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184 篇 会议
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学科分类号

162 篇 农学
- 120 篇 兽医学
- 42 篇 畜牧学
- 1 篇 作物学
- 1 篇 农业资源与环境
- 1 篇 林学
13 篇 管理学
- 13 篇 农林经济管理
8 篇 医学
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- 2 篇 临床医学
- 2 篇 药学(可授医学、理...
6 篇 工学
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- 2 篇 生物工程
- 1 篇 建筑学
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- 4 篇 生物学

主题

11 篇 饲料营养
9 篇 动物医学
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7 篇 原核表达
7 篇 生产性能
7 篇 分离鉴定
6 篇 战略规划
6 篇 中药药理
6 篇 药敏试验
6 篇 流行病学
4 篇 肉鸡
4 篇 基因克隆
4 篇 程序性死亡分子1
4 篇 鸡
4 篇 奶牛
4 篇 饲养管理
4 篇 猪细小病毒
4 篇 生长性能
4 篇 程序性死亡分子1配...
4 篇 病原鉴定

机构

50 篇 河南农业大学
30 篇 河南科技学院
29 篇 河南科技大学
14 篇 河南省动物疫病预...
10 篇 河南牧业经济学院
8 篇 河南省饲草饲料站
7 篇 郑州牧业工程高等...
6 篇 信阳农林学院
6 篇 河南省动物性食品...
5 篇 河南省动物卫生监...
5 篇 新乡学院
5 篇 扬州大学
4 篇 河南畜牧规划设计...
4 篇 河南省畜牧局
3 篇 河南省纯种肉牛繁...
3 篇 山东省动物疫病预...
3 篇 河南德邻生物制品...
3 篇 平顶山郏县红牛繁...
3 篇 鹤壁市动物疫病预...
3 篇 河南省种牛遗传性...

作者

16 篇 吴志明
16 篇 闫若潜
16 篇 赵明军
13 篇 赵雪丽
11 篇 程相朝
10 篇 张春杰
8 篇 王川庆
8 篇 崔保安
8 篇 刘梅芬
7 篇 王东方
7 篇 王彦华
7 篇 陈红英
7 篇 丁轲
7 篇 李银聚
6 篇 王选年
6 篇 王新庄
6 篇 陈慧娟
6 篇 杭柏林
6 篇 陈陆
5 篇 菅复春

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共表达鹅细小病毒GPVVP3-gIL2重组乳酸杆菌口服免疫评价

共表达鹅细小病毒GPVVP3-gIL2重组乳酸杆菌口服免疫评价

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：丁轲余祖华王天奇闫文朝赵战勤刘一尘程相朝张春杰河南科技大学动物科技学院功能微生物研究中心洛阳471003 河南科技大学宏翔发酵饲料实验室河南洛阳471003 河南科技大学动物科技学院功能微生物研究中心洛阳471003

采用共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌口服免疫鹅,评价口服表达融合蛋白GPVVP3-glL2的重组乳酸杆菌的免疫效果.将重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅后检测血清GPV抗体、小肠粘液sIgA和和脾淋巴细胞增殖情况... 详细信息

采用共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌口服免疫鹅,评价口服表达融合蛋白GPVVP3-glL2的重组乳酸杆菌的免疫效果.将重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅后检测血清GPV抗体、小肠粘液sIgA和和脾淋巴细胞增殖情况,评价其免疫效果.结果表明,淋巴细胞增殖试验表明口服重组菌后能特异地刺激脾淋巴细胞增殖,且在第4、5、6周明显高于GPVVP3组和glL2组;重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅可以产生抗VP3蛋白抗体,且具有中和活性的抗体显著高于GPWP3组;小肠粘液sIgA细胞生成的数量自第2周较GPVVP3组和疫苗组显著上升.动物攻毒试验结果显示GPVVP3-glL2融合蛋白免疫组能够获得85％的保护率,表明所构建的重组乳酸杆菌口服后对GPV的攻击具有较好的免疫保护作用.因此,本试验成功构建了能稳定表达GPVVP3-IL2融合蛋白的口服乳酸杆菌工程菌,为研究其作为口服疫苗奠定了基础.

关键词：鹅细小病毒白细胞介素-2 乳酸杆菌口服疫苗融合蛋白免疫效果

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舍内环境湿度对肉仔鸡生长性能及血液指标的影响研究

舍内环境湿度对肉仔鸡生长性能及血液指标的影响研究

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：魏凤仙李绍钰胡骁飞徐彬孙全友河南省农业科学院畜牧兽医研究所河南郑州450008 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室河南郑州450002

目的：湿度是畜禽舍环境的重要环境指标之一,禽舍内相对湿度是一个被普遍认识而不重视的环境因素.在家禽生产中,湿度经常被忽视,尤其是养殖后期.研究肉仔鸡长期慢性湿度应激对肉仔鸡血离子和血清酶活的影响,可为养鸡生产中重视鸡舍湿度... 详细信息

目的：湿度是畜禽舍环境的重要环境指标之一,禽舍内相对湿度是一个被普遍认识而不重视的环境因素.在家禽生产中,湿度经常被忽视,尤其是养殖后期.研究肉仔鸡长期慢性湿度应激对肉仔鸡血离子和血清酶活的影响,可为养鸡生产中重视鸡舍湿度,提高肉鸡生产环境条件提供理论参考.方法：试验选择生长均匀的21日龄健康AA雄性肉仔鸡144只,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复8只鸡,对照组:60％相对湿度(60％ RH);处理1:35％相对湿度(35％ RH);处理2: 85％相对湿度(85％RH).试验在智能人工气候舱内完成,试验期为21天.42日龄时,测定肉仔鸡生长性能及血液生化指标.结果：试验结果显示:与对照组相比,85％高湿度显著降低试验鸡末重、日采食量和日增重(P＜0.05),饲料转化效率有降低的趋势(P＞0.05),与Yahav (2000)研究环境相对湿度(RH)对家禽的饲料转化效率影响不显著结果一致;35％低湿度有降低肉仔鸡生长性能的趋势(p＞0.05).非适宜湿度有使肉仔鸡血清钾离子降低及磷、氯离子含量升高的趋势(P＞0.05).85％湿度肉仔鸡血清乳酸脱氢酶活性和谷草转氨酶(AST)活性升高显著(P＜0.05);35％湿度使肉仔鸡血清谷草转氨酶活性升高显著(P＜0.05).结论：慢性湿度应激影响肉仔鸡的生长性能及血液生理生化指标.

关键词：肉仔鸡禽舍环境湿度生长性能血液指标

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共轭亚油酸对堆型艾美耳球虫感染鸡十二指肠黏膜免疫和脂质过氧化状态的影响

共轭亚油酸对堆型艾美耳球虫感染鸡十二指肠黏膜免疫和脂质过氧化...

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：刘永祥杨建平姜东风刘艳丽徐秋良河南牧业经济学院河南郑州 450011

目的：研究日粮添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对人工感染堆型艾美耳球虫(Eaceruvlina)肉仔鸡的生长、卵囊排出量、肠道黏膜免疫反应和氧化应激状态的影响.方法：肉仔鸡在采食21d的基础日粮或1.5％CLA日粮后,每个处理一... 详细信息

目的：研究日粮添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对人工感染堆型艾美耳球虫(Eaceruvlina)肉仔鸡的生长、卵囊排出量、肠道黏膜免疫反应和氧化应激状态的影响.方法：肉仔鸡在采食21d的基础日粮或1.5％CLA日粮后,每个处理一半重复人工感染球虫,每只肉仔鸡口服10000个Eaceruvlina孢子化卵囊.结果：与基础日粮相比,CLA日粮缓解因Eacervulina感染而造成的肉仔鸡生长抑制(P＜0.01),并降低感染后6～9 d期间的卵囊排出量(P＜0.01).无论有无球虫感染,日粮添加CLA均提高肉仔鸡十二指肠上皮内淋巴细胞(Intestinal intraepithelial lymphocyte,IEL)的CD8"T淋巴细胞百分数(P＜0.05),而对肉仔鸡十二指肠干扰素γ(Interferonγ,IFNγ)基因表达没有影响(P＞0 05).日粮CLA显著抑制因Eacervulina感染而诱导的十二指肠黏膜丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量的提高(P＜0.05),显著阻止因***感染而诱导的肉仔鸡十二指肠黏膜谷胱甘肽(***)水平的降低(P＜0.01),但不影响总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase,TSOD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活性(P＞0.05).结论：日粮添加CLA减少Eaceruvlina感染后肉仔鸡卵囊排出量,缓解***感染引起的生长抑制,其抗球虫特性在一定会程度上与提高肉仔鸡十二指肠IEL的CD8+T淋巴细胞百分数和阻止GSH水平的降低有关.

关键词：肉仔鸡堆型艾美耳球虫病共轭亚油酸十二指肠肠道黏膜免疫脂质过氧化状态

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禽支气管炎病毒Jin-13分离株在SPF鸡体内的动态分布

禽支气管炎病毒Jin-13分离株在SPF鸡体内的动态分布

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：李欢王川庆杨霞赵军陈陆王新卫常洪涛李永涛刘红英王泽霖河南农业大学禽病研究所郑州450002

本研究旨在探究禽传染性支气管炎病毒(IBV)感染SPF鸡后在体内的动态分布.针对IBV流行毒Jin-13株N基因设计并合成一对引物,建立了检测IBV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法.人工感染90日龄SPF鸡l、4、7、10、14、21、28、35天后检测心脏、肝... 详细信息

本研究旨在探究禽传染性支气管炎病毒(IBV)感染SPF鸡后在体内的动态分布.针对IBV流行毒Jin-13株N基因设计并合成一对引物,建立了检测IBV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法.人工感染90日龄SPF鸡l、4、7、10、14、21、28、35天后检测心脏、肝脏、脾脏、肺脏、气管、肾脏、十二指肠等内脏器官病毒载量,以研究体内病毒复制动态及分布情况.该方法在7.77×108～100copies.μL-1范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中7.7copies.μL-1的病毒核酸,比常规RT-PCR方法敏感100倍.结果表明鸡群从感染后第4日开始发病,各组织器官内IBV病毒含量逐渐升高,至第7日肾脏病毒含量最高达到7.13×104 copies·μL-1,其余依次为气管、肺脏、脾脏、心脏、肝脏和十二指肠.攻毒10日后各组织内含量均逐渐降低.肝脏于攻毒后21日时已检测不到IBV.于攻毒后第28日肾脏、气管和肺脏仍能检测到IBV.心脏可持续带毒35天.本研究为解释IBV的持续排毒及不同血清型IBV毒株均具有非常严重的致肾损伤现象提供了参考依据.

关键词：无特定病原鸡禽传染性支气管炎病毒 Jin-13分离株动态分布

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猪巨细胞病毒TaqMan荧光定量PCR检测的建立

猪巨细胞病毒TaqMan荧光定量PCR检测的建立

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：王东方拜廷阳吴志明闫若潜赵明军李文山赵雪丽王淑娟刘梅周口市畜禽改良站河南周口466000 河南省动物疫病预防控制中心河南郑州450008 鹤壁市动物疫病预防控制中心河南鹤壁458030

建立一种特异、灵敏、快速检测猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定量PCR方法.根据GenBank已登录的猪巨细胞病毒(Porcine Cytomegalovirus,PCMV)DNA序列设计合成特异性引物对和TaqMan荧光探针,经优化反应条件,建立了猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定... 详细信息

建立一种特异、灵敏、快速检测猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定量PCR方法.根据GenBank已登录的猪巨细胞病毒(Porcine Cytomegalovirus,PCMV)DNA序列设计合成特异性引物对和TaqMan荧光探针,经优化反应条件,建立了猪巨细胞病毒的TaqMan荧光定量PCR检测方法(fluorescent quantitative real-time PCR,FQ-PCR),进行了FQ-PCR检测方法的敏感性、特异性和重复性试验;对疑似PCMV感染临床样品进行了应用检测,并与常规PCR方法进行了比对;对FQ-PCR检测结果为PCMV阳性猪的不同内脏器官进行病毒含量比较检测.成功建立了PCMV的FQ-PCR方法,标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板浓度有良好的线性关系,相关系数为0.998;检测灵敏度可达1拷贝/μL,是常规PCR的100倍;特异性高,对pGEM-T/PCMV重组质粒扩增呈现阳性反应曲线,而对6个对照病原的扩增曲线均呈现阴性反应;对不同浓度的pGEM-T/PCMV重组质粒分别重复扩增6次,重复结果良好;对15份临床疑似PCMV感染的组织病料进行应用检测表明,其中有9份样品为阳性,与常规PCR方法检测的阳性符合率为100％.猪的内脏器管中PCMV含量最高为扁桃体,最低的为小肠.成功建立了PCMV FQ-PCR方法,可用于临床上PCMV感染猪的确诊和隐性感染猪的早期检测,对PCMV的快速诊断、综合防控及净化等具有重要意义.

关键词：猪巨细胞病毒荧光定量聚合酶链反应寡核苷酸探针检测机制

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表达HPV16 E7的重组减毒单增李斯特菌的构建及免疫应答分析

表达HPV16 E7的重组减毒单增李斯特菌的构建及免疫应答分析

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：贾艳艳殷月兰焦新安程相朝张春杰李银聚吴廷才丁轲扬州大学江苏省人兽共患病学重点试验室江苏扬州225009 河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室河南洛阳471003 扬州大学江苏省人兽共患病学重点试验室江苏扬州225009 河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室河南洛阳471003

本研究旨在构建稳定分泌表达LLO-E7融合蛋白的重组减毒单增李斯特菌,并分析重组菌诱导的免疫应答能力.首先,利用同源重组技术将人乳头瘤病毒(HPV)16型E7抗原定点整合至单增李斯特菌基因组,然后Western blot分析重组菌的E7表达,最后通过... 详细信息

本研究旨在构建稳定分泌表达LLO-E7融合蛋白的重组减毒单增李斯特菌,并分析重组菌诱导的免疫应答能力.首先,利用同源重组技术将人乳头瘤病毒(HPV)16型E7抗原定点整合至单增李斯特菌基因组,然后Western blot分析重组菌的E7表达,最后通过酶联免疫斑点试验(ELISPOT)、细胞毒性T淋巴细胞杀伤试验及酶联免疫吸附试验(ELISA)来测定重组减毒单增李斯特菌诱导的特异性免疫应答.结果显示,构建的重组菌能够稳定分泌表达具有活性的LLO-E7融合蛋白;ELISPOT结果表明,重组菌LM4△hly::E7以诱发Thl型免疫为主;同时LM4Δhly::E7能够诱导强烈的特异性CTL杀伤活性,杀伤率可达到72％,与对照组相比,差异极显著(P＜0.01);ELISA检测LM4hly::E7免疫小鼠血清中的E7抗体效价为1∶400.以上研究结果表明重组减毒菌LM4Δhly::E7能够诱导机体产生E7特异性的细胞免疫应答和体液免疫应答,同时显示出减毒李斯特菌作为疫苗载体具有广阔的应用前景.

关键词：宫颈癌疫苗减毒单增李斯特菌 E7抗原免疫应答

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共轭亚油酸对环孢酶素A注射仔猪细胞免疫反应的影响

共轭亚油酸对环孢酶素A注射仔猪细胞免疫反应的影响

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：刘永祥程伟邱荣超姜东风河南省牧业经济学院河南郑州450000

目的：研究日粮添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对细胞免疫抑制剂环孢酶素A(Ciclosporin A,CsA)注射仔猪细胞免疫反应的影响.方法：采用2×2试验设计即日粮类型(2％CLA或2％大豆油)和细胞免疫抑制处理(注射CsA或生理... 详细信息

目的：研究日粮添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对细胞免疫抑制剂环孢酶素A(Ciclosporin A,CsA)注射仔猪细胞免疫反应的影响.方法：采用2×2试验设计即日粮类型(2％CLA或2％大豆油)和细胞免疫抑制处理(注射CsA或生理盐水),48头21d断奶仔猪随即分配到4个处理组,试验期为42d.结果：注射CsA显著提高仔猪的料重比(P＜0.05),而日粮添加CLA显著降低仔猪的料重比(P＜0.05),且日粮CLA阻止因CsA注射引起的仔猪料重比提高(P＜0.05).CsA注射极显著降低胸腺CD4-和CD8+T淋巴细胞百分数(P＜0.01).日粮CLA显著提高胸腺CD4+ CD8+双阳性和CD8+单阳性T淋巴细胞百分数(P＜0.05),且阻止注射CsA引起的仔猪胸腺CD4+单阳性、CD8+单阳性T淋巴细胞百分数的降低(P＜0.01).CsA注射严重耗竭仔猪外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞(P＜0.0l).无论注射CsA与否,日粮添加CLA均提高仔猪外周血CD8+T淋巴细胞数和IL-2诱生活性(P＜0.05),显著缓解注射CsA引起仔猪外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞数的减少和IL-2诱生活性的降低(P＜0.01).在无CsA注射的情况下,日粮CLA对仔猪外周血淋巴细胞转化率没有显著影响(P＞0.05),但日粮CLA显著抑制因CsA注射的引起的仔猪外周血淋巴细胞转化率降低(P＜0.05).结论：日粮添加CLA能显著缓解因CsA注射引起的仔猪细胞免疫抑制.

关键词：仔猪饲料营养共轭亚油酸免疫反应环孢酶素A

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鸡miR-148a的组织表达及其发育调控功能预测分析

鸡miR-148a的组织表达及其发育调控功能预测分析

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：李国喜闫峰宾贾丽娟康相涛河南农业大学牧医工程学院河南省家禽种质资源创新工程研究中心郑州450002

目的：旨在明确miR-148a的时序和组织表达特征，挖掘其在鸡发育过程中的潜在调控功能。方法：采集固始鸡5个发育阶段的下丘脑、大脑、小脑、延脑、心、肝、肺、肾、胰、脾、肌胃、腺胃小肠、胸肌和腿肌共15种组织用于表达谱构建。利用pr... 详细信息

目的：旨在明确miR-148a的时序和组织表达特征，挖掘其在鸡发育过程中的潜在调控功能。方法：采集固始鸡5个发育阶段的下丘脑、大脑、小脑、延脑、心、肝、肺、肾、胰、脾、肌胃、腺胃小肠、胸肌和腿肌共15种组织用于表达谱构建。利用primerScriptTM RT reagent Kit对总RNA进行反转录;采用Hairpin-itTM miRNAs qPCRQuantitation Kit检测各组织中miR-148a的表达。利用Pictar和TargetScan算法预测miR-148a的靶基因。利用DAVID Bioinformatics Resources 6.7中的资源对预测靶基因进行Gene Ontology(GO)分析和通路分析。结果：miR-148a在胚胎期各组织中的表达水平明显低于出壳后;miR-148a在出壳后的大脑、小脑、延脑、腺胃、小肠、肝、胰和胸肌等器官组织中的表达水平随着发育进程被显著上调。miR-148a预测靶基因在胚胎器官形态发生、消化道形态发生、心血管发育、感觉器官发育、肠发育、骨骼系统发育、后脑发育、呼吸系统发育、免疫系统发育等发育过程显著富集。结论：miRNA表达谱研究是进行miRNA功能研究的第一步，可为深入了解特定miRNA生物学功能提供有益线索。本研究证明，鸡miR-148a为一广泛性表达miRNA，在所检测的5个发育阶段、15种组织中均有表达，且呈现明显的时序特征。己知miRNA通过抑制其靶mRNA的翻译而发挥生物学调控功能。本研究中，miR-148a预测靶基因的富集分析结果与其组织表达谱分析结果存在较高的一致性，这暗示miR-148a可能参与鸡多种器官组织的发育调控。

关键词：鸡 miR-148a基因组织表达生长发育调控功能

来源：评论

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重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病毒作用研究

重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病毒作用...

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：闫若潜刘毅吴志明程俊贞赵明军刘梅芬赵雪丽陈慧娟杨晓璐张书阳河南省动物疫病预防控制中心河南郑州450008

为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2融合蛋白同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临... 详细信息

为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2融合蛋白同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果.结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,重组融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低对照组.但试验组鸡的IBDV抗体水平于7dpc～42dpc则极显著低于对照组(p＜0.01).然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3dpc～21dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7dpc～21dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7dpc～14dpc)均显著高于对照组(p＜0.01).结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用.

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒鸡α干扰素鸡白细胞介素-2 重组融合蛋白抗病毒作用免疫能力

来源：评论

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鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株平衡致死系统的构建与鉴定

鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株平衡致死系统的构建与...

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：胡宁程相朝张春杰李银聚赵战勤尚珂陈桂华河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室河南洛阳471003

目的:通过构建鼠伤寒沙门氏菌SL 1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株平衡致死系统,为研制更加安全有效的减毒鼠伤寒沙门菌基因缺失株和开发适于粘膜免疫更加理想的疫苗活载体奠定基础.方法:本文以x7213(pREΔasd)为供体菌,SL1344ΔcrpΔcya为受... 详细信息

目的:通过构建鼠伤寒沙门氏菌SL 1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株平衡致死系统,为研制更加安全有效的减毒鼠伤寒沙门菌基因缺失株和开发适于粘膜免疫更加理想的疫苗活载体奠定基础.方法:本文以x7213(pREΔasd)为供体菌,SL1344ΔcrpΔcya为受体菌进行结合转移,通过自杀性质粒介导的等位交换技术两步法筛选SL 1344ΔcrpΔcyaΔasd缺失株,并对其生物学特性进行了初步研究.结果:该缺失株在有外源DAP的存在下才能够正常生长,且能稳定遗传缺失的asd基因,其血清型与亲本株SL1344ΔcrpΔcya及强毒株SL1344保持一致;其生化特性与亲本株基本相同,但与强毒株相比变化较明显,且生长速度明显减慢;雏鸡毒力试验结果表明其毒力较SL1344降低了至少105倍.结论:本研究以SL 1344ΔcrpΔcya为亲本株构建了ΔcrpΔcyaΔasd三基因缺失株,对从死亡雏鸡肝脏中分离出的细菌做PCR和血清型鉴定表明,感染雏鸡的细菌是鼠伤寒沙门菌,应用Bliss法计算,强毒株SL1344的口服感染LD50为3.32×105 CFU,重组菌株SL1344ΔcrpΔcyaΔasd(pYA3493)的口服感染最高剂量未致雏鸡死亡,初步说明其毒力较强毒株SL1344降低了至少105倍,说明其作为疫苗载体具有良好的安全性,而且依赖DAP生长,与含有asd基因的无抗性质粒互补,构成宿主载体平衡致死系统,用于外源基因稳定表达,为将鼠伤寒沙门菌开发为一种安全高效的口服多价疫苗活载体奠定了基础.

关键词：鼠伤寒沙门菌疫苗载体基因缺失株平衡致死系统

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