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378 篇 会议
1 篇 期刊文献

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373 篇 农学
- 365 篇 兽医学
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- 5 篇 生物学
4 篇 工学
- 4 篇 生物工程
3 篇 经济学
- 3 篇 应用经济学
2 篇 医学
- 2 篇 公共卫生与预防医...
1 篇 管理学
- 1 篇 农林经济管理

主题

17 篇 prrsv
13 篇 分离鉴定
10 篇 大肠杆菌
9 篇 疫苗
9 篇 rt-pcr
9 篇 禽流感病毒
8 篇 耐药性
8 篇 原核表达
8 篇 猪瘟病毒
8 篇 单克隆抗体
8 篇 pcv
8 篇 检测
8 篇 猪圆环病毒
8 篇 鉴定
7 篇 新城疫病毒
7 篇 沙门氏菌
7 篇 致病性
7 篇 序列分析
6 篇 猪圆环病毒2型
6 篇 副猪嗜血杆菌

机构

20 篇 河南农业大学
20 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 吉林大学
19 篇 中国农业大学
17 篇 华中农业大学
13 篇 南京农业大学
13 篇 军事医学科学院军...
13 篇 四川大学
12 篇 吉林农业大学
12 篇 山东农业大学
10 篇 江苏省农业科学院...
10 篇 中国畜牧兽医学会...
10 篇 中国农业科学院上...
9 篇 河南省动物疫病预...
9 篇 广西大学
9 篇 石河子大学
8 篇 宁夏动物疾病预防...
8 篇 青岛农业大学
8 篇 广西兽医研究所
7 篇 贵州大学

作者

13 篇 王红宁
12 篇 丁壮
11 篇 王川庆
11 篇 刘长明
11 篇 赵军
10 篇 吴志明
10 篇 闫若潜
10 篇 赵明军
10 篇 金梅林
9 篇 杨霞
9 篇 常洪涛
9 篇 危艳武
9 篇 万遂如
8 篇 卢冰霞
8 篇 陈创夫
8 篇 李斌
8 篇 梁家幸
8 篇 乔军
8 篇 秦毅斌
8 篇 赵武

语言

373 篇 中文
6 篇 英文

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三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建

三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李斌苏乾莲赵武秦毅斌梁家幸肖爱欢卢冰霞李莹莹何颖段群棚姜佳佳梁保忠广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西大学动物科学技术学院

为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,在由猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2N端及中间部分三个连续基因片段B1、B2、B3所构建的原核表达质粒pET32a-B1、pET32a-B2、pET32a-B3的基础上,设计引物扩增基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEAS... 详细信息

为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,在由猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2N端及中间部分三个连续基因片段B1、B2、B3所构建的原核表达质粒pET32a-B1、pET32a-B2、pET32a-B3的基础上,设计引物扩增基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEASY-M1 Expression Vector直接进行T-A连接,构建得到重组真核表达质粒pEASY-a、pEASY-b、pEASY-c。将真核表达质粒pEASY-a、pEASY-b、pEASY-c分别转染293T细胞,经实时荧光定量RT-PCR检测目的基因,证实这三个真核表达质粒可转染293T细胞表达目的蛋白。经SDS-PAGE电泳分析、WesternBlot鉴定,结果表明真核表达质粒pEASY-a、pEASY-b、pEASY-c在转染293T细胞中表达的目的蛋白具有良好的HEV抗原性。从而获得了三个HEVORF2连续片段的候选核酸疫苗,为今后进一步深入研究奠定了基础。

关键词：猪戊型肝炎病毒 ORF2 真核表达质粒鉴定核酸疫苗

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猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合表达质粒在猪体内诱导的保护性免疫反应研究

猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合表达质粒在猪体内诱导的保护性...

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：闫若潜王东方吴志明李桂喜刘梅芬王淑娟赵明军赵雪丽河南省动物疫病预防控制中心商丘市动物疫病预防控制中心

为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2/猪白介素-2(PoIL-2)嵌合重组表达质粒(rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2)在猪体内的免疫效果和免疫保护效果从而研制高效PCV2核酸疫苗,本研究将35只10日龄健康仔猪平均分成7组以进行rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2重组表达质粒或PCV2 ORF2基因原核表达的rCap蛋白免疫及免疫保护试验。共进行4次免疫肌肉注射,每次间隔2周;于第4次免疫后3周通过口腔和鼻腔途径感染PCV2细胞强毒。分别于第4次免疫后和攻毒后不同时间通过检测免疫猪血清抗体水平和外周血T淋巴细胞增殖活性、辅助性T细胞(Th)和细胞毒性T细胞(Tc)亚群的百分含量、排毒率和病毒血症阳性维持时间等指标以评价其免疫和免疫保护效果。结果表明:各免疫组猪均产生了抗PCV2特异性ELISA免疫抗体,但rCap蛋白免疫组猪抗体水平较低;rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒在猪体的免疫和免疫保护效果显著优于rpcDNA3.1/ORF2质粒;在rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒或rpcDNA3.1/ORF2质粒中添加rCap蛋白对重组质粒免疫及免疫保护效果无明显影响。因此,选取rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒为下一步研制PCV2核酸疫苗的主要成分。

关键词：猪圆环病毒2型猪白细胞介素2 rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2重组表达质粒免疫免疫保护

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广西陆川猪肺炎支原体P46基因克隆及序列分析

广西陆川猪肺炎支原体P46基因克隆及序列分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：李莹莹何颖李斌秦毅斌卢冰霞梁家幸赵武周英宁陆芹章广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西大学动物科学技术学院

为了解广西陆川猪肺炎支原体(Mhp)地方流行毒株的主要免疫原性蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,以2011年至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎(MPS)阳性病料为研究对象,抽提DNA进行PCR扩增,将克隆出与目的基因大小... 详细信息

为了解广西陆川猪肺炎支原体(Mhp)地方流行毒株的主要免疫原性蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,以2011年至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎(MPS)阳性病料为研究对象,抽提DNA进行PCR扩增,将克隆出与目的基因大小相符的片段回收,再与载体连接,转化到大肠杆菌DH5a中,筛选阳性克隆及测序,扩增获得的4株Mhp毒株(GXLC1、GXLC2、GXLC3和GXLC4),随后用DNASTAR软件对P46基因序列进行比对分析。结果表明,已克隆出的P46基因序列长度为1104bp,编码368个氨基酸,其中该序列中含有3个编码色氨酸的TGA密码子,而不是终止密码子,1个CGG为编码精氨酸的稀有密码子,而不是其他支原体中的无义密码子。所获4株P46的基因序列与所参考的猪肺炎支原体J株、232株、7448株及168株的核苷酸同源性为98.4%～99.4%,氨基酸同源性为98.6%～99.5%,毒株之间P46基因的同源性很高,保守性较强。

关键词：广西陆川猪猪肺炎支原体 P46基因克隆序列分析

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表达PRRSV GP5蛋白重组减毒猪霍乱沙门菌C78-1构建及生物学特性

表达PRRSV GP5蛋白重组减毒猪霍乱沙门菌C78-1构建及生物学特性

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张淼丹张明亮张春杰张俊峰贾艳艳何雷程相朝河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室

为了构建表达猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒PRRSVGP5蛋白口服重组减毒猪霍乱沙门氏菌活载体疫苗株,通过PCR克隆去除信号肽序列的PRRSVORF5基因,将其插入到表达载体pYA3493中,构建了重组质粒pYA3493-dORF5。将该重组质粒电转入猪霍乱沙门... 详细信息

为了构建表达猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒PRRSVGP5蛋白口服重组减毒猪霍乱沙门氏菌活载体疫苗株,通过PCR克隆去除信号肽序列的PRRSVORF5基因,将其插入到表达载体pYA3493中,构建了重组质粒pYA3493-dORF5。将该重组质粒电转入猪霍乱沙门菌基因缺失株(缺失crp,asd基因),获得PRRSVORF5基因减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpasdC78-1(pYA-dORF5)重组菌。通过对重组菌表型性状、生长特性、稳定性及安全性和定制能力进行测定,并对重组菌表达的GP5蛋白进行SDS-PAGE和Westernblot分析。结果显示,该菌株保留了在DAP阴性环境中生存的能力;不能利用麦芽糖、蔗糖及果糖等碳源,但保留了利用葡萄糖的能力,其生长速度低于强毒株C78-1,而与crpasdC78-1相比变化不明显;在体外连续传代能够稳定遗传dORF5目的基因片段。Western-blot证实重组菌表达的GP5蛋白能与PRRSV阳性血清特异性结合;通过口服途径与强毒株C78-1及猪霍乱沙门菌弱毒疫苗株C500相比,crpasdC78-1(pYA-dORF5)毒力分别下降492倍和1.3倍。通过侵袭力实验测得重组菌在血液,肠系膜淋巴结和脾脏均定植能力良好。结果表明,成功构建了能稳定表达PRRSVGP5蛋白的口服重组减毒猪霍乱沙门菌,为研究PRRSV口服基因工程疫苗奠定了良好的基础。

关键词：重组减毒猪霍乱沙门菌 PRRSV ORF5 生物学特性

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Poly(I:C)通过IFIT3作用IFN-β抑制PRRSV复制

Poly(I:C)通过IFIT3作用IFN-β抑制PRRSV复制

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张莉莉刘捷白娟杜以军王先炜刘星姜平南京农业大学农业部动物细菌学重点开放实验室

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起世界养猪业巨大经济损失主要病原之一,目前商品化疫苗和抗病毒药物保护力有限。三角形四肽重复干扰素诱导蛋白3(IFIT3)被认为是一种新的抗病毒蛋白,对先天性免疫具有重要调节作用。猪肺泡巨噬细胞感... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起世界养猪业巨大经济损失主要病原之一,目前商品化疫苗和抗病毒药物保护力有限。三角形四肽重复干扰素诱导蛋白3(IFIT3)被认为是一种新的抗病毒蛋白,对先天性免疫具有重要调节作用。猪肺泡巨噬细胞感染PRRSV后IFIT3明显增加,但IFIT3在PRRSV复制中的作用尚不清楚。采用双链RNA类似物poly(I:C)作为刺激物,在Marc-145细胞上系统地观察IFIT3在PRRSV复制过程中作用,结果显示:双链RNA类似物poly(I:C)刺激Marc-145细胞可以抑制PRRSV复制,而IFIT3表达量明显增加;过量表达猪IFIT3能显著抑制PRRSV复制,干扰Marc-145细胞中内源性IFIT3的表达,利于PRRSV增殖,且同时破坏了poly(I:C)介导的抗病毒功能;过量表达猪IFIT3可以显著增加poly(I:C)诱导的IFN-β启动子活性,相反,干扰Marc-145细胞中内源性IFIT3可以抑制poly(I:C)诱导的IFN-β启动子活性;poly(I:C)能激活Marc-145细胞中IFIT3、TBK1和磷酸化IRF3的表达。此外,尽管poly(I:C)刺激的Marc-145中IFIT3与PRRSV核衣壳(N)蛋白在细胞浆中存在共定位现象,但是共沉淀结果表明二者之间无相互作用。本研究结果表明,Poly(I:C)通过IFIT3介导MAVS信号通路抑制PRRSV复制,从而为PRRSV新型疫苗和抗病毒药物研究奠定了基础。

关键词： PRRSV IFN-β poly(I:C) IFIT3

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抗体在PRRSV感染PAM中的作用

抗体在PRRSV感染PAM中的作用

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：杨青原秦运杰王冬梅杜东颖夏平安杨明凡河南农业大学牧医工程学院兽医微生物实验室

(目的)本试验通过研究IgG对PRRSV的增殖情况的影响,来探讨抗PRRSV特异性和PRRS非特异性抗体在PRRSV-ADE中的作用。(方法)本研究分别将抗PRRS特异性IgG(2.64mg/ml)和非特异性IgG(2.63mg/ml)作倍比稀释,与等体积含200TCID50/100μL的PRRSVHn-1/06株病毒液混合,制备成一系列的感染性免疫复合物(PRRSV-IgG)和阴性抗体-病毒混合液(PRRSV+IgG),接种PAM细胞;同时将纯化的猪阴性IgG(2.63mg/ml)和兔抗猪IgG(2.64mg/ml)等体积混合制备免疫复合物(IC),分别与等体积含200TCID50/100μL的PRRSVHn-1/06株病毒液混合,制备成免疫复合物-病毒混合液(PRRSV+IC),接种PAM细胞。接种24h后用实时荧光定量PCR方法检测PRRSV的mRNA水平。同样的方法,分别将2倍稀释的PRRSV-IgG,PRRSV+IgG和4倍稀释的PRRSV+IC接种PAM细胞,用实时荧光定量PCR方法分别检测感染12、24、36和48h后不同时间段内PRRSV的mRNA水平。(结果)结果显示,一定浓度的PRRS特异性亚中和水平抗体和非特异性抗体,在感染48h时间段内均能极显著促进PRRSV在PAM细胞中增殖;而适当剂量的免疫复合物,在感染48h时间段内也均能促进PRRSV在PAM细胞中增殖。(讨论)结果表明,一定浓度的PRRS特异性亚中和水平抗体和非特异性抗体均能促进PRRSV在PAM细胞中增殖,但是不同特性的抗体对PRRSV的增殖能力存在着差异。

关键词： PRRSV 免疫复合物抗体 ADE PAM

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猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C抗原位点的原核表达与免疫活性

猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C抗原位点的原核表达与免疫活性

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：汪洋阳黄小波曹三杰文心田张鑫淼段素芬阳酉萍张丹张小会四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心

本研究开展了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的B、C抗原位点区域的原核表达与免疫活性研究。根据S基因的B、C抗原位点区序列设计一对引物,从S基因克隆质粒19T-S1扩增了含B、C抗原位点的基因片段(以SBC表示)。将SBC插入pMD19-T载体构建了... 详细信息

本研究开展了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的B、C抗原位点区域的原核表达与免疫活性研究。根据S基因的B、C抗原位点区序列设计一对引物,从S基因克隆质粒19T-S1扩增了含B、C抗原位点的基因片段(以SBC表示)。将SBC插入pMD19-T载体构建了19T-SBC,再用EcoRⅠ/HindⅢ酶切SBC亚克隆至pET-32a(+)构建了重组质粒pET-32a-SBC。将pET-32a-SBC转入BL21进行诱导表达,并确定其最佳表达条件。亲和层析纯化重组SBC蛋白,分别免疫兔和猪制备阳性血清,并测定了抗体效价和抗体活性。结果表明的SBC基因片段大小为549bp,pET-32a-SBC在大肠杆菌中的最佳表达条件为IPTG诱导浓度为0.6mmol/L、最佳诱导时间为4h,最佳诱导温度为32℃,重组SBC蛋白约为20.1KDa,主要以包涵体形式存在于细胞质中。琼脂扩散试验测定兔抗SBC蛋白血清和猪抗SBC蛋白分别为1:16和1:8,间接ELISA测定效价分别为1:1280和1:640。Westernblot结果证实重组SBC蛋白与兔抗SBC蛋白血清、猪抗SBC蛋白血清以及猪抗TGEV阳性血清均发生特异性反应。本研究建立了SBC的原核表达系统并证实重组SBC蛋白具有良好的免疫活性,为开展SBC的应用研究奠定了基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 S基因 B、C抗原位点原核表达免疫原性

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B亚型禽偏肺病毒对SPF鸡的致病性研究

B亚型禽偏肺病毒对SPF鸡的致病性研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：孙晓艳刁有祥裴苹苹王蛟刘鑫山东农业大学动物科技学院

本研究利用分离的1株B亚型禽偏肺病毒,采用静脉注射和点眼滴鼻两种途径接种SPF鸡,并在接种同时免疫新城疫弱毒疫苗。在攻毒后3、6、9、12、15d,每组随机抽取3只翅下采血,检测血液生化指标,利用血凝和血凝抑制试验检测新城疫HI抗体效价;... 详细信息

本研究利用分离的1株B亚型禽偏肺病毒,采用静脉注射和点眼滴鼻两种途径接种SPF鸡,并在接种同时免疫新城疫弱毒疫苗。在攻毒后3、6、9、12、15d,每组随机抽取3只翅下采血,检测血液生化指标,利用血凝和血凝抑制试验检测新城疫HI抗体效价;利用流式细胞术分析外周血CD4+/CD8+比值,ELISA试剂盒测定血清中IL-2、IFN-γ的含量;同时观察静脉注射组和点眼滴鼻组鸡的临床症状、剖检病变和病理组织学变化。结果表明,攻毒后9～15d,静脉注射组和点眼滴鼻组外周血CD4+/CD8+比值和血清IL-2、IFN-γ的含量均显著低于对照组(P<0.05),而静脉注射组与点眼滴鼻组间无显著差异(P>0.05);静脉注射组和点眼滴鼻组的免疫器官指数低于对照组,但各组间差异不显著(P>0.05);各组间新城疫HI抗体水平无显著差异(P>0.05);血液生化指标仅谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)在攻毒后显著升高(P<0.05),其他指标在各组间无显著差异(P>0.05);静脉注射组和点眼滴鼻组在感染后3～10d出现轻微临床症状;病理组织学检测结果显示,静脉注射组和点眼滴鼻组的呼吸道和肝脏病变最明显。综上所述,B亚型禽偏肺病毒感染SPF鸡后,在一段时间内抑制机体细胞免疫,导致免疫机能下降,并引起轻微的组织病变;B亚型禽偏肺病毒通过两种不同的攻毒途径对SPF鸡的致病性无显著差异。

关键词： B亚型禽偏肺病毒 SPF鸡致病性

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Detection and primary epidemiologic survey of Border disease virus infections in small ruminants in east China

Detection and primary epidemiologic survey of Border disease...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者： Jieyuan Jiang Wenliang Li Li Mao Xia Liu Yinhua Sun Leilei Yang Wenwen Zhang Yongqian Zhao Institute of Veterinary Medicine Jiangsu Academy of Agricultural Sciences Key Laboratory of Veterinary Biological Engineering and Technology Ministry of Agriculture National Center for Engineering Research of Veterinary Bio-products

Border disease virus belonging to the genus of pestivirus causes the border disease of small ru minants. The disease has been found worldwide, however, no any reports of BDV infection was ava ilable;and it was commonly considered that there were no the virus infections before in China. We have detected border disease viruses in the serum and tissue samples of the goats and sheep being clinical signs in east China by RT-PCR. Four BDV strains with no cytopathologic effects (CPE) w

关键词： Detection and primary epidemiologic survey of Border disease virus infections in small ruminants in east China

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减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律

减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张鑫淼文心田黄小波曹三杰汪洋阳张丹段素芬阳酉萍张小会四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心

以小鼠为动物模型研究了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa)的口服免疫规律。将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、SL7207(pVAXD)以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫小鼠的外周血及脾脏淋巴细胞增殖水平、干扰素(IFN-γ)和细胞因子IL-4水平。结果表明,SL7207(pVAXD-N-Sa)口服免疫可诱导小鼠分别产生特异性的抗TGEVS、N两种蛋白的血清IgG及肠道黏膜IgA。在整个免疫过程中,SL7207(pVAXD-N-Sa)产生的抗体水平(包括血清IgG及肠道黏膜IgA)与SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)无显著差异,均在免疫后第6w诱导产生的抗体滴度达到最高峰。免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激脾淋巴细胞的增殖作用优于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)。在免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激产生的γ-干扰素的水平高于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N),但无显著差异(P>0.05)。在整个免疫过程中,诱导产生的IL-4水平不明显,免疫组与对照组无显著差异(P>0.05)。研究结果显示SL7207(pVAXD-N-Sa)具有良好的口服免疫原性,并同时具有S和N双基因的免疫功能,本研究为进一步开展猪体的免疫评价奠定了基础。

关键词：减毒沙门氏菌传染性胃肠炎 S/N双基因小鼠口服免疫

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