号通路从而缓解仔猪的免疫应激性炎症的基础上,进一步研究了AAP和NAC对LPS诱导的仔猪外周血单核细胞NLRP3炎性小体信号通路的作用及机制。【方法】将分离后培养的仔猪外周血单核细胞分别设空白对照组、脂多糖(LPS)造模组、对乙酰氨基酚组(浓度为0.25、0.5和1 mM)、乙酰半胱氨酸组(浓度为0.25、0.5和1 mM)和用药联合组(浓度均为0.25、0.5和1mM组合),药物预处理1h后,再加入终浓度为1μg/mL的LPS,继续培养10、16和20h后,采用ELISA法测定细胞培养上清液中IL-1β、IL-18和TNF-α的含量;采用Western blot方法测定LPS刺激10h后的单核细胞中Cleaved Casapse-1的含量;采用RT-PCR方法测定LPS刺激3h后的单核细胞中IL-1β,IL-18,NLRP3及Cleaved Caspase-1的mRNA表达量。【结果】LPS刺激后,细胞培养液中IL-1β、IL-18和TNF-α水平均极显著上升(P<0.01),IL-1β,IL-18,NLRP3及Cleaved Caspase-1的mRNA表达量极显著增加(p<0.01)。LPS刺激不影响NLRP3炎性复合体组成部分ASC和Caspase-1的mRNA水平。AAP(0.5-1.0mM)和NAC(0.5-1.0mM)单独使用或联合使用均能下调IL-1β,IL-18,NLRP3及C1eaved Caspase-1的mRNA表达水平。NAC可显著增强AAP的上述抑制作用。AAP和NAC的联合使用对NLRP3炎性小体信号通路有较好的抑制作用。AAP和NAC的联合抗炎效应发生在NLRP3受体和Cleaved Caspase-1的mRNA表达上调。【结论】对乙酰氨基酚与乙酰半胱氨酸能通过抑制炎性小体信号通路的激活,减轻脂多糖诱导的仔猪单核细胞的炎症反应,且两药联用后的效果更佳,AAP和NAC的抗炎活性可能与LPS诱导下的NLRP3炎性小体信号通路的抑制有关。

关键词：对乙酰氨基酚乙酰半胱氨酸脂多糖炎性小体抗炎作用

来源：评论

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抗肺炎链球菌感染的相关药靶研究

抗肺炎链球菌感染的相关药靶研究

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：宋萌李洪恩邓旭明吉林大学动物医学学院

肺炎链球菌溶血素(Pneumolysin,PLY)是肺炎链球菌的一个重要毒力因子,它与肺炎链球菌感染导致的高死亡率及急性致死性肺炎有很大关系。神经氨酸酶A(Neuramidinase A,NanA)是肺炎链球菌的另一重要毒力因子,它可以促进细菌对宿主细胞的粘... 详细信息

肺炎链球菌溶血素(Pneumolysin,PLY)是肺炎链球菌的一个重要毒力因子,它与肺炎链球菌感染导致的高死亡率及急性致死性肺炎有很大关系。神经氨酸酶A(Neuramidinase A,NanA)是肺炎链球菌的另一重要毒力因子,它可以促进细菌对宿主细胞的粘附作用,与动物血脑屏障上皮细胞的相互作用可促使肺炎链球菌进入中枢神经系统,引发脑膜炎。另外,研究发现,NanA与肺炎链球菌生物被膜的形成有直接的关系。而NanA是由转肽酶A(SortaseA,SrtA)通过C端的LPETG序列锚定在细胞壁上的。本研究旨在发现既可抑制PLY溶血活性又可抑制SrtA转肽酶活性的小分子药物。通过PLY中和试验,我们发现β-Sitosterol具有抑制PLY溶血活性的作用。通过SrtA活性抑制试验,我们发现α-D-Methylglucoside可明显抑制SrtA的活性。然后,我们进一步研究了同时含有谷甾醇基团和葡萄糖苷基团的小分子药物β-Sitosterol-3-O-glucopyranoside(SOG),结果发现,它既具有溶血抑制活性又具有SrtA活性抑制作用。通过生物膜形成抑制试验,我们发现SOG可明显抑制生物膜的形成。MIC试验表明SOG并没有抑菌活性。在体内,唾液酸是NanA催化宿主细胞表面糖蛋白末端唾液酸残基得到的产物。有研究报道,唾液酸可促进生物被膜的形成。本研究发现,唾液酸可明显回补SOG对生物膜形成的抑制作用。此结果表明,SOG对SrtA活性的抑制作用导致NanA的活性受到影响。通过Western-blot,我们发现在培养液中加入SOG后,在培养物上清液中检测到NanA,表明NanA在细胞壁上的锚定受到影响。动物实验研究发现,SOG可明显降低肺炎链球菌的致死率,减少肺炎链球菌在小鼠肺与血液内的定殖数,并且缓解肺炎链球菌引起的肺组织病理变化。综上所述,SOG可作为抗肺炎链球菌毒力药物研发的重要候选药物,并且,本研究为肺炎链球菌抗毒力研究打下坚实的基础。

关键词：溶血素 SortaseA NanA 生物膜

来源：评论

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聚醚类离子载体抗球虫药对肉鸡肝脏和小肠CYP3A37、CXR和MDR1 mRNA表达水平的影响

聚醚类离子载体抗球虫药对肉鸡肝脏和小肠CYP3A37、CXR和MDR1 mRN...

引用

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王国永江善祥河南科技大学动物科技学院南京农业大学动物医学院

本文将1日龄AA肉鸡饲喂不含任何药物的饲料饲喂至28日龄后,挑选24只体重相近的健康雄性肉鸡随机分成对照组、盐霉素诱导组、莫能菌素诱导组和马杜霉素诱导组,每组6只。对照组肉鸡连续10天继续饲喂不含任何药物的饲料;盐霉素诱导组、莫... 详细信息

本文将1日龄AA肉鸡饲喂不含任何药物的饲料饲喂至28日龄后,挑选24只体重相近的健康雄性肉鸡随机分成对照组、盐霉素诱导组、莫能菌素诱导组和马杜霉素诱导组,每组6只。对照组肉鸡连续10天继续饲喂不含任何药物的饲料;盐霉素诱导组、莫能菌素诱导组和马杜霉素诱导组分别连续10天饲喂含有盐霉素(60 mg/kg)、莫能菌素(120 mg/kg)和马杜霉素(5 mg/kg)的饲料。采用TRIZOL试剂盒法提取肉鸡肝脏和小肠总RNA后,以β-actin基因为内参,荧光定量PCR检测肉鸡肝脏和小肠中参与药物代谢的重要基因CYP3A37、CXR和MDR1 mRNA的相对表达量。荧光定量PCR检测显示,莫能菌素和马杜霉素极显著增加肉鸡肝脏中CYP3A37基因mRNA的含量(P<0.01);盐霉素和马杜霉素则能促进肝脏中CXR基因mRNA的表达(P<0.01,P<0.05),同时还极显著降低肝脏中MDR1基因mRNA含量(P<0.01)。莫能菌素和马杜霉素能诱导肉鸡小肠中CYP3A37基因的mRNA的表达(P<0.01,P<0.05);三种抗球虫药对小肠中CXR的表达无显著影响;而盐霉素则极显著抑制了小肠中MDR1基因的表达(P<0.01)。结果表明,三种聚醚类离子载体抗球虫药对肉鸡肝脏和小肠中CYP3A37、CXR mRNA的表达有不同程度的诱导作用,对MDR1 mRNA的表达有不同程度的抑制作用。这些药物代谢密切相关的基因mRNA表达的改变,很可能导致其蛋白表达的变化,从而影响到药物的代谢,甚至产生药物相互作用。同时,本研究发现,三种聚醚类离子载体抗球虫药对肉鸡肝和小肠中CYP3A37及其受体CXR mRNA的表达的影响不一致,推测CXR受体可能并未参与CYP3A37 mRNA的表达调控。

关键词：氟苯尼考聚醚离子载体抗球虫药 CYP3A37 CXR MDR1 mRNA

来源：评论

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恩诺沙星和氟苯尼考治疗对oqxAB的传播以及肠道内微生物的影响

恩诺沙星和氟苯尼考治疗对oqxAB的传播以及肠道内微生物的影响

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：陈奕刘雅红华南农业大学兽医学院

(目的)多耐药细菌的发生率逐年增加,减弱了当前可用的抗菌剂疗效,增加了治疗费用和临床失败率。本实验通过口服攻毒携带编码多耐药外排泵基因oqxAB的质粒(pHXY0908)的鼠伤寒沙门氏菌(ATCC 14028-pHXY0908),研究该基因及携带该基因的质... 详细信息

(目的)多耐药细菌的发生率逐年增加,减弱了当前可用的抗菌剂疗效,增加了治疗费用和临床失败率。本实验通过口服攻毒携带编码多耐药外排泵基因oqxAB的质粒(pHXY0908)的鼠伤寒沙门氏菌(ATCC 14028-pHXY0908),研究该基因及携带该基因的质粒在鸡的胃肠道内大肠杆菌中的扩散转移情况,以期为治疗耐药菌的散播提供参考数据。(方法)小鸡人工感染沙门氏菌后分为三组,其中两组为给药组,分别给予推荐剂量的恩诺沙星和氟苯尼考进行治疗,连续5天。第三组为感染不给药组,作为对照。通过PCR,接合转移,PFGE,RFLP以及qPCR等实验来检测携带oqxAB的质粒的大肠杆菌分离情况以及菌株的亲缘关系,以及给药之后肠道菌群的变化。(结果)从给药组和对照组小鸡分离得到的大肠杆菌均获得了含有oqxAB的质粒,其中氟苯尼考给药组,oqxAB阳性的大肠杆菌总的分离率和出现的频率显著高于对照组。将粪便中分离得到的携带oqxAB的质粒的大肠杆菌作为供体菌,在体外再进行接合转移,发现新获得的结合子耐药表型与攻毒的菌株相似,且携带的oqxAB阳性质粒与攻毒的沙门氏菌含有的质粒(pHXY0908)限制性酶切图谱一致。PFGE分析表明oqxAB阳性的大肠杆菌呈现多种谱型,其中三种谱型占主导。MLST分析表明它们均属于ST533型。通过荧光定量PCR分析粪便DNA发现给予抗生素能够维持高水平的oqxAB基因排泄量,且这种效果能够持续到治疗结束后12天。给药后肠道菌群变化迅速,其中乳酸杆菌和大肠杆菌变化较明显。(结论)本研究首次表明了oqxAB基因可以在胃肠道微生物之间进行传播,给予临床治疗剂量的恩诺沙星和氟苯尼考能够增加对促进oqxAB的转移,扩大耐药基因库。同时特殊的ST型可能与oqxAB在体内的扩散密切相关。

关键词： oqxAB 鼠伤寒沙门氏菌 PFLR PFGE qPCR

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酮洛酚肠溶口腔崩解片的研制

酮洛酚肠溶口腔崩解片的研制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：聂海英潘乐乐向龙峰彭健波杨善忠何家康广西大学动物科学技术学院广西兽药制剂工程技术研究中心

【目的】制备酮洛酚(Ketoprofen,KET)肠溶口腔崩解片,达到掩味、减少药物对胃的刺激作用,使药物主要在肠道中溶解、释放和吸收,延长药效。【方法】(1)固体分散体的研制:以醋酸羟甲基丙基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS)为肠溶性载体,使用双螺杆... 详细信息

【目的】制备酮洛酚(Ketoprofen,KET)肠溶口腔崩解片,达到掩味、减少药物对胃的刺激作用,使药物主要在肠道中溶解、释放和吸收,延长药效。【方法】(1)固体分散体的研制:以醋酸羟甲基丙基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS)为肠溶性载体,使用双螺杆热熔挤出机制备KET肠溶固体分散体(Solid dispersion,SD),各区段挤出温度均为160℃、螺杆转速:50 rpm/min;获得的挤出物经粉碎后保留30-60目的颗粒,通过差示扫描量热法(DSC)对固体分散体颗粒进行表征,并考察固体分散体的体外释放度。(2)口腔崩解片的制备:以甘露醇、微晶纤维素为填充剂、交联聚乙烯吡咯烷酮为超级崩解剂、阿斯巴甜为矫味剂、硬脂酸镁为湿润剂,采用粉末直接压片法制备KET口腔崩解片。【结果】(1)通过热熔挤出后获得了深黄色的条状挤出物;差示扫描量热图谱显示,KET-HPMCAS物理混合物中,药物KET的结晶峰发生了轻微的左移,同时变宽和减弱,其原因可能是在DSC测试中,如果药物和载体的混溶性好,相互作用较强,此条件下也使药物的结晶度降低,而经过融熔挤出后得到的肠溶固体分散体在97℃的特征融熔峰全部消失,热重图谱主要保留载体HPMCAS的特征性图谱,提示药物是以无定形态分散在载体中;(2)体外释放度结果,SD中药物在0.1 mol/[盐酸溶液中2h内释放8.91%,在磷酸缓冲液(pH=6.8)中45min内释放83.27%,表明SD具有肠溶特性;(3)片剂特性:片剂外观性状为黄色、脆度0.23%、硬度3.32 kp、崩解时限28s、含量标示量98.16%。【结论】制备的KET肠溶性固体分散体具有肠溶制剂特性;制各的KET口腔崩解片其质量符合口崩片的要求,具有口感良好、崩解迅速、溶出快、服用方便,提高患者顺应性等优点。

关键词：酮洛酚热熔挤出技术固体分散体肠溶口腔崩解片

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