目的:前列腺特异抗原(Prostate Specific antigen,PSA)是前列腺癌诊断的重要标志物,由此建立前列腺癌早期诊断新方法。方法:培养前列腺癌LNCaP细胞,从中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增PSA-DNA,用洋地黄毒苷标记此基因,通过二次酶放大时间...
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目的:前列腺特异抗原(Prostate Specific antigen,PSA)是前列腺癌诊断的重要标志物,由此建立前列腺癌早期诊断新方法。方法:培养前列腺癌LNCaP细胞,从中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增PSA-DNA,用洋地黄毒苷标记此基因,通过二次酶放大时间分辨荧光测量技术测定靶PSA DNA。结果:成功培养了LNCaP细胞,提取的总RNA浓度为1701μg/μl,OD260/OD280=2.1404(>2.0),纯度很好,经RT-PCR成功扩增出PSA基因,扩增产物长度与目的基因理论值一致,用时间分辨荧光测量技术测定靶PSADNA标准曲线线性范围好,灵敏度高,准确度和精密度分别为90%和15%左右。结论:本研究为以PSA基因为靶标的前列腺癌早期诊断新方法的研究奠定了坚实的基础。
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