检索结果-内蒙古大学图书馆

中国遗传学会“发育、遗传和疾病”研讨会

作者：高健民福建师范大学生命科学学院

病毒是19世纪末通过对疾病研究发现的非细胞形态生物,是迄今发现的最小、最简单的生命有机体。病毒性疾病对人类生命和健康的威胁已经显得愈益突出,并被认为是二十一世纪人类健康的主要杀手之一。无疑,病毒病将是人类步入新世纪所面临... 详细信息

病毒是19世纪末通过对疾病研究发现的非细胞形态生物,是迄今发现的最小、最简单的生命有机体。病毒性疾病对人类生命和健康的威胁已经显得愈益突出,并被认为是二十一世纪人类健康的主要杀手之一。无疑,病毒病将是人类步入新世纪所面临的重大而迫切的问题。目前,尽管全球范围内由腹泻所致死亡率在不断下降,但每年仍有20多万例死亡,在资源不足的国家,腹泻还与国民的生理及精神的发育相关。在我国,病毒性腹泻流行还很猖獗。近年的国内外资料均表明, 腹泻病已是以病毒感染最为严重,可高达70～80%,其中除轮状病毒(RV)外,诺沃克样病毒(NLV) 是引起婴幼儿病毒性腹泻的第二位常见病原。现有的资料均表明诺沃克样病毒肠炎遍布全球,可引起各年龄组流行性腹泻。目前已发现 NLV 成员庞杂,也已对其100多个分离株进行了基因测序,根据 RNA 聚合酶区或外壳蛋白区核苷酸和氨基酸序列的同源性比较,将人类杯状病毒分为3个基因组(genogroup,GG)：基因组Ⅰ(GGI)代表株 NV,包括 Southampton(SOT)、Desert shield(DSV)病毒等;基因组Ⅱ(GGⅡ) 代表株 Mexico(MxV),包括 Hawaii(HV)、Snow Mountain(SMV)、Melksham(MKV)病毒等;基因组Ⅲ(GGⅢ)代表株 Sapporo(SV)病毒。而在2002～2003年,ICTV 对杯状病毒组最新建议的分类为：诺沃克病毒(NV)、诺沃克样病毒(NLV)、札幌病毒(SV)、札幌样病毒(SLV)。SLV(Sapporo-like virus,札幌样病毒)是典型的杯状病毒,电镜下可见杯状病毒的典型形态。SV(札幌病毒)的基因组全长约为7 708 bp(不包括 polyA 尾巴),其在遗传上与 NV 和 MxV 基因组相距较远,已有证据说明它更接近于动物杯状病毒,提示有动物-人传播的可能性。目前知道 SLV 主要引起婴儿、小儿童(3个月～5岁)和老人的急性胃肠炎。我国地域辽阔, 人口众多,各地区都要系统掌握流行的毒株型别特点,才能为腹泻病的防治提供依据。这种深入地进行 NLV 感染的流行病学调查显得更为迫切和有意义。然而,目前对 NLV 感染的免疫与易感问题认识还不多。因此研究札幌样病毒(SLV)的重要意义,也正是基于这一点提出的。我们在2001年10月～2002年11月的实验结果也显示：采用 ELISA 和 RT-PCR 法同时检测婴幼儿腹泻粪便样品中 RV、NLV,结果106例中,RV 阳性47例(44．3%),NLV GGⅡ阳性23例 (21．7%),NLV GGⅢ(即札幌病毒,SV)19例阳性(17．9%),NLV GGⅠ没有检测到。依据我们的实验结果表明,福建省福州地区确实存在 NLV 感染,其严重程度与国内外文献相符。所有的研究资料都证实,婴幼儿腹泻病以 NLV GGⅡ和 GGⅢ为主,而年长儿和成人腹泻病则以 NLV GGⅠ为主。说明实在有必要把 NLV 感染诊治方法的研究,包括分子病毒学特别是病毒受体的研究提到议事日程。但是,国内至今尚未有这方面的研究报道。病毒受体的研究是病毒学研究的重要组成部分,近年新技术的飞速发展促进了病毒受体的深入研究。迄今,有关 NLV 的病毒受体研究尚未见到。本研究将在重组 SLV 壳蛋白的基础上,深入研究 SLV 的病毒受体。首先通过免疫组化技术确定 SLV 病毒受体的组织细胞定位,进一步的工作, 将根据病毒受体的组织细胞定位的结果,按照病毒和其受体的特异性结合实质上是蛋白质与蛋白质之间的相互作用的理论,克隆表达 SLV 膜蛋白基因片段,随后筛选并确定 SLV 病毒受体基因,这将为应用生物技术防治 NLV 病毒感染及研制疫苗和抗病毒药物提供重要的基础资料,也对了解婴幼儿腹泻的发病机制及疾病预防具有重大指导意义。

关键词：婴幼儿腹泻病毒感染基因组杯状病毒札幌病毒分子生物学

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“网络时代的生命科学研讨会”即将召开

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生物技术通讯 2001年第1期12卷 47-47页

21世纪将是信息技术(IT)和生物技术(BT)高速发展与互相促进的时代，信息经济与生物经济时代就要到来!世纪之初，中国遗传学会《遗传》杂志(http://***)与宝芝林商务网(http://***)、中国生物软件网(http://***)将联合举办“第一届网络... 详细信息

21世纪将是信息技术(IT)和生物技术(BT)高速发展与互相促进的时代，信息经济与生物经济时代就要到来!世纪之初，中国遗传学会《遗传》杂志(http://***)与宝芝林商务网(http://***)、中国生物软件网(http://***)将联合举办“第一届网络时代的生命科学研讨会”，为国内外IT、BT企业和专家学者提供沟通、交流与合作的机会，以互联网为平台，联合推广新产品、新技术、新成果，加速实现产业化。协办单位有《科学新闻》周刊、北京华大基因中心、赢家在线网络科技有限公司、健康123网等。已报名参会作报告的院士、博导有数十人。详细信息请浏览上述网站。大会名誉主席：中国科协副主席李振声院士，中国科学院遗传所副所长朱祯教授。大会执行主席：李绍武；大会秘书长：王佩。　　一、会议主题与研讨内容　　1、生物技术、生物信息学、生物芯片、基因组学、转基因与克隆技术新进展；2、基因诊断与基因治疗；3、生物产业新成果、新技术与风险投资；4、基于生物、医药领域的优秀互联网公司新赢利模式；5、药厂、医疗机构、媒体、生物企业网站开发及ASP模式；6、生物技术专业人才培养与生物企业人才需求。　　二、展览与参观内容　　1、生物技术新成果、新品种、新药的转让与推广洽谈；2、实验室新装备及医疗器械展销；3、网站/主页建设的咨询与承接服务；4、电脑与生物、医药、农学类新书展销；5、人才招聘与人才交流；6、参观中科院遗传所人类基因组中心暨北京华大基因中心；7、参观北京锦绣大地农业股份有限公司。　　三、日期与地点　　本次会议将于2001年4月8-11日在北京劳动大厦举行，地址：德胜门外北沙滩。乘328、315、355、345、602、809、919等公共汽车均可到达，交通便利。欢迎海内外企业家与专家学者参加会议。4月8日报到，4月9日上午开幕。　　四、收费标准　　每位参会代表会议注册费400元(含餐费)，住宿者(三星级酒店)标准间每日每床90余元。凡参会代表赠阅2001年1～6期《遗传》杂志及大会专刊《科学新闻》周刊，免费参加会议参观。参会通知函索即寄，请汇款预交注册费。　　开户行：北京交行复兴路分理处　　帐　　户：7792015001917　　开户名称：北京宝芝林生物技术有限公司

关键词：研讨会网络时代生命

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某规模化种鸡场沙门菌流行现状调查、耐药性分析及分子分型

某规模化种鸡场沙门菌流行现状调查、耐药性分析及分子分型

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第六次学术研讨会

作者：罗薇黄翠颖王凡刘博闻田禹齐潘志明耿士忠焦新安扬州大学农业部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室江苏省人兽共患病学重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

沙门菌(Salmonella)是一种革兰阴性菌,是世界卫生组织法定报告的人兽共患病原菌之一。沙门菌病不仅给养禽业造成严重的损失,而且还能通过食物链传染给人,严重威胁人类健康。据统计,被沙门菌污染的鸡群及其制品是人沙门菌病的主要原因之... 详细信息

沙门菌(Salmonella)是一种革兰阴性菌,是世界卫生组织法定报告的人兽共患病原菌之一。沙门菌病不仅给养禽业造成严重的损失,而且还能通过食物链传染给人,严重威胁人类健康。据统计,被沙门菌污染的鸡群及其制品是人沙门菌病的主要原因之一。我国是世界上第一大蛋鸡,第二大肉鸡生产和消费国。经过前期的流行病学调查结果显示,鸡群感染沙门菌的风险较高,沙门菌既能水平传播,又能垂直传播,通过祖代、父母代、商品代,代代相传,级联放大从而影响下游养禽业,因此从种鸡开始进行沙门菌病净化是控制沙门菌流行的重要环节,了解我国种鸡场沙门菌的污染状况为净化提供必要的数据依据。本研究依托国内某规模化种鸡场,通过定期采样,收集样品,并对所采集的样品进行沙门菌特异性分离,血清型鉴定与耐药性分析,同时通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对其进行基因分型研究。共收集样品904份,分离出沙门菌168株,分离率为18.58%,其中优势血清型为肠炎沙门菌(93.45%),其次为鼠伤寒沙门菌(3.57%)和未定型沙门菌(2.98%)。抗生素药物敏感性实验结果显示,喹诺酮类耐药比例高达99.30%,硝基呋喃类耐药率达93.01%,青霉素类64%,氨基糖苷类耐药率63.64%。多重耐药统计结果显示,该种鸡场对4-6种药物耐药的沙门菌分离株达37.76%;对7-9种药物耐药的沙门菌分离株32.17%;1-3种药物耐药的沙门菌分离株29.37%;选取不同生产环节的28株肠炎沙门菌菌株进行PFGE分型,按Dice系数大于0.85为同一聚类簇,100%为同一PFGE型的原则,28株肠炎沙门菌被划分为了1个聚类簇10个PFGE型,表明同一种群的门菌分离株遗传亲缘关系非常近,这些沙门菌分离株在该种鸡场长期稳定存在。

关键词：沙门菌种鸡场耐药性脉冲场凝胶电泳

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蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒M蛋白的免疫原性比较研究

蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒M蛋白的免疫原性比较研究

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第六次学术研讨会

作者：黄敏刘宸瑞滕巧泱刘芹防李雪松陈鸿军李泽君杨健美中国农业科学院上海兽医研究所

H17N10和H18N11两种新亚型的A型流感病毒的基因组序列在野生蝙蝠体内被报道之后,蝙蝠可能成为流感病毒新的贮存宿主而受到关注,蝙蝠流感病毒虽然与其他亚型流感病毒存在一定差异,但也具有IAVs变异能力强,易发生重组的特性。目前为止,这... 详细信息

H17N10和H18N11两种新亚型的A型流感病毒的基因组序列在野生蝙蝠体内被报道之后,蝙蝠可能成为流感病毒新的贮存宿主而受到关注,蝙蝠流感病毒虽然与其他亚型流感病毒存在一定差异,但也具有IAVs变异能力强,易发生重组的特性。目前为止,这两种病毒尚未在禽类和其它哺乳动物体内被检测出,仅存在于一些野生蝙蝠中。在蝙蝠体内,除了发现的这两种新亚型流感病毒(H17,H18)之外,可能还存在着其它亚型流感病毒的感染,虽然鲜有报道,但已有报道显示H9亚型的阳性比例最高。如果在蝙蝠体内同时感染蝙蝠流感病毒与H9亚型流感病毒,那么两种亚型的流感病毒可能发生会重组,对人类健康和养禽业将可能造成不可预知的危险。新发现的蝙蝠流感病毒的M1蛋白与其它亚型A型流感病毒的同源性为78%左右,其M2蛋白与其它亚型的同源性更低,为42%左右。为比较蝙蝠流感病毒H17N10亚型与禽流感病毒H9N2亚型的M蛋白(包括M1和M2蛋白)的免疫原性,分别构建两种亚型流感病毒M1、M2的原核表达载体和真核表达载体,以及利用前期反向遗传学技术拯救获得两种重组病毒感染MDCK细胞,并分别与相应的单抗或多抗进行免疫印迹和免疫荧光鉴定。结果显示,两种亚型病毒的M1蛋白的原核表达产物均与M1多抗反应,均不与2株M1单抗反应;拯救的两种重组病毒感染细胞后及其M1蛋白的真核表达产物均与M1的单抗5F2反应,不与单抗3G8及M1的多抗反应,两种亚型的结果一致;而两种亚型的M2蛋白通过与单抗和多抗反应,出现了不一致的结果,M2的单抗仅与蝙蝠流感病毒M2的原核表达产物反应,不与H9N2禽流感病毒M2的原核表达产物反应,M2的多抗则反之;且M2的多抗仅与H9N2禽流感M2的真核表达产物以及拯救病毒反应,均不与蝙蝠流感病毒M2的真核表达产物及拯救病毒反应。我们通过试验研究证实这两种亚型流感病毒的M2蛋白之间确实存在免疫原性的差异,并且筛选到了可以区分蝙蝠流感病毒和禽流感病毒的M2抗体,为进一步研究流感病毒M蛋白相关的生物学机制提供了基础。

关键词：禽流感病毒免疫原性比较研究

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猪瘟兔化弱毒疫苗株适应家兔的分子基础

猪瘟兔化弱毒疫苗株适应家兔的分子基础

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李超李永锋申梁黄俊华孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种猪烈性传染病。我国在国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)中将猪瘟列为五种优先防治的一类动物疫病之一。早在20世纪50年代,中国学者... 详细信息

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种猪烈性传染病。我国在国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)中将猪瘟列为五种优先防治的一类动物疫病之一。早在20世纪50年代,中国学者通过将猪瘟病毒强毒株在兔体内连续传480余代后,成功培育了安全有效的猪瘟兔化弱毒疫苗株即C株或HCLV株。该疫苗株能引起兔体定型热反应,能给免疫猪提供完全免疫保护。本研究以CSFV石门株cDNA全长感染性克隆为骨架,构建了一系列替换HCLV株基因组不同部分的嵌合感染性克隆,采用基于RNA聚合酶Ⅱ的反向遗传操作系统拯救相应嵌合病毒,用PCR、针对强弱毒荧光定量PCR、间接免疫荧光试验、抗原捕捉ELISA等方法对拯救的嵌合病毒进行验证,证明7种嵌合病毒拯救成功。病毒生长动力学及免疫荧光试验表明,以石门株基因组为骨架、5端非编码区(5-NCR)被弱毒相应序列替换的嵌合病毒vSM-HCLV5NCR与石门株在SK-6细胞上的增殖水平相似,其它嵌合病毒的生长水平与石门株相比都有不同程度的减弱。以石门株基因组为骨架、3-NCR(3端非编码区)被弱毒相应序列替换的嵌合病毒vSM-HCLV3NCR增殖能力略强于HCLV株,仅5-NCR保留石门株序列的嵌合病毒生长速度低于HCLV株,而其它嵌合病毒和HCLV株生长水平没有显著差别。为了确定HCLV株适应家兔的基因组决定区域,将拯救的嵌合病毒进行家兔接种试验,有趣的是,所拯救的嵌合病毒均没有引起家兔的体温反应,即便是嵌合病毒vHCLV-SM5NCR,其基因组与HCLV株仅在5-NCR处有9个核苷酸的差异。接种后10d,用HCLV株攻击所有接种家兔,结果显示,除了DMEM接种兔外,所有嵌合病毒接种兔能抵抗HCLV株的攻击,这表明,HCLV株的兔体定型热表型是其全基因组序列综合作用的结果,而不是部分区域单独在起作用。接种嵌合病毒后3d,能在含有HCLV株全部编码区序列的嵌合病毒vHCLV-SMNCR、vHCLV-SM3NCR和vHCLV-SM5NCR接种兔脾脏中检测到病毒增殖,且增殖水平与HCLV株没有显著差异,而从其它嵌合病毒接种兔脾中没有检测到病毒复制,这说明,HCLV株的编码区序列对其适应家兔脾脏增殖起着决定性作用,而单独的5或3半端编码区并不足以使HCLV株在家兔脾脏内增殖。究竟是什么原因使其能在兔脾脏中增殖却不引起家兔体温反应有待于进一步研究。

关键词：猪瘟病毒猪瘟兔化弱毒疫苗株病毒复制兔体定型热兔脾适应性

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猪瘟病毒Npro蛋白核仁穿梭及其对病毒复制的影响

猪瘟病毒Npro蛋白核仁穿梭及其对病毒复制的影响

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李永锋申梁黄俊华李超李素孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fevervirus,CSFV)引起的一种烈性传染病。猪瘟病毒Npro蛋白具有自我切割酶活性和抑制I型干扰素产生的功能,且与病毒毒力有关。最近的研究表明,猪瘟病毒Npro蛋白抑制干扰... 详细信息

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fevervirus,CSFV)引起的一种烈性传染病。猪瘟病毒Npro蛋白具有自我切割酶活性和抑制I型干扰素产生的功能,且与病毒毒力有关。最近的研究表明,猪瘟病毒Npro蛋白抑制干扰素产生的功能并不影响病毒毒力。因此,Npro蛋白可能在影响病毒复制或毒力方面有其他未知的功能。对一些病毒来说,其蛋白在细胞内的运输对于病毒的复制是必需的。已报道Npro蛋白在猪瘟病毒感染时定位于细胞质和细胞核,但其细胞核定位是否影响病毒的复制尚不清楚。本研究首先利用反向遗传操作技术,构建四半胱氨酸(tetracysteine,TC)标记的猪瘟病毒突变体,病毒一步生长曲线表明,TC标签的插入不影响病毒的复制;利用TC-双砷染色技术,首次研究了Npro蛋白在病毒感染的活细胞内的运输动力学,结果显示,Npro蛋白在病毒复制周期的早期只定位于细胞质,在晚期穿梭于细胞核仁;瞬时转染试验结果表明,Npro蛋白也可定位于核仁,而且TC标签的引入不影响Npro蛋白的核仁定位;细胞质和细胞核分离试验结果表明,Npro蛋白存在于细胞核。Npro蛋白分子量仅为17kDa,经软件预测,其中不存在细胞核或核仁定位信号;截短表达的Npro蛋白突变体均定位于细胞核,却不定位于核仁。已报道干扰素调节因子3(Interfe ronregulatory factor3,IRF3)与Npro蛋白相互作用并定位于猪瘟病毒感染细胞的细胞质中,因此我们推测IRF3可能改变Npro蛋白的细胞内运输。研究发现,在共表达IRF3与Npro蛋白的细胞中,Npro蛋白仅定位于细胞质,表明IRF3可以改变Npro蛋白的细胞定位;IRF3-Npro融合蛋白只定位于细胞浆,但依然保留Npro蛋白的切割活性,进一步研究表明,Npro蛋白的核仁定位是独立于其切割活性和抑制干扰素产生功能的一种新功能。为了研究Npro蛋白细胞内运输对病毒复制的影响,我们构建了表达IRF3-Npro融合蛋白的突变体病毒vSM-IRF3和表达失去抑制干扰素产生功能的Npro-D136N的突变体病毒vSM-D136N,试验结果表明,vSM-IRF3表达的IRF3-Npro融合蛋白只定位于细胞质;vSM-IRF3的平均滴度比亲本病毒约低200倍,而vSM-D136N的平均滴度比亲本病毒低约30倍;多步生长曲线显示,vSM-IRF3的复制在病毒复制周期的晚期(36-72hpi)受到明显抑制;干扰素启动子活性检测结果表明,vSM-IRF3与亲本病毒一样不诱导干扰素产生。以上结果证明,阻碍Npro蛋白的核仁穿梭是影响vSM-IRF3复制周期晚期增殖的主要因素。总之,本研究首次发现,Npro蛋白具有独立于其切割活性和抑制干扰素产生功能的核仁穿梭功能;IRF3可以引起Npro蛋白细胞内的重新分布;Npro蛋白的核仁穿梭对于猪瘟病毒在其复制周期晚期的有效复制是必须的。

关键词：猪瘟病毒 Npro蛋白四半胱氨酸标记核仁穿梭病毒复制

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