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电离辐射对小鼠脾细胞中调节性T细胞及其相关分子表达的影响

电离辐射对小鼠脾细胞中调节性T细胞及其相关分子表达的影响

引用

第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：金顺子孟凡旭董娟聪吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室

背景:调节性T细胞是一群起重要功能的免疫细胞群体,目前研究认为,CD4+CD25+Treg细胞在整个调节性T细胞群体中起主要作用,具有典型的调节抑制功能;它可主动维持自身稳定、参与免疫应答、调节免疫耐受、维持免疫平衡、阻止损伤性免疫病理... 详细信息

背景:调节性T细胞是一群起重要功能的免疫细胞群体,目前研究认为,CD4+CD25+Treg细胞在整个调节性T细胞群体中起主要作用,具有典型的调节抑制功能;它可主动维持自身稳定、参与免疫应答、调节免疫耐受、维持免疫平衡、阻止损伤性免疫病理反应,其数量和功能的异常是有关人类和其他动物某些自身免疫性疾病、炎症反应性疾病的重要原因之一。本实验在电离辐射诱导不同免疫效应的大量前期工作基础上,着重观察调节性T细胞(Treg)及Foxp3的基因与蛋白水平表达变化,进一步阐明不同剂量电离辐射诱导的免疫效应机理,为辐射免疫学理论提供新的实验依据。目的:观察不同剂量X射线照射后不同时间小鼠脾细胞中调节性T细胞和Foxp3的表达变化,探讨X射线对调节性T细胞以及相关因子Foxp3的影响。方法:应用雄性ICR小鼠,用X.S.S.205(FZ)型固定式X射线深部治疗机进行不同剂量的全身照射(0.075Gy和2Gy),于照射后不同时间(0、4、8、16、24、48和72 h)处死,取脾脏,分别应用流式细胞术和RT-PCR法检测调节性T细胞和Foxp3的表达水平。结果:高、低剂量X射线全身照射后,小鼠脾细胞CD4+CD25+Treg细胞百分比在照射后8 h达高峰,随后一直保持较高水平(p<0.05)。Foxp3在mRNA水平,低剂量照射后变化不明显,而高剂量照射后于24 h时间点形成峰值;Foxp3在蛋白水平,小剂量照射后并无有显著变化;而大剂量照射后于16 h形成峰值,随后略有下降,但仍保持较高水平。结论:调节性T细胞及相关分子Foxp3的不同变化可能成为高、低剂量X射线诱导不同免疫效应的原因之一。

关键词：电离辐射调节性T细胞 Foxp3 免疫效应

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氡和吸烟联合作用致肺癌及相关机制研究

氡和吸烟联合作用致肺癌及相关机制研究

引用

第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：朱茂祥魏菡李平杨陟华潘秀颉曹珍山米娜陈忠民军事医学科学院放射与辐射医学研究所

目的:氡及其子体和吸烟是引起肺癌的两种主要因素。流行病学研究表明,氡及吸烟的联合致肺癌作用存在协同效应,动物实验提示。两者作用的先后顺序不同,致癌危险存在差异,氡照射后吸烟,危险度协同增加,反之,危险度只与氡照射相关。本研究... 详细信息

目的:氡及其子体和吸烟是引起肺癌的两种主要因素。流行病学研究表明,氡及吸烟的联合致肺癌作用存在协同效应,动物实验提示。两者作用的先后顺序不同,致癌危险存在差异,氡照射后吸烟,危险度协同增加,反之,危险度只与氡照射相关。本研究对氡和吸烟联合致细胞损伤作用进行观察,为氡和吸烟致肺癌危险评价提供实验依据。材料与方法:用α粒子和卷烟烟气凝集物(CSC)单独和/或联合处理人支气管上皮细胞(BEP2D),以两者单独作用的损伤效应和作为预期值,评价两者联合作用的生物学效应及先后作用顺序的差异。结果:α粒子或CSC单独作用BEP2D细胞后,观察到多种与剂量相关的损伤效应,包括细胞膜完整性的破坏(LDH释放增多)、线粒体受损(NAO的消耗增加)、脂质过氧化的增强(MDA含量增多)、细胞内氧化还原稳态的失衡(SOD、SeGPx活力的降低及GSH的消耗增多)、DNA损伤(彗星现象及8-OH-dG增多)以及细胞凋亡和死亡等,提示这些损伤可能是物理和化学因素诱发癌症的共同事件。两者联合作用BEP2D细胞,与相同剂量α粒子或CSC比较,损伤效应显著增高,并呈现与作用顺序有关的复杂性:先α粒子照射后CSC染毒组,所有指标均明显高于两者加和作用的预期值,呈现协同效应,而先CSC染毒后α粒子照射组,反应细胞氧化损伤的多种指标(细胞内活性氧、NAO、MDA、SOD、SeGPx等)低于预期值,特别是在CSC剂量较低时更明显,提示两者作用的先后顺序对细胞的作用存在差异。此外,低水平的α粒子(0.25Gy)和CSC(1?g/ml),单独或联合作用BEP2D细胞,经体外长期培养,传代至35代时,仅先α粒子照射后CSC染毒组细胞出现了明显的恶性转化特征(如失去接触抑制,锚着独立生长能力增强;细胞周期处于失控状态等),而其他处理组均未观察到与正常细胞有显著差异的变化,进一步证实氡和吸烟致肺癌危险与其作用先后顺序有关。结论:α粒子和CSC联合对细胞的作用与两者作用的先后顺序有关,先α粒子照射后CSC染毒比先CSC染毒后α粒子照射组具有更高的致癌危险性。

关键词： α粒子相关机制

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64排CT胰腺疾病低剂量应用研究

64排CT胰腺疾病低剂量应用研究

引用

第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：陈大伟胡博奇吉林大学公共卫生学院

低剂量扫描历来是国际上非常有争议的课题,对于怎样用合适剂量进行CT扫描许多科学工作者都有各自的研究方法,怎样用最简易的方法进行剂量的检测对于患者的保护有着至关重要的帮助。本研究考虑到腹部为高频扫描部位,随着人们生活水平的提... 详细信息

低剂量扫描历来是国际上非常有争议的课题,对于怎样用合适剂量进行CT扫描许多科学工作者都有各自的研究方法,怎样用最简易的方法进行剂量的检测对于患者的保护有着至关重要的帮助。本研究考虑到腹部为高频扫描部位,随着人们生活水平的提高,丰富的食物选择常常造成胰腺疾病的发生,从而成为现代社会的高发病,而其本身易于体表测量,属于辐射敏感组织,容易发生辐射损伤,本文主旨以逐步降低毫安量以达到最低剂量诊断图像,当对患者进行腹部检查的过程中选择最优化的参数,减低剂量照射,优化腹部剂量参数,尽量选择低剂量腹部扫描参数,最终达到保护患者权益和人身健康。保护患者。一般认为0.5-2.0Gy的辐射剂量可导致食欲减退、恶心、呕吐,大于5Gy可出现多次呕吐和腹泻。而胰腺受照剂量过大可导致胰腺癌的发生几率增高,本研究共选取110名患者进行CT检查,事先量好腹围,选取同一层进行扫描,在固定螺距的情况下降低电流,选出最好的曝光电流,而又不使图像失去诊断价值。最后采用数据分析,用sigma plot 2000进行对数据的测算。数据结果显示:在采用GE lightspeed VCT进行腹部检查时低剂量扫描和常规剂量扫描相比。对于GE lightspeed VCT腹部部扫描的过程中,随着腹围增加,胰腺的受照剂量也随之增加。对其进行的统计学运算,其曝光量幅度达到61.8%～74%单次容积CT剂量指数降幅可达69.9%～83.3%腹围在<90cm范围内最低电流可控制在80mA～60 mA范围之内,腹围在90-110cm范围内最低电流可控制在90 mA～70 mA范围之内,腹围在>110cm范围内最低电流可控制在10 mA-90 mA范围之内,在进行评片的过程中经过三位教授的评价得到了低剂量应用的准确参数,在图像的诊断过程中对于准确的病灶界限,器官轮廓,形态三位医生都给出了精准的评价标准,使此次试验得到了很好的准确度。对于GElightspeed VCT在进行腹部检查的过程中,随着电流的降低,胰腺的受照剂量也降低。

关键词：胰腺多层螺旋CT 受照剂量影像质量

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低剂量X射线诱导小鼠睾丸中细胞色素c和caspase-3表达的变化

低剂量X射线诱导小鼠睾丸中细胞色素c和caspase-3表达的变化

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第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：王志成龚守良吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室

背景:睾丸生精细胞对电离辐射非常敏感,但也依据细胞类型和所处的周期时相而不同,很低剂量的辐射就可以引起睾丸生精细胞凋亡增加。线粒体参与细胞凋亡调控是一个重要的机制。线粒体膜间蛋白细胞色素c(cytochrome c,Cyt c)在电离辐射刺... 详细信息

背景:睾丸生精细胞对电离辐射非常敏感,但也依据细胞类型和所处的周期时相而不同,很低剂量的辐射就可以引起睾丸生精细胞凋亡增加。线粒体参与细胞凋亡调控是一个重要的机制。线粒体膜间蛋白细胞色素c(cytochrome c,Cyt c)在电离辐射刺激下释放出来,继而激活caspase凋亡途径,启动细胞凋亡发生。目的:研究0.025～0.2 Gy X射线照射后3-24 h小鼠睾丸内细胞色素c(Cyt c)和caspase-3 mRNA和蛋白的表达的变化,探讨Cyt c和caspase-3基因在X射线诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的作用。方法:选用健康昆明小鼠,体重(20±2)g,取不同剂量(0.025,0.05,0.075,0.1和0.2 Gy)照射后12 h和0.075 Gy照射后不同时间(3,6,12,18和24 h)的睾丸组织进行检测。Trizol试剂提取总RNA,逆转录反应生成cDNA后,采用实时PCR(Real-time PCR)试剂盒,Cyt c和caspase-3引物进行扩增,相对标准曲线法分析相对表达;小鼠睾丸提取总蛋白后进行Western blot法检测Cyt c和caspase-3蛋白表达的变化。结果:Real-timePCR结果显示不同剂量照射后12 h,Cyt c和caspase-3 mRNA表达随剂量增加而增加,Cyt c mRNA在0.1Gy照射时表达最大,而后稍有降低;caspase-3则在0.075 Gy照射后表达最大,而后稍有降低。0.075 Gy照射后Cyt c和caspase-3 mRNA表达随着时间延长表达增多,24 h时达到最大,表现出一定的剂量效应规律。Western blot结果显示,Cyt c和caspase-3蛋白在0.075 Gy照射时表达量最大;而照射后不同时间Gytc和caspase-3蛋白表达在12 h时最大,表现出一定的时程效应规律。结论:低剂量(0.025～0.2 Gy)X射线能够诱导小鼠睾丸生精细胞中细胞色素c和caspase-3 mRNA和蛋白的表达,并且具有剂量和时程规律性。提示这些基因在低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸生精细胞的凋亡调控中起到重要作用。

关键词：细胞色素生精细胞凋亡小鼠睾丸 caspase-3 低剂量

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分割剂量电离辐射对肿瘤细胞多药耐药的影响

分割剂量电离辐射对肿瘤细胞多药耐药的影响

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第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：刘晓冬焦本蒸孔德娟吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室

肿瘤细胞多药耐药(multi-drug resistance,MDR)是当前困扰临床肿瘤药物治疗疗效的主要障碍,肿瘤细胞对化疗或放疗存在交叉抵抗现象。早年据美国癌症协会统计,每年死亡的癌症患者中61%与原发耐药、33%与获得性耐药有关。因此如何逆转肿... 详细信息

肿瘤细胞多药耐药(multi-drug resistance,MDR)是当前困扰临床肿瘤药物治疗疗效的主要障碍,肿瘤细胞对化疗或放疗存在交叉抵抗现象。早年据美国癌症协会统计,每年死亡的癌症患者中61%与原发耐药、33%与获得性耐药有关。因此如何逆转肿瘤细胞多药耐药成为临床肿瘤治疗中的难点。多药耐药机制复杂多样,其中以P-糖蛋白(P-gp)的高表达以及抗凋亡有关。电离辐射作为肿瘤治疗领域三大治疗手段之一,能导致细胞周期停滞和凋亡,但就目前研究结果而言,电离辐射与多药耐药之间的关系比较复杂,既有电离辐射诱导肿瘤细胞多药耐药的报道,又有电离辐射逆转肿瘤细胞多药耐药的研究。因此电离辐射对于肿瘤细胞多药耐药现象的作用取决于肿瘤细胞的种类、特性以及电离辐射的品质等等。同时如何优化电离辐射治疗方案以达到逆转肿瘤细胞获得性多药耐药现象将成为肿瘤治疗的重要组成部分。本实验主要观察不同电离辐射方案对卵巢癌细胞多药耐药性的影响,以寻找能更好逆转肿瘤细胞多药耐药治疗方案。实验结果表明:1、常规分割剂量放射治疗(2Gy/次,1次/天)下SKOV3细胞,无论总吸收剂量在5Gy还是10Gy均能诱导其对长春新碱(VCR)和顺铂(CCD)耐药性的增强;2、常规分割剂量放射治疗(2Gy/次,1次/天)SKVCR 2.0细胞(长春新碱耐药株),当总吸收剂量为10Gy时,其对顺铂(CCD)和依托泊甙(VP-16)的耐药性显著降低,成功逆转其对二者的获得性耐药;3、超分割放射治疗(1Gy/次,2次/天,间隔4h)下不能诱导SKOV3细胞广泛性耐药,而对于SKVCR 2.0耐药细胞而言,超分割放射治疗目前并无任何逆转意义。因此常规分割剂量放射治疗对于以顺铂为一线化疗药物的卵巢癌能成功的逆转其由长春新碱诱导的多药耐药现象,同时应用超分割放射治疗(1Gy/次,2次/天,间隔4 h)能降低常规分割放射治疗诱导的卵巢癌耐药性的增高,将为卵巢癌的放射治疗分割方案的规划提供依据,并为进一步实验研究奠定基础。

关键词：肿瘤细胞放射治疗治疗方案分割剂量多药耐药电离辐射

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α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化的变化

α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化的变化

引用

第七届中国核学会“三核”论坛暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：胡迎春周乔丹张博杨柳宋博强李刚吴德昌霍艳英军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 重庆医科大学病理学教研室重庆400016 军事医学科学院附属307医院北京100071

目的：应用甲基化芯片技术,分析α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化谱的变化.方法：选用北京博奥生物有限公司的晶芯⑧人DNA甲基化谱检测cDNA芯片,分别提取α粒子诱发永生化人支气管上皮恶性转化细胞BERP35T... 详细信息

目的：应用甲基化芯片技术,分析α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNA甲基化谱的变化.方法：选用北京博奥生物有限公司的晶芯⑧人DNA甲基化谱检测cDNA芯片,分别提取α粒子诱发永生化人支气管上皮恶性转化细胞BERP35T4和对照细胞BEP2D的基因组DNA,用非甲基化敏感酶MseI对基因组DNA进行酶切,然后在酶解后的片段两端连接上连接臂,再用甲基化敏感内切酶进行消化,最终消化产物进行PCR扩增和荧光标记,最后与甲基化芯片进行杂交.杂交结果用LuxScan10KA双通道激光扫描仪进行扫描,采用LuxScan 3.0图形分析软件对芯片图像进行分析,并把图像信号转化为数字信号,对芯片上的数据进行归一化处理,最后以差异倍数为1.5的标准来确定差异表达基因.结果：α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化后,有16个基因发生了甲基化的改变,其中,甲基化上调基因有9个,下调基因7个.鞘氨酸激酶SKIP,蛋白质磷酸酶PPP3CC,蛋白激酶MAP2K6,杀伤细胞免疫球蛋白受体KIR2DL1、KIR2DL4、KIR3DP1,锌指蛋白ZNF493、ZNF100,转录因子NKX2-5、TFAP2D、DR1,钾离子通道KCNJ16,肉瘤抗原CCDC18,以及甘油甲酸酯结合蛋白FNBP1L、同源异形蛋白IRX4、HSF蛋白片段EPB41L3、TCP10蛋白等都发生了甲基化改变.结论：应用甲基化芯片成功分析了α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化后甲基化谱的变化,证实了电离辐射能够通过改变细胞的表观遗传修饰而在肿瘤发生中发挥一定的作用,并成功获得了辐射致癌过程中由辐射引起的DNA甲基化变化信息.

关键词： α粒子甲基化芯片恶性转化 BEP2D细胞

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中国核电发展现状与前景

中国核电发展现状与前景

引用

第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：叶奇瑧

2010年7月国际核电发展状况(一)目前世界共有441座核电站运行268座压水堆核电站94座沸水堆核电站23座气冷堆核电站40座重水堆核电站12座石墨水冷堆核电站3座快中子堆核电站压水堆核电站共发电249GW(2.49亿千瓦)占核电总发电量65%主要是... 详细信息

2010年7月国际核电发展状况(一)目前世界共有441座核电站运行268座压水堆核电站94座沸水堆核电站23座气冷堆核电站40座重水堆核电站12座石墨水冷堆核电站3座快中子堆核电站压水堆核电站共发电249GW(2.49亿千瓦)占核电总发电量65%主要是第二代核电站

关键词：核电机组双层安全壳压水堆核电站非能动安全壳冷却系统核级泵中国核学会三代核电核电站建设核电发展现状与前景

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环耙明衍生物增加人乳腺癌细胞MDA-MB-231放射敏感性及体外抑制其生长、转移的研究

环耙明衍生物增加人乳腺癌细胞MDA-MB-231放射敏感性及体外抑制其...

引用

第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：车俊焦旸徐加英张玉松胡旭东王利利樊赛军苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院苏州市肿瘤放射生物学重点实验室

研究背景:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一。我国是乳腺癌的传统低发区,但近年来发病率逐年增加,势头迅猛。因此开发新的抗癌及抑制乳癌细胞生长、转移的药物迫在眉睫。环耙明是从藜芦类植物中提取的一种甾体类化合物,2000年Taipa... 详细信息

研究背景:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一。我国是乳腺癌的传统低发区,但近年来发病率逐年增加,势头迅猛。因此开发新的抗癌及抑制乳癌细胞生长、转移的药物迫在眉睫。环耙明是从藜芦类植物中提取的一种甾体类化合物,2000年Taipale J等人研究发现环耙明具有抗肿瘤功效,随后环耙明的抗肿瘤作用在多种肿瘤细胞中得到证实。但环耙明存在一缺陷:在有机及无机化合物中的溶解度较低。本实验室通过改变环耙明局部亚基及空间结构得到一系列衍生物(命名为SLX系列药物),很好地解决了溶解问题。本研究通过MTT、划痕、克隆等实验观察SLX药物对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增敏、生长、转移的影响,并通过流式细胞术及Western-blot实验探讨其涉及的作用机制。目前环耙明及其衍生物影响肿瘤细胞放射敏感性的报道只有一篇,国内未见相关研究报道。目的:研究环耙明衍生物SLX-26和SLX-43对人乳腺癌细胞MDA-MB-231放射敏感性、生长及转移的影响及其作用机制。方法:以离体人类乳腺癌MDA-MB-231细胞为材料,通过光镜镜检、MTT细胞存活实验、划痕实验、克隆形成实验、流式细胞技术以及Western-blot实验,观察环耙明衍生物对MDA-MB-231细胞放射敏感性、生长形态、细胞增殖、细胞周期以及转移的影响和蛋白表达水平。结果:与对照组相比,SLX-26和SEX-43能明显增加MDA-MB-231细胞对放射线的敏感性,影响其正常的生长形态,降低细胞存活率。SLX-26和SLX-43抑制MDA-MB-231细胞的转移,且呈一定浓度-依赖关系。SLX-26和SLX-43可以降低XRCCI、EGFR及NF-kB的表达。结论:环耙明衍生物SLXs能增加DA-MB-231放射敏感性,抑制MDA-MB-231细胞生长、转移,且呈浓度依赖的特点,其作用机制可能与其降低XRCCl、EGFR及NF-kB的表达有关。

关键词：人乳腺癌细胞放射敏感性 MDA-MB-231 体外抑制

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低浓度鞣花酸对GM细胞的辐射防护作用

低浓度鞣花酸对GM细胞的辐射防护作用

引用

第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：杨江涛龚红霞娄艳徐加英焦旸樊赛军苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院苏州市肿瘤放射生物学重点实验室

目的:鞣花酸(ellagic acid)是一种广泛存在于各种软果、坚果如石榴、草莓、葡萄、黑莓和胡桃中的一种天然多酚组分,其中以石榴皮中的含量最为丰富。近年来的研究表明,鞣花酸具有多种生物学活性:抑制肿瘤细胞的增殖和扩散、诱导肿瘤细胞... 详细信息

目的:鞣花酸(ellagic acid)是一种广泛存在于各种软果、坚果如石榴、草莓、葡萄、黑莓和胡桃中的一种天然多酚组分,其中以石榴皮中的含量最为丰富。近年来的研究表明,鞣花酸具有多种生物学活性:抑制肿瘤细胞的增殖和扩散、诱导肿瘤细胞发生细胞凋亡、抗氧化作用和抗辐射作用。其中对前三种作用的研究已经展开了大量的工作,而对抗辐射作用的研究目前还很少。本研究探讨了鞣花酸对-射线作用后的正常人成纤维细胞株GM的辐射防护作用。方法:采用CCK-8法检测鞣花酸对正常人成纤维细胞株GM的细胞毒性作用。取对细胞无明显毒性作用的鞣花酸浓度,于-射线照射前加入到细胞培养液中,培养24h,单一剂量的X射线照射后利用胎盼蓝染色计数法得到不同鞣花酸浓度下细胞的存活率。取细胞存活率最高的鞣花酸浓度,于-射线照射前加入到细胞培养液中,培养24h,不同剂量的-射线照射后得到鞣花酸对GM细胞有效的辐射防护范围。以上不同浓度、不同剂量作用后的样品均用流式细胞仪进行细胞周期的检测、荧光显微镜进行细胞凋亡率的检测、Western blot法进行DNA损伤修复相关抗体的检测以及RT-PCR法进行DNA损伤修复相关基因的检测。结果:当鞣花酸浓度在0-5mol/L时对正常人成纤维细胞株GM无明显的毒性作用。取0、1、2、4 mol/L浓度的鞣花酸作用于GM细胞24h,然后进行4Gy剂量的-射线照射,发现在2 mol/L时细胞的存活率最高。取2mol/L浓度的鞣花酸作用于GM细胞24h,然后进行2、4、6、8Gy剂量的-射线照射,发现在6Gy以内鞣花酸对GM细胞都有一定的辐射防护作用。细胞周期的检测、细胞凋亡率的检测、DNA损伤修复相关抗体的检测以及DNA损伤修复相关基因的检测都从细胞亚显微和分子层面验证了上述结果。结论:鞣花酸具有一定的辐射防护作用。

关键词：防护作用毒性作用鞣花酸

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60Co射线照射后人正常肝细胞子代基因谱的改变

60Co射线照射后人正常肝细胞子代基因谱的改变

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第七届中国核学会“三核”论坛中国放射医学教育五十年暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议

作者：左雅慧党旭红王小莉王仲文童建中国辐射防护研究院放射医学与环境医学研究所中国原子能科学研究院苏州大学放射医学与公共卫生学院

目的:利用基因芯片技术研究60Co射线照射后肝细胞子代基因谱的改变,为进一步研究辐射诱发基因组不稳定性的分子机制提供依据。方法:取对数生长期的肝细胞,在冰浴下用60Co辐照装置照射(剂量为2、4和6 Gy)。将照射后的克隆存活细胞培养至1... 详细信息

目的:利用基因芯片技术研究60Co射线照射后肝细胞子代基因谱的改变,为进一步研究辐射诱发基因组不稳定性的分子机制提供依据。方法:取对数生长期的肝细胞,在冰浴下用60Co辐照装置照射(剂量为2、4和6 Gy)。将照射后的克隆存活细胞培养至15代,利用含有48000条人基因的Illumina光纤微珠基因芯片对受照肝细胞子代差异表达基因进行分析,同时利用实时荧光定量PCR技术对差异表达基因HAVCR2、RAN进行验证,最后对部分差异表达基因进行生物信息学分析并构建基因相互作用网络图。结果:在所分析的48000个基因中,2Gy照射组中共有262个差异表达基因,其中上调基因有130个,下调基因有132个;4Gy照射组中共有2746个差异表达基因,其中上调基因有1282个,下调基因有1463个;6Gy照射组中共有3406个差异表达基因,其中上调基因有1687个,下调基因有1719个。上述三个剂量组与对照组相比,共同差异表达基因有71个,其中上调基因有35个,下调基因有36个。实时荧光定量PCR结果显示,HAVCR2基因表达上调,其在2Gy、4Gy、6Gy组中的相对表达量分别为8.024、8.318、8.513;RAN基因表达下调,其在2Gy、4Cy和6Gy组中的相对表达量分别为0.867、0.866、0.853;检测结果与芯片检测结果的趋势相一致。利用BioCata公共信号通路资源数据库对三个剂量组共同差异表达的71个基因进行生物信息学分析,结果显示,其中13个基因有通路数据。这些通路涉及Adhesion、Apoptosis、Cell Activation、Cell CycleRegulation、Cell Signaling、Cytokines/Chemokines、Developmental Biology、Expression、Hematopoiesis、Immunology、Metabolism等12个方面。利用GeneSpring软件构建了部分通路中差异表达基因的相互作用网络图。结论:基因芯片技术在基因组水平上证实了辐射可诱发人肝细胞基因组不稳定性,同时筛选出一批相关的差异表达基因,这些基因主要与细胞周期、细胞骨架和运动、细胞凋亡、细胞信号转导、DNA复制和修复等生物功能相关。构建了差异表达基因相互作用的网络图,初步揭示了RAN、CDTI、IER3、V-FOS等基因在辐射诱发基因组不稳定性进程中可能的生物学功能。

关键词：基因芯片基因组不稳定性人正常肝细胞 60Co射线

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