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机构

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13 篇 汕头大学
12 篇 prenatal diagnos...
11 篇 广州市妇女儿童医...
11 篇 暨南大学
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6 篇 中山大学附属第一...
5 篇 广东省妇产医院
5 篇 广东省计划生育科...
5 篇 广东省生物资源应...
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4 篇 长江大学
4 篇 广东省妇幼保健院...

作者

16 篇 刘丽
16 篇 王波
12 篇 苏海浩
12 篇 胡兢晶
12 篇 李秀珍
11 篇 伍苑宾
10 篇 刘向东
10 篇 盛慧英
10 篇 丁俊彩
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9 篇 陈志雄
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8 篇 郭媛媛
8 篇 程静
8 篇 密英鸽
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CRISPR/Cas9介导的水牛多位点基因打靶载体的构建

CRISPR/Cas9介导的水牛多位点基因打靶载体的构建

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广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：马小娅蒋泓刘芳唐冬生佛山科学技术学院医学院

同源重组是基因打靶的分子基础,但是细胞内发生同源重组的频率非常低。本研究组近年来从事基因打靶研究,建立了高效多位点基因打靶技术。该技术以rRNA基因间的内部转录间隔重复序列为靶位点,可使外源基因位于活跃的转录单位内,且使基因... 详细信息

同源重组是基因打靶的分子基础,但是细胞内发生同源重组的频率非常低。本研究组近年来从事基因打靶研究,建立了高效多位点基因打靶技术。该技术以rRNA基因间的内部转录间隔重复序列为靶位点,可使外源基因位于活跃的转录单位内,且使基因定点整合效率相应提高200-300倍。CRISPR/Cas9系统是细菌在噬菌体长期选择压力下进化出来的一种有效抵御外源DNA入侵的免疫机制。在细菌细胞内,CRISPR簇在其前导区的调控下转录成precrRNA,然后在tracrRNA和Cas9参与下成为加工成熟的crRNA,并引导crRNA/tracrRNA/Cas9复合体识别结合外源DNA特定序列,剪切DNA双链,沉默外源基因的表达。基于此种原理,CRISPR/Cas9系统被开发成一种新型的基因打靶系统。CRISPR/Cas9系统由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白复合物,它对靶点的识别依赖于RNA对靶DNA序列的识别,识别作用通过碱基的互补配对完成。对一个具体的DNA位点进行基因打靶,只需要在原有gRNA核心序列的基础上添加21 bp长度的核苷酸序列作为引导序列即可,此引导序列的的3′端必须存在PAM序列(NGG)。因此,在gRNA核心序列上添加引导序列的构建过程极为简单和快捷。通过生物信息学分析,本研究组在水牛细胞的rRNA基因间的内部转录间隔序列中,确定了适合gRNA识别并结合Cas9进行切割的位点,并针对该位点,根据gRNA的序列特征,设计了3条gRNA序列,并构建同时表达gRNA和Cas9的真核表达载体。此外,在gRNA识别的靶位点的两侧设计和扩增两条基因打靶同源引导序列DS1和DS2,将DS1,DS2以及EGFP基因分别插入pUC19载体中,构建成多位点基因打靶载体pUC19-DS1-EGFP-DS2。利用多位点基因打靶载体结合gRNA和Cas9的表达载体,可以在水牛细胞中进行初步的CRISPR/Cas9诱导的多位点基因打靶研究,将有可能为水牛转基因研究提供高效定点转基因方法。

关键词： CRISPR/Cas9 多位点基因打靶水牛

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烟草超表达硒代谢关联基因对硒盐胁迫的效应

烟草超表达硒代谢关联基因对硒盐胁迫的效应

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广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：陈大清梁红龙永豪彭锐彬李亚男仲恺农业工程学院生命科学学院长江大学农学院

硒代半胱氨酸甲基转移酶基因(SMT)和半胱氨酸脱硫酶基因(AtCpNiifS)是两种与硒代谢有关联的基因。前者表达的蛋白通过催化SeCys进行甲基化反应,生成甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys),它是一种非蛋白硒代氨基酸,可以减少硒直接掺入到蛋白质的... 详细信息

硒代半胱氨酸甲基转移酶基因(SMT)和半胱氨酸脱硫酶基因(AtCpNiifS)是两种与硒代谢有关联的基因。前者表达的蛋白通过催化SeCys进行甲基化反应,生成甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys),它是一种非蛋白硒代氨基酸,可以减少硒直接掺入到蛋白质的量从而提高了植物对硒的耐受性;后者在拟南芥中表达一种叶绿体蛋白,是高等植物中首个定性的NifS簇蛋白,它同时含有Cys脱硫酶活性和Se-Cys裂解酶的活性,其对硒代半胱氨酸的活性比对Cys的活性高近300倍。我们实验室通过转基因获得了这两个硒耐受关联基因的超表达烟草阳性株系(PCR鉴定的超表达烟草阳性株系),在此基础上,设计以野生型烟草为对照,用添加0、20、40、60mg/L硒酸盐溶液的MS培养基处理野生型和转基因烟草进行硒胁迫试验。分别测定叶绿素含量、过氧化氢酶活性、单株生物量(鲜重)、丙二醛含量等生理指标,结果表明:硒酸盐胁迫处理30d后,野生型烟草的过氧化氢酶活性、叶绿素含量、鲜重均显著地低于硒代半胱氨酸甲基转移酶(SMT)和半胱氨酸脱硫酶(AtCpNifS)转基因烟草,但丙二醛(MDA)含量则明显高于两个转基因品种。提示超表达SMT和AtCpNifS基因,使烟草获得了一定的硒盐耐受性。此外,用0、10、20、30mg/L亚硒酸盐对转基因和野生型烟草进行胁迫处理,其响应趋势与上述结果基本一致。总体上无论转基因还是野生烟草对亚硒酸盐的耐受性均低于硒酸盐,60mg/L硒酸盐处理野生型还有微弱生长;30mg/L亚硒酸盐处理野生型烟草生长几乎停止;转基因烟草虽有一定耐受性,但亚硒酸盐处理后生长受抑制程度亦明显加大。

关键词：野生型耐受性硒酸盐硒代谢

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单倍体联合脐血移植治疗X连锁肾上腺脑白质营养不良1例

单倍体联合脐血移植治疗X连锁肾上腺脑白质营养不良1例

引用

广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：江华刘丽程静李秀珍刘莎江敏妍蔡燕娜梁翠丽广州市妇女儿童医疗中心遗传内分泌科

目的:研究单倍体联合脐血移植治疗儿童早期脑型X连锁肾上腺脑白质营养不良的效果。方法:患儿男性,5岁,因发现血浆极长链脂肪酸异常升高8月于2013年8月入院。其哥哥在2013年4月因运动、智力倒退在我院经头颅MR、血浆极长链脂肪酸分析、AB...

目的:研究单倍体联合脐血移植治疗儿童早期脑型X连锁肾上腺脑白质营养不良的效果。方法:患儿男性,5岁,因发现血浆极长链脂肪酸异常升高8月于2013年8月入院。其哥哥在2013年4月因运动、智力倒退在我院经头颅MR、血浆极长链脂肪酸分析、ABCD1基因突变分析确诊为X-连锁肾上腺脑白质营养不良(X-ALD),儿童脑型晚期。随后对本患儿行相关检查也确诊为X-ALD,儿童脑型早期。由于无HLA相合供者,一直给予口服氢化可的松治疗至2013年12月,复查头颅MR提示病情进展,Loes评分7分,经家人同意入院行单倍体联合脐血移植治疗。采用Bu+CTX+ATG方案预处理及CAS+短疗程小剂量MTX方案预防移植物抗宿主病(GVHD)。在移植1、2d依次回输非血缘脐带血干细胞、父供子外周血干细胞(HLA-A、B、DRB1配型5/6相合),合计输注总有核细胞11.5×10^8/kg、单个核细胞7.44×10^8/kg,CD34+细胞5.68×10^6/kg。结果:患儿在移植后2d开始骨髓造血重建。移植后12d检测造血干细胞移植后嵌合体示90%为其父来源,10%为脐血来源。移植后28、48、60d检测造血干细胞移植后嵌合体示全供者植入(其父来源>95%)。移植后50d复查血浆极长链脂肪酸较前下降,ABCD1基因突变分析未见已知致病突变,也未见移植前同一突变。继续口服氢化可的松,皮质醇、ACTH维持正常范围。移植后第4月复查头颅MR提示病灶范围无继续扩大,血浆极长链脂肪酸水平继续下降,病情未见复发。目前为移植后第10月复查头颅MR提示,颅内病变进行性损害趋势减缓。结论:造血干细胞移植是治疗早期儿童脑型X-ALD的有效手段。对于无HLA相合供者,且急需进行移植治疗的患者,单倍体联合脐血移植是一个可接受的选择。

关键词：

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FTO基因在粤黄鸡胚胎期肌肉和肝脏组织中的表达规律

FTO基因在粤黄鸡胚胎期肌肉和肝脏组织中的表达规律

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广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：林惠然贾新正聂庆华华南农业大学动物科学学院

肉鸡育种中最重要的指标之一是个体体重增长速度。经过长期系统地选育,肉鸡的生长速度大大提高,目前白羽商品肉鸡只需饲养33天体重就可以达到2kg上市体重。但截至目前,控制肉鸡体重选育的遗传机制仍不明确。而在我国的南方,黄羽肉鸡由... 详细信息

肉鸡育种中最重要的指标之一是个体体重增长速度。经过长期系统地选育,肉鸡的生长速度大大提高,目前白羽商品肉鸡只需饲养33天体重就可以达到2kg上市体重。但截至目前,控制肉鸡体重选育的遗传机制仍不明确。而在我国的南方,黄羽肉鸡由于肉质优良深受消费者的喜爱,占据肉鸡市场的绝大部分。生长速度和体重的均匀度是制约黄羽肉鸡产业的主要难题。因此,鉴定控制体重增长的主效基因基因是对于快速培育黄羽肉鸡的优良品系具有重要的意义。FTO基因即俗称的肥胖基因,在小鼠的活体过表达及基因敲除实验中都显示其与体重呈显著相关,并且在高脂饲养实验中显示其能增加机体的葡萄糖耐受能力。FTO基因在哺乳动物成体中的研究很多已经见诸报道,但却缺少对禽类特别是胚胎期功能的研究。本实验通过采集粤黄鸡9～16胚龄鸡胚的胸肌和肝脏进行FTO表达定量,以β-actin作为内参基因,再通过T检验进行差异显著性检验分析。结果表明,胸肌组织中,FTO表达量从9胚龄到11胚龄变化不大,而12胚龄时表达量最高,同比9胚龄增加了4.01倍,之后又趋于平稳;肝脏组织中从9胚龄开始整体呈上升趋势,15胚龄时表达量最高,相对9胚龄的表达量上调了4.93倍。前期对小鼠的实验发现FTO在机体各个组织中都有表达,以下丘脑、肝脏和肌肉表达丰度较高。下丘脑是摄食调节中枢,而肝脏是机体能量代谢中心,预示FTO可能在能量代谢和肌肉组织生长中发挥重要作用。因此研究FTO基因在胚胎期肝脏及肌肉中的表达规律对分析FTO在胚胎期对能量代谢及肌肉生长的作用有重要意义。本研究发现FTO基因的表达在12胚龄的胸肌及15胚龄的肝脏分别出现峰值,表明FTO基因在肉鸡胚胎期的作用具有时空差,暗示其可能与胚胎期肝脏及肌肉的特定生命活动存在关联。本试验为进一步研究FTO基因对肉鸡体重的作用特别是对能量代谢及肌肉生长有关的通路影响有指示作用。

关键词： FTO基因表达规律肉鸡定量

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基于microRNA调控的绿藻持续光合放氢转基因生物反应器研究

基于microRNA调控的绿藻持续光合放氢转基因生物反应器研究

引用

广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：胡章立李辉刘燕媚庄晓珊张立深圳市海洋藻类开发与应用工程实验室深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室深圳大学生命科学学院

由于氢气在燃烧后无CO释放,被认为是最具吸引力的替代清洁能源。由于绿藻氢酶的活性是光合细菌和蓝藻中氢酶活性的100多倍,所以绿藻光合放氢是最具有应用前景的生物制氢途径。然而,绿藻氢酶受光合放氧的抑制,使得其持续放氢时间只有几... 详细信息

由于氢气在燃烧后无CO释放,被认为是最具吸引力的替代清洁能源。由于绿藻氢酶的活性是光合细菌和蓝藻中氢酶活性的100多倍,所以绿藻光合放氢是最具有应用前景的生物制氢途径。然而,绿藻氢酶受光合放氧的抑制,使得其持续放氢时间只有几秒到几分钟。解决绿藻光合制氢过程中的氧抑制问题,使藻细胞够持续光合产氢,这已经成为目前绿藻光合制氢的理论与技术瓶颈问题。Melis等（2000）在缺硫条件下培养莱茵衣藻时,发现光合放氧速率发生可逆下降现象,但线粒体的呼吸耗氧却不受影响,使莱茵衣藻细胞处于厌氧环境,解除了衣藻光合放氧对氢酶的抑制作用,从而使持续放氢时间达到70小时以上,莱茵衣藻的放氢效率大大提高。进一步研究表明:当莱茵衣藻在缺硫条件下培养时,其藻细胞光合系统Ⅱ（PSⅡ）的活性受到抑制,进一步诱导了呼吸耗氧,从而解除氧对绿藻氢酶的抑制,实现绿藻持续放氢过程。本研究对莱茵衣藻缺硫胁迫下持续放氢的分子机制进行了深入研究,先后对莱茵衣藻缺硫胁迫的microRNA组学、转录组学和蛋白组学进行了深入系统的研究,发现了microRNAs能参与莱茵衣藻光合系统Ⅱ活性的调控。针对PSⅡ活性相关蛋白的调控microRNAs或设计人工microRNA,利用Cre-MIR 11 62的表达骨架和热激启动子构建莱茵衣藻外源基因表达载体,进行microRNAs诱导过表达,结果发现:诱导microRNAs高表达,会导致PSⅡ活性相关蛋白的表达水平大大下降,并能导致藻细胞持续光合放氢时间达到72小时以上。这一新发现初步证明:基于microRNAs的调控途径完全可以替代缺硫培养条件,达到使绿藻细胞持续光合放氢的目标。该研究结果为解决绿藻连续光合放氢的理论与技术难题提供了新的途径。

关键词： microRNA 光合系统生物反应器

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CGSIV病毒分类定位

CGSIV病毒分类定位

引用

广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：李蔚董传甫周天鸿暨南大学生命科学技术学院中山大学生命科学学院

从2009年开始,在中国不同地区爆发了驯养中国大鲵的病毒性疾病。不同研究小组分离出相关的病毒,并从MCP基因和其它一些基因序列比对中认为属于虹彩病毒科,蛙病毒属。虹彩病毒科下分5个病毒属:虹彩病毒属(Iridovirus)、绿虹彩病毒属(Chlo... 详细信息

从2009年开始,在中国不同地区爆发了驯养中国大鲵的病毒性疾病。不同研究小组分离出相关的病毒,并从MCP基因和其它一些基因序列比对中认为属于虹彩病毒科,蛙病毒属。虹彩病毒科下分5个病毒属:虹彩病毒属(Iridovirus)、绿虹彩病毒属(Chloriridovirus)、淋巴囊肿病毒属(Lymphocystivirus)、蛙病毒属(Ranavirus)和肿大细胞病毒属(Megalocytivirus)。蛙病毒属(Ranavirus)可分为三个明显区别的种群:类FV3病毒(FV3-1ikeviruses),如FV3,TFV,STIV;类ATV病毒(ATV-like viruses)如ATV和EHNV;类GIV病毒(GIV-like viruses)如SGIV和GIV。前两者又称为类两栖类蛙病毒(Amphibian-like ranaviruses ALRV)。而后在研究CMTV病毒时,又提出CMTV病毒可在ALRV病毒中另外分为1个组,而且感染中国大鲵的CGSV根据MCP片段也认为属于CMTV组。这样ALRV群病毒又可分为3个组:类FV3病毒组、类ATV病毒组和CMTV组病毒。本文论文从湖南张家界驯养的中国大鲵病鲵中分离和鉴定了一株虹彩病毒(蛙病毒属),命名为中国大鲵虹彩病毒HN1 1株(Chinese giant salamander iridovims strain HN11,CGSIV-HN1 1),为探讨CGSIV-HN11与其它虹彩病毒的关系,特别是在ALRV病毒组中的位置和进化联系。本文利用系统发育树,点阵比对,重复序列比对,ORF比对等信息分析了CGSIV-HN11与虹彩病毒科,蛙病毒属,ALRV病毒和其它中国大鲵病毒之间的关系。得到下列结果:1)利用PCNA基因蛋白序列和核心基因组26个基因编码的蛋白氨基酸串联重复序列构建系统发育树。2支系统发育树表明了包括CGSIV-HN11在内的虹彩病毒已测序的23株病毒的集聚和亲缘关系。2)点阵比对和ORF比对等信息分析了包括CGSIV-HN11在内的ALRV病毒的进化关系和分子分类。推导出蛙病毒属宿主可能的变迁途径。3)重复序列比对进一步证实了ALRV病毒的进化关系、分子分类和蛙病毒属多宿主可能的变迁途径。4)讨论了CGSIV HN1 1和ATV的进化来源和亲缘关系。5)分析了CGSIV-HN11与其它中国大鲵病毒基因组之间的异同和亲缘关系。

关键词：中国大鲵信息分析 ORF CGSIV 分类定位

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基于RNA-seq数据发掘药用野生稻MYB转录因子家族抗旱基因

基于RNA-seq数据发掘药用野生稻MYB转录因子家族抗旱基因

引用

广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：夏昌选戴双凤谢海媚刘向东陈志雄华南农业大学农学院

药用野生稻(Oryzaofficinalis Wall.)基因组为CC染色体组野生稻,生长环境恶劣,积累了大量栽培稻所缺乏的抗性基因。转录组测序(RNA-seq)技术是在转录组水平上开展功能基因组学研究的强有力的工具,为非模式植物功能基因的发掘提供一个有... 详细信息

药用野生稻(Oryzaofficinalis Wall.)基因组为CC染色体组野生稻,生长环境恶劣,积累了大量栽培稻所缺乏的抗性基因。转录组测序(RNA-seq)技术是在转录组水平上开展功能基因组学研究的强有力的工具,为非模式植物功能基因的发掘提供一个有效的方法。MYB转录因子家族在水稻抗逆胁迫过程中起着重要作用。本研究分析了20%PEG模拟干旱处理的四叶期药用野生稻与未处理组的转录谱测序(RNA-seq)数据,筛选出1 54个转录本属于MYB转录因子家族,通过序列分析,发现54个转录本具有完整编码区。有三个基因响应干旱处理,分别命名为OoMYB1、OoMYB2和OoMYB3。对这三个基因进行基因组序列扩增,结果表明,OoMYB1有两个外显子和一个长为249bp的内含子;OoMYB2有三个外显子与两个长为536bp与126bp的内含子;OoMYB3只有一个外显子没有内含子,但可推测其可能还有其他剪切方式。应用q-RTPCR技术分析这三个基因及其日本晴中同源基因在相应处理后表达水平的改变,OoMYB1在处理后表达上调且其上调倍数(50倍)显著大于其栽培稻同源基因的上调倍数(7倍);OoMYB2与其栽培稻同源基因处理后都上调,两者上调倍数没有显著差异;OoMYB3处理后表达下调,而其栽培稻同源基因表达上调。为了更深入了解基因的功能,分别构建了OoMYB1和OoMYB2增强表达载体,利用农杆菌介导法转化梗稻日本晴,获得阳性转基因株系,对转化OoMYB1的T1代转基因植株四叶期幼苗非生物胁迫处理,初步分析发现转OoMYB1株系抗旱能力增强。进一步利用酵母双杂系统进行蛋白质转录激活活性验证,结果显示,OoMYB3具有转录活性。将候选基因蛋白与荧光蛋白融合并瞬时表达于水稻原生质分析其蛋白质的亚细胞定位,结果显示,OoMYB1为核质共定位蛋白;OoMYB2为质体定位蛋白;OoMYB3为核定位蛋白。

关键词：药用野生稻转录组测序抗旱 MYB转录因子

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水稻生长发育过程基因表达EST序列大规模生物信息学分析

水稻生长发育过程基因表达EST序列大规模生物信息学分析

引用

广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：宋东光王惠珍何丽烂佛山科学技术学院食品与园艺学院园艺系

阐明基因表达调控网络的分子机理成为了近年来分子生物学研究的主要领域之一,表达序列标签(expressed sequence tags,EST)分析获得的基因表达信息真实反映了细胞内基因活动的情况,包括基因的组织特异表达情况。EST生物信息学分析包括转... 详细信息

阐明基因表达调控网络的分子机理成为了近年来分子生物学研究的主要领域之一,表达序列标签(expressed sequence tags,EST)分析获得的基因表达信息真实反映了细胞内基因活动的情况,包括基因的组织特异表达情况。EST生物信息学分析包括转录组、重叠群拼接,基因注释,SSR多态性,调控网络,ORF确定,选择性剪接,microRNA及非编码RNA分析,RNA编辑,SNPs,GO注释等。本文利用FreeBSD系统工具分析NCBI获得的水稻EST序列进行大规模分析,包括blast比对,重叠群拼接,基因注释,组织特异表达等分析,为进一步构建水稻生长发育基因表达调控网络奠定基础。从NCBI的GenBank数据库下载的水稻EST序列截至2014年2月多达119万条,其中粳稻为98.7万条,籼稻为20.4万条。本文报道首先对水稻EST进行blast比对分析,将打分达到100分以上的比对序列id号合并一起,得到54万条比对的id组,在将其按照序号排序后将第一个序号相同的行合并得到7.6万条id行,再一次排序合并则返回了3.9万条id行。将id行的序列进行Phrap拼接分析,获得序列重叠群并利用获得的重叠群再次进行了blast比对分析,分值大于250的合并得到共34969个,其中只有一个重叠序列的为27556个,7413个含两个或以上的重叠群(两个以上的有2032个)。从前面的比对及重叠群分析结果我们可以初步推断水稻的基因数目约在3万多个。接着进行了重叠群序列与NCBI核酸数据库比对,返回了各个重叠群序列的功能注释,共211351多条比对结果,去除载体、基因组克隆、RNA克隆等未注释结果后得到约10万条注释含有具体内容的功能注释。对照不同组织的EST序列与比对及拼接结果,我们将进一步对各个组织的表达重叠群进行分析,以了解组织特异表达情况。所有分析工作是在FreeBSD平台完成的,通过系统的内嵌文本过滤命令使得很多大规模的自动化blast/phrap等分析也能够很快完成。本文结果无疑将对水稻生长发育过程基因表达调控的网络构建提供重要的工作基础,也将为水稻分子育种中了解基因互作等提供必要的参考。

关键词：水稻 EST分析重叠群拼接基因注释生物信息学

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核黄素反应性脂质沉积性肌病的临床特征及基因突变分析

核黄素反应性脂质沉积性肌病的临床特征及基因突变分析

引用

广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：操基清张成李亚勤杨娟梁颖茵冯善伟张旭利婧张惠丽朱瑜龄耿嘉杨丽卿中山大学附属第一医院神经科南方医科大学珠江医院神经内科解放军空军航空医学院研究所分子病理中心昆明医学院附属第一医院神经科山东烟台毓璜顶医院神经科

目的分析核黄素反应性脂质沉积性肌病的临床特征和基因突变,以实现早期诊断和治疗。方法回顾性收集自2012年8-2013年3月我院神经科收治的两个家系三例患者的临床和基因突变资料以及三例患者维生素B2治疗前后运动功能的变化。结果例1,女... 详细信息

目的分析核黄素反应性脂质沉积性肌病的临床特征和基因突变,以实现早期诊断和治疗。方法回顾性收集自2012年8-2013年3月我院神经科收治的两个家系三例患者的临床和基因突变资料以及三例患者维生素B2治疗前后运动功能的变化。结果例1,女性,主因呼吸、咳痰费力3年余就诊,以进行性呼吸肌和四肢近端肌肉无力和发热加重、心脏受累、肌源性损害的肌电图改变以及肌活检油红O染色肌纤维脂滴沉积为特点。例2和例3系同胞兄弟,分别主因运动后疲劳1年余和运动后疲劳1月余就诊,以运动后双下肢和颈部肌肉明显无力和肌源性损害的肌电图改变为特点。两个家系三例患者均携带电子转移黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)基因突变(分别为c.250G>A(Ala84Thr)纯合突变和c.250G>A(Ala84Thr)与c.524G>A(Arg175His)复合杂合突变)。经VitB2治疗后,三例患者的肌力戏剧性好转,例1在治疗10个月后呼吸肌和四肢近端肌肉无力症状完全消失,四肢活动恢复正常运动功能。1分钟可做下蹲起立动作10个以上。例2在治疗后2个月行走和跑步如常人,抬头有力,篮球运动约2h无疲劳感。例3在治疗后2个月可参加任何激烈运动且无疲劳感。结论核黄素反应性脂质沉积性肌病虽然临床上以四肢近端和躯干肌无力,不能耐受运动为主要表现,但也需注意少量以呼吸肌无力为首发症状的病例,以免漏诊和误诊。另外该病给予维生素B2单药治疗可出现明显好转或痊愈。因此,临床上不能排除核黄素反应性脂质沉积性肌病时,可尝试维生素B2试探性治疗。

关键词：核黄素基因突变分析临床特征

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饥饿条件下FoxO转录因子介导家蚕抗菌肽的表达调控

饥饿条件下FoxO转录因子介导家蚕抗菌肽的表达调控

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广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：张杰杨伟克许俊峰杨婉莹曹阳邓小娟华南农业大学动物科学学院

抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是一类体液免疫的重要效应分子。植物和动物都可以产生AMPs这种小分子的阳离子多肽,破坏微生物细胞膜,造成微生物生长停滞或者裂解。在感染条件下,昆虫主要是通过Toll和IMD信号通路来识别病原物并... 详细信息

抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是一类体液免疫的重要效应分子。植物和动物都可以产生AMPs这种小分子的阳离子多肽,破坏微生物细胞膜,造成微生物生长停滞或者裂解。在感染条件下,昆虫主要是通过Toll和IMD信号通路来识别病原物并且调控相关抗菌肽基因的表达,清除和抵抗微生物的感染。然而有研究发现,在没有病原物入侵的情况下,内源性激素以及一些胁迫环境都会诱导昆虫抗菌肽的表达,但其具体的调控方式还不清楚。近年来,在果蝇中的研究表明FoxO可以调控免疫相关基因的表达。FoxO是insulin信号转导途径下游一个重要的转录因子,在细胞中有许多重要功能,参与细胞代谢、分化、氧化应激以及细胞凋亡。正常条件下,FoxO会被ILS信号通路中关键的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt磷酸化使其滞留在细胞质中,然而当ILS被阻断或者Akt活性被抑制的情况下,FoxO不能被磷酸化从而进入细胞核调控其下游基因的表达。家蚕(Bombyx mori)是鳞翅目昆虫的模式生物,我们发现适当的饥饿处理可以提高家蚕血淋巴的抑菌活性,qRT-PCR的结果显示饥饿可以诱导家蚕抗菌肽的表达,其中以defensinB、cecropinB6的上调最为显著。为研究饥饿对家蚕抗菌肽的表达调控机制,通过双荧光素酶报告实验分析启动子活性,发现饥饿处理后正常defensinB启动子的活性明显上调,而缺失FoxO结合位点的启动子对饥饿处理不敏感。Western blot检测表明,家蚕Bm-12细胞在饥饿处理8h后,Akt磷酸化程度明显下降,可见饥饿抑制了类胰岛素信号(ILS)转导通路。在家蚕Bm-12细胞中过表达FoxO-GFP融合蛋白,发现Bm-12细胞经饥饿处理8h后,带有绿色荧光的FoxO蛋白大部分与细胞核重叠,表明饥饿促使FoxO激活进入细胞核。RNAi的研究结果表明干扰InR后的家蚕脂肪体中抗菌肽基因defensinB表达上调。上述研究表明:在家蚕体内,饥饿通过降低ILS水平激活下游转录因子FoxO,使FoxO进入细胞核进而调控相关抗菌肽基因的表达。

关键词：家蚕(Bombyx mori) 类胰岛素信号饥饿 FoxO转录因子抗菌肽

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