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"任意字段=动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会"
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B亚型禽偏肺病毒对SPF鸡的致病性研究
B亚型禽偏肺病毒对SPF鸡的致病性研究
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
孙晓艳
刁有祥
裴苹苹
王蛟
刘鑫
山东农业大学
动物科技学院
本研究利用分离的1株B亚型禽偏肺病毒,采用静脉注射和点眼滴鼻两种途径接种SPF鸡,并在接种同时免疫新城疫弱毒疫苗。在攻毒后3、6、9、12、15d,每组随机抽取3只翅下采血,检测血液生化指标,利用血凝和血凝抑制试验检测新城疫HI抗体效价;...
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本研究利用分离的1株B亚型禽偏肺病毒,采用静脉注射和点眼滴鼻两种途径接种SPF鸡,并在接种同时免疫新城疫弱毒疫苗。在攻毒后3、6、9、12、15d,每组随机抽取3只翅下采血,检测血液生化指标,利用血凝和血凝抑制试验检测新城疫HI抗体效价;利用流式细胞术分析外周血CD4+/CD8+比值,ELISA试剂盒测定血清中IL-2、IFN-γ的含量;同时观察静脉注射组和点眼滴鼻组鸡的临床症状、剖检病变和病理组织学变化。结果表明,攻毒后9~15d,静脉注射组和点眼滴鼻组外周血CD4+/CD8+比值和血清IL-2、IFN-γ的含量均显著低于对照组(P<0.05),而静脉注射组与点眼滴鼻组间无显著差异(P>0.05);静脉注射组和点眼滴鼻组的免疫器官指数低于对照组,但各组间差异不显著(P>0.05);各组间新城疫HI抗体水平无显著差异(P>0.05);血液生化指标仅谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)在攻毒后显著升高(P<0.05),其他指标在各组间无显著差异(P>0.05);静脉注射组和点眼滴鼻组在感染后3~10d出现轻微临床症状;病理组织学检测结果显示,静脉注射组和点眼滴鼻组的呼吸道和肝脏病变最明显。综上所述,B亚型禽偏肺病毒感染SPF鸡后,在一段时间内抑制机体细胞免疫,导致免疫机能下降,并引起轻微的组织病变;B亚型禽偏肺病毒通过两种不同的攻毒途径对SPF鸡的致病性无显著差异。
关键词:
B亚型禽偏肺病毒
SPF鸡
致病性
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PRRSV不同毒力毒株诱导Toll样受体和细胞因子表达特性的比较
PRRSV不同毒力毒株诱导Toll样受体和细胞因子表达特性的比较
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
张莉莉
刘捷
白娟
王晓晔
李玉峰
姜平
南京农业大学农业部动物细菌学重点开放实验室
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因容易变异,不同流行毒株毒力差异较大,造成严重经济损失,但其免疫和致病机制尚不清楚。本研究将24头仔猪平均分成4组,每组6头,分别接种高致病性PRRSV分离株BB0907(HP),低毒力PRRSV毒株NT0801(LP),NT080...
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因容易变异,不同流行毒株毒力差异较大,造成严重经济损失,但其免疫和致病机制尚不清楚。本研究将24头仔猪平均分成4组,每组6头,分别接种高致病性PRRSV分离株BB0907(HP),低毒力PRRSV毒株NT0801(LP),NT0801第70代衍生毒株NT0801-F70(LP-der)和DMEM营养液(对照),隔离饲养观察。攻毒后0、6、9、15天用ELISA方法检测猪血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ和IL-10含量;攻毒后15天用Real-timePCR方法检测各组肺脏和脑组织中TLR2、3、7和8基因表达水平,并分离猪肺泡巨噬细胞(PAMs)和猪外周血淋巴细胞(PBMCs),分别采用TLR2、3、7/8的配体(LTA、poly(I:C)、CL097)和PRRSV刺激,检测细胞上清中细胞因子水平。结果为:与LP相比,HP组试验猪产生明显临床症状,而LP-der几乎没有毒力;HP感染猪的血清中IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ的水平高于LP或者LP-der组。LP组PAMs经poly(I:C)或CL097刺激后分泌的TNF-α和IL-1β水平显著高于DMEM营养液对照组,同时,HP组PBMCs经CL097刺激后分泌的TNF-α、IL-1β和IL-6显著高于LP和LP-der组。HP组PBMCs经CL097刺激后分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6高于LP和LP-der组,LP组PAMs经poly(I:C)、CL097刺激后TNF-α和IL-1β的分泌高于DMEM组。该结果表明,与LP和LP-der相比,HP更能诱导TLR3、7、8和TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-γ表达,从而丰富了PRRSV免疫和致病机制理论,并有助于开发更为有效的PRRSV疫苗。
关键词:
PRRSV
免疫原性
致病性
TLRs
细胞因子
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重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)对
传染
性法氏囊灭活疫苗的免疫增强机理研究
重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)对传染性法氏囊灭活疫苗的免疫增强...
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
闫若潜
闫志玲
吴志明
赵明军
程俊贞
刘梅芬
赵雪丽
谢彩华
安春霞
河南省动物疫病预防与控制中心
为了评价重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理,本研究将40只7日龄
健康
SPF鸡随机平均分为4组以进行rChIL-6蛋白对鸡
传染
性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验,于14日龄时进行免疫接种和rChIL-6蛋白注射。...
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为了评价重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理,本研究将40只7日龄
健康
SPF鸡随机平均分为4组以进行rChIL-6蛋白对鸡
传染
性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验,于14日龄时进行免疫接种和rChIL-6蛋白注射。分别检测4组鸡免疫前和免疫后不同时间血清中IBDV抗体水平、不同细胞因子表达水平、脾淋巴细胞增殖活性和外周血T淋巴细胞增殖活性等指标以揭示rChIL-6蛋白在机体内对疫苗的免疫增强机理。结果表明:免疫后7~49d,rChIL-6蛋白与IBDV灭活疫苗共免疫组(第4组)鸡血清中IBDV抗体水平极显著高于IBDV灭活疫苗对照组(p<0.01);免疫后7~35d,第4组鸡血清中的白细胞介素-4、6、2(ChIL-4、ChIL-6、ChIL-2)和γ干扰素(ChIFN-γ)等4种细胞因子的表达水平极显著高于其他3组对照组(p<0.01),α干扰素(ChIFN-α)的表达水平于免疫后14~35d期间极显著高于其他3组对照鸡(p<0.01);rChIL-6蛋白单独应用后可显著提高机体的ChIL-4、ChIL-6和ChIL-2的表达水平,但对ChIFN-γ、ChIFN-α的表达水平无明显影响。免疫后7~14d,第4组鸡的脾淋巴细胞增殖活性显著高于其他3组对照鸡(p<0.01);免疫后7~21d,第4组鸡的外周血T淋巴细胞的增殖活性稍高于其他3组对照组(p>0.05)。结果表明:rChIL-6在体液免疫和细胞免疫水平对鸡
传染
性法氏囊灭活疫苗免疫后均具有免疫增强作用;对机体体液免疫应答的增强能力高于细胞免疫应答。
关键词:
重组鸡白细胞介素-6蛋白
鸡
传染
性法氏囊病毒
灭活疫苗
免疫增强
机理
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减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律
减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
张鑫淼
文心田
黄小波
曹三杰
汪洋阳
张丹
段素芬
阳酉萍
张小
会
四川农业大学动物医学院
动物传染病与基因芯片实验室
四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心
以小鼠为
动物
模型研究了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa)的口服免疫规律。将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、SL7207(pVAXD)以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘...
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以小鼠为
动物
模型研究了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa)的口服免疫规律。将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、SL7207(pVAXD)以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫小鼠的外周血及脾脏淋巴细胞增殖水平、干扰素(IFN-γ)和细胞因子IL-4水平。结果表明,SL7207(pVAXD-N-Sa)口服免疫可诱导小鼠分别产生特异性的抗TGEVS、N两种蛋白的血清IgG及肠道黏膜IgA。在整个免疫过程中,SL7207(pVAXD-N-Sa)产生的抗体水平(包括血清IgG及肠道黏膜IgA)与SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)无显著差异,均在免疫后第6w诱导产生的抗体滴度达到最高峰。免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激脾淋巴细胞的增殖作用优于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)。在免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激产生的γ-干扰素的水平高于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N),但无显著差异(P>0.05)。在整个免疫过程中,诱导产生的IL-4水平不明显,免疫组与对照组无显著差异(P>0.05)。研究结果显示SL7207(pVAXD-N-Sa)具有良好的口服免疫原性,并同时具有S和N双基因的免疫功能,本研究为进一步开展猪体的免疫评价奠定了基础。
关键词:
减毒沙门氏菌
传染
性胃肠炎
S/N双基因
小鼠
口服免疫
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gga-miR-21过表达细胞株对
传染
性法氏囊病病毒复制的影响
gga-miR-21过表达细胞株对传染性法氏囊病病毒复制的影响
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
欧阳伟
朱向东
王永山
王永强
潘群兴
毕振威
王笑梅
江苏省农业科学院兽医研究所
农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心
南京农业大学动物医学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
兽医生物技术国家重点实验室
为研究microRNA(gga-miR-21)对
传染
性法氏囊病病毒(IBDV)复制的影响,本研究利用PCR方法从鸡的肝细胞基因组中扩增细胞pri-gga-miR-21,克隆于慢病毒表达质粒pL-EGFP中构建重组质粒pL-miR-21。将pL-miR-21和3个包装质粒pLP1、pLP2和pLP/V...
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为研究microRNA(gga-miR-21)对
传染
性法氏囊病病毒(IBDV)复制的影响,本研究利用PCR方法从鸡的肝细胞基因组中扩增细胞pri-gga-miR-21,克隆于慢病毒表达质粒pL-EGFP中构建重组质粒pL-miR-21。将pL-miR-21和3个包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共转染293FT细胞,制备含gga-miR-21基因的重组慢病毒VL+miR-21。用VL+miR-21感染DF-1细胞,经杀稻瘟菌素筛选获得了过表达gga-miR-21的细胞株DF-miR-21,用定量RT-PCR(qRT-PCR)检测表明,gga-miR-21的表达量比正常DF-1细胞提高60%。将IBDV接种于DF-miR-21细胞,在96h后,其病毒滴度(104.75TCID50/0.1mL)显著低于正常DF-1细胞的病毒滴度(108.75TCID50/0.1mL)。用生物信息学方法和双荧光素酶报告系统分析验证,在IBDV基因组VP1基因中存在gga-miR-21的结合靶点。将IBDV感染的DF-miR-21细胞,用western blot分析,VP1蛋白的表达量比正常DF-1细胞显著降低;用qRT-PCR分析,VP1mRNA水平与正常DF-1细胞没有明显差异。本实验结果表明:细胞gga-miR-21可抑制IBDV的复制,其分子作用机理是在VP1基因翻译水平上实现的。
关键词:
传染
性法氏囊病病毒(IBDV)
miRNA
gga-miR-21
慢病毒表达系统
病毒复制
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传染
性法氏囊病病毒自然重配株全基因组序列分析
传染性法氏囊病病毒自然重配株全基因组序列分析
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
朱向东
王永山
欧阳伟
潘群兴
毕振威
李月华
范红结
王笑梅
江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
南京农业大学
动物医学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室
从具有新的流行病学特征的
传染
性法氏囊病(IBD)发病鸡群中分离到两株
传染
性法氏囊病病毒(IBDV),分别命名为QL和ZZ-11,对4周龄SPF鸡的致死率分别为94%和86%。为分析该毒株的分子生物学特征,对其全基因组序列进行了测定,两个病毒株基因组...
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从具有新的流行病学特征的
传染
性法氏囊病(IBD)发病鸡群中分离到两株
传染
性法氏囊病病毒(IBDV),分别命名为QL和ZZ-11,对4周龄SPF鸡的致死率分别为94%和86%。为分析该毒株的分子生物学特征,对其全基因组序列进行了测定,两个病毒株基因组A节段长度为3260bp、B节段长度2827bp。病毒演化分析结果显示两个病毒基因组A节段的核苷酸序列与已发表的强毒株序列的同源性分别为96.8%~98.1%和96.9%~98.4%,处在IBDV超强毒株分支上;而B节段与已发表的弱毒株序列的同源性分别为89.7%~90.4%和90.0%~90.7%,位于弱毒株分支上。IBDV超强毒株和弱毒株序列特征氨基酸残基与基序分析表明,QL和ZZ-11两个病毒株的A节段VP2基因的氨基酸残基为222A、249Q、253Q、254G、256I、294I和299S,七肽基序为SWSASGS,均符合超强毒株的分子特征;而B节段777-782位核苷酸序列为GGTGCC,没有Kpn酶切位点,具有弱毒株的序列特点。以上分析结果表明,QL和ZZ-11为IBDV自然重配株,A节段源于超强毒株,而B节段源于弱毒株。
关键词:
传染
性法氏囊病病毒(IBDV)
病毒演化
重配病毒
序列分析
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学校读者
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2012年河南省猪流行性腹泻病毒S1基因遗传变异分析
2012年河南省猪流行性腹泻病毒S1基因遗传变异分析
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
陈慧娟
闫若潜
赵雪丽
赵明军
周兵强
吴志明
河南农业大学牧医工程学院
河南省动物疫病预防控制中心
为分析2012年河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增S1基因的特异性引物,利用RT-PCR方法,对2012年分离的5株PEDV毒株的S1基因进行扩增、克隆和序列测定,并对其进行遗传进化分析。结果表明:5株PEDVS1基因核...
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为分析2012年河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增S1基因的特异性引物,利用RT-PCR方法,对2012年分离的5株PEDV毒株的S1基因进行扩增、克隆和序列测定,并对其进行遗传进化分析。结果表明:5株PEDVS1基因核苷酸同源性为98.3%~99.5%,氨基酸同源性为97.1%~98.9%。与2012年国内登陆的PEDV流行株相比较核苷酸同源性为97.8%~99.2%,氨基酸同源性为97.4%~99.1%。与参考毒株CV777相比较核苷酸同源性为88.7%~89.1%,氨基酸同源性为87.3%~88.4%。同源性分析结果表明:5株分离株S1基因变异情况基本一致,存在相同的插入和缺失,并且与国内2012年登陆的毒株相比没有突变倾向;但与参考毒株CV777相比较,在第163bp~166bp处有3个核苷酸插入,在173bp~174bp之间有9个核苷酸插入,在405bp~406bp之间有3个核苷酸插入,在463bp~464bp之间有3个核苷酸缺失,这些位点核苷酸的插入和缺失导致了其编码的氨基酸相应改变。PEDVS1基因在我国只有一个血清型,但PEDV分3个群,系统进化树分析表明5株分离株S1基因与2012年国内登陆的毒株均属于Ⅲ群,与2011年国内登陆的PEDVⅠ群流行毒株相比较核苷酸同源性为88.6%~89.3%,氨基酸同源性为85.3%~86.9%,而参考毒株CV777属于Ⅱ群。目前我国流行的PEDVS1基因有PEDV群和Ⅲ群的存在,但这些毒株的致病性和抗原性差异仍有待进一步研究。
关键词:
猪流行性腹泻病毒
S1基因
遗传变异
分析
来源:
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B亚型禽白血病病毒所致免疫抑制条件下共感染禽波氏杆菌对雏鸡致病性的影响
B亚型禽白血病病毒所致免疫抑制条件下共感染禽波氏杆菌对雏鸡致...
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
郭繁霞
朱瑞良
赵雪
吴村
曲亭和
贺晓华
郭中坤
潘德琴
黄璇
李奕芙
山东农业大学动物科技学院
山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室
近些年,在养禽业中,免疫抑制性病毒所致雏鸡免疫抑制条件下继发其它病毒、细菌或寄生虫的混合感染的现象越来越普遍、越来越严重。本研究选择B亚型禽白血病病毒(ALV-B)感染雏鸡造成免疫机能低下,建立免疫抑制模型,以探索免疫抑制条件下...
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近些年,在养禽业中,免疫抑制性病毒所致雏鸡免疫抑制条件下继发其它病毒、细菌或寄生虫的混合感染的现象越来越普遍、越来越严重。本研究选择B亚型禽白血病病毒(ALV-B)感染雏鸡造成免疫机能低下,建立免疫抑制模型,以探索免疫抑制条件下共感染禽波氏杆菌后对雏鸡致病性的影响。研究中设计了ALV-B单独感染组,***单独感染组,ALV-B和***共感染组,空白对照组,并且比较相互之间的差异。通过对雏鸡免疫学指标、生长性能及病毒血症和排毒状况的检测,对二者混合感染雏鸡的影响进行了研究。结果显示,ALV-B和***共感染能引起雏鸡的免疫力低下,表现为免疫器官的发育、抗体的产生、淋巴细胞的转化、IL-2和IFN-γ的合成和分泌等受到明显抑制;混合感染组延长了***的病程,增强其对雏鸡的致病性;同时机体出现明显的生长迟滞现象,尤其是第5周龄,共感染组平均体重仅相当于对照组的40%;本研究提示ALV-B和***在雏鸡体内的增殖方面起协同作用,从而促进了病原在鸡群间的散播;而***对ALV-B导致的病毒血症有一定的抑制作用。总之,在ALV-B免疫抑制作用下,***对雏鸡的致病性显著增强。本研究为生产中家禽感染免疫抑制病毒造成的免疫抑制条件下继发其它疾病的普遍发生提供了理论依据,提醒国内外
兽医
工作者和养禽界对免疫抑制状态下继发其它病原的感染应引起密切的关注。
关键词:
B亚型禽白血病病毒
禽波氏杆菌
免疫抑制
共感染
致病性
来源:
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传染
性法氏囊病病毒VP2单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制
传染性法氏囊病病毒VP2单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
刘静静
王永山
欧阳伟
夏兴霞
潘群兴
王晓丽
毕振威
诸玉梅
朱瑞良
山东农业大学动物科技学院
江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
为研制
传染
性法氏囊病病毒(IBDV)快速检测试剂盒,用重组IBDV-VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞触合,获得三株稳定分泌抗VP2蛋白单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为1D11、2G8和2E5,抗体亚类分别为IgG1κ、...
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为研制
传染
性法氏囊病病毒(IBDV)快速检测试剂盒,用重组IBDV-VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞触合,获得三株稳定分泌抗VP2蛋白单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为1D11、2G8和2E5,抗体亚类分别为IgG1κ、IgG2bκ和IgG1κ。间接免疫荧光试验(IFA)证明,三株单抗均与VP2发生特异性反应。相加ELISA证明三株mAb识别VP2不同的抗原表位。在病毒中和试验中,1D11和2G8腹水对IBDV的中和效价分别为104和103,而2E5无中和活性。用亲和层析方法纯化1D11和2E5,分别作为包被抗体和标记抗体,建立了IBDV夹心ELISA检测方法,优化了实验条件,测定了其主要性能指标,对IBDV的最低检出量为102TCID50/mL。用夹心ELISA、AGP和RT-PCR三种方法同步检测8种实验样品,夹心ELISA与RT-PCR的检测结果一致,显著高于AGP方法。组装成的试剂盒,置于37℃保存7d、4℃保存6个月和-20℃保存24个月,其检测结果没有显著差异(P>0.05)。
关键词:
传染
性法氏囊病病毒(IBDV)
VP2
单克隆抗体(mAb)
夹心ELISA
试剂盒
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猪Toll样受体配体对PRRSV免疫佐剂作用
猪Toll样受体配体对PRRSV免疫佐剂作用
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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会
作者:
张莉莉
白娟
刘捷
王晓晔
李玉峰
姜平
南京农业大学农业部动物细菌学重点开放实验室
猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)给全球养猪业造成了巨大的经济损失,目前商品化疫苗仅能提供部分保护力。近来关于人和猪的一些研究表明Toll样受体(TLR)的配体有免疫佐剂效应,如合成的双链RNA(dsRNA)[poly(I:C)]、脂磷壁酸(LTA)和CL097...
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猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)给全球养猪业造成了巨大的经济损失,目前商品化疫苗仅能提供部分保护力。近来关于人和猪的一些研究表明Toll样受体(TLR)的配体有免疫佐剂效应,如合成的双链RNA(dsRNA)[poly(I:C)]、脂磷壁酸(LTA)和CL097。为了研究这些化合物是否诱导PRRSV特异性免疫应答效果,本试验采用PRRSV灭活病毒液(KV)与TLR配体组合后皮下免疫小鼠。结果表明,单独的poly(I:C)和CL097诱导小鼠IFN-γ和PRRSV特异性抗体水平高于KV组或KV-LTA组。将20头6周龄PCV2和PRRSV抗原、抗体均阴性的断奶仔猪,随机分为4组,第1组接种由100μgpoly(I:C)、80μgDOTAP和灭活病毒配制而成的灭活苗,第2组接种8μgCL097、80μgDOTAP和灭活病毒配制而成的灭活苗,第3组接种的是灭活病毒配制而成的灭活苗,第四组接种DMEM。每头猪通过颈部肌肉进行免疫,首免后2周加强免疫一
次
。首免后14天和28天,采血分离血清,用于PRRSV抗体及细胞因子(IL-4和IFN-γ)的检测;同时分离外周血淋巴细胞,测定淋巴细胞增殖反应,并测定细胞分泌细胞因子(IL-4和IFN-γ)的量。首免后28天,肌肉接种2×105.0TCID50 PRRSVS Y0608病毒液。攻毒后隔离饲养,每天观察仔猪临床表现,测量直肠温度。攻毒后第7、14和21天采血分离血清,用于病毒及抗体的检测。攻毒后第21天扑杀所有试验猪,采集肺脏组织,并进行病理学检查。结果为,KV混合poly(I:C)或CL097后诱导猪体产生的PRRSV特异性抗体和T淋巴细胞增殖水平高于KV组。攻毒后,与KV或对照组相比,KV-poly(I:C)或-CL097免疫组患猪产生的临床症状较轻、病毒血症更低、肺部的病理损伤更少。表明KV-poly(I:C)或-CL097能提高抵抗PRRSV的保护力。TLR3和TLR7/8的配体为新PRRSV疫苗的开发提供了候选佐剂。
关键词:
PRRSV
灭活病毒(KV)疫苗
TLR配体
佐剂
来源:
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