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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：徐鹏赵权王泽东刘全周铁忠锦州医科大学畜牧兽医学院吉林农业大学动物科技学院军事医学科学院军事兽医研究所

弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,它可以感染包括人类在内的几乎所有哺乳动物。本试验采用不同剂量△Tg MAPK1、Tg Complement和Tg GT1的速殖子接种小鼠,统计分析小鼠的平均存活时间及存活小鼠肝、脑组织内的虫体数量,确定弓形虫MAPK1... 详细信息

弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,它可以感染包括人类在内的几乎所有哺乳动物。本试验采用不同剂量△Tg MAPK1、Tg Complement和Tg GT1的速殖子接种小鼠,统计分析小鼠的平均存活时间及存活小鼠肝、脑组织内的虫体数量,确定弓形虫MAPK1对体内致病性及增值的影响。采用BDTMCBA技术通过流式细胞仪检测比较△Tg MAPK1与Tg GT1在接种小鼠后第3天和第7天时血清和腹腔液内细胞因子的表达差异,推测MAPK1基因对体内细胞因子变化的影响。结果表明:小鼠体内致病性试验表明MAPK1缺失可降低弓形虫对小鼠的致病力,降低其在小鼠体内增殖速度,表明Tg MAPK1是弓形虫的一种新的毒力基因。腹腔液中细胞因子表达差异试验表明MAPK1基因可能是通过调控IL-12p70、TNF-α、IFN-γ和IL-10的表达而促进腹腔内巨噬细胞活化,进而杀灭弓形虫。血清中细胞因子表达差异试验表明MAPK1基因可能是通过调控IL-12p70、TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-10的表达而促使机体由Th2型免疫应答向Th1型的转变,从而建立潜伏感染或慢性感染。

关键词：弓形虫丝裂原活化蛋白激酶1 TgMAPK1 基因敲除

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A genetically modified attenuated Listeria vaccine expressing HPV16E7 kill tumor cells in direct and antigen-specific manner

A genetically modified attenuated Listeria vaccine expressin...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：贾艳艳 Wei Jun Tan Fei Fei Duan Zhi Ming Pan Xiang Chen Yue Lan Yin Xin An Jiao Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis Joint International Research Laboratory of Agriculture & Agri-Product SafetyJiangsu Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Disease and ZoonosisYangzhou University

Attenuated Listeria monocytogenes(***,LM)induces specific CD8+and CD4+T cell responses,and has been identified as a promising cancer vaccine *** cancer is the third most common cancer in women worldwide,with human pap... 详细信息

关键词： HPV A genetically modified attenuated Listeria vaccine expressing HPV16E7 kill tumor cells in direct and antigen-specific manner

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凉山田鼠分子系统进化

凉山田鼠分子系统进化

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四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会

作者：郝海邦刘少英张修月刘洋陈伟才岳碧松生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学学院四川省林业科学研究院

凉山田鼠Proedromys liangshanensis(Rodentia:Cricetidae)是近年描述的一新种,主要分布于四川凉山州的偏远山区,横断山脉区域。根据其牙齿形态学,体长,尾长,阴茎结构学,及栖息环境将其并入沟牙田鼠属(该属有另外一种沟牙田鼠)。目前对... 详细信息

凉山田鼠Proedromys liangshanensis(Rodentia:Cricetidae)是近年描述的一新种,主要分布于四川凉山州的偏远山区,横断山脉区域。根据其牙齿形态学,体长,尾长,阴茎结构学,及栖息环境将其并入沟牙田鼠属(该属有另外一种沟牙田鼠)。目前对其分子生物学方面的知识了解甚少。为了给该新种提供更多的分子生物学信息,为分类学、系统进化学及分子遗传学提供资料,确定该种的系统进化位置,作者采用引物步移法测定了凉山田鼠的线粒体全序列。凉山田鼠线粒体全序总长16 296 bp,有13个蛋白基因,2个rRNA基因,及22 tRNA基因。其基因结构,顺序与其他啮齿类相似,但是其控制区的A+T含量较高。联合GenBank上其他17个啮齿类全序列进行贝叶斯,MP,ML等进化分析,构建系统进化树。分析结果显示,凉山田鼠属和田鼠属构成姐妹群。系统进化树拓扑结构形成的分类支与啮齿类现行权威分类基本相一致,说明利用线粒体进行系统进化分析时有效的。但是根据线粒体全序列所做的分子系统进化没能很好地说明沟牙田鼠属的成立,要确定沟牙田鼠属的有效性还需要更多的样品,尤其是沟牙田鼠和其他田鼠类的样品。本研究结果虽然并没有提供有力证据说明沟牙田鼠属的成立,但是为该新种提供了更多的分子生物学信息,为啮齿类的系统进化研究提供了有用的资料。

关键词：凉山田鼠线粒体系统进化

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关于中国畜牧兽医学会2014年学术年会征文的通知

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畜牧兽医学报 2014年第4期45卷 679-680页

各省、自治区、直辖市畜牧兽医学会、各学科分会、杂志编辑部、各团体会员单位、各有关单位、会员:为了更好地研讨交流我国畜禽健康养殖中的热点难点问题,促进畜牧业持续健康发展,中国畜牧兽医学会拟于11月7日-10日,在广东省广州市举办2... 详细信息

各省、自治区、直辖市畜牧兽医学会、各学科分会、杂志编辑部、各团体会员单位、各有关单位、会员:为了更好地研讨交流我国畜禽健康养殖中的热点难点问题,促进畜牧业持续健康发展,中国畜牧兽医学会拟于11月7日-10日,在广东省广州市举办2014年学术年会。期间,还将举行中国畜牧兽医学会禽病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会。

关键词：畜牧兽医学术年会学会研究生持续健康发展热点难点问题家畜传染病学华南农业大学健康养殖预防控制

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Synergistic antitumor effect of the combination of a dual cancer-specific oncolytic adenovirus and cisplatin on lung cancer cells

Synergistic antitumor effect of the combination of a dual ca...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：朱羿龙 Zhifei Chen Shuang Chen Yiquan Li Wenjie Li Min Li Chuanxin Cui Yingli Cui Yuanyuan Fan Xunzhe Yin Shanzhi Li JIN Zhao Xiao Lia Ningyi Jin Key Laboratory of Jilin Province for Zoonosis Prevention and Control Institute of Military VeterinaryAcademy of Military Medical Sciences

Introduction Cisplatin is one of the most common platinum drugs;however,tumor drug-resistance,nephrot oxicity,hepatotoxicity,ototoxicity,and other side-effects are associated with the long-term use of c ***,novel therapeutic regimens that combine cisplatin-based therapy with other meth ods to reduce side effects and increase the curative effect are urgently *** the present stud y,we used the combination of ATV and cisplatin to inhibit tumor formation,and the migration an d invasion of A549 cells.

关键词： Synergistic antitumor effect of the combination of a dual cancer-specific oncolytic adenovirus and cisplatin on lung cancer cells ATV

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辽宁省仔猪病毒性腹泻病原学调查及PEDV的遗传变异分析

辽宁省仔猪病毒性腹泻病原学调查及PEDV的遗传变异分析

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：王楠楠王辉暖高慎阳董筱萍李晶刘文军刘全李宁刘丽颖周铁忠锦州医科大学畜牧兽医学院中国科学院微生物研究所辽宁省动物卫生监测预警中心营口市动物疫病预防控制中心

引起仔猪传染性腹泻病的病原主要有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV),这三种病原的传染途径和发病过程相类似,具有发病急、传播速度快,哺乳仔猪感染率和死亡率都较高的特点,临床诊断和控制难度较大。... 详细信息

引起仔猪传染性腹泻病的病原主要有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV),这三种病原的传染途径和发病过程相类似,具有发病急、传播速度快,哺乳仔猪感染率和死亡率都较高的特点,临床诊断和控制难度较大。近年来辽宁省哺乳仔猪传染性病毒性腹泻病发生较为严重,给养猪业造成了巨大的经济损失。为查明辽宁省仔猪病毒性腹泻病主要病原的种类,明确主要流行病原的分布情况,从而制定有针对性的防控措施,开展了辽宁省仔猪病毒性腹泻的病原调查及PEDV的遗传变异分析。为了解辽宁猪流行性腹泻病毒(PEDV)来源及变异特性,经PCR诊断,细胞分离,细胞病变观察、RT-PCR以及S基因序列鉴定,成功分离1株PEDV毒株(LN-2015-1)。S基因序列分析显示,与CV777毒株相比,除点突变外,分离株还出现最长9bp的插入,6bp的缺失和13bp连续突变。氨基酸也存在最长3aa插入和2aa缺失,同时存在4处连续3个及以上的氨基酸突变,抗原表位分析表明在5个表位区共发生16个氨基酸的突变。同源性分析显示与HB-HA2015毒株的同源关系最近,序列相似性为99.2%,与2010年以来国内外代表变异毒株同源性较高,达到98.5-98.8%,而与2010年以前的传统同源性较低,在93.2%-95.6%之间;进化树分析显示该毒株与近年来国内外流行的变异毒株属于同一群,并且与HB-HA2015形成一小的分支,而与传统毒株进化距离较远。

关键词：猪流行性腹泻病原调查辽宁分离株 S基因抗原表位变异分析

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雏鸡屎肠球菌病形态学与分子生物学诊断

雏鸡屎肠球菌病形态学与分子生物学诊断

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：张欣李博闫金坤刘利强刘建钗刘娜刘彦威沈洁史瑞雅贾苗苗河北工程大学生命科学与食品工程学院河北省禽病工程研究中心

为了调查雏鸡屎肠球菌感染,从发病的雏鸡肝脏分离病菌,并将采集的肝脏、心脏等病料进行固定、制作病理切片;从病鸡肝脏分离接种的营养琼脂平板上挑取单个菌落进行纯化培养并对纯化后的病菌进行革兰氏染色;采用水煮法对纯化后的分离菌进... 详细信息

为了调查雏鸡屎肠球菌感染,从发病的雏鸡肝脏分离病菌,并将采集的肝脏、心脏等病料进行固定、制作病理切片;从病鸡肝脏分离接种的营养琼脂平板上挑取单个菌落进行纯化培养并对纯化后的病菌进行革兰氏染色;采用水煮法对纯化后的分离菌进行DNA提取、16S r DNA PCR扩增及序列分析并对分离菌进行特异PCR分析以及致病性试验。结果显示分离株菌落细小圆形,菌体为圆形或椭圆形,革兰氏染色阳性;分离株与Gen Bank中屎肠球菌相似性为99.6-98.7%,与其他菌株的相似性均小于97%;经特异PCR分析,扩增条带为特异屎肠球菌的目的片段;病理观察发现,肝脏肿大、出血,肝细胞质疏松并且致病试验复制出与临床相似病。经分子生物学方法结合菌落及菌体的形态学,该菌被鉴定为屎肠球菌;病理学观察及致病性试验均提示该病雏为屎肠球菌感染。但进一步的生化试验发现与报道的屎肠球菌标准株的不完全一致,且3株分离菌的生化试验结果也有差异。为此,本试验采用屎肠球菌特异PCR的方法,进一步验证分离株为屎肠球菌。在不同生化鉴定方法,肠球菌对糖发酵的结果不完全一致。这与本试验分离3株菌对发酵试验结果类似。分析其原因可能屎肠球菌菌株不同,对糖发酵能力有差异。因此下一步研究可对分离株进行药敏试验,分析菌株不同抗药性是否有差异。

关键词：分子生物学诊断屎肠球菌形态学

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REV感染对SPF雏鸡免疫器官TGF-β1含量变化的影响

REV感染对SPF雏鸡免疫器官TGF-β1含量变化的影响

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：高雪丽崔宏伟郑世民刘超男吕晓萍东北农业大学动物医学学院

禽网状内皮组织增生病(Reticuloendotheliosis,RE)是由禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosisvirus,REV)引起的免疫抑制性肿瘤病,该病严重危害养禽业的发展。转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)是一种具有多种生物学功能的免疫抑制因子,在细胞增殖分化、组织损伤修复、骨再生及间质形成等方面起关键作用,但其在禽类免疫抑制病中研究较少。本实验以1日龄SPF雏鸡为研究对象,对鸡TGF-β1基因进行克隆及蛋白表达,制备兔抗鸡TGF-β1多克隆抗体,应用实时荧光定量PCR法及间接ELISA法,对REV感染雏鸡免疫器官(胸腺、脾脏、法氏囊)TGF-β1m RNA和蛋白含量的动态变化进行检测,深入探讨REV感染雏鸡的免疫致病机制。实验结果发现:雏鸡感染REV后,其胸腺、脾脏、法氏囊TGF-β1m RNA表达分别于感染后7d、7～14d及14d极显著高于对照雏鸡(p<0.01),表明SPF雏鸡感染REV初期,TGF-β1前体复合物被激活,TGF-β1m RNA表达急剧增加,雏鸡免疫功能受到抑制;但在病毒感染后期,胸腺、脾脏TGF-β1m RNA表达量逐渐降低,法氏囊TGF-β1m RNA持续升高,表明法氏囊是TGF-β1发挥免疫抑制作用的靶器官;SPF雏鸡感染REV后,其法氏囊、胸腺组织TGF-β1含量分别于7～14d、7～28d极显著高于对照雏鸡(p<0.01),但脾脏TGF-β1含量在7～21d极显著低于对照组雏鸡(p<0.01),以上结果表明REV感染机体后,对各免疫器官TGF-β1分泌作用机制并不相同。

关键词： RE SPF雏鸡免疫器官 TGF-β1

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不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导鸡TLR-7和Mx表达的研究

不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导鸡TLR-7和Mx表达的研究

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：王建琳曹志伟王冬冬王守春尹燕博青岛农业大学动物科技学院

本试验研究不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导SPF鸡、SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞中TLR-7和Mx表达的动态变化,为不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导IFN-I产生差异的机制提供依据。150只6周龄SPF鸡随机分为3组,分别静脉接种PBS、105EID50毒株... 详细信息

本试验研究不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导SPF鸡、SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞中TLR-7和Mx表达的动态变化,为不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导IFN-I产生差异的机制提供依据。150只6周龄SPF鸡随机分为3组,分别静脉接种PBS、105EID50毒株SD/196和SD/818各0.2m L,分别于接种后的1、3、5、7和10天每组剖杀8只,收集具有明显病变差异的组织;180枚10日龄SPF鸡胚分别尿囊腔接种PBS、104EID50的SD/196毒株和SD/818毒株各0.1m L,分别于接种后的4、8、16、24、32和48小时每组收集胚体10个;鸡胚成纤维细胞分别接种PBS、SD/196和SD/818毒株病毒液(1m.o.i)进行37℃培养,于感染后的4、8、16、24、32和48小时收集细胞;动态收集的病变组织、胚体和成纤维细胞通过荧光定量PCR测定TLR-7和Mx m RNA的表达。结果显示,肺脏、肾脏、十二指肠和法氏囊为主要病变差异组织,除鸡胚TLR-7的表达外,毒株SD/818大部分时间点诱导主要病变差异组织、鸡胚和成纤维细胞中TLR-7和Mx的表达显著高于毒株SD/196(P <0.05)。结果表明不同致病性H9N2亚型AIV明显诱导了SPF鸡主要病变差异组织、SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞中TLR-7和Mx的表达,且较高致病性毒株SD/818诱导表达量明显高于较低致病性毒株SD/196。

关键词：鸡胚成纤维细胞禽流感病毒 TLR-7

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重组旋毛虫plancitoxin-1-like活性位点突变体蛋白的核酸酶活性

重组旋毛虫plancitoxin-1-like活性位点突变体蛋白的核酸酶活性

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中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会

作者：廖成水王晓利田文静张梦珂张春杰李银聚吴庭才程相朝河南科技大学动物科技学院/洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室河南科技大学医学院洛阳职业技术学院

旋毛虫plancitoxin-1-like(Ts-Pt)是旋毛虫125种DNase II家族蛋白中唯一具有典型DNase II活性区域HKD基序的核酸酶,且普遍认为,组氨酸位点是DNase II的活性氨基酸位点。为研究Ts-Pt活性位点突变体蛋白的核酸酶活性,利用重叠PCR方法获得T... 详细信息

旋毛虫plancitoxin-1-like(Ts-Pt)是旋毛虫125种DNase II家族蛋白中唯一具有典型DNase II活性区域HKD基序的核酸酶,且普遍认为,组氨酸位点是DNase II的活性氨基酸位点。为研究Ts-Pt活性位点突变体蛋白的核酸酶活性,利用重叠PCR方法获得Ts-Pt活性位点突变体片段,以p ET-28a(+)为载体构建重组表达质粒并在大肠杆菌中诱导表达。重组Ts-Pt突变体蛋白经亲和层析纯化后进行SDS-PAGE分析。利用琼脂糖凝胶电泳法和核酸酶酶谱分析重组Ts-Pt突变体蛋白的核酸酶活性。成功构建含Ts-Pt突变体重组质粒的基因工程菌,SDS-PAGE和亲和层析纯化结果显示,重组Ts-Pt突变体蛋白呈包涵体表达。重组蛋白经复性后并没有表现出核酸酶活性,但核酸酶酶谱分析结果显示,包涵体表达的重组Ts-Pt突变体蛋白表现出降解DNA的能力。同时,N端和C端活性位点H及HCK和DHSK突变并不影响Ts-Pt的核酸酶活性,研究结果为后续进一步研究庞大的DNase II家族蛋白在旋毛虫发育和感染方面的作用研究提供一定的参考数据。

关键词：旋毛虫 plancitoxin-1-like 活性位点突变体核酸酶

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