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作者

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血管内皮祖细胞的研究

血管内皮祖细胞的研究

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第四届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨全国人体干细胞移植技术临床应用管理高层研讨会、第一届中华医学会医学工程学分会干细胞工程专业委员会学术年会

作者：韩忠朝刘鹏霞张磊中国医学科学院血液学研究所细胞产品国家工程研究中心

血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)是血管内皮细胞的前体细胞,不仅参与人胚胎血管生成,也参与出生后的血管新生过程及机体、器官损伤后的血管再生与修复,又称血管母细胞(an-gioblast)。1997年,Asaharal等首次证明循环外... 详细信息

血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)是血管内皮细胞的前体细胞,不仅参与人胚胎血管生成,也参与出生后的血管新生过程及机体、器官损伤后的血管再生与修复,又称血管母细胞(an-gioblast)。1997年,Asaharal等首次证明循环外周血中存在能分化为血管内皮细胞的前体细胞,并将其命名为血管内皮祖细胞。近年来的研究显示,内皮祖细胞在心脑血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用。本文介绍了内皮祖细胞生物学的相关内容，分析了内皮祖细胞的分离培养与体外扩增，并对内皮祖细胞的临床与实验研究进行简述。

关键词：糖尿病足干细胞移植自体移植血管内皮祖细胞内皮功能体外扩增

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64层螺旋CT冠状动脉钙化积分诊断冠心病价值的定量分析

64层螺旋CT冠状动脉钙化积分诊断冠心病价值的定量分析

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第二届放射青年医师学术论坛暨第一届全国MR功能成像学术研讨会

作者：鲁锦国吕滨唐翔宋会军陈雄彪王增武韩磊中国医学科学院阜外心血管病医院放射科心内科 100037 中国医学科学院阜外心血管病医院放射科心内科 100037

随着影像技术的发展，无创性冠状动脉成像已开始广泛应用于临床，多层螺旋CT(multi-derect rowcomputed tomogralphy，MDCT)，尤其是64层螺旋CT在空间分辨率和时间分辨率方面均能较好的满足临床诊断需要。冠状动脉钙化(Coronary arteryc... 详细信息

随着影像技术的发展，无创性冠状动脉成像已开始广泛应用于临床，多层螺旋CT(multi-derect rowcomputed tomogralphy，MDCT)，尤其是64层螺旋CT在空间分辨率和时间分辨率方面均能较好的满足临床诊断需要。冠状动脉钙化(Coronary arterycaIcification，CAC)是冠状动脉粥样硬化的标志，已为病理学家所证实，然而钙化斑块高密度导致的部分容积效应，可影响对局部管腔狭窄程度的判断。本文利用MDCT对冠状动脉钙化(Coronary calciurn score，CCS)的定量研究，探讨冠状动脉钙化与患者年龄、冠状动脉狭窄程度及范围的关系，寻找诊断冠状动脉狭窄合适的钙化积分点，以便指导临床对冠状动脉狭窄程度的诊断，特别是对具有大量钙化斑块的冠状动脉狭窄的诊断。

关键词：螺旋CT 冠状动脉钙化积分冠心病诊断价值动脉钙化

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自体外周血干细胞移植对糖尿病足患者疗效及内皮功能的影响

自体外周血干细胞移植对糖尿病足患者疗效及内皮功能的影响

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作者：王富军岳琳谷涌铨杜亚萍杨艳辉齐惠卿刘月芹高丽霞丁海霞葛洁河北医科大学第四医院内分泌科河北石家庄 050011 首都医科大学宣武医院血管外科北京 100053

糖尿病足(Diabetes Foot DF)发病率逐年增高,已成为非创伤性截肢的主要原因。其主要发病原因是下肢供血障碍,且主要为流出道闭塞,故药物治疗、血管搭桥、介入手术等疗效欠佳。自体干细胞植入缺血的肢体,可促进局部血管形成,取得明显疗效... 详细信息

糖尿病足(Diabetes Foot DF)发病率逐年增高,已成为非创伤性截肢的主要原因。其主要发病原因是下肢供血障碍,且主要为流出道闭塞,故药物治疗、血管搭桥、介入手术等疗效欠佳。自体干细胞植入缺血的肢体,可促进局部血管形成,取得明显疗效,国内外已有不少报道。但其确切机制、对全身血管功能等方面的影响,有无全身抗动脉粥样硬化作用尚不清楚。笔者于2006年1月开展了自体外周血干细胞(Peripheral Blood Stem Cells PBSC)移植治疗糖尿病下肢血管病变的临床研究,已完成36例均获得成功。在观察临床疗效同时,观察了其对DF患者内皮依赖性血管舒张功能(endothelium2 de-pendent vasodilation,EDD)的影响。

关键词：糖尿病足自体干细胞移植外周血干细胞临床疗效内皮功能

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奈米SnO2/CNT复合材料之合成及电化学性质之研究

奈米SnO2/CNT复合材料之合成及电化学性质之研究

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第一届两岸三地绿色材料学术研讨会

作者：方馨芸杨文都吴茂松蔡惠美谢清渊国立高雄应用科技大学化学工程与材料工程系中山科学研究院材料光电研究所电能材料组

本研究以溶胶-凝胶技术,由锡离子和柠檬酸-纤维素配位,形成错合物,制得奈米锡碳复合锂电池阳极材料。合成之SnO粉末,其结晶温度约300℃,而在600℃方可得到结晶性良好之陶瓷粉末。由TGA得700℃左右重量损失几乎趋于平缓。XRD分析结果配合... 详细信息

本研究以溶胶-凝胶技术,由锡离子和柠檬酸-纤维素配位,形成错合物,制得奈米锡碳复合锂电池阳极材料。合成之SnO粉末,其结晶温度约300℃,而在600℃方可得到结晶性良好之陶瓷粉末。由TGA得700℃左右重量损失几乎趋于平缓。XRD分析结果配合TEM表面型态分析可得知,材料的结构为多晶,其颗粒大小约20-30 nm,证实材料粒径的奈米化。奈米SnO/CNT复合材料,以SEM,TEM分析表面性质,结果发现热处理700℃时,复合结果最佳,随温度的上升,SnO颗粒成长,覆盖添加的奈米碳管。煅烧600℃之SnO阳极材料电容量最高,约为710mAh/g;奈米SnO/CNT复合材料,作为锂离子电池阳极材料,可降低不可逆行为,于700℃热处理SnO/CNT复合材料电容量298.66 mAh/g较700℃SnO电容量58.05 mAh/g,高出约250 mAh/g。

关键词：锂电池溶胶-凝胶法奈米SnO2/CNT复合材料

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晚期糖基化终末产物调节氧化应激对内皮祖细胞生物学功能的影响及意义

晚期糖基化终末产物调节氧化应激对内皮祖细胞生物学功能的影响及...

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作者：陈剑飞黄岚宋明宝于世勇郜攀俞洋王红第三军医大学新桥医院全军心血管病研究所重庆 400037

目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对体外培养的内皮祖细胞(EPCs)氧化应激状况的改变及对EPCs生物学功能的影响,探讨AGEs参与动脉粥样硬化发生发展的可能作用位点。方法:使用密度梯度离心法从骨髓获取单个核细胞并进行体外培养。... 详细信息

目的:观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对体外培养的内皮祖细胞(EPCs)氧化应激状况的改变及对EPCs生物学功能的影响,探讨AGEs参与动脉粥样硬化发生发展的可能作用位点。方法:使用密度梯度离心法从骨髓获取单个核细胞并进行体外培养。对贴壁细胞进行细胞化学分析,以激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素1(FITC-UEA-Ⅰ)和DiI-标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-acLDL)双染色阳性细胞为正在分化的EPCs。在EPCs中加入不同浓度AGEs,测定AGEs作用24h后。EPCs内活性氧、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSFH-PX)含量,同时测定EPCs迁移、黏附、增殖能力。结果:AGEs作用后EPCs内活性氧含量明显增加,超氧化物岐化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶含量减少,EPCs生物学功能明显减退。结论: AGEs促进EPCs内活性氧生成,减少抗氧化酶的合成,增强氧化应激,破坏细胞内环境稳定性,使细胞生物学功能受损。并且这种变化与AGEs浓度成正相关。

关键词：晚期糖基化终末产物内皮祖细胞动脉粥样硬化氧化应激抗氧化酶

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内皮祖细胞移植治疗深静脉血栓的实验研究

内皮祖细胞移植治疗深静脉血栓的实验研究

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作者：姜坤李晓强李传勇孟庆友苏州大学附属第二医院血管外科

目的:利用内皮祖细胞的生物学特性,研究细胞移植对慢性深静脉血栓的治疗作用,为慢性深静脉血栓的治疗提供一个新思路。方法:Ficoll法分离大鼠骨髓单个核细胞,EBM-2MV培养基培养扩增骨髓源性EPCs并进行鉴定。然后结扎大鼠肾下段下腔... 详细信息

目的:利用内皮祖细胞的生物学特性,研究细胞移植对慢性深静脉血栓的治疗作用,为慢性深静脉血栓的治疗提供一个新思路。方法:Ficoll法分离大鼠骨髓单个核细胞,EBM-2MV培养基培养扩增骨髓源性EPCs并进行鉴定。然后结扎大鼠肾下段下腔静脉,并在下腔静脉内注射凝血酶(200U/ml),饲养约10天,建立慢性深静脉血栓模型,并分三组:A组(25只)单纯EPCs组,移植1ml含有106个EPCs细胞悬液;B组(25只),移植EBM-2MV培养基组,移植1mlEGM-2MV培养基;C组(25只),空白对照组,不作任何处理。移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓,应用Western blot法检测下腔静脉及血栓内VEGF、BFGF的蛋白表达变化;HE染色及vWF免疫组化染色观察血栓机化再通情况。结果:体外成功培养了骨髓源性EPCs,并进行了鉴定和体外标记。成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型,EPCs移植后A组VEGF、BFGF的表达有明显的上调,B组和C组之间无统计学意义。移植后三组血栓再通毛细血管密度A组明显高于B、C组(P<0.05)。免疫组化染色vWF确定再通管道为新生血管,管道为内皮细胞组成。结论: EPCs为内皮细胞的前体细胞,移植到深静脉血栓中能够促进血管新生,加快血栓的机化和再通。

关键词：内皮祖细胞细胞移植治疗深静脉血栓血管新生血栓机化

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自体干细胞动员对缺血性心肌病炎症变化及心室重构影响的研究

自体干细胞动员对缺血性心肌病炎症变化及心室重构影响的研究

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作者：陈柯祝晓郭勇刘永浩吴珍峰沈振亚苏州大学附属第一医院心血管外科江苏苏州 215006

目的:利用骨髓干细胞动员的方法研究其对缺血性心肌病炎症变化及心室重构的影响,并对其机制进行初步的探讨。方法:20只健康太湖梅山猪,明胶海绵栓塞冠状动脉(LAD)建立猪缺血性心肌病-心肌梗死模型,随机分为4组:A组为对照组,心梗后... 详细信息

目的:利用骨髓干细胞动员的方法研究其对缺血性心肌病炎症变化及心室重构的影响,并对其机制进行初步的探讨。方法:20只健康太湖梅山猪,明胶海绵栓塞冠状动脉(LAD)建立猪缺血性心肌病-心肌梗死模型,随机分为4组:A组为对照组,心梗后未予以特殊处理;B组为心梗后3h经冠状动脉注射间骨髓间充质干细胞(MSCs)组;C组为心梗后3h后连续5d静脉注射粒细胞集落刺激因子(G-CSF)150μg/kg.d;D组为心梗1w后连续5d注射G-CSF150μg/kg.d。各组均在各项处理措施后不同时间点检测血清白介素1β(IL-1β)、血清白介素10(IL-10)、血清金属基质蛋白酶9(MMP-9)和血清血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)值,并在不同时间点以Powerlab+Millar压力导管、磁共振(MRI)检测分析心脏功能变化。心梗后第4w获取猪心,测量心梗面积。结果:急性期骨髓干细胞动员组与其他各组相比,包括左心室发展压(LVDP)、左室压上升及下降最大速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)以及舒张末期室壁厚度(EDWT)、每搏输出量(SV)在内的各项心功能指标均有明显改善(P<0.05)。急性期骨髓干细胞动员组实验终点测量心梗面积显著低于其他各组。急性期骨髓干细胞动员组IL-1β、MMP-9、Ang-Ⅱ水平显著低于其他各组(P<0.05),IL-10显著高于其他各组(P<0.05)。结论:1.心梗后急性期骨髓干细胞动员能够在早期调节抗炎细胞因子和促炎细胞因子的表达平衡漂移。2.心梗后急性期骨髓干细胞动员能够在心梗后早期、晚期抑制心室重构的进展。3.心梗后急性期骨髓干细胞动员通过缩小心梗面积,增加心输出量、并诱导左室心肌增厚改善心功能。

关键词：骨髓干细胞动员缺血性心肌病炎性因子心室重构心功能心输出量

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利用猪脱细胞血管基质和间充质干细胞构建小口径组织工程血管的初步研究

利用猪脱细胞血管基质和间充质干细胞构建小口径组织工程血管的初...

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作者：董建德孟艳汪忠镐张建谷涌铨李春民王春仁陈兵李建新吴英锋张淑文

目的:探讨利用异种脱细胞血管基质和间充质干细胞在体外构建小口径血管移植物。材料和方法:采用非离子型去垢剂和胰蛋白酶去除猪髂动脉血管壁结构细胞,对脱细胞基质进行组织学、力学检测及孔隙率评估。采用密度梯度离心和贴壁培养... 详细信息

目的:探讨利用异种脱细胞血管基质和间充质干细胞在体外构建小口径血管移植物。材料和方法:采用非离子型去垢剂和胰蛋白酶去除猪髂动脉血管壁结构细胞,对脱细胞基质进行组织学、力学检测及孔隙率评估。采用密度梯度离心和贴壁培养的方法从犬骨髓中分离出间充质干细胞并体外培养扩增。在生物反应器内采用旋转种植的方法将犬骨髓间充质干细胞种植到脱细胞基质在,并进一步在搏动性生物反应器内进行培养。采用逐渐增加剪切力的方法使种植的间充质干细胞最终能够耐受体内动脉条件下的剪切力:剪切力在2天内由1dyne/cm2逐渐增加15 dyne/cm2,然后在5dyne/cm2的剪切力下继续培养2天。结果:经过脱细胞处理后,光镜和电镜观察证实血管壁的细胞成分完全去除。自然血管的爆破强度为2975±680.53mmHg(n=6),脱细胞处理后,爆破强度为1675±283.95 mmHg(n=6),t=3.054,P=0.038。自然血管和脱细胞基质的孔隙率分别为72.51％和94.93％。间充质干细胞能够种植到脱细胞基质的管腔面上,细胞在剪切力的作用下成为基本融合。细胞呈高度伸长状态并且其排列与流体的方向一致。结论:小口径血管移植物可以通过将间充质干细胞种植到异种脱细胞血管基质并在搏动性生物反应器内培养的方法进行构建。

关键词：组织工程血管间充质干细胞血管移植物脱细胞细胞外基质生物反应器

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自体骨髓单个核细胞可安全治疗前壁心肌梗死后心力衰竭

自体骨髓单个核细胞可安全治疗前壁心肌梗死后心力衰竭

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作者：聂颖高炜郭艳红崔鸣张永珍郭丽君郭静萱北京大学第三医院心内科分子心血管学教育部重点实验室 100083

目的:评价经冠状动脉内注射自体骨髓单个核细胞治疗前壁心肌梗死后心力衰竭的安全性。方法:15例前壁心肌梗死患者接受PCI和药物治疗同时,进行冠状动脉内自体骨髓单个核细胞移植。细胞治疗前后,测定血浆及骨髓中CD34+细胞含量;移植... 详细信息

目的:评价经冠状动脉内注射自体骨髓单个核细胞治疗前壁心肌梗死后心力衰竭的安全性。方法:15例前壁心肌梗死患者接受PCI和药物治疗同时,进行冠状动脉内自体骨髓单个核细胞移植。细胞治疗前后,测定血浆及骨髓中CD34+细胞含量;移植前、后24h和随访12m时分别测定血浆红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、网织红细胞、D-二聚体(D-Dimer)、N末端B型钠尿肽原(NT-proB-NP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肌钙蛋白T(TNT)、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及尿酸(UA)水平。入组及随访12m时行动态心电图(Holter)评价心律失常发生情况,观察并记录移植前后及随访过程中发生的不良反应。结果:分离后骨髓单个核细胞数量为(1.48±0.52)×109;CD34+细胞占(1.28±0.17)％,数量为(18.57±9.14)×106。移植前循环血中CD34+细胞占(0.33±0.12)％,术后24h达峰值(1.30±0.35)％,72h基本恢复至移植前水平(0.53±0.21)％。移植后24h血浆NT-proBNP无显著性变化[(1864.00±369.7)pg/mlvs.(1864.00±412.60)pg/ml,P>O.05]，随访12m时较基线显著降低[(701.05±154.60)Pg/ml vs.(1864.00±369.7)pg/ml，P<0.05]。移植后2、6、14、24h血浆TNT、CK-MB水平较前均无显著变化。与基线相比，移植后24h、12m血浆RBC、Hb、网织红细胞、D-Dimer、hs-CRP及肝、肾功能均无显著变化。术后12m随访未见恶性心律失常发生。结论:经冠状动脉注射骨髓单个核细胞未引起微栓塞、炎症反应及心肌损伤，不诱发或加重心力衰竭，对血液系统、肝、肾功能及凝血功能无影响，长期随访未见与移植相关的严重副作用。本研究提示经冠状动脉注射自体骨髓单个核细胞治疗方法是安全、可行的。

关键词：前壁心肌梗死心力衰竭骨髓单个核细胞骨髓移植治疗安全性

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GCA-HIF-1α-GCC提高移植骨髓干细胞存活率及治疗缺血性心肌病的实验研究

GCA-HIF-1α-GCC提高移植骨髓干细胞存活率及治疗缺血性心肌病的...

引用

作者：祝晓劳伟杰胡雁秋沈振亚苏州大学附属第一医院心血管外科江苏苏州 215006

目的:运用双定点基因突变的方法重组HIF-1α,转染干细胞并抑制其凋亡,提高治疗缺血性心肌病的效果,并进一步探讨其机理。方法:健康梅山猪的骨髓MSCs分离纯化后,流式细胞仪检测细胞周期。构建低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible fac... 详细信息

目的:运用双定点基因突变的方法重组HIF-1α,转染干细胞并抑制其凋亡,提高治疗缺血性心肌病的效果,并进一步探讨其机理。方法:健康梅山猪的骨髓MSCs分离纯化后,流式细胞仪检测细胞周期。构建低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α的突变体pcDNA3.1+-GCA-HIF-1α-GCC,并用慢病毒包装。对转染细胞进行表达分析。以慢病毒包装系统(pPACKH1-Lentivector PackagingKit)介导的GCA-HI-1α-GCC基因转染猪MSCs,检测转GCA-HIF-1α-GCC基因的骨髓干细胞和原代细胞、转慢病毒空载体细胞的凋亡情况。将健康梅山猪(24只)随机分成4组(空白组、DMEM组、MSCs组和转基因组),应用明胶海绵栓塞冠状动脉左前降支(LAD)建立心梗模型。8周后评估心功能。各组注射液经心导管注射到LAD栓塞处远端。分别于注射后1周、2周、4周、6周和8周,行评估心功能和活体内干细胞标记情况,检测血浆BNP、VEGF在梗死后和移植前后的变化;组织学观察各组移植细胞的情况,测算心梗面积,以及检测过氧化酶体增殖物激活型受体α(peroxisomeproliferatoractivated receptor α,PPARα)、原位杂交检测AKT蛋白表达。结果:转染MSCs 48小时后,可检测到强荧光出现。Western blot免疫印迹技术表明HIF-1α蛋白表达产物的分子量与已知分子量相符。转GCA-HIF-1α-GCC基因的MSC的凋亡率明显降低。Western blot表明转基因的MSCs,HO-1蛋白表达增高而Bax表达降低。移植前,梗死心脏的左室舒张末径(EDWT)增加,每搏量(SV)明显下降,血流动力学LVDP、±dp/dt-max下降明显。移植后,C、D组的心功能较移植前有改善(P<0.05);与A、B两组和移植前相比,梗死区的收缩功能和血流灌注均有所改善(P<0.05),移植组的心梗面积缩小(P<0.05);D组更为明显(与C组比较,P<0.05)。与A、B和C组相比,D组PPARα、AKT蛋白表达明显增加(P<0.05)。D组的增加比C组显著。与A、B两组相比,C、D组梗死区的毛细血管密度明显增加(P<0.05),D组的增加比C组显著,同样比较,BNP降低明显(P<0.05),D组的降低比C组显著。C、D组VEGF的水平在梗死后有所增加,在细胞移植后一周出现高峰,后逐渐下降。结论:使用携带目的基因GCA-HIF-1α-GCC的慢病毒系统转染猪的骨髓干细胞可使其稳定表达HIF-1α。转GCA-HIF-1α-GCC的MSCs在体外较MSCs更能耐受缺氧和乏营养所诱发的凋亡,其原因与HIF-1α稳定表达促使干细胞分泌HO-1抑制Bax有关。MSCs能在宿主心肌组织中存活,通过防止梗死区变薄、抑制收缩功能异常而改善左室功能。GCA-HIF-1α-GCC转染MSCs可以使移植的干细胞更能耐受移植早期的缺氧和乏营养的微环境,减少细胞的凋亡,增加参与心肌修复的干细胞的绝对数量,从而可更加显著改善心脏功能,PPAR、AKT在其中起非常重要的作用。应用GCA-HIF-1α-GCC基因和MSCs自体移植是治疗缺血性心肌病的一种有效的方法。

关键词：基因治疗间充质干细胞自体移植缺血性心肌病双定点基因突变

来源：评论

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