丝胶蛋白水凝胶(支架)作为近年来开发的一种新型组织工程材料由于具有优良的性能和生物活性,已被广泛地应用于多种组织损伤的修复与治疗。然而目前,其除菌技术仍然缺乏系统地研究。本文采用辐照灭菌技术,基于丝胶蛋白的不同环节(蚕茧、丝胶蛋白液、丝胶蛋白水凝胶和丝胶蛋白水凝胶支架)进行辐照灭菌处理,并对材料的理化性质进行系统地评价,以期获得高效,稳定且对样品破坏小的丝蛋白材料除菌方案。实验结果:(1)辐照剂量为15 k Gy时,不同环节(蚕茧、丝胶蛋白水溶液、水凝胶、水凝胶冻干支架)辐照均可有效灭菌;(2)辐照显著地提高了蚕茧的溶解率(由87%提高到94%);(3)和未辐照丝胶蛋白冻干支架(β折叠含量为44.16%)相比,在不同环节辐照后的丝胶蛋白β折叠含量均有所降低,其中在支架环节辐照对丝胶蛋白的β折叠影响最小,辐照后的丝胶蛋白支架β折叠含量为39.38%;(4)辐照对水凝胶的孔隙率和膨胀率无显著性影响;(5)辐照后丝胶蛋白的分子量均有不同程度的影响,其中在水溶液环节辐照对丝胶蛋白的分子量破坏最为严重;(6)在冻干支架阶段辐照得到的无菌支架微观结构完整性较好;(7)水凝胶经辐照后会溶解。结果表明,对于制备无菌丝胶蛋白水凝胶在蚕茧环节辐照较好,而对于获得无菌丝胶蛋白生物支架则在支架环节除菌为宜。
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