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作者

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8 篇 侯丽
7 篇 叶宝东
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5 篇 王建英
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5 篇 沈建平
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茅莓总皂苷裸鼠体内诱导K562白血病细胞凋亡机制研究

茅莓总皂苷裸鼠体内诱导K562白血病细胞凋亡机制研究

引用

全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：许晓峰程汝滨杨波高瑞兰张学进浙江省中西医结合医院浙江中医药大学药学院浙江中医药大学附属第一医院/浙江省中医院

目的：明确茅莓总皂苷(TSRP)对K562细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨其凋亡与STAT3和eIF4E信号通路传导活性关系.方法：建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,随机分为对照组、TSRP低剂量组(20mg/kg)和高剂量(100 mg/kg)三组,T...

目的：明确茅莓总皂苷(TSRP)对K562细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨其凋亡与STAT3和eIF4E信号通路传导活性关系.方法：建立裸鼠K562细胞皮下移植瘤模型,随机分为对照组、TSRP低剂量组(20mg/kg)和高剂量(100 mg/kg)三组,TSRP灌胃后观察裸鼠的精神状态等变化,定期测量各组裸鼠瘤块体积,称取瘤体质量,计算抑瘤率;采用HE染色光学显微镜观察肿瘤细胞的凋亡情况;原位末端标记法 (TUNEL)染色观察瘤块凋亡细胞,并进行细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)测定;免疫组织化学检测瘤块中Bcl-2 、p-STAT3和p-eIF4E的表达.结果：接种成瘤初期,各组荷瘤裸鼠精神状态均良好,随着移植瘤体积的增大,荷瘤裸鼠正常活动逐渐受到影响,处死前所有荷瘤裸鼠均表现为严重的恶病质消耗状态,精神萎靡;从移植瘤生长曲线来看,对照组生长曲线陡直,而TSRP低、高剂量组生长曲线位于对照组下方,曲线平缓;抑瘤率随着TSRP剂量增加而增加,和对照组比较具有明显统计学意义(P＜0.01);移植瘤块HE染色后光学显微镜观察显示TSRP能够诱导K562细胞发生明显的凋亡形态改变;TUNEL染色显示TSRP处理组中瘤块细胞凋亡率和AI明显增加,和对照组比较,P＜0.01;免疫组织化学显示TSRP处理后瘤块Bc1-2的荧光信号比对照组弱,降低了抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平;免疫组织化学同时显示TSRP药物处理组中p-eIF4E和p-STAT3的荧光信号和阳性率与对照组相比明显降低,降低了eIF4E和STAT3通路的传导活性.结论：TSRP在体内能够明显抑制K562细胞移植瘤的生长,并有诱导K562细胞凋亡作用,其机制可能与抑制eTF4E和STAT3通路的活性相关,为今后中药茅莓应用于临床提供了可靠的实验依据.

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思维导图在造血干细胞移植患者中的应用

思维导图在造血干细胞移植患者中的应用

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：杨小芳张晓兰程秋琴张凌燕杨丽娟林敏周郁鸿浙江中医药大学附属第一医院/浙江省中医院

造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)已成为血液恶性疾病等人类疾患的一种规范化治疗手段,引领了整个干细胞临床应用的潮流.造血干细胞移植是经大剂量放、化疗或其他免疫抑制处理,清除受体体内的肿瘤细胞、... 详细信息

造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)已成为血液恶性疾病等人类疾患的一种规范化治疗手段,引领了整个干细胞临床应用的潮流.造血干细胞移植是经大剂量放、化疗或其他免疫抑制处理,清除受体体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞,阻断发病机制,将正常供体或自体的造血干细胞输注给受体,使之重建正常造血和免疫功能.造血干细胞具有增殖、分化为各系成熟血细胞的功能和自我更新能力,从而实现造血功能和免疫功能的重建.在治疗过程中,护理质量是HSCT成功的一个关键环节,在护理实践工作中,笔者发现不同文化背景患者对于治疗的理解接受能力参差不齐.思维导图由英国"记忆之父"东尼·博赞提出,由一个中心关键词向外扩散出多个知识要点分支,每个分支由符号、数字、词汇等构成,然后再由每个分支要点散发出相关的知识点,形成一个树枝状的结构图,可用不同的颜色、图像建立记忆链接.为了让患者更好地配合治疗和护理,全面掌握造血干细胞移植中的注意事项,本院血液科自2015年1月起设计并运用思维导图对造血干细胞移植患者进行健康宣教.借助思维导图图文并重的特点,将枯燥的宣教文字转变为生动的图形信息,帮助患者尽快理解记忆,运用思维导图这一工具对患者进行标准化宣教，与以往传统宣教方式相比，一方面可以使宣教者的讲解条理清晰、避免遗漏重要内容;另一方面利用思维导图的丰富图形及色彩效果，吸引患者注意力，使患者在宣教过程中能够保持积极关注，且宣教过后，把思维导图交由患者查看阅读，帮助其理解记忆，进而提高其依从性。本研究结果显示，观察组患者依从性和宣教满意度均高于对照组，差异有统计学意义。说明通过思维导图对造血干细胞移植患者进行标准化宣教，使患者更好地掌握相关知识，并将其内化为自觉行为，迅速建立有利于疾病康复的日常生活习惯和自觉锻炼行为，促进造血干细胞移植患者的康复。

关键词：造血干细胞移植思维导图健康宣教依从性

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缓和姑息医疗在血液肿瘤的必要性应用

缓和姑息医疗在血液肿瘤的必要性应用

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：李冬云张淼李晓婧刘菲钱树树李潇北京中医药大学东直门医院

缓和医疗既往称姑息医疗，译自palliative medicine。香港译为纤缓医学，台湾泽作安宁疗护，大陆一直以来译为姑息治疗。缓和医疗是指对患有威胁到生命的疾病患者进行四全照顾(全人、全家、全程、全队)，通过最大限度减轻患者的生理和... 详细信息

缓和医疗既往称姑息医疗，译自palliative medicine。香港译为纤缓医学，台湾泽作安宁疗护，大陆一直以来译为姑息治疗。缓和医疗是指对患有威胁到生命的疾病患者进行四全照顾(全人、全家、全程、全队)，通过最大限度减轻患者的生理和精神心理痛楚，使患者及其家人获得最好生存质量的医学。缓和治疗的对象:包括处于患有威胁生命的疾病各阶段患者，也包括临终患者。血液肿瘤如急性白血病，恶性淋巴瘤，多发性骨髓瘤等都是严重威胁患者生命的疾病，患者及其家属更需要缓和医疗，当疾病复发、耐药，难于达到缓解时，治疗的重点就是控制症状和维持生理功能，提高生活质量。缓和医疗的具体方法有症状控制(医疗十人文);社会/心理/灵性关怀(人文);沟通(人文);家庭支持(医疗+人文)。其主要任务是:关心病人生活质量;减轻因临终末期病症所引起的痛苦和不适;帮助临终病人与家属在临终阶段增加入世亲情，使生、死两相安;满足临终病人在生命最后一段日子中的所有需要;在病人离世后继续为其家属提供慰籍。沟通是缓和医疗的重要方法血液肿瘤患者心理反应有"五阶段":否认一震惊否认期;愤怒一愤怒期;挣扎一讨价还价期;抑郁一抑郁期;接受一接受期。在我国，绝大多数血液肿瘤患者在吃中药，当现代医学已无能为力时，求助于中医就成了颇具中国特色的最后一道防线，患者从心理上可以接受，中医也自觉不自觉地承担了这方面的很多职责。文化背景、基础理论、临床实践是组成中医学体系的三大板块。中医认为血液肿瘤是在内虚的基础上，多种致病因素相互作用，导致机体阴阳失调，脏腑经络气血功能障碍，引起病理产物聚结。中医药治疗重在调平，具体是在中医整体观念指导下辨证施治提供个体化的治疗，扶正与驱邪，内治与外治，局部与整体结合，量体裁衣，为每位患者提供一个适合自身特点的个体化治疗方案，实际上中医治疗疾病讲究的也是杂合以治与综合治疗，尤其中医外治。根据治疗的途径不同，中医外治分:整体治疗:导引、体育、音乐疗法等，缓和医疗的主要任务是减轻患者及亲属的身心痛苦、提高生活质量，是一个涉及医疗技术、道德伦理、社会保险、国家法律等诸多方面的系统工程。对医学本源、医学根本目的和对医学局限性的认知，是缓和医疗在科学和理性的基础上有序发展的持久动力。

关键词：血液肿瘤缓和医疗家庭支持生活质量症状控制

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参耳生血颗粒治疗低危型骨髓增生异常综合征疗效分析

参耳生血颗粒治疗低危型骨髓增生异常综合征疗效分析

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：乔子剑徐文江杨淑莲曹江勇河北医科大学附属廊坊市中医院

目的：骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干细胞的克隆性疾病,除采用异基因干细胞移植外尚无特效疗法,应用中药制剂参耳生血颗粒治疗低危型MDS,分析其临床疗效.方法：我院门诊和住院确诊的低危型MDS患者共87例,按数字表法随机分...

目的：骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干细胞的克隆性疾病,除采用异基因干细胞移植外尚无特效疗法,应用中药制剂参耳生血颗粒治疗低危型MDS,分析其临床疗效.方法：我院门诊和住院确诊的低危型MDS患者共87例,按数字表法随机分为观察组和对照组.两组的年龄、性别、病程均经统计学处理无显著性差异(P＞0.05).对照组应用康力龙6～12mg/d,沙立度胺100～200mg/d,RAS加服维生素B6 100～200 mg.治疗组在上述治疗基础上加服中药制剂参耳生血颗粒(组成：人参、地耳草、制马钱子等.冀药制字Z20051446,规格为12g袋),每次12g,日3次口服.两组均在治疗6个月后进行疗效评价.观察两组患者治疗前后外周血血常规、T-细胞亚群、骨髓病态造血细胞等及治疗前后贫血出血等症状、消化道反应、心肝肾功能等变化.结果：治疗组与对照组基本缓解率、总有效率分别为8.13％、2.87％及72.79％、55.65％,有效病例见效时间最短2.7个月,最长9.3个月,平均3.4个月.两组治疗前后血常规均有明显变化(P＜0.05),治疗组病例经治疗后血常规改善较对照组更为明显.治疗组治疗前后骨髓红系病态造血细胞比较有显著性差异(P＜0.05),说明中药具有促进有核红细胞的分化、成熟,纠正造血缺陷,使红系病态造血减轻的作用,但对粒系、巨核系病态造血细胞的改善未见明显变化(P＞0.05).对照组粒系、红系、巨核系三系病态造血细胞治疗前后的变化不明显(P＞0.05).结论：临床资料研究观察结果表明参耳生血颗粒能够促进骨髓病态造血细胞的凋亡、分化,干扰骨髓病态造血,刺激骨髓造血细胞的生长,并诱导其分化、成熟,有利于MDS骨髓的正常造血.其能够明显改善低危型MDS患者的临床症状及外周血象,对低危型MDS疗效较为显著,而对RAEB-Ⅰ及RAEB-Ⅱ型的治疗效果则较差.应用参耳生血颗粒治疗低危型MDS的临床观察有一定疗效,其具体作用机理有待于我们进一步探讨.

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黄芩苷抑制急性单核系初发原代白血病和细胞株增殖和诱导凋亡

黄芩苷抑制急性单核系初发原代白血病和细胞株增殖和诱导凋亡

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：林筱洁彭来君高瑞兰沃立科浙江中医药大学附属第一医院/浙江省中医院

目的：研究黄芩苷对急性髓系白血病(AML)M5初发原代细胞和细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用,为其应用于辅助治疗提供依据.方法：选用5例急性髓系白血病M5原代细胞,及FAB M5型急性髓系SHI-1白血病细胞株.采用半固体集落培养法观察黄芩苷... 详细信息

目的：研究黄芩苷对急性髓系白血病(AML)M5初发原代细胞和细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用,为其应用于辅助治疗提供依据.方法：选用5例急性髓系白血病M5原代细胞,及FAB M5型急性髓系SHI-1白血病细胞株.采用半固体集落培养法观察黄芩苷对初发原代白血病细胞和细胞株克隆增殖的抑制作用.10～80uM黄芩苷处理原代M5 AML细胞一周,及SHI-1白血病细胞3天,离心沉淀涂片后瑞氏染色法观察黄芩苷诱导白血病细胞凋亡的形态学改变,免疫细胞化学法观察初发原代M5 AML细胞的PTEN蛋白表达.ANNEXIN V/PI双标法流式检测黄芩苷诱导的SHI-1白血病细胞凋亡细胞百分率.结果：10～80uM黄芩苷显著抑制初发原代AML M5细胞克隆形成,克隆抑制率分别为24.0± 12.0％～97.6±0.3％.20～80uM黄芩苷明显抑制SHI-1白血病细胞的克隆增殖,克隆抑制率分别为41.5±4.5％～96.8±1.6％.瑞氏染色结果显示20～80μM黄芩苷抑制AML M5原代和SHI-1白血病细胞增殖并诱导凋亡.20～80μM黄芩苷明显抑制原代M5 AML细胞核内PTEN蛋白表达.20～80μM黄芩苷诱导SHI-1白血病细胞早期凋亡细胞的百分率增加,分别为5.1±0.6％～19.1±2.1％,呈剂量依赖性.讨论与结论：急性髓系白血病M5是所有白血病类型中化疗效果比较差的类型,条件允许一般建议做骨髓移植,但治疗费用比较高.还有部分病例会出现髓外浸润,也有出现高白细胞而更高危和难治的病例.因此M5病情凶险且完全缓解率相对低,一般在40％左右.因此研究中药有效成分黄芩苷对AML M5的作用很有必要.本研究证实黄芩苷对AML M5原代细胞和SHI-1细胞株均有抑制增殖和诱导凋亡作用,AML M5原代细胞对黄芩苷更为敏感,10uM即能显著抑制初发原代AML M5克隆增殖.文献报道核内缺乏PTEN蛋白的细胞对DNA损伤高度敏感而容易被杀伤,经黄芩苷作用后AML M5细胞核内的PTEN蛋白表达逐渐减少,提示黄芩苷能增加白血病细胞对DNA损伤剂的敏感性,有望可应用于AML M5的辅助治疗.

关键词：黄芩苷 AML M5初发原代白血病细胞 SHI-1白血病细胞抑制增殖细胞凋亡

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浙贝黄芩汤提取物对HL60、HL60/ADR细胞增殖及耐药的影响

浙贝黄芩汤提取物对HL60、HL60/ADR细胞增殖及耐药的影响

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：杨臻王建英张坤许亚梅北京中医药大学东直门医院

目的：观察比较浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对急性髓系白血病HL60、HL60/ADR细胞增殖及化疗药物敏感性的影响.方法：采用MTS法检测比较浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对急性髓系白血病敏感细胞HL60、耐药细胞H...

目的：观察比较浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对急性髓系白血病HL60、HL60/ADR细胞增殖及化疗药物敏感性的影响.方法：采用MTS法检测比较浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对急性髓系白血病敏感细胞HL60、耐药细胞HL60/ADR的增殖抑制作用,计算各提取物的IC50值.测定非毒剂量(＜IC10)浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物联合阿霉素作用后HL60、HL60/ADR细胞阿霉素IC50的变化.结果：浙贝黄芩汤提取物对HL60细胞的IC50值由低到高依次为醇提取物(141.06±11.29μg/ml)、水提取物(177.28±4.00μg/ml)、酸水提取物(217.66± 16.78μg/ml),P＜0.05.浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物对HL60/ADR细胞的IC50值均大于200μg/ml,浙贝黄芩汤酸水提取物对HL60/ADR细胞的IC50值大于400μg/ml,各提取物对HL60/ADR细胞的IC50值均高于HL60细胞.200μg/ml浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对HL60/ADR细胞增殖的抑制率分别为(27.28±4.69)％、(37.67±3.43)％、(25.39±4.98)％,其中醇提取物抑制率高于水提取物及酸水提取物,P＜0.05;水提取物及酸提取物抑制率比较差异无统计学意义,P＞0.05.非毒剂量(＜IC10)浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物联合阿霉素作用于HL60细胞,阿霉素的IC50值降低,P＜0.05,增敏倍数分别为1.60、2.00倍.非毒剂量(＜IC10)浙贝黄芩汤醇提取物联合阿霉素作用于HL60/ADR细胞,阿霉素的IC50值降低,P＜0.05,逆转倍数为1.50倍.结论：浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物能不同程度的抑制HL60及HL60/ADR细胞增殖,以醇提取物抑制作用最强.浙贝黄芩汤水提取物、醇提取物、酸水提取物对HL60/ADR细胞的抑制作用弱于HL60细胞.非毒剂量(＜IC10)浙贝黄芩汤醇提取物能有效增加HL60细胞对阿霉素的敏感性,并部分逆转HL60/ADR细胞对阿霉素的耐药性.

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中西医结合治疗急性白血病三步曲

中西医结合治疗急性白血病三步曲

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：刘清池河北医科大学第一医院

目的：总结已经治愈的急性白血病患者治疗过程,找出共同规律.方法：诊断分类标准采用世界卫生组织(WH0)2008年淋巴造血组织肿瘤分类标准,急性白血病临床治愈标准：停止化疗5年或无病生存(DFS)达10年者[见张志南,沈悌主编《血液病诊断及...

目的：总结已经治愈的急性白血病患者治疗过程,找出共同规律.方法：诊断分类标准采用世界卫生组织(WH0)2008年淋巴造血组织肿瘤分类标准,急性白血病临床治愈标准：停止化疗5年或无病生存(DFS)达10年者[见张志南,沈悌主编《血液病诊断及疗效标准》].回顾分析作者在2000年～2009年期间采用中西医结合方法经治愈的86例急性白血病的治疗过程,找出其相同的经过阶段,总结治愈规律.结果：86例患者据经过了血液形态学缓解,分子生物学或遗传学缓解,残留白血病检测持续阴性2年以上.在治疗方法上,取得血液形态学缓解69例(80.2％)患者,采用的是凉血解毒中药结合化疗;取得血液形态学缓解患者后,有34例(39.5％)采用的是巩固化疗结合扶正祛邪法中医治疗,26例(30.2％)的患者在巩固化疗结合扶正祛邪法中医治疗的基础上加用了CIK或DC-CIK细胞输注达到分子生物学或遗传学缓解;取得分子生物学或遗传学缓解后,31例(36％)患者采用了中医解毒祛邪法治疗,48例(55.8％)患者采用了益气养血解毒祛邪治疗,86例治愈的患者均维持残留白血病检测持续阴性2年以上.结论：根据多数急性白血病患者的治疗情况和病情变化规律,我们总结出急性白血病三步疗法.第一步采用凉血解毒中药结合化疗取得血液学缓解.急性白血病发病时,病人常有发热、出血、肝脾肿大、乏力等表现,此为急性白血病初发阶段,多因感受邪毒,直伤髓府,而成髓毒.此时白血病细胞在患者体内大量产生,邪毒实盛,治疗的目的就是尽快遏制病情,达到血液形态学缓解.中医治则为凉血解毒,西医首选化疗.第二步取采用扶正祛邪中药结合化疗或DC-CIK细胞治疗取得遗传学或分子生物学缓解.取得血液学缓解的病人,体内白血病细胞经过第一个阶段的治疗已经大为减少,但急性白血病相关基因阳性,残留白血病水平仍较高,患者多有气色差、乏力、食欲不振等表现,此时患者正气已虚,邪已不盛,治当健脾益气,滋阴养血,解毒祛邪,以获得遗传学或分子学缓解,使急性白血病相关基因或异常染色体转为阴性.这一阶段巩固化疗以巩固疗效,但是单纯依靠化疗很难取得稳定的分子生物学或遗传学缓解.此阶段要充分利用免疫机制,可采取细胞免疫治疗、中药调节免疫、造血干细胞移植等措施迸一步清除白血病细胞.第三步采用解毒祛邪中药结合细胞免疫治疗清除微小残留白血病细胞达到治愈.取得遗传学或分子学缓解的患者体内白血病细胞显著减少,但并未彻底消失,仍是复发的根源.此时化疗对这些残留的白血病细胞作用成效不大,如同大炮打蚊子.此阶段患者血象、骨髓象正常,自我感觉无明显不适,属正气亦复,邪气已微.西医首选细胞生物疗法,中医重用解毒祛邪中药清解毒邪,以达根治.

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急性髓系白血病KG-1a细胞中白血病干细胞的富集以及黄芩苷的作用研究

急性髓系白血病KG-1a细胞中白血病干细胞的富集以及黄芩苷的作用...

引用

全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：林筱洁王雨婷高瑞兰王潇浙江中医药大学附属第一医院/浙江省中医院

目的：富集急性髓系白血病KG-1a细胞中白血病干细胞(LSC)含量,研究黄芩苷对KG-1a及富含ISC的KG-1a细胞抑制增殖和诱导凋亡作用,为应用于治疗白血病提供实验依据.方法：采用半固体集落培养法观察黄芩苷对KG-1a细胞克隆增殖的抑制作用.KG... 详细信息

目的：富集急性髓系白血病KG-1a细胞中白血病干细胞(LSC)含量,研究黄芩苷对KG-1a及富含ISC的KG-1a细胞抑制增殖和诱导凋亡作用,为应用于治疗白血病提供实验依据.方法：采用半固体集落培养法观察黄芩苷对KG-1a细胞克隆增殖的抑制作用.KG-1a细胞经10～80uM黄芩苷处理3天,离心沉淀涂片,瑞氏染色法观察凋亡的形态学.ANNEXIN V/PI双标法流式检测黄芩苷诱导的凋亡细胞百分率.免疫印迹法观察黄芩苷对凋亡相关分子Caspase 3、Caspase 9及NF-kB p65表达的影响.采用20uM blebbistatin作用富集急性髓系白血病KG-1a细胞中LSC.流式检测CD34+CD38-CD123+细胞比例.半固体集落培养法观察黄芩苷对富含LSC的KG-1a细胞克隆增殖的抑制作用,瑞氏染色法观察集落内细胞形态学.结果：20 ～ 80uM黄芩苷显著抑制KG-1a细胞的克隆形成,抑制率分别为30.4％±8.6％～89.6％±6.2％.瑞氏染色结果显示20～ 80μM黄芩苷抑制KG-1a细胞增殖并诱导凋亡.20～80μM黄芩苷诱导KG-1a白血病细胞早期凋亡细胞(ANNEXIN V+/PI-)百分率增加,分别为9.7％±0.9％～22.5％±2.8％,呈剂量依赖性.黄芩苷促进KG-1a细胞中凋亡效应分子Caspase 3和Caspase 9表达,并抑制抗凋亡分子NF-kB p65表达.20uM blebbistatin作用KG-1a细胞3天,CD34+CD38-CD123+细胞比例明显为11.5％,远远高于作用前的0.2％(提高57.5倍),获取了富含LSC的KG-1a细胞,其克隆形成率明显增加,20～60uM黄芩苷明显抑制富含LSC的KG-1a细胞的克隆增殖,抑制率分别为30.8％±3.7％～81.8％±9.3％.随着剂量增大集落内细胞减少,细胞结构变得不清晰或固缩.讨论：LSC是白血病耐药和复发的根本原因,因此研究中药有效成分黄芩苷对LSC的作用很有必要.LSC的表型为CD34+CD38-CD90-CD 117-CD 123+CD96+CLL-1+,含量非常少,约占AML骨髓有核细胞0.01％～0.09％,因此很难分离获取研究所需的足量具有活性的LSC,很多研究采用CD34+CD38-白血病细胞来表示***-1a白血病细胞属于FAB M0细胞,CD34+CD38-细胞比例高达95.7％.blebbistatin是非肌肉型肌球蛋白IIB的阻断剂,非肌肉型肌球蛋白ⅡB是造血干/祖细胞不对称分裂而自我更新的关键分子.通过blebbistatin暂时性地阻断非肌肉型肌球蛋白ⅡB能抑制LSC自我更新而使LSC比例提高.本研究采用20uM blebbistatin作用KG-1a细胞3天抑制LSC自我更新而使LSC比例提高57.5倍,富集LSC含量,获取富含LSC的KG-1a细胞.信号通路在LSC中特异地显著激活,黄芩苷对KG-1a细胞、富含LSC的KG-1a细胞均有抑制增殖、诱导凋亡作用,能下调NF-κB表达,有望特异性抑制LSC,治疗白血病有助于提高临床疗效.

关键词：黄芩苷白血病干细胞(LSC) KG-1a白血病细胞抑制增殖细胞凋亡

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输血依赖非重型再生障碍性贫血临床特征和治疗转归

输血依赖非重型再生障碍性贫血临床特征和治疗转归

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：林圣云项静静黄畅沈建平叶宝东胡致平沈一平郑智茵周郁鸿浙江中医药大学附属第一医院/浙江省中医院

目的：回顾性分析浙江中医药大学附属一院血液科近6年住院非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者治疗情况,分析输血依赖NSAA临床特征和治疗转归,为选择合适治疗提供依据.方法：回顾性分析浙江中医药大学附属一院2000年至2015年住院诊断NSAA178... 详细信息

目的：回顾性分析浙江中医药大学附属一院血液科近6年住院非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者治疗情况,分析输血依赖NSAA临床特征和治疗转归,为选择合适治疗提供依据.方法：回顾性分析浙江中医药大学附属一院2000年至2015年住院诊断NSAA178例,初诊110例(61.8％),非初诊68例(38.2％),男91例(51.1％),女87例(48.9％);中位年龄32岁(18岁～82岁),其中输血依赖NSAA91例,进一步分析成人输血依赖NSAA临床特征和治疗转归.结果：可随访输血依赖NSAA91人(51.1％),男66例(61.7％),女41例(38.3％),中位年龄32岁(18岁～81岁),中位随访时间30月(6月～67月),治疗方案：①雄激素+中药：雄性激素可明显促进红细胞系造血,甚至可能有助于外周血三系回升,多用于非依赖输血NSAA,非依赖成分输血,外周血常维持于安全水平;也可用于IST无效或无法接受IST的患者.定期观察血常规变化;②环孢素+雄激素+中药：外周血低于正常;依赖成分输血,或因ANC明显降低,存在严重感染倾向者,不具备使用ATG+环孢素或是异基因造血干细胞移植的条件;老年NSAA、孕妇NSAA;外周血尚处于安全水平,不需联合ATG治疗;③ATG+环孢素+雄激素+中药：依赖成分输血,或因ANC明显降低,存在严重感染倾向者,雄激素并有助于提高ATG的疗效;④异基因造血干细胞移植：依赖成分输血,IST无效,有合适的供者.其中CR39例(42.9％),PR22例(24.2％),CR+PR61例(67％),NR30例(33％),其中转化为SAA 3例(10％),死亡20例(66.7％),输血依赖中18例异基因造血干细胞移植并发症,2例死亡患者均发生在移植后1个月内,均为抢救性移植,1例输血依赖NSAA转重再患者移植(亲缘间全相合)前出现全身皮肤感染,移植后2周内感染未得到控制,死于脓毒性休克,电解质紊乱.另1例肝炎后再生障碍性贫血,移植(母供子半相合)后4周死于脓毒性休克,其余16例患者急性移植物抗宿主反应(aGVHD)2例,表现为出血性膀胱炎、腹泻各1例,甲强龙治疗控制正常,慢性移植物抗宿主反应(cGVHD)3例,1例表现为肠道GVHD及皮肤黏膜的GVHD,1例表现为肺部曲霉菌感染,1例表现为病毒感染,泊沙康唑抗真菌,环孢素加量及糖皮质激素免疫抑制,抗CD52的单抗,抗病毒,增强抵抗力使用后好转,近期及远期肝功能损伤及肾能异常各1例,护肝、护肾后好转,上述远期并发症需进一步随访.结论：ATG联合CsA治疗成人输血依赖NSAA有效率达80％,可以作为一线治疗选择,异基因造血干细胞移植治疗输血依赖NSAA虽然存在GVHD、严重感染出血等高风险,但复发率低,推荐有合适供者尽可能选择异基因造血干细胞移植.

关键词：输血依赖非重型再生障碍性贫血临床特征治疗转归

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抗IL-17抗体联合CSA对免疫介导再障小鼠免调控及造血的研究

抗IL-17抗体联合CSA对免疫介导再障小鼠免调控及造血的研究

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全国民族医、中医血液病学术研讨会暨青年学术论坛

作者：康曦沈建平陈均法张宇邓姝王尧坤周郁鸿浙江中医药大学附属第一医院/浙江省中医院

目的：研究IL-17抗体联合环孢菌素A(CsA)对免疫介导性再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)模型小鼠骨髓造血功能的影响及免疫调控,为进一步探讨AA的发病机制并为优化治疗策略提供新的思路和方法.方法：(1)X射线5.5Gy全身均匀照射Balb/c... 详细信息

目的：研究IL-17抗体联合环孢菌素A(CsA)对免疫介导性再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)模型小鼠骨髓造血功能的影响及免疫调控,为进一步探讨AA的发病机制并为优化治疗策略提供新的思路和方法.方法：(1)X射线5.5Gy全身均匀照射Balb/c小鼠5分钟,在照射后4小时内,给已照射的Balb/c小鼠注射来自于DBA小鼠的胸腺淋巴结悬液,每只Balb/c小鼠输入淋巴细胞1×106个,成功建立再生障碍性贫血模型.(2)造模结束后将小鼠随机分为以下几组：①正常对照组,生理盐水腹腔注射×15天;②模型组：生理盐水腹腔注射×15天;③抗IL-17抗体治疗组：抗IL-17抗体100ug只,腹腔注射-3、-1、1、3d;④CsA治疗组：单独给予CsA(5mg/kg/d),腹腔注射d1-d15;⑤抗IL-17抗体联合CsA治疗组：CsA (5mg/kg/d),腹腔注射d1-d15,抗IL-17抗体100ug/只,腹腔注射-3、-1、1、3d,每组8只.(3)在造模后的不同时间点观测各组小鼠的一般状况,外周血白细胞、血红蛋白、血小板等计数,治疗结束后取骨髓,骨髓病理切片观察增生情况、流式细胞仪分析骨髓CD34+细胞的表达、分析脾脏CD4+CD25+细胞比例;免疫蛋白印迹法(Westem blot)分析脾细胞T-bet、Foxp3转录调控蛋白的表达水平;实时定量PCR检测脾单个核细胞Th17相关转录因子RORγt表达.结果：①模型组小鼠外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)计数在造模后降低,第7、15天测定值分别为：WBC (0.323±0.093)×109/L,Hb(142± 13.32)g/L,PLT(97.75±16.68)×10/L、WBC(0.60±0.20)×109/L,Hb(63.75±39.21)g/L,PLT(149.25±53.98)×19/L.骨髓增生极度低下,病理切片示：模型组小鼠骨髓增生低下,造血组织淡染,造血细胞量明显减少,出现大量被脂肪组织代替的空白区.CD34+细胞明显减少(CD34+： 0.73％±0.15％).外周血流式细胞检测CD4+CD25+细胞比例降低(CD4+CD25+：0.525％±0.25％).Westem blot检测：T-bet蛋白表达上升,Foxp3蛋白表达下降.实时定量PCR检测：RORγt表达上升,均提示造模成功.②与模型组比较,抗IL-17抗体组、CsA组、抗IL-17抗体联合CsA组小鼠成模后15天内外周血细胞数持续上升,其中抗IL-17抗体联合CsA组上升明显(P＜0.05),并显著大于CsA组和IL-17组(P＜0.05).骨髓病理切片示：各治疗组骨髓造血状况有不同程度的恢复,抗IL-17抗体联合CsA组的作用更为明显,出现造血组织修复现象,造血细胞量明显较模型组丰富.单药组的骨髓抑制也有所改善,但不如联合用药组明显,仍可见空白区,造血细胞数量相对较少.流式细胞仪检测骨髓CD34+细胞、脾脏CD4+CD25+细胞,抗IL-17抗体组、CsA组、抗IL-17抗体联合CsA组均上升,有统计学意义(P＜0.05),抗IL-17抗体联合CsA组显著优于单用CsA组,(P＜0.05).western blot检测T-bet蛋白,经治疗后表达下降,抗IL-17抗体联合CsA组降低明显,并显著优于单药组(P＜0.05),Foxp3蛋白经治疗后表达增加,抗IL-17抗体联合CsA组增加显著优于单用药物组(P＜0.05).实时定量PCR检测：RORγt经治疗后下降,抗IL-17抗体联合CsA组下降有统计学意义.其余两组有下降趋势.结论：①抗IL-17抗体可促进骨髓造血恢复,通过下调转录因子RORγt表达、增加Treg细胞的数量、下调T-bet蛋白表达,抑制Th1细胞功能的过度亢进等方面治疗AA;②抗IL-17抗体联合环孢菌素A可恢复Th1 7/Treg细胞动态平衡,治疗AA具有协同作用.

关键词：再生障碍性贫血(aplasfic anemia,AA) IL-17 IL-17抗体环孢菌素A(CsA)

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