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373 篇 农学
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主题

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9 篇 rt-pcr
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8 篇 单克隆抗体
8 篇 pcv
8 篇 检测
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机构

20 篇 河南农业大学
20 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 吉林大学
19 篇 中国农业大学
17 篇 华中农业大学
13 篇 南京农业大学
13 篇 军事医学科学院军...
13 篇 四川大学
12 篇 吉林农业大学
12 篇 山东农业大学
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10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 中国农业科学院上...
9 篇 河南省动物疫病预...
9 篇 广西大学
9 篇 石河子大学
8 篇 宁夏动物疾病预防...
8 篇 青岛农业大学
8 篇 广西兽医研究所
7 篇 贵州大学

作者

13 篇 王红宁
12 篇 丁壮
11 篇 王川庆
11 篇 刘长明
11 篇 赵军
10 篇 吴志明
10 篇 闫若潜
10 篇 赵明军
10 篇 金梅林
9 篇 杨霞
9 篇 常洪涛
9 篇 危艳武
9 篇 万遂如
8 篇 卢冰霞
8 篇 陈创夫
8 篇 李斌
8 篇 梁家幸
8 篇 乔军
8 篇 秦毅斌
8 篇 赵武

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373 篇 中文
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牛病毒性腹泻病毒CC13B株全基因组序列及分析

牛病毒性腹泻病毒CC13B株全基因组序列及分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：朱利塞邢泽黎贾川川涂长春王新平吉林大学动物医学学院解放军军事医学科学院军事兽医研究所

本研究应用MDBK细胞从长春某牛场发生疑似为牛病毒性腹泻-粘膜病的病牛粪样中分离到一株病毒,经过电镜观察和序列测定证实为牛病毒性腹泻病毒,并将其命名为牛病毒性腹泻病毒CC13B株(BVDV-CC13B)。对BVDV CC13B株完整基因组序列进行了测... 详细信息

本研究应用MDBK细胞从长春某牛场发生疑似为牛病毒性腹泻-粘膜病的病牛粪样中分离到一株病毒,经过电镜观察和序列测定证实为牛病毒性腹泻病毒,并将其命名为牛病毒性腹泻病毒CC13B株(BVDV-CC13B)。对BVDV CC13B株完整基因组序列进行了测定,结果显示CC13B毒株的全基因组为12281bp。将BVDV-CC13B毒株的全长基因组序列与发表的BVDV病毒序列进行同源性比对,结果其核苷酸序列与国外发表的BVDV CP7毒株的同源性最高,为96%;而与国内其他地区分离株的同源性较低,最高为89.6%。根据病毒基因组序列的差异,BVDV CC13B毒株归类为基因I型。本研究结果为国内BVDV在不同地区的流行情况提供新的流行病学资料,将对今后本病的防控提供分子流行病学理论依据。

关键词：牛病毒性腹泻病毒全基因序列同源性 CC13B

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宁夏部分养猪小区病毒病流行现状调查及分析

宁夏部分养猪小区病毒病流行现状调查及分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李知新王进香周海宁闫小芹田进梅赵燕宁夏动物疾病预防控制中心

针对宁夏2007年以来部分地区调入生猪频繁发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)等疫情,对猪存栏较为集中的地区进行PRRSV、CSFV等病原学调查,并对其发展趋势进行分析。采用ELISA方法对297份血清样本进行抗体检测;采用RT-... 详细信息

针对宁夏2007年以来部分地区调入生猪频繁发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)等疫情,对猪存栏较为集中的地区进行PRRSV、CSFV等病原学调查,并对其发展趋势进行分析。采用ELISA方法对297份血清样本进行抗体检测;采用RT-PCR方法对297份血清和送检的78份病料组织进行病原学检测。血清学调查结果显示,PRRSV隐性感染阳性样品111份,阳性率为37.4%。其中母猪带毒率较高,仔猪次之,育成猪最低,均不表现临床发病;病原学调查结果表明,对血清学检测PRRSV阳性样本111份进行RT-PCR检测,阳性率为100%;病料组织中单重感染PRRSV阳性样品18份,阳性率为23.0%,属于美洲型,与CH-la遗传关系较近,归属同一基因亚型;猪群中PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV和PPV不同混合感染比较严重,以二重感染为主,三重感染次之。调查发现,PRRSV隐性感染十分普遍,严重危害着宁夏的养猪业;同时由于其它病原微生物的混合感染日趋复杂化,使得对猪病防控的难度也越来越大。

关键词：猪 PRRSV 血清学调查病原学调查发病趋势

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羊口疮病毒新疆野毒株SHZ1 B2L和F1L基因的克隆及遗传进化分析

羊口疮病毒新疆野毒株SHZ1 B2L和F1L基因的克隆及遗传进化分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：杨海波贺志昊孟庆玲乔军彭叶龙王国超刘昱成陈创夫石河子大学动物科技学院预防兽医学重点实验室

为了研究羊口疮病毒(ORFv)新疆野毒株的遗传进化情况,参照GenBank公布的ORFvB2L和F1L基因序列,设计特异性引物,对ORFvSHZ1新疆野毒株B2L和F1L基因进行PCR扩增,克隆、测序后进行遗传进化分析。结果:新疆野毒株SHZ1与GenBank公布的其他17... 详细信息

为了研究羊口疮病毒(ORFv)新疆野毒株的遗传进化情况,参照GenBank公布的ORFvB2L和F1L基因序列,设计特异性引物,对ORFvSHZ1新疆野毒株B2L和F1L基因进行PCR扩增,克隆、测序后进行遗传进化分析。结果:新疆野毒株SHZ1与GenBank公布的其他17个毒株相比,B2L基因核苷酸同源性为97.28%～98.86%,推导氨基酸同源性为88.65%～90.50%;F1L基因核苷酸同源性为94.56～97.07%,推导氨基酸同源性为93.82%～95.88%。基于B2L基因的遗传进化树分析发现,SHZ1株B2L基因与我国现用疫苗株B2L基因亲缘关系较近;而基于F1L基因的遗传进化树显示,SHZ1株与意大利分离株的亲缘关系最近,推测ORFvSHZ1株可能是国外流行株与疫苗株重组后产生的一个变异株。

关键词：羊口疮病毒新疆野毒株SHZ1 B2L基因 F1L基因遗传进化分析

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HA基因D222N变异对2009/H1N1病毒的致病性研究

HA基因D222N变异对2009/H1N1病毒的致病性研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：孔维立孙洪磊孙怡朋蒲娟刘金华中国农业大学动物医学院

背景2009/H1N1病毒引发了21世纪第一次流感大流行的爆发。根据研究结果发现,HA蛋白的D222N的突变,在2009/H1N1感染的重症病例中出现频率较高。这一氨基酸位点处于HA蛋白的受体结合区,该位点的变异是否影响2009/H1N1病毒的致病性,有待于... 详细信息

背景2009/H1N1病毒引发了21世纪第一次流感大流行的爆发。根据研究结果发现,HA蛋白的D222N的突变,在2009/H1N1感染的重症病例中出现频率较高。这一氨基酸位点处于HA蛋白的受体结合区,该位点的变异是否影响2009/H1N1病毒的致病性,有待于进一步的探究。方法通过反向遗传技术,我们构建了2009/H1N1大流行病毒及D222N的突变病毒。通过探究这些病毒在体外细胞系(MDCK/A549)上的生长动力学,受体结合特性以及对BALB/c小鼠的致病性,来评价D222N对2009/H1N1病毒的影响。结果D222N病毒在MDCK细胞上表现出较高的复制能力,而在A549细胞上恰好相反。D222N的变异提高了流感病毒对a2-3受体的结合特性,却表现出对小鼠较弱的致病力。总结D222N的出现改变了受体结合特性,减弱了对小鼠的致病力。由此推测该位点的改变可能与2009/H1N1重症病例之间并无关联。

关键词：重症病例唾液酸受体 D222N

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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的纯化及免疫原性研究

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的纯化及免疫原性研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：周家强张洋溢曹三杰黄小波文心田

本研究将本室构建的原核表达载体pET-ApxⅡ在大肠杆菌BL21中进行原核表达。表达产物以包涵体的形式存在,包涵体进过洗涤后通过亲和层析进行纯化,然后纯化后的蛋白进行Western-bloting检测分析。将100只小鼠随机分为5组,血清1型全菌灭活... 详细信息

本研究将本室构建的原核表达载体pET-ApxⅡ在大肠杆菌BL21中进行原核表达。表达产物以包涵体的形式存在,包涵体进过洗涤后通过亲和层析进行纯化,然后纯化后的蛋白进行Western-bloting检测分析。将100只小鼠随机分为5组,血清1型全菌灭活苗组,血清7型全菌灭活苗组,ApxⅡA蛋白免疫组,血清7型灭活苗+ApxⅡA蛋白免疫组以及PBS对照组。每次免疫后一周,利用毒素Ⅱ建立的ELISA进行抗体的检测,第三次免疫后一周,用浓度分别为1.0×106CUF/ml和1.5×106CUF/ml的1型和7型菌株进行攻毒。结果显示:单独ApxⅡA蛋白免疫的小鼠对血清1型攻击的保护率为60%,对血清7型的保护率为50%,对同种血清型和异种血清型都有一定的免疫保护力;而血清7型灭活苗+ApxⅡA蛋白免疫组的保护率分别为70%和90%,表明ApxⅡA蛋白在一定程度内能够增强灭活苗的免疫效果。本研究为猪传染性胸膜肺炎高效疫苗的研究奠定了基础。

关键词：原核表达 ApxⅡA蛋白纯化小鼠免疫原性

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以免疫刺激复合物基质为佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫效果评价

以免疫刺激复合物基质为佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫效...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：熊祺琰王占伟甘源冯志新刘茂军邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

试验旨在探讨免疫刺激复合物基质(ISCOM-matrix)作为猪支原体肺炎168株活疫苗佐剂使用的可行性,并考察配合疫苗肌肉注射时的免疫效力和攻毒保护效力。方法:制备ISCOM-matrix,检验其对活疫苗的毒性,并于体外刺激淋巴细胞观察增殖应答情... 详细信息

试验旨在探讨免疫刺激复合物基质(ISCOM-matrix)作为猪支原体肺炎168株活疫苗佐剂使用的可行性,并考察配合疫苗肌肉注射时的免疫效力和攻毒保护效力。方法:制备ISCOM-matrix,检验其对活疫苗的毒性,并于体外刺激淋巴细胞观察增殖应答情况。而后将添加ISCOM-matrix佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫动物,检测血清抗体水平及及淋巴细胞增殖应答水平,于免疫后8周攻毒,评价攻毒保护效力。结果表明,所制备的ISCOM-matrix不影响活疫苗的活力,并且在体外可直接或协同刀豆蛋白刺激淋巴细胞产生明显的增殖反应,最低起效浓度低至0.01ng/ml;当作为佐剂与活疫苗配合肌肉注射免疫时,可以显著诱导动物对疫苗抗原的细胞免疫应答,体液免疫应答亦有一定程度增强,但组内差异较大。用肺炎支原体强毒攻毒后25天剖检,免疫组病变明显较攻毒对照组减轻,显示出较好的攻毒保护效果。

关键词：免疫刺激复合物基质猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射

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犬源伪狂犬病毒BJ-RD株的分离鉴定及gE基因分析

犬源伪狂犬病毒BJ-RD株的分离鉴定及gE基因分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：钟承张乐天王巨实陆梓杰刘蕾杨万莲孙艳争吕艳丽中国农业大学动物医学院

本研究对一例具有剧烈搔痒症状,但无明确传播途径的病犬的组织进行伪狂犬病毒(PRV)特异性PCR检测,从脑干、三叉神经、交感神经和颈段脊髓中扩增出预期大小的DNA片段。将PCR为阳性的脑干组织病料接种Vero细胞,培养72h后细胞发生圆缩,脱... 详细信息

本研究对一例具有剧烈搔痒症状,但无明确传播途径的病犬的组织进行伪狂犬病毒(PRV)特异性PCR检测,从脑干、三叉神经、交感神经和颈段脊髓中扩增出预期大小的DNA片段。将PCR为阳性的脑干组织病料接种Vero细胞,培养72h后细胞发生圆缩,脱落等病变。对出现稳定病变的细胞培养物进行PRVPCR检测获得预期大小的DNA片段,用PRVmAb进行免疫组化染色,部分细胞中出现大量棕褐色阳性颗粒,从而判定感染细胞中存在PRV,将此分离株命名为BJ/RD株。根据GenBank登录的PRV(JF797219)序列设计引物,扩增gE基因,并对扩增产物进行序列测定与分析,结果显示,BJ/RD株与此前分离的犬源毒株BJ/YT及2012年河北猪群分离株HB/HD的gE基因序列完全相同(核酸同源性为100%),与2012年河北地区分离株HB/HS、HB/BD、HB/LF核苷酸同源性99.9%,与而与国内外其他猪源PRV分离株gE基因序列有一定差异(BJ/RD株gE基因GenBank ***017275)。

关键词：犬伪狂犬病毒分离鉴定 gE基因序列分析

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巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用

巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：白方方武昱孜靳蒙蒙刘茂军冯志新熊祺琰邵国青江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心

应用巢式聚合酶链式反应(Nested PCR)建立了一种检测猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)的方法,试验中以酚-氯仿法制备模板DNA,根据猪鼻支原体P37序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。在特异性检测试验中,设计的引物不能... 详细信息

应用巢式聚合酶链式反应(Nested PCR)建立了一种检测猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)的方法,试验中以酚-氯仿法制备模板DNA,根据猪鼻支原体P37序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。在特异性检测试验中,设计的引物不能扩增出猪絮状支原体、猪滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡毒支原体、胸膜肺炎放线杆菌、猪瘟病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒及猪呼吸与繁殖综合症病毒等病原体;敏感性试验表明,第一次PCR和第二次PCR的敏感度分别为3.01mg/L和3.01×10-4mg/L。对41份临床样品肺组织的检测中,普通PCR和巢式PCR的检出率分别为29.3%(12/41)和82.9%(34/41)。结果表明巢式PCR方法明显优于常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性,为猪鼻支原体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。

关键词：猪鼻支原体巢式PCR 检测

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禽支气管炎病毒Jin-13分离株在SPF鸡体内的动态分布

禽支气管炎病毒Jin-13分离株在SPF鸡体内的动态分布

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李欢杨霞赵军常洪涛王晓梦刘红英张秀平王新卫王川庆河南农业大学禽病研究所

本研究旨在探究禽传染性支气管炎病毒(IBV)感染SPF鸡后在体内的动态分布。针对IBVJin-13毒株N基因设计并合成一对引物,建立了检测IBV SYBR Green I荧光定量PCR方法。人工感染90日龄SPF鸡1、4、7、10、14、21、28、35天后检测心脏、肝脏... 详细信息

本研究旨在探究禽传染性支气管炎病毒(IBV)感染SPF鸡后在体内的动态分布。针对IBVJin-13毒株N基因设计并合成一对引物,建立了检测IBV SYBR Green I荧光定量PCR方法。人工感染90日龄SPF鸡1、4、7、10、14、21、28、35天后检测心脏、肝脏、脾脏、肺脏、气管、肾脏、十二指肠等内脏器官病毒载量,以研究体内病毒复制动态及分布情况。该方法在7.77×108～100copies/μL范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中7.7copies/μL的病毒核酸,比常规RT-PCR方法敏感100倍。结果表明鸡群从感染后第4日开始发病,各组织器官内IBV病毒含量逐渐升高,至第7日肾脏病毒含量最高达到7.13×104copies/μL,其余依次为肺脏、脾脏、心脏、肝脏。攻毒10日后各组织内含量均逐渐降低。肝脏于攻毒后21日内检测不到IBV。肾脏带毒持续到28天。心脏带毒可达35天。

关键词：传染性支气管炎病毒 Jin-13分离株 SPF鸡荧光定量PCR 动态分布

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牛乳头瘤病毒2型L1基因克隆及原核表达

牛乳头瘤病毒2型L1基因克隆及原核表达

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：贺志昊刘昱成杨海波王国超孟庆玲乔军才学鹏陈创夫石河子大学动物科技学院中国农业科学院兰州兽医研究所

为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因。本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆入原核表达质粒pGEX4T-1中,用IPTG诱导L1蛋白表达,... 详细信息

为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因。本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆入原核表达质粒pGEX4T-1中,用IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。SDS-PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80ku的重组蛋白;Western blot显示该蛋白可与抗BPV2多克隆抗体发生免疫反应。小鼠免疫试验表明,BPV2L1重组蛋白可诱导小鼠产生抗BPV2 L1特异性抗体;琼脂扩散试验显示,重组的L1蛋白具有良好的免疫原性。本研究通过原核表达的BPV2 L1蛋白,证实其具有良好的反应原性及免疫原性,为牛乳头瘤病的疫苗和诊断试剂研发奠定了基础。

关键词：牛乳头瘤病毒2型衣壳蛋白 L1基因克隆原核表达

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