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184 篇 会议
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162 篇 农学
- 120 篇 兽医学
- 42 篇 畜牧学
- 1 篇 作物学
- 1 篇 农业资源与环境
- 1 篇 林学
13 篇 管理学
- 13 篇 农林经济管理
8 篇 医学
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- 2 篇 临床医学
- 2 篇 药学(可授医学、理...
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主题

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9 篇 动物医学
7 篇 免疫功能
7 篇 原核表达
7 篇 生产性能
7 篇 分离鉴定
6 篇 战略规划
6 篇 中药药理
6 篇 药敏试验
6 篇 流行病学
4 篇 肉鸡
4 篇 基因克隆
4 篇 程序性死亡分子1
4 篇 鸡
4 篇 奶牛
4 篇 饲养管理
4 篇 猪细小病毒
4 篇 生长性能
4 篇 程序性死亡分子1配...
4 篇 病原鉴定

机构

50 篇 河南农业大学
30 篇 河南科技学院
29 篇 河南科技大学
14 篇 河南省动物疫病预...
10 篇 河南牧业经济学院
8 篇 河南省饲草饲料站
7 篇 郑州牧业工程高等...
6 篇 信阳农林学院
6 篇 河南省动物性食品...
5 篇 河南省动物卫生监...
5 篇 新乡学院
5 篇 扬州大学
4 篇 河南畜牧规划设计...
4 篇 河南省畜牧局
3 篇 河南省纯种肉牛繁...
3 篇 山东省动物疫病预...
3 篇 河南德邻生物制品...
3 篇 平顶山郏县红牛繁...
3 篇 鹤壁市动物疫病预...
3 篇 河南省种牛遗传性...

作者

16 篇 吴志明
16 篇 闫若潜
16 篇 赵明军
13 篇 赵雪丽
11 篇 程相朝
10 篇 张春杰
8 篇 王川庆
8 篇 崔保安
8 篇 刘梅芬
7 篇 王东方
7 篇 王彦华
7 篇 陈红英
7 篇 丁轲
7 篇 李银聚
6 篇 王选年
6 篇 王新庄
6 篇 陈慧娟
6 篇 杭柏林
6 篇 陈陆
5 篇 菅复春

语言

186 篇 中文

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河南省牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查与分析

河南省牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查与分析

引用

中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第八届会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：杨德新闫琛博彭展吕海淼沈菩秀于井成童超王新庄河南农业大学动物医学院

引言牛病毒性腹泻（Bovine viral diarrhea,BVD）是由牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）引起的一种接触性传染病,是牛的最重要病原之一,在全球的奶牛业和肉牛业都造成严重的经济损失。BVDV感染后呈多种临床表现类型... 详细信息

引言牛病毒性腹泻（Bovine viral diarrhea,BVD）是由牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）引起的一种接触性传染病,是牛的最重要病原之一,在全球的奶牛业和肉牛业都造成严重的经济损失。BVDV感染后呈多种临床表现类型,以体温升高,食欲减少、口腔黏膜烂斑、腹泻和发育异常为主。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 ELISA 分子流行病学调查河南省

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H5N1亚型禽流感Re-4株+Re-6二价灭活疫苗临床免疫效果评价试验

H5N1亚型禽流感Re-4株+Re-6二价灭活疫苗临床免疫效果评价试验

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张盼盼赵明军赵雪丽谢彩华安春霞王东方钱勇王淑娟闫若潜吴志明河南省动物疫病预防控制中心

不少学者对当前流行的H5N1亚型禽流感病毒进行分子遗传进化研究,结果表明,近年来我国多地区出现clade2.3.2分支毒株,并且范围迅速扩大,逐渐代替clade2.3.4,成为我国大范围存在的优势毒株,重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-5株)对Clade2.... 详细信息

不少学者对当前流行的H5N1亚型禽流感病毒进行分子遗传进化研究,结果表明,近年来我国多地区出现clade2.3.2分支毒株,并且范围迅速扩大,逐渐代替clade2.3.4,成为我国大范围存在的优势毒株,重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-5株)对Clade2.3.2分支毒株不能提供完全有效的免疫保护。因此我省决定按照农业部要求,在全省范围内采用重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-4+R

关键词：二价灭活疫苗免疫效果评价试验

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中国部分地区马属动物隐孢子虫、贾第虫第虫分子流行病学

中国部分地区马属动物隐孢子虫、贾第虫第虫分子流行病学

引用

河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：菅复春张素梅王荣军齐萌王海燕刘鲜霞张龙现宁长申河南农业大学牧医工程学院河南省人兽共患病国际联合实验室郑州450002

隐孢子虫是一种重要的人兽共患原虫病病原,可以感染260多种脊椎动物,主要引起肠胃炎和急慢性腹泻为主的隐孢子虫病,已在106个国家的人群中发现隐孢子虫病的流行.隐孢子己成为人类6种常见腹泻病的病原之一.很多动物是人兽共患隐孢子虫宿... 详细信息

隐孢子虫是一种重要的人兽共患原虫病病原,可以感染260多种脊椎动物,主要引起肠胃炎和急慢性腹泻为主的隐孢子虫病,已在106个国家的人群中发现隐孢子虫病的流行.隐孢子己成为人类6种常见腹泻病的病原之一.很多动物是人兽共患隐孢子虫宿主和人感染隐孢子虫的来源.贾第虫是全球分布的脊椎动物普遍存在的肠道寄生虫,该虫主要是通过食物或者饮水传播,可引起动物腹泻,也是人类常见的腹泻病原之一.多种动物如家养和野生反刍动物及犬、猫、兔和其他啮齿动物等是人兽共患贾第虫的贮存宿主,因此,动物隐孢子虫和贾第虫流行情况和基因型分布受到人们的重视.为研究我国马属动物隐孢子虫和贾第虫临床感染情况及其公共卫生意义,从2008-2011年间,从河南,山东,内蒙古等6省区的部分地区分别采集驴、马、骡粪便样品1032份,其中球虫、蛔虫、圆线虫、绦虫、其他寄生虫卵/卵囊/包囊感染率分别为7.14％、12.6％、55.99％、3.53％、4.53％,两种及其以上寄生虫混合感染率2.58％.本次调查共检出隐孢子虫疑似样品222 (17.5％)份,感染强度较低,以幼龄马属动物感染率较高.用基于SSU rRNA基因的PCR-RFLP分析鉴定以及DNA序列分析鉴定技术对上述222份隐孢子虫阳性或疑似样品进行基因分型,结果共鉴定出5个隐孢子虫种类/基因型：Cryptosporidium donkey genotype,***, horse genotype, ***基因型, Cryptosporidium pig 1.其中新基因型有86个样品,donkey genotype为优势种类,其次为***共12个样品.经SSU rRNA基因扩增鉴定的阳性样品进一步用gp60基因进行亚型分型,发现获得的扩增产物分属三个不同的亚家族：Ⅱd、V和一个新的亚型家族和四个亚型：horse genotype家族V中两个样品均是VA11G3亚型,Ⅱd亚家族中两个样品均属ⅡdA19G1,在新家族中,有两个样品属于ⅫA16亚型,其余19个都为ⅫA16G1亚型.所属Ⅻ家族样品数量为21个,占84％,和基于SSU rRNA的分类结果一样,donkey genotype为优势种类.其中horse genotype、ⅡdA 19G1是人兽共患的隐孢子虫基因型.基因亚型ⅫA16、ⅫA 16G1是新发现的驴的隐孢子虫基因亚型,也是优势亚型,该亚型对动物的致病力、是否对人具有感染性尚不明确,需要进一步探索.对部分样品贾第虫TPI基因和GDH基因扩增并测序,经搜索同源序列、ClustalXl.83比对、phylip3.69进化分析,发现扩增出的4个TPI序列中的3个属于聚集体BIV,与聚集体BIV仅有2个碱基的变异;另一个TPI阳性样品属于聚集体Al.扩增的7个GDH序列均属聚集体BIV,两个基因位点分析的共8个贾第虫样品均属于人兽共患的聚集体A、B,这与文献报道的马的贾第虫主要种类为聚集体E有明显差别.尽管donkey genotype生物学特性尚不清楚,但***和home genotype的及贾第虫聚集体AI和BIV的发现表明,在我国,马属动物是人隐孢子虫和贾第虫感染的贮存宿主,其中***ⅡdA19G1也是河南省人感染的隐孢子虫亚型.因此,虽然马属动物隐孢子虫和贾第虫的感染率不高,感染强度不大,动物本身并不表现出临床症状,但作为贮存者和携带者在人隐孢子虫和贾第虫感染中所扮演的角色却不容忽视.

关键词：马属动物隐孢子虫贾第虫种类基因型基因亚型

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隐孢子虫LAMP检测方法建立与初步应用

隐孢子虫LAMP检测方法建立与初步应用

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：史亚东董海聚王金鸿周欢张龙现宁长申菅复春河南农业大学牧医工程学院河南省人兽共患病国际联合实验室郑州450002

隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是由隐孢子虫(Cryptosporidium)引起的一种重要的人兽共患寄生虫病,可以引起人及哺乳类、鸟类、鱼类、爬行类等动物出现腹泻或消化道症状,对于免疫缺陷或抑制病人危害更严重,甚至危及生命.随着工业化和城... 详细信息

隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是由隐孢子虫(Cryptosporidium)引起的一种重要的人兽共患寄生虫病,可以引起人及哺乳类、鸟类、鱼类、爬行类等动物出现腹泻或消化道症状,对于免疫缺陷或抑制病人危害更严重,甚至危及生命.随着工业化和城市化的快速进行,环境污染越来越严重,含有隐孢子虫卵囊的动物或人的粪便污染食物或饮水,存在人或动物感染隐孢子虫的风险,因此需要更适合的检测方法对动物粪便或环境样本进行检测.本研究的目的就在于建立一种简单、快速、特异性好、灵敏度高的分子生物学方法来检测粪便中的隐孢子虫.本研究根据微小隐孢子虫18S rRNA基因的4条特异LAMP引物设计2条环引物,初步建立并优化了LAMP(环介导等温扩增)方法来快速检测微小隐孢子虫.结果发现,LAMP反应过程可省去95℃热变性和80℃酶失活过程,最佳反应温度和时间分别是63℃和60min,MgSO4、Betaine、dNTP Mixture、Bst DNA聚合酶的最佳浓度分别是8mmol/L、0.8mol/L、0.8mmol/L、8U/25μL,外内引物最浓度分别为0.2μmol/L、1.2μn01/L,添加环引物后LAMP反应时间缩短为20min.该方法展现了较好的特异性,检测微小隐孢子虫出现LAMP特征性梯状条带,对贾第虫、肠阿米巴、柔嫩艾美耳球虫、类圆线虫检测则无特征性梯状条带;LAMP的检测限度为5×100个/μL,比常规PCR方法的检测限度低2个数量级(100倍);LAMP产物经酶切验证得到预期的结果.比较LAMP产物在3个不同浓度琼脂糖中电泳,发现在1.5％的琼脂糖中电泳时,LAMP条带较分散,比较容易观测;比较4种不同的LAMP结果判断方法,发现通过SYBR Green Ⅰ显色来判断LAMP结果可用于现场快速检测.本研究对***、***、***、***和***的一些18s rRNA基因序列进行比对,得到保守片段,利用该保守片段设计LAMP引物,建立并优化了隐孢子虫属特异可视LAMP检测方法.LAMP反应体系优化结果为：最佳反应温度和时间分别为63℃和60min,MgSO4、dNTP Mixture、Betaine、 Bst DNA聚合酶的最佳浓度分别是8mmol/L、1.0mmol/L、0.8mol/L、8U/25μL,外内引物最浓度分别为0.2μmol/L、1.6μmol/L,添加环引物后LAMP反应时间缩短为20min.建立的LAMP方法检测微小隐孢子虫、贝氏隐孢子虫、鼠隐孢子虫、安氏隐孢子虫、隐孢子虫禽基因型Ⅴ出现LAMP特征性梯状条带,经SYBR Green Ⅰ显色为(亮)绿色,而贾第虫、肠阿米巴、柔嫩艾美尔球虫、类圆线虫及双蒸水无特征性梯状条带,经SYBR Green Ⅰ显色为橙色;LAMP的检测限度是5×101个卵囊/μL,比常规PCR方法的检测限度低1个数量级(10倍);LAMP产物经酶切验证得到了预期的结果.本研究对SYBR Green Ⅰ的使用做了系统详细的优化,发现该染料的最佳使用浓度是1000×,最佳使用量是1μL,最佳观测方法是可见光直接肉眼观测,我们还创新了一种染料添加方法,可以不开盖进行显色反应,该方法经济、实用,非常适合于LAMP结果的可视判断;LAMP产物经SYBR Green Ⅰ显色的检测限度和电泳检测限度相似.对实验室保存的样本进行检测也验证了该方法的可行性,该方法的检测敏感性和巢式PCR方法的相似.

关键词：隐孢子虫环介导等温扩增聚合酶链式反应检测染色

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河南省家兔、牛肠道寄生虫流行病学调查及兔源贾第虫分子特征研究

河南省家兔、牛肠道寄生虫流行病学调查及兔源贾第虫分子特征研究

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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会

作者：刘杰齐萌刘鲜霞周欣薛周欢王荣军张龙现宁长申菅复春河南农业大学牧医工程学院河南省人兽共患病国际联合实验室郑州450002

寄生虫病是养殖业中常见的一种慢性、隐蔽性、消耗性疾病,尤其是在草食动物中,因其相应的耐受性强,患病动物往往不表现明显的临床症状,因此,没能引起人们的重视.但其潜在的经济损失很大.贾第虫病是由贾第虫引起的一种人兽共患性原虫病,... 详细信息

寄生虫病是养殖业中常见的一种慢性、隐蔽性、消耗性疾病,尤其是在草食动物中,因其相应的耐受性强,患病动物往往不表现明显的临床症状,因此,没能引起人们的重视.但其潜在的经济损失很大.贾第虫病是由贾第虫引起的一种人兽共患性原虫病,主要寄生于宿主小肠、十二指肠、胆囊等部位,可引起腹痛、腹泻和慢性吸收障碍等症状,是人类和哺乳动物肠道感染的常见寄生虫之一,主要通过人和动物、水、食物等之间的接触传播,每年给人类和养殖业带来巨大损失.为了解河南省兔和肉牛寄生虫感染情况和流行特征,笔者从2012年6月到2012年11月,对河南省17个地区30个养兔场和3个肉牛场的寄生虫感染情况进行了调查,并应用基于TPI基因的巢氏PCR方法对感染的兔贾第虫进行了种类鉴定和种系发育研究.1.为了解河南省部分地区兔和肉牛寄生虫感染情况和流行特征,应用饱和蔗糖漂浮法和卢戈氏碘液染色法对河南省郑州、荥阳、开封、兰考、商丘、济源、洛阳、周口、西华、许昌、鄢陵、安阳、滑县、内黄、濮阳、民权、灵宝17个地区30个养兔场和3个肉牛养殖场的寄生虫感染情况进行了调查.本次共采集1371份兔粪便样品和460份肉牛粪样,检出兔寄生虫阳性粪样1008份,总感染率为73.52％.共查到5种肠道寄生虫,1种体外寄生虫,分别为：球虫、贾第虫、圆线虫、拴尾线虫、阿米巴和螨虫.其中以球虫感染率最高,为61.70％,贾第虫感染率为1.09％,圆线虫感染率为24.28％,拴尾线虫感染率为2.91％,阿米巴原虫感染率为7％,螨虫感染率为3.42％;460份肉牛粪便样品共检出寄生虫阳性粪样328份,总感染率为71.3％.共查到7种肠道寄生虫,1种体外寄生虫.分别为：阿米巴、线虫、球虫、鞭虫、双腔吸虫、莫尼茨绦虫、安氏隐孢子虫和牛毛虱.其中以阿米巴感染率最高,为57.17％,线虫感染率为34.34％,球虫感染率为18.04％、鞭虫感染率为4.78％,双腔吸虫感染率为3.91％,莫尼茨绦虫感染率为1.73％,安氏隐孢子虫感染率为0.21％,牛毛虱感染率为19.13％;发现15份兔粪样为贾第虫阳性,总感染率为1.09％.结果表明,贾第虫感染率与兔日龄呈负相关,其感染率的高低饲养模式也有很大关系.2.为掌握兔源贾第虫的遗传特征,对获得的15份兔贾第虫阳性样品进行基于TPI的巢氏PCR特异性扩增,15份样品全部扩增出特异性产物,产物序列长度约为530bp.对扩增出的15个兔源贾第虫分离株的序列进行测序,并在NCBI核酸序列数据库进行同源序列搜索,应用Clustal X2.1、DNASTAR等生物学软件对序列进行比对、同源性分析及构建分子进化树.结果表明, 15个兔源分离株均属于贾第虫集聚体B.其中,有8株贾第虫分离株属于WB10基因型,有5株分离株属于B4基因型,有2株分离株属于B7基因型.贾第虫病是危害人类健康的10种主要寄生虫病之一,集聚体B为人兽共患基因型,表明我省兔贾第虫的流行具有重要的公共卫生意义.本次对河南省家兔和肉牛的肠道寄生虫流行病学调查,兔贾第虫分子生物学特性和种系关系进行了研究,为以后的草食动物寄生虫病的防控和进行后续研究提供了参考依据和物质基础.

关键词：兔肉牛寄生虫贾第虫 TPI基因种系发育分析

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浙江及周边地区猪流行性腹泻病毒的遗传进化分析

浙江及周边地区猪流行性腹泻病毒的遗传进化分析

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：田朋飞屈玲玲张国瑞邢刚金玉兰周继勇浙江大学农业部动物病毒学重点实验室

为了解猪流行性腹泻病毒在浙江及周边地区的流行情况及遗传变化规律,本研究采集2012年2月-2013年2月浙江、江西等26个猪场的169份病料进行分析,PEDV的感染率为56.2%(96/169)。对20株野毒株的5’-S-ORF3-E-M-N-3’的基因序列进行进化分析... 详细信息

为了解猪流行性腹泻病毒在浙江及周边地区的流行情况及遗传变化规律,本研究采集2012年2月-2013年2月浙江、江西等26个猪场的169份病料进行分析,PEDV的感染率为56.2%(96/169)。对20株野毒株的5’-S-ORF3-E-M-N-3’的基因序列进行进化分析,表明,他们DNA同源性为98.3-100%,与其他毒株的DNA同源性为94.6-98.4%,同时发现CH/JXZS-3L/2012、CH/JXZS-1223L/2012在N基因后12nt处有一个17nt的插入,这些基因与最近流行于中国的PEDV相似,不同于2010年之前的病毒株及疫苗毒。

关键词：猪流行性腹泻病毒系统进化分析

来源：评论

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中原地区马立克氏病病毒野毒株的分离与鉴定

中原地区马立克氏病病毒野毒株的分离与鉴定

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：余祖华丁轲罗俊滕蔓张春杰程相朝李银聚吴庭才河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室河南省动物免疫学重点实验室

2011-2012年,中原地区某些鸡场马立克氏病(MD)疫苗免疫鸡群暴发了MD,应用病毒分离技术对感染鸡进行了病毒分离,并通过PCR技术对分离的病毒进行了鉴定。从这些鸡场发病鸡的外周血中分离到17株能适应鸡胚成纤维细胞的病毒,这些病毒感染CEF... 详细信息

2011-2012年,中原地区某些鸡场马立克氏病(MD)疫苗免疫鸡群暴发了MD,应用病毒分离技术对感染鸡进行了病毒分离,并通过PCR技术对分离的病毒进行了鉴定。从这些鸡场发病鸡的外周血中分离到17株能适应鸡胚成纤维细胞的病毒,这些病毒感染CEF3-5天后均能形成典型的病毒蚀斑。应用PCR技术从这些病毒感染细胞的总DNA中均能扩增出132bp重复序列的条带,毒株间132bp重复序列扩增产物的拷贝数存在差异。结果表明分离的17株病毒均为马立克氏病毒(MDV),通过132bp重复序列扩增产物的拷贝数可以初步判定中原地区流行着不同毒力的MDV野毒株。

关键词：马立克氏病分离鉴定 132bp重复序列

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一株水貂犬瘟热病毒的分离与鉴定

一株水貂犬瘟热病毒的分离与鉴定

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：徐聪尹斐斐徐鸿陈静田夫林王贵升山东省动物疫病预防与控制中心山东大学生命科学学院

2013年7月,潍坊诸城某水貂养殖场发生传染病一例,养殖场规模大约在7000只左右,平均每天死亡十几只,对养殖户造成很大的经济损失。临床症状为精神萎靡,食欲不振,眼、鼻流出黏性分泌物,个别严重病例发生腹泻,伴有神经症状。剖检可见肺脏... 详细信息

2013年7月,潍坊诸城某水貂养殖场发生传染病一例,养殖场规模大约在7000只左右,平均每天死亡十几只,对养殖户造成很大的经济损失。临床症状为精神萎靡,食欲不振,眼、鼻流出黏性分泌物,个别严重病例发生腹泻,伴有神经症状。剖检可见肺脏出血严重,肠粘膜脱落,肝脏有针尖状出血点、质脆易碎。采集发病水貂的肝、脾、肺、脑等组织,通过RT-PCR检测确定是犬瘟热病毒(CDV),测序分析发现:该病毒与NCBI上发布的登录号为EF042819、KC590511、KC667070的毒株同源性均为96%以上,将阳性样品接种Vero细胞,通过细胞培养传代获得病毒一株,并命名为CDV-SD。

关键词：水貂犬瘟热病毒 RT-PCR 细胞培养

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水貂腹泻与神经症状并发症病例的诊断与治疗

水貂腹泻与神经症状并发症病例的诊断与治疗

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：尹斐斐王贵升徐鸿李玉杰于青海田夫林陈静孙圣福山东省动物疫病预防与控制中心

2013年7月,山东地区某水貂养殖场的水貂发生腹泻与神经症状并发症,发病率为2.0%,病死率100%。临床表现为拉稀,小貂出现头部震颤,病程5-6天后死亡,采集病貂肝脏、肺脏、脑、小肠等脏器,进行细菌分离培养和病毒病检测,检测结果表明,该病... 详细信息

2013年7月,山东地区某水貂养殖场的水貂发生腹泻与神经症状并发症,发病率为2.0%,病死率100%。临床表现为拉稀,小貂出现头部震颤,病程5-6天后死亡,采集病貂肝脏、肺脏、脑、小肠等脏器,进行细菌分离培养和病毒病检测,检测结果表明,该病例细小病毒(MEV)、犬瘟热病毒为阴性(CDV);细菌性混合感染,主要致病菌有中间葡萄球菌、奇异变形杆菌和沙门氏菌,药敏试验结果表明,该病例对复方阿莫西林、头孢他定、阿米卡星、庆大霉素等均敏感。建议改善饲养管理,添加敏感药物,一周后疫情基本控制。

关键词：水貂腹泻与神经症状并发症诊断治疗

来源：评论

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猪α干扰素基因在干酪乳酸杆菌中的表达

猪α干扰素基因在干酪乳酸杆菌中的表达

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：陈红英马世杰李坤付朋飞郭晓庆高晓云崔保安河南农业大学牧医工程学院

从质粒pMD18-IFN-α扩增出猪α干扰素(IFN-α)基因成熟蛋白序列,克隆到含有信号肽的质粒pUCK-SP中,获得重组质粒pUCK-SP-IFN-α。再将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切获取的SP-IFN-α片段插入到同样处理的干酪乳酸杆菌(***)整合型表达载体pMJ67的la... 详细信息

从质粒pMD18-IFN-α扩增出猪α干扰素(IFN-α)基因成熟蛋白序列,克隆到含有信号肽的质粒pUCK-SP中,获得重组质粒pUCK-SP-IFN-α。再将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切获取的SP-IFN-α片段插入到同样处理的干酪乳酸杆菌(***)整合型表达载体pMJ67的lac启动子下游,得到重组质粒pMJ67-SP-IFN-α,电穿孔转化***5276。抽提***基因组DNA,采用PCR及测序鉴定证实猪IFN-α基因整合到***的基因组中。通过半定量RT-PCR检测到重组***中含猪IFN-α基因的mRNA。SDS-PAGE证明猪IFN-α基因在重组***中获得了表达。通过在猪睾丸(ST)细胞上抑制猪伪狂犬病毒(PRV)致病变作用试验,发现重组猪IFN-α干酪乳酸杆菌的上清液对猪伪狂犬病毒具有抑制活性。

关键词：猪α干扰素干酪乳酸杆菌电穿孔转化抗病毒活性

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