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生物适应及多样性的基因组进化机制

生物适应及多样性的基因组进化机制

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：张国捷中国国家基因库深圳华大基因研究院哥本哈根大学生物系

微观进化描述的是物种在环境变化时在分子水平产生的适应性变化,而宏观进化描述的是在大尺度水平物种起源、进化、分化、分布等生物学特征。如何系统综合微观进化与宏观进化一直是进化生物学上的难题。近几年测序技术的飞速发展极大推... 详细信息

微观进化描述的是物种在环境变化时在分子水平产生的适应性变化,而宏观进化描述的是在大尺度水平物种起源、进化、分化、分布等生物学特征。如何系统综合微观进化与宏观进化一直是进化生物学上的难题。近几年测序技术的飞速发展极大推动了基因组学的发展,也将我们对进化的理解视野从过去的个别基因扩展到全基因组整体水平。在过去的数年里,本课题组利用新一代测序技术对多种生物类群进行了基因组序列的解读,物种范围覆盖了脊椎动物和无脊椎动物,旨在通过比较基因组学的手段在多个方面对生物的多样性以及对环境的适应性机制进行系统的解读,从而建立我们对微观进化以及宏观进化两个层次的理解。生物系统发生关系树是我们理解物种进化和性状进化的重要基础。然而由于传统分类学以及过去分子系统分类学工作的局限性,至目前为之,仍有众多物种的进化地位尚未明确。近几年,我们尝试利用全基因组序列首次高支持度地解决了长期针对蝙蝠和树鼩进化地位的争议。当今鸟类是做生物系统发生学中最复杂、争议最广泛的一个生物类群。经过数百年的研究,当前对鸟纲内部物种分类仍然十分混乱,仅有6个和目的分类地位得到较为普遍的共识,然而仍然有40多个目的分类地位不明确。近年来,我们对鸟纲进行了广泛的采样,对每个目的鸟类选取出代表物种进行全基因组测序,并利用全基囚组序列对整个鸟纲进行了彻底的全基因组范围系统发生树的重构工作,极大的改变了我们之前对鸟类进化的理解。此外,通过群体水平和跨物种水平的基因组比较,我们可以对物种的关键性状进化、物种种群变迁、环境适应、以及人工选择的作用机制进行全方位的系统阐述。

关键词：微观进化宏观进化比较基因组学适应性进化

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获得性MFS外排泵耐药性相关基因的多样性研究

获得性MFS外排泵耐药性相关基因的多样性研究

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：李佩珍应俊马萍汪倩张晋芳徐晓敏卢玲玲包其郁温州医学院检验医学-生命科学学院瑞安市中医院检验科

外排泵基因是细菌耐药性形成的主要因素之一,其中主要易化超家族系统(MFS)可通过基因水平转移导致耐药性的播散。本文通过大规模基因组测序,结合生物信息学分析,对分离自临床标本的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟杆菌、... 详细信息

外排泵基因是细菌耐药性形成的主要因素之一,其中主要易化超家族系统(MFS)可通过基因水平转移导致耐药性的播散。本文通过大规模基因组测序,结合生物信息学分析,对分离自临床标本的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟杆菌、肺炎克雷伯们菌等种属共1200菌株进行MFS类外排泵基因的多样性、多态件分析及结构与基因功能关系的研究。结果显示:六种属菌株基因组编码了包括氯霉素类、四环素类、林可霉素类、诺氟沙星类、甲基紫类、阿拉伯糖类、转运蛋白类、多耐药类等共计17种MFS外排泵耐药性相关基因,其中floR、cmlA、tetA、emrB、emrD、emrK、emrY、yieO、yehQ等9个基因较常见,而某些基因只出现在个别菌种中,如fexA基因只在肺炎克雷伯菌中出现,lmrB基因只在阴沟肠杆菌中检出。通过PCR扩增、克隆了六种属细菌的235个floR基因并测序,聚类分析可将所有floR基因归为3簇(cluster),其中ClusterOne包含218个克降,ClusterTwo包含15个克隆,两簇序列同源性在81%左右,另外2个基因与上述2簇同源性较低,另为一簇。对前2簇基因进行SNPs位点分析发现,Cluster One共检出95个同义突变(Ks)、148个非同义突变(Ka)和5个无义突变;Cluster Two中共检出5个同义突变和10个非同义突变。对235个克隆进行了氯霉素和氟苯尼考的耐药性测定(MIC),结果发现不同克隆对2种药物的敏感性不同,耐药程度分布在2-512μg/mL,大多数在64-256μg/mL之间。本文结果说明,新一代高通量测序技术非常适合在群体水平上分析耐药性相关基因的多样性和遗传变异规律研究,挖掘新的耐药性基因。

关键词：耐药性外排泵基因 MFS 相关基因多样性研究

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甘蓝型油菜BAN、F3H和TT19基因的eQTL定位研究

甘蓝型油菜BAN、F3H和TT19基因的eQTL定位研究

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：卢坤曲存民张凯余浩陆俊杏柴友荣李加纳西南大学农学与生物科技学院重庆市油菜工程中心

黄烷酮3-羟化酶（flavonone 3-hydroxylase,F3H）、BANYULS（BAN）基因编码的花青素还原酶（Anthocyanidin reductase,ANR）和TTl9编码的谷胱甘肽转移酶（g|***）是类黄酮途径中的3个关键酶,在花青素和原花青素的合成和转运起重要作用... 详细信息

黄烷酮3-羟化酶（flavonone 3-hydroxylase,F3H）、BANYULS（BAN）基因编码的花青素还原酶（Anthocyanidin reductase,ANR）和TTl9编码的谷胱甘肽转移酶（g|***）是类黄酮途径中的3个关键酶,在花青素和原花青素的合成和转运起重要作用。本研究利用重组自交系F代家系（GH06×油研2号选系）花后30天种子对上述3个基因家族的表达量进行检测,利用QTL作图方法对其进行了eQTL分析,取LOD临界值为2.0,共检测到二十个相关的eQTL位点,分别位于LG07、LG08、LG10、LG11、LG12、LG16、LG20、LG22八个不同的连锁群上,单位点解释遗传表型变异的4.09%～8.95%。在LG8和LGl6连锁群上检测TTl9和BAN基因及BAN和F3H基因相关的eQTL分别与同一个标记E4M8/a和H022L18-2紧密连锁。根据全基因组BLASTN比对,BAN基因在白菜中有两个不同的成员,其中一个成员位于白菜A01染色体上F3H的两个基因分别位于A03和A09两条染色体,而TT19的两个基因分别位于A02和A10两条染色体。其中A09染色体上的4个eQTL连锁标记200 kb侧翼序列不仅在白菜和甘蓝中具有很好的共线性关系,而且它们分别与拟南芥第1和第5染色体也具有较好的共线性,能够用于候选基因分析,为深入研究甘蓝型油菜黄籽性状等复杂性状形成的分子机理和调控机制奠定了基础。

关键词：甘蓝型油菜透明种皮表达数量性状位点调控网络

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计算机视觉在胎儿脑畸形筛查中的应用

计算机视觉在胎儿脑畸形筛查中的应用

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：贺力新陈阿梅卓志媛宋莹晓乌日图内蒙古医科大学组织胚胎学教研室内蒙古医科大学第一附属医院超声科内蒙古工业大学机械学院

在胚胎发生中,胎儿脑形态结构的改变对于诊断胎儿脑畸形有重要意义。超声检查是常规胎儿产前检查最安全的检查方法,并被公认为是筛查胎儿畸形的首选方法,在临床有重要的诊断价值。在进行胎儿脑部畸形及遗传病的计算机辅助诊断中,通常将... 详细信息

在胚胎发生中,胎儿脑形态结构的改变对于诊断胎儿脑畸形有重要意义。超声检查是常规胎儿产前检查最安全的检查方法,并被公认为是筛查胎儿畸形的首选方法,在临床有重要的诊断价值。在进行胎儿脑部畸形及遗传病的计算机辅助诊断中,通常将胎儿双顶径(biparietal diameter,BPD)和头围的生物测量指标用来评价胎儿头部的人小,小脑半球(cerebral hemispheres,CH)和小脑延髓池(cisterna of medulla,CM)在不同孕期的形态是颅脑内结构是否异常的评价指标之一。本文提出了一种基于计算机视觉的方法通过对胎儿脑部各感兴趣部分进行提取,分别采用如下方法:总体的胎儿颅脑使用改进的基于边缘检测的随机椭圆检测(randomized ellipse detection,RED),此方法为对图像进行二值化,采用过滤椒盐噪声中盐粒噪声的机理去除非整体椭圆部分的零点,然后采用了改进的基于最小二乘法的随机椭圆检测;其颅内的各组织成分采用水平集方法进行分割。用上述方法对30例孕期为23w5d的健康胎儿B超图像处理,得到每例的各感兴趣部分的,如胎儿颅脑整体,小脑半球,侧脑室的灰度图,然后经统计学处理计算健康胎儿各部分灰度范围得到标准统计模型组,使用此模型组来匹配待诊的胎儿B超图像的直方分布图,用临床已确诊3例脑疾患的B超图像对此方法进行了验证,具有显著性差异,初步确定此方法的可行性。但是此种方法未经临床大量例数及产后随访验证,因此需要进行大样本的实验研究方能得到一可信度高的标准摸板对脑畸形的筛查,本文结果显示该方法尚有很大的研究空间。

关键词：产前诊断胎儿脑图象处理

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牦牛胃溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析

牦牛胃溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：任洪辉王永江明锋骆美蓉张林朱小翌李建波动物遗传育种学国家民委-教育部重点实验室西南民族大学生命科学与技术学院西南民族大学青藏高原研究院

溶菌酶是动物体内十分重要的非特片性免疫因子,参与多种免疫防护反应,具有杀菌、抗病毒、提高免疫力、减轻炎症等多种功效,有着潜在的研究价值和商业前景,本实验室首次对牦牛胃溶菌酶基因进行了真核表达研究。参照GeneBank中牦牛胃溶菌... 详细信息

溶菌酶是动物体内十分重要的非特片性免疫因子,参与多种免疫防护反应,具有杀菌、抗病毒、提高免疫力、减轻炎症等多种功效,有着潜在的研究价值和商业前景,本实验室首次对牦牛胃溶菌酶基因进行了真核表达研究。参照GeneBank中牦牛胃溶菌酶基因的序列号(GenBank:EU780011.1),根据实验需要设计并合成引物。利用RT-PCR技术从牦牛胃组织总RNA中扩增获得特异性基因片段,将所获得的目的片段克隆至pMD(?)19-T Vector。重组子测序结果表明,牦牛胃溶菌酶基因序列大小为441bp,其中前54个密码子翻译成信号肽,成熟肽分子量大小为14.1kD。将目的基因连接至表达载体pPICZα-A的α-因子信号肽序列下游,构建重组质粒pPICZot-A-BGSLYZ,然后电转化至毕赤酵母X33中。经抗生素Zeocin抗性筛选获得高效分泌表达牦牛胃溶菌酶的毕赤酵母工程菌株。对具有较高抗性的菌株进行甲醇诱导表达,经SDS-PAGE分析鉴定,并用藤黄微球菌对表达产物进行活性测定。结果表明:重组表达菌株分泌的重组蛋白均与预期大小一致;在72h时表达产物活性最高,为48OU/ml;体外抑菌检测显示,毕赤酵母表达产物对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌作用。上述结果表明:牦牛胃溶菌酶基因在毕赤酵母X33中得到可溶性表达,构建了相应的工程菌株,并具有一定的抑菌活性;同时表明牦牛胃溶菌酶在消除胃内有害细菌方面发挥重要的免疫作用。

关键词：牦牛胃溶菌酶毕赤酵母分泌表达抗菌活性

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牦牛和犏牛精原干细胞的自我更新与分化调控

牦牛和犏牛精原干细胞的自我更新与分化调控

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：曾贤彬姬秋梅马志杰刘仲娜杨琴宋乔乔钟金城西南民族大学动物遗传育种学国家民委-教育部共建重点实验室青海高原牦牛研究中心

精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的自我更新与分化调控障碍是F1代雄性犏牛精子发生15阻滞的主要因素之一。本研究运用新一代高通量测序技术(RNA-seq)对健康成年的牦牛和犏牛睾丸组织进行转录组测序,分析了两行中参与调控SSC... 详细信息

精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的自我更新与分化调控障碍是F1代雄性犏牛精子发生15阻滞的主要因素之一。本研究运用新一代高通量测序技术(RNA-seq)对健康成年的牦牛和犏牛睾丸组织进行转录组测序,分析了两行中参与调控SSCs自我更新与分化相关基因的表达差异状况。结果表明:①Gdnf、Erm、Fgf2、Egf、Lhxl、Bcl6b、Ngn3、Plzf、Taf4b等基因具有抑制SSCs分化或促进SSCs自我更新的功能,它们在犏牛睾丸组织中均显著表达上调;②Scf、c-Kit、Tptl基因在犏牛睾丸组织的表达量叫显增加,而SSCs特异的SCF/c-Kit信号和Tptl蛋白分别行使介导抑制能诱发细胞凋亡的p53通路和促使Oct4、Nanog基因表达上调,维持SSCs多能性的生物学功能;③Stra8基因在哺乳动物生殖细胞减数分裂起始过程中发挥着关键性的作用,但Nanos2是其重要的表达抑制因了。前者在犏牛睾丸组织中表达下调,而后者表达显著上调:④视黄酸RA与RAR和RXR形成的异源二聚体结合直接激活Stra8基因表达,其还能促进两个减数分裂标志基因-Sycp3和Dmcl及c-Kit的表达。在犏牛睾丸组织中,RA合成相关的关键基因,如Raldh基因表达显著下调,且RA代谢酶基因Cyp26bl表达明显增加。综上所述,与牦牛睾丸组织表达谱比较分析,认为犏牛睾丸组织中SSCs具有更强的自我更新和抗细胞凋亡的能力;但该细胞的分化严重受阻,该过程与细胞核中RA含量降低及Stra8基因表达抑制密切相关。本研究通过分析调控SSCs自我更新与分化相关基因的表达差异,为揭示犏牛雄性不育和精子发生机制以及牦生杂交改良研究提供了一定的理论基础。

关键词：犏牛转录组精原干细胞自我更新分化

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CGSIV病毒STPK基因表达鉴定和功能分析

CGSIV病毒STPK基因表达鉴定和功能分析

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：赵高翔张欣李蔚董传甫周天鸿暨南大学生命科学技术学院中山大学生命科学学院

中国大鲵虹彩病毒(The Chinese giant salamander lridovirus,CGSIV)是从患病的中国大鲵体内分离得到的一株病毒。它是驯养大鲵死亡的致病感染原之一。研究CGSIV病毒的基因结构、表达形式和功能对病毒的感染机制和分子生物学机理有着重... 详细信息

中国大鲵虹彩病毒(The Chinese giant salamander lridovirus,CGSIV)是从患病的中国大鲵体内分离得到的一株病毒。它是驯养大鲵死亡的致病感染原之一。研究CGSIV病毒的基因结构、表达形式和功能对病毒的感染机制和分子生物学机理有着重要的意义。本论文主要对CGSIV的丝氨酸苏氨酸磷酸激酶基因(STPK)进行研究,以探讨该基因的生物学信息和表达方式,在病毒粒子和病毒周期中存在的情况,为该基因的功能研究提供基本材料。CGSIV病毒的ORF065R编码一个与丝氨酸苏氨酸磷酸激酶同源的蛋白。基因全长为1497bp,编码长为498aa,分子量预期大小为53.5kDa的蛋白。序列与多种虹彩病毒基因组序列进行比对,同源性最接近的为soft-shelled turtle iridovirus(STIV)的060R,相同性达99%。编码STPK同源的ORF是虹彩病毒的26个核心基因之一,但相应的作用尚未得到研究。本文利用PCR从CGSIV病毒基因组上扩增出基因编码序列,并将此克隆至PET-22b(+)原核表达载体上,大肠杆菌表达纯化蛋白。再将纯化的蛋白注射小鼠,制备了针对该蛋白的特异性抗体。然后CGSIV病毒感染细胞,CHX和AraC抑制实验条件下,利用RT-PCR和Western blot技术检测STPK的表达时序,表明CGSIV的STPK基因属于早期表达基因。将CGSIV病毒感染细胞,检测了STPK蛋白在宿主细胞内的定位情况。结果表明STPK蛋白存在于细胞质中。对CGSIV病毒粒子进行了分离纯化,并且检测表明STPK蛋白存在于成熟的病毒粒子上。同时研究利用反义吗啉环寡核苷酸(antisense morpholino oligonucleotides,asMOs)KD技术下调CGSW ORF65的表达,检测STPK蛋白在病毒复制中的作用。论文讨论了STPK蛋白在病毒感染时对病毒复制和病毒与宿主相互作用的可能机制。该课题对该基因进行了初步的研究,为进一步研究该蛋白的功能和了解该病毒基因的特性提供了新的依据。

关键词： CGSIV STPK 基因克隆基因定位功能研究

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利用TALEN系统快速构建MSTN突变小鼠模型

利用TALEN系统快速构建MSTN突变小鼠模型

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：周芳芳姜坤林玥琳陈红岩费俭卢大儒复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海市南方模式动物中心

引言:肌肉生长抑制素Myostatin基因(MSTN,也叫GDF8)是一种抑制骨骼肌生长发育的生长因子,为TGF-β超家族成员。其不仅在骨骼肌中表达,在肝脏,乳腺组织,脂肪组织等器官也有少量存在。现已有研究表明MSTN参与机体蛋白质、糖类以及脂肪等... 详细信息

引言:肌肉生长抑制素Myostatin基因(MSTN,也叫GDF8)是一种抑制骨骼肌生长发育的生长因子,为TGF-β超家族成员。其不仅在骨骼肌中表达,在肝脏,乳腺组织,脂肪组织等器官也有少量存在。现已有研究表明MSTN参与机体蛋白质、糖类以及脂肪等物质代谢的调节。本课题准备从动物水平上研究了MSTN与肝脏脂肪代谢之间的关系。材料和方法:首先我们利用TALEN(transcription activator-like(TAL)effector nucleases)方法构建了MSTN基因突变小鼠模型,并利用HRM(High Resolution Melt)方法对突变的效率进行快速检测。TALEN方法是近几年流行的可以使定点突变的基因敲除方法,其原理为TAL的核酸识别单位为重复34个恒定氨基酸序列,其中的12、13位点双连氨基酸与A、G、c、T有恒定的对应关系,即NG识别T,HD识别C,NI识别A,NN识别G。为获得识别某一特定核酸序列的TALE,按照DNA序列将相应TAL单元串联克隆即可。我们利用TALEN mRNA微注射受精卵的方法敲除小鼠的MSTN,构建了MSTN-/-小鼠,同时利用HRM对TALEN敲除细胞、小鼠的效率进行检测以及对构建的动物模型进行筛选,结合测序,表明HRM在突变的大量筛选检测方面非常方便有效,节约了大量时间与成本。结果 :我们建立了HRM的基因突变检测快速方法。MSTN TALEN质粒转染细胞以及小鼠尾静脉快充检测突变效率分别约为20%和5%。TALEN RNA注射单细胞期小鼠受精卵150枚,移植入假孕母鼠代孕,最后共产子45只,出生率为30%。其中,6只小鼠在MSTN基因靶标位置发生基因突变,基因编辑效率为13.3%,且基因突变可以稳定遗传,在第三代时已经得到突变纯合子。在高脂饮食一个月左右,杂合子与突变纯合子肌肉发达程度与野生型小鼠相比均有增加,且突变纯合子更明显。结论:MSTN基因敲除小鼠的肌肉与正常小鼠相比超常发达,TALEN系统可以用于高效,快速的构建MSTN-/-小鼠模型,HRM方法可用于突变快速检测,为进一步研究MSTN在脂代谢作用提供了动物模型。

关键词： MSTN TALEN HRM

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酵母细胞对内源DNA复制胁迫的响应

酵母细胞对内源DNA复制胁迫的响应

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：赵乐晖邹友龙夏乙燧楼慧强中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室

保证基因组准确的复制和传递是所有生命体生存与繁衍的基础。真核细胞都有一整套复杂精确的机制来实时监控与协调DNA复制进程,这个过程被称为DNA复制检验点或s期检验点（The S-phase checkpoint）。目前关于应对外界环境因子引起的DNA... 详细信息

保证基因组准确的复制和传递是所有生命体生存与繁衍的基础。真核细胞都有一整套复杂精确的机制来实时监控与协调DNA复制进程,这个过程被称为DNA复制检验点或s期检验点（The S-phase checkpoint）。目前关于应对外界环境因子引起的DNA损伤应答的研究相对较为深入,现有的s期检验点通路模型也绝大多数来自于细胞应对羟基脲等外界药物胁迫的研究。然而,如果突变发生在直接参与DNA复制的基因中,DNA复制叉内部出现功能异常,细胞是如何应对这类内部威胁的昵?所有真核生物中,前导链是由DNA聚合酶Polε的催化亚基Pol2这一必需基因负责合成的。我们利用酿酒酵母的遗传分析优势,筛选到一系列Pol2的温度敏感株,其中有几个突变株含有G564D突变。该位点在所有B家族DNA聚合酶中均高度保守,因此我们构建了pol2G564D酵母突变株。该突变菌株在37℃表现出明显的温度敏感,FACS分析显示其S期延滞。另外,Pol2同源蛋白Pfu DNA聚合酶中相应位点的突变导致聚合活性的明显下降。这些结果都暗示着该位点突变导致DNA复制活性下降,复制速度变慢。酵母交配四分孢子分析证明pol2G564D与检验点激酶突变株mecl△smll△和rad53kd合成致死,与检验点中介因子的双突变菌株p012G564D mrcl或pol2G564D rad9△均表现出更严重的生长缺陷,细胞周期异常及染色质重排频率显著增加。pol2G564D突变导致Rad53磷酸化和激活。这些结果表明该突变株存在DNA复制缺陷,DNA复制叉行进速度变慢或前导链/滞后链合成的不同步化会激活Mecl/Rad5检验点通路,从而保证细胞维持基因组稳定性和正常生长。由于DNA复制及其检验点在真核生物中的高度保守性,我们构建的前导链DNA复制缺陷模型以及对可能的检验点通路进行的遗传分析,将有助于我们更深入地研究真核生物细胞维持基因组稳定性的多重分子机制。

关键词： DNA复制前导链复制胁迫 DNA聚合酶Pol2 DNA复制检验点基因组稳定性

来源：评论

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SKP2增强食管癌细胞失巢凋亡抗性的分子机制研究

SKP2增强食管癌细胞失巢凋亡抗性的分子机制研究

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：石峰潘蓓青张钰郝佳洁蔡岩徐昕王明荣北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室

食管癌的死亡率在我国恶性肿瘤中居第四位,鳞状细胞癌是我国食管癌的主要病理类型,但其发生发展的机制尚未闸明。我们前期研究发现S期激酶要关蛋白-2(S-phasekinase-associated protein 2,SKP2)在食管癌组织中存在基因拷贝数增加及mRNA... 详细信息

食管癌的死亡率在我国恶性肿瘤中居第四位,鳞状细胞癌是我国食管癌的主要病理类型,但其发生发展的机制尚未闸明。我们前期研究发现S期激酶要关蛋白-2(S-phasekinase-associated protein 2,SKP2)在食管癌组织中存在基因拷贝数增加及mRNA、蛋白质水平的高表达,且SKP2基因扩增及蛋白高表达与淋巴结转移和肿瘤分期显著相关、SKP2属F-box蛋白家族成员,日SKP1-CUL-1—F-Box(SCF)E3泛素连接酶复合体的组成成分之一,在泛素化过程中负责对底物蛋白的识别,参与蛋白选择性降解过程。细胞表型研究发现,敲降SKP2表达,食管癌细胞失巢凋亡比例显著上升,而在贴壁状态下SKP2对细胞调亡影响并不明显。失巢凋亡是细胞在失去与基质的黏附时发生的一种特殊形式的凋亡,肿瘤细胞抵抗失巢凋亡的能力与其转移潜能密切相关。我们进一步研究发现食管细胞在诱导悬浮后SKP2蛋白表达水平显著上升,提示SKP2在食管癌细胞诱导悬浮后的表达水平提高可能与细胞抗失巢凋亡相关。分子机制研究发现,敲降SKP2表达后,在细胞悬浮状念下,细胞周期检验点最关键的效应蛋白激酶之一CHK2磷酸化水平明显降低;而在细胞贴壁状念下,SKP2不影响CHK2磷酸化。以上发现提示,SKP2可能通过影响CHK2磷酸化而增强食管癌细胞的失巢凋亡抗性,进而促进食管癌的发生发展。

关键词：食管鳞癌 SKP2 失巢凋亡

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