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13 篇 期刊文献

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学科分类号

800 篇 农学
- 444 篇 兽医学
- 161 篇 作物学
- 71 篇 农业资源与环境
- 61 篇 畜牧学
- 47 篇 水产
- 14 篇 林学
- 9 篇 植物保护
- 7 篇 园艺学
359 篇 理学
- 183 篇 生物学
- 92 篇 生态学
- 69 篇 海洋科学
- 15 篇 地质学
- 7 篇 大气科学
- 2 篇 地球物理学
158 篇 医学
- 89 篇 临床医学
- 45 篇 基础医学(可授医学...
- 34 篇 药学(可授医学、理...
- 8 篇 公共卫生与预防医...
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- 20 篇 环境科学与工程（可...
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- 6 篇 化学工程与技术
- 3 篇 食品科学与工程（可...
- 2 篇 轻工技术与工程
20 篇 教育学
- 19 篇 教育学
8 篇 管理学
- 5 篇 公共管理
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- 3 篇 应用经济学

主题

25 篇 分离鉴定
25 篇 检测方法
24 篇 pcr
21 篇 prrsv
15 篇 水稻
13 篇 elisa
12 篇 原核表达
12 篇 生物学特性
12 篇 流行病学调查
11 篇 会员代表大会
11 篇 东海
11 篇 浮游动物
11 篇 猪繁殖与呼吸综合...
10 篇 猪流行性腹泻病毒
10 篇 分子机制
9 篇 初步研究
9 篇 学术研讨会
9 篇 分离与鉴定
8 篇 小麦
8 篇 分离株

机构

45 篇 中国农业大学
41 篇 中国海洋大学
38 篇 吉林大学
29 篇 河南科技大学
28 篇 中国科学院海洋研...
23 篇 中国科学院沈阳应...
23 篇 华中农业大学
20 篇 厦门大学
20 篇 武汉大学
19 篇 南京农业大学
19 篇 中山大学
17 篇 西南大学
17 篇 中国科学院南海海...
17 篇 军事医学科学院军...
17 篇 四川农业大学
15 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 西北农林科技大学
13 篇 复旦大学
13 篇 西南民族大学
13 篇 华东师范大学

作者

19 篇 黄良民
18 篇 程相朝
17 篇 廖成水
17 篇 张春杰
16 篇 尹仁福
15 篇 赵德明
15 篇 周向梅
14 篇 金宁一
14 篇 丁壮
14 篇 王海燕
13 篇 余祖华
13 篇 杨利峰
11 篇 杨莹莹
11 篇 郑世军
11 篇 钟金城
11 篇 黄娇玲
11 篇 谢芝勋
11 篇 曹红
11 篇 谢丽基
11 篇 李俊姣

语言

1,110 篇 中文
102 篇 英文

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IBV N-M-E病毒样颗粒的构建及其免疫原性研究

IBV N-M-E病毒样颗粒的构建及其免疫原性研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：吴暄杨鑫曾凡亚左磊韩潇潇徐鹏卫王红宁四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室

引言禽传染性支气管炎病毒（Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV）属于尼多病毒目（Nidovirale s）,冠状病毒科（Coronaviridae）,冠状病毒属第三群的代表种。IBV毒株变异频繁,不同基因型之间交叉保护弱,疫苗对不同流行毒株不能有... 详细信息

引言禽传染性支气管炎病毒（Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV）属于尼多病毒目（Nidovirale s）,冠状病毒科（Coronaviridae）,冠状病毒属第三群的代表种。IBV毒株变异频繁,不同基因型之间交叉保护弱,疫苗对不同流行毒株不能有效保护,常导致免疫失败。IBV N蛋白基因序列较为保守,且在病毒感染过程中会大量表达,同时具有较强的诱导交叉保护抗体和细胞毒T细胞免疫能力,M蛋白、E蛋白为膜蛋白,在病毒的复制、装配以及出芽过程中起到至关重要的作用。构建IBV N-M-E抗原,旨在提高疫苗的免疫保护。病毒样颗粒（Virus-Like Particles,VLPs）又称类病毒颗粒或假病毒颗粒,是由病毒的一种或多种包膜蛋白或结构蛋白自发组装而形成的空心颗粒,在大小和形态上与天然病毒类似。VLPs不含有病毒的遗传物质,故不具备感染性,作为免疫原,它可通过和病毒感染一样的途径呈递给免疫细胞,有效地诱导机体的免疫系统产生免疫保护反应,VL Ps具有以天然形式来高效、高密度的展示病毒的抗原蛋白、表位等目标分子的能力,能够诱导出很强的免疫应答,而且VLPs的大分子结构也能进一步提升免疫反应。IBV N-M-E病毒样颗粒的构建及其免疫原性研究为IBV新型疫苗创制提供科学依据。材料和方法利用昆虫细胞-杆状病毒（Bac-to-Bac）将IBV M41毒株N、M、E基因构建入杆状病毒基因组,鉴定N、M、E能够正确表达后,用分别表达IBV 3种结构蛋白的重组杆状病毒共感染Sf9昆虫细胞,采用超速离心和蔗糖密度梯度离心方法对细胞及上清进行分离纯化,利用透射电镜对IBV病毒样颗粒的形成情况进行观察分析。制备IBV N-M-E VLPs疫苗,通过皮下注射途径免疫SPF鸡,分别以IBV M41灭活疫苗和PBS作为阳性和阴性两对照组。通过检测免疫鸡血清中的IBV特异性抗体（IgG）、血凝抑制（HI）抗体、以及攻毒保护效率等指标评价IBV N-M-E VLPs的免疫原性。结果讨论结果显示:IBV N、M、E均能在Bac-to-Bac表达系统中表达,经共感染后3种结构蛋白能够自组装成VLPs,其在颗粒大小以及形态上与天然的IBV病毒粒子相似,IBV N-M-E VLPs疫苗,首免后第7天,除PBS组外,检测到IBV特异性抗体,至第二次免疫后14天时,IBV M41灭活疫苗组以及IBV N-M-E VLPs组血清中IgG抗体水平达到峰值,且显著高于阴性对照组（p<0.01）;I BV N-M-E VLPs组在两次免疫过程中抗体水平略低于IBV M41灭活疫苗组;血凝抑制实验结果表明:IBV M41灭活疫苗组及N-M-E VLPs免疫组HI抗体水平均显著高于阴性对照组（p<0.05）,但IBV N-M-E VLPs免疫组略低IBV M41灭活疫苗组;攻毒保护实验结果显示:阴性对照组死亡率35%、IBV N-M-E VLPs免疫组死亡率10%、IBV M41灭活疫苗组死亡率0。结果表明IBV N-M-E VLPs能够诱导机体产生中和抗体,且对鸡群有一定的保护能力。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒病毒样颗粒疫苗

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口蹄疫病毒共享型单克隆抗体的制备及其识别表位的鉴定

口蹄疫病毒共享型单克隆抗体的制备及其识别表位的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会

作者：周国辉刘文铭杨宝琳王明霞于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所牛羊传染病研究创新团队

引言口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起一种急性、热性、高度接触性传染病,其易感动物包括牛、羊、猪等家畜及野生偶蹄动物。FMDV是单股、正链RNA病毒,属于微RNA病毒科、口蹄疫病毒属的成员。FMDV可分为O... 详细信息

引言口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起一种急性、热性、高度接触性传染病,其易感动物包括牛、羊、猪等家畜及野生偶蹄动物。FMDV是单股、正链RNA病毒,属于微RNA病毒科、口蹄疫病毒属的成员。FMDV可分为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia1型共7种血清型,不同血清型毒株间不产生交叉免疫保护;每个血清型都包含众多基因型,血清型和基因型内各分离株存在广泛的抗原变异。在发展中国家使用疫苗预防口蹄疫,快速准确地诊断也是有效控制口蹄疫的关键。本研究制备FMDV各血清型毒株共享的单抗并鉴定其针对的表位,目的是研发FMDV血清型广谱性病原诊断和抗体检测试剂。材料与方法用提纯并灭活的A型FMDV病毒抗原免疫BALB/c小鼠,经融合、间接ELISA筛选和间接免疫荧光（IFA）验证,获得1株稳定分泌多血清型FMDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3D9。进而,用试剂盒鉴定Ig亚类;间接ELISA和中和试验检测抗体效价;硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数;经IFA和Western blot鉴定,确定单抗3D9所识别的表位为线性或构象表位。结果与讨论本研究采用纯化的A型FMDV病毒抗原免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA筛选和间接免疫荧光（IFA）验证,获得了1株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3D9,为IgG1/κ亚类。经间接ELISA检测显示,3D9杂交瘤细胞培养上清的抗体效价分别为1:6400,小鼠腹水效价为1:10～5;硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为2.5mol/L;经IFA鉴定,单抗3D9为A型、O型和Asia1型共享单抗。经Western blot分析表明:3D9单抗所识别表位均为构象表位。3D9单克隆抗体的获得,为口蹄疫病毒和诊断技术研究提供了重要的实验材料。3D9是一株识别A型、O型和Asia1型FMDV共享型构象表位的单抗,为IgG1/κ亚类。为确定FMDV 3D9识别表位的性质,本研究用噬菌体随机十二肽库对单抗3D9进行3轮生物淘选,经噬菌体ELISA和抗原竞争抑制试验鉴定,获得12个与单抗3D9均发生特异性反应的阳性噬菌体克隆;序列测定及比对分析显示,有4个噬菌体克隆展示一个共有基序GVYxxAYxW（x代表任意氨基酸）,初步认定其为单抗3D9识别的模拟表位;通过与FMDV 7个血清型不同毒株的氨基酸序列进行比对发现,该3D9模拟表位与VP2蛋白序列GVYxxxxxxxAYxxxxW高度同源,而且该真实序列在各血清型FMDV毒株之间是高度保守的,表明3D9表位是FMDVVP2蛋白的一个高度保守性表位;为进一步验证3D9表位的存在,利用反向遗传技术成功拯救了表位突变株V90A,经双抗体夹心ELISA检测表明,V氨基酸残基对3D9表位的活性起重要作用。总之,本研究在制备口蹄疫病毒单抗的基础上对其识别的表位进行鉴定,单抗3D9识别的表位是位于VP2蛋白上的7个血清型FMDV共享的构象表位。这些研究将为口蹄疫病毒诊断和抗体检测试剂的开发提供理论依据和实验基础。

关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体噬菌体展示构象表位表位作图

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