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作者

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12 篇 陆江阳
12 篇 唐勇
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11 篇 王长振
10 篇 胡韶华

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199 篇 中文
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排序：

联合应用纳米免疫磁珠富集技术和量子点荧光标记技术对胎儿非整倍体疾病进行无痛性产前诊断的研究

联合应用纳米免疫磁珠富集技术和量子点荧光标记技术对胎儿非整倍...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议暨第八届全军定量病理学学术会议

作者：隋玉杰杜珍武吴飞李凌云杨龙飞钟莉莉张桂珍吉林大学第二医院医学研究中心吉林长春 130041 吉林大学第二医院妇产科吉林长春 130041

本研究旨在建立一种联合应用纳米免疫磁珠富集技术和量子点荧光标记技术对怀有非整倍体胎儿的孕妇进行无痛性产前诊断的方法。在优化的条件下，比较使用不同的密度梯度离心液Ficoll 1077、Percoll 1075与Percoll 1090双倍密度梯度离心液... 详细信息

本研究旨在建立一种联合应用纳米免疫磁珠富集技术和量子点荧光标记技术对怀有非整倍体胎儿的孕妇进行无痛性产前诊断的方法。在优化的条件下，比较使用不同的密度梯度离心液Ficoll 1077、Percoll 1075与Percoll 1090双倍密度梯度离心液、Percoll 1090细胞分离液离心后所分离新生儿脐血的有核红细胞的数量和纯度。通过EDC化学偶联法将磁性纳米颗粒与抗CD71单克隆抗体共价偶联，通过透射电镜观察偶联前后的磁性纳米颗粒的形态变化：应用考马斯亮蓝法测定优化条件后蛋白的偶联率：用免疫荧光法检测到偶联后的抗体是否具有活性;细胞结合能力实验检测偶联物能否分离富集新生儿脐血中的有核红细胞;新生儿脐血模型检测偶联物分离效率。采用改进水相法在水溶液中直接合成经过巯基丙酸修饰的水溶性CdTe荧光量子点，用荧光光度计测量荧光量子点的荧光光谱;通过EDC法将水溶性CdTe荧光量子点与抗胎儿特异性血红蛋白抗体相偶联，制备抗胎儿特异性血红蛋白抗体的荧光量子点荧光探针，荧光光度计测量荧光量子点探针的荧光光谱，比较偶连抗体前后的荧光量子点的荧光光谱的变化;应用荧光量子点探针免疫荧光法对脐血有核红细胞的标记，并与免疫细胞化学法相比较;光漂白实验检测量子点的荧光稳定性;对从孕妇外周血中磁性分离的胎儿有核红细胞进行量子点荧光鉴定。用痕量基因组DNA提取试剂盒提取经过磁性富集量子点鉴定的孕妇外周血中胎儿有核红细胞的DNA，用实时荧光定量PCR检测样品基因组DNA的唐氏综合征关键区域与阳性对照的相对定量。

关键词：胎儿非整倍体疾病产前诊断纳米免疫磁珠富集技术量子点荧光标记技术

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长期丰富生存环境对雄性大鼠海马及海马内有髓神经纤维老年性改变作用的体视学研究

长期丰富生存环境对雄性大鼠海马及海马内有髓神经纤维老年性改变...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者：赵圆宇仇玄黄春霞师晓燕卢伟陈林杨姝李琛唐勇重庆医科大学基础医学院

目的:对青年雄性大鼠和中老年雄性大鼠进行长期丰富生存环境干预,并运用无偏体视学方法研究丰富生存环境干预对雄性大鼠海马及海马内有髓神经纤维的改变,以期探讨丰富生存环境干预延缓雄性大鼠海马衰老可能的形态学基础。方法:将青年（... 详细信息

目的:对青年雄性大鼠和中老年雄性大鼠进行长期丰富生存环境干预,并运用无偏体视学方法研究丰富生存环境干预对雄性大鼠海马及海马内有髓神经纤维的改变,以期探讨丰富生存环境干预延缓雄性大鼠海马衰老可能的形态学基础。方法:将青年（6月龄）雄性SD大鼠24只和中老年（14月龄）雄性SD大鼠24只,分别随机分为标准环境组和丰富生存环境组。青年大鼠分别在普通环境和丰富生存环境中饲养至中老年期（18月龄）,中老年大鼠分别在普通环境和丰富生存环境中饲养至老年期（28月龄）。每组随机抽取5只大鼠,进行形态学定量研究。每只大鼠随机抽取一侧半脑,切成1mm厚的连续脑片。计数等距测点框与所有海马脑组织片枕侧面重叠的测点数,根据卡瓦列里原理计算海马的总体积。将另一侧大脑半球中含有海马的全部脑片均切取一张冠状切面的冰冻切片,利用卡瓦列里原理分别计算CA1和DG的体积。取出含海马的脑切片（6片片）。将等距测点框随机叠加在脑组织切片上,取1 mm大小的海马组织块,制成电镜切片。利用透射电镜放大6200倍和17500倍进行拍照,通过体视学方法测得海马、CA1区和DG区内有髓神经纤维总长度、有髓神经纤维和髓鞘总体积、有髓神经纤维直径和髓鞘厚度。结果:与标准环境组中老年和老年SD雄性大鼠相比,丰富生存环境组海马、CA1区及DG区的总体积均无显著性差异（p>0.05）;丰富生存环境组海马和DG区内有髓神经纤维总体积、髓鞘总体积以及有髓神经纤维的内径均无显著性差异（p>0.05）;丰富生存环境组海马和DG内有髓神经纤维总长度、轴突总体积均显著性增加（p<0.05）;丰富生存环境组CA1区有髓神经纤维总体积、髓鞘总体积、有髓神经纤维总长度和轴突中体积均显著性增加（p<0.05）。有髓神经纤维-直径-髓鞘厚度分布图显示:海马、CA区和DG内有髓神经纤维总长度增加主要由直径为0.2μm.7μm、髓鞘厚度为0.05μm.14μm的有髓神经纤维增加所致。结论:1、长期丰富生存环境干预对海马、CA1、DG区内有髓神经纤维的老年退行性改变均具有显著的保护作用。2、与DG区相比,海马CA1区内有髓神经纤维对丰富生存环境干预更为敏感。3、长期丰富生存环境对雄性大鼠海马内有髓神经纤维老年性退行性改变的积极保护作用可能是长期丰富生存环境延缓大脑衰老的重要结构基础之一。

关键词：长期丰富生存环境雄性大鼠海马有髓神经纤维体视学

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ROR1基因在人前脂肪细胞分化前后表达

ROR1基因在人前脂肪细胞分化前后表达

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议暨第八届全军定量病理学学术会议

作者：杜珍武杨麒巍隋玉杰钟丽丽杨龙飞宋旸任明张桂珍吉林大学第二医院研究中心吉林长春130041 吉林大学第二医院骨科医院骨科研究所吉林长春130033 吉林大学第二医院研究中心吉林长春130041 吉林大学第二医院骨科医院骨科研究所吉林长春130033

背景:人抵抗素在产生胰岛素抵抗的过程中发挥重要作用,但其受体迄今为止没有明确.受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(,ROR1)是属于ROR家族具有1型糖基化的膜蛋白.最近在鼠前成脂细胞(3T3L1)研究模型上发现抵抗素通过与ROR1结合发挥对细胞糖脂... 详细信息

背景:人抵抗素在产生胰岛素抵抗的过程中发挥重要作用,但其受体迄今为止没有明确.受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(,ROR1)是属于ROR家族具有1型糖基化的膜蛋白.最近在鼠前成脂细胞(3T3L1)研究模型上发现抵抗素通过与ROR1结合发挥对细胞糖脂代谢影响。但在人前体脂肪细胞抵抗素是否通过与ROR1相互作用，发挥对脂肪细胞糖脂代谢的影响，从而诱发胰岛素抵抗还未见报道。明确ROR1在人前脂肪细胞以及向成脂分化后的表达情况将为进一步研究抵抗素与RORI相互作用调控细胞的糖脂代谢分子机制提供实验基础。目的：观察ROR1基因在人前体脂肪细胞以及向成脂分化前后的表达。方法：从人脂肪组织内应用酶消化方法，分离并培养人前脂肪细胞。应用流式细胞术进行细胞表型鉴定，应用成脂肪诱导试剂盒进行人脂肪前体细胞向脂肪细胞诱导，诱导的成脂细胞应用油红O染色鉴定。应用RT-PCR进行RORI基因两个变异体表达。结果：通过形态学观察以及流式细胞术表型鉴定，成功从人脂肪组织中分离并体外扩增前脂肪细胞，油红O染色观察显示分离培养人脂肪前体细胞能有效向脂肪细胞分化。RT-PCR结果显示RORl基因两个变异体在人脂肪前体细胞具有表达，在分化为脂肪细胞后，ROR1基因变异体1表达没有改变，而变异体2表达下降。结论：RORl基因的两个变异体在人脂肪前体细胞均具有一定表达，但在向脂肪细胞分化后，变异体l的表达没有改变，而变异体2表达下降。

关键词：胰岛素抵抗糖脂代谢前脂肪细胞成脂分化酪氨酸激酶样孤儿受体1基因

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Combined serum biomarkers in non-invasive diagnosis of non-alcoholic steatohepatitis

Combined serum biomarkers in non-invasive diagnosis of non-a...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议暨第八届全军定量病理学学术会议

作者： Mei Yang Jingmin Zhao DongPing Xu Yuan Liu Xiaodong Guo Wenshu Li Chaonan Guo Hongping Zhang Yinjie Gao Yuanli Mao Department of Pathology and Hepatology Beijing 302 HospitalBeijing 100039China Institute of Infectious Diseases/Liver Failure Medical Center Beijing 302 HospitalBeijing100039Chi Center for Clinical Trial Beijing 302 HospitalBeijing 100039China Center for Clinical Laboratory Beijing 302 HospitalBeijing 100039China

Backgroud&Aims:Non-alcoholic steatoheaptitis (NASH), the critical stage of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), is of chronic progression and can develop cirrhosis and even hepatocellular carcinoma (HCC).Seeking non-invasive biomarkers in diagnosing NASH is a worldwide heated *** study aims at testing the accuracy of the combination of cytokeratin-18 M30 fragment (CK-18-M30), fibroblast growth factor 21 (FGF-21), interleukin 1 receptor antagonist (IL-1Ra),pigment epithelium-derived factor (PEDF) and osteoprotegerin (OPG) in diagnosing NAFLD and NASH.

关键词： Non-alcoholic Steatohepatitis Non-invasive diagnosis Combined serum biomarker Accuracy

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β-连环蛋白、p120ctn、survivin及ERβ在乳腺癌中的表达及临床意义

β-连环蛋白、p120ctn、survivin及ERβ在乳腺癌中的表达及临床意...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者：郭江泽姚宏太原市人民医院

目的:通过观察β-连环蛋白、p120、survivgin和雌激素受体β亚型（ERβ）蛋白在乳腺良性肿瘤和乳腺癌组织中的表达、分布,分析四种蛋白与乳腺癌的临床病理特征之间的关系并探讨其在乳腺癌发生、发展和预后中的价值。方法:采用免疫组织... 详细信息

目的:通过观察β-连环蛋白、p120、survivgin和雌激素受体β亚型（ERβ）蛋白在乳腺良性肿瘤和乳腺癌组织中的表达、分布,分析四种蛋白与乳腺癌的临床病理特征之间的关系并探讨其在乳腺癌发生、发展和预后中的价值。方法:采用免疫组织化学二步法检测50例乳腺恶性肿瘤及15例乳腺良性肿瘤组织中β-连环蛋白、p120、survivin及ERβ的表达情况,并对四者的表达与患者的年龄、肿块大小、组织学分级、临床分期及淋巴结转移的关系进行统计学分析。分别对β-连环蛋白和p120、β-连环蛋白和survivin、β-连环蛋白和ERβ的表达相关性进行统计学分析。结果:1、15例乳腺良性肿瘤组织中,β-连环蛋白和p120均有1例异常表达,有2例survivin表达阳性,有12例ERβ表达阳性。2、50例乳腺癌组织中β-连环蛋白和p120的异常表达率分别为72%和68%,两者的异常表达均与组织学分级和淋巴结转移密切相关（P<0.05）。乳腺癌组织中survivin蛋白和ERβ的阳性表达率分别为74%、44%,其中survivin表达与组织学分级显著相关（P<0.05）,ERβ的表达与患者年龄、肿瘤大小和组织学分级有明显负相关关系（P<0.05）。3、β-连环蛋白、p120、survivin在乳腺癌中的表达显著高于乳腺良性肿瘤组织,ERβ在乳腺癌中的表达明显低于乳腺良性肿瘤组织,差异有统计学意义（P<0.05）。4、乳腺癌的β-连环蛋白异常表达与p120异常表达有显著的正相关性（r=0.319）;β-catenin蛋白的异常表达强度随着survivin蛋白表达强度的增强而升高,有显著正相关性（r=0.543）;在乳腺癌组织中虽然β-c atenin蛋白的异常表达强度随着ERβ蛋白表达强度的降低而升高,但是差异无统计学意义。结论:1、β-连环蛋白、p120在乳腺癌中出现明显的表达异常,survivin蛋白在乳腺癌中阳性表达率升高,ERβ在乳腺癌的阳性表达率降低,反映出其表达情况在乳腺癌发生发展中起重要作用。2、β-连环蛋白、p120、survivin蛋白和ERβ的表达与乳腺癌的一些临床病理特征密切相关,其表达情况可作为监测乳腺癌恶性程度的有用指标。3、β-cat异常表达与p120异常表达和survivin阳性表达可能在乳腺癌的发生发展中起协同作用,β-cat异常表达与ERβ蛋白的表达无显著关系,但有相反关系趋势,说明ERβ蛋白可能与三者共同促进乳腺组织向恶性转化。四者对准确预测乳腺癌的生物学行为及制定个体化治疗方案可能具有一定的临床价值。

关键词：乳腺癌 β-连环蛋白连环蛋白p120 survivin 雌激素受体β 免疫组化

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长期微波辐射对大鼠空间学习记忆能力和脑电图的影响

长期微波辐射对大鼠空间学习记忆能力和脑电图的影响

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者：李海娟胡向军王丽峰王长振乔思默邹勇徐新萍军事医学科学院放射与辐射医学研究所

目的:随着微波技术在各领域的广泛应用,微波辐射的潜在健康危害日益引起关注。中枢神经系统是微波辐射的敏感靶器官之一,其对认知功能的影响是目前关注重点。长期微波辐射对认知功能效应的相关研究对于维护职业暴露人群的健康需求极为... 详细信息

目的:随着微波技术在各领域的广泛应用,微波辐射的潜在健康危害日益引起关注。中枢神经系统是微波辐射的敏感靶器官之一,其对认知功能的影响是目前关注重点。长期微波辐射对认知功能效应的相关研究对于维护职业暴露人群的健康需求极为重要。本研究拟检测不同剂量微波长期辐射对认知功能相关指标,如大鼠空间学习记忆能力及脑电图的影响,以期为防护标准的制定提供一定理论依据。材料和方法:对75只Wistar大鼠实施微波辐射,辐射参数:频率2.856 GHz,平均功率密度分别为5、10、20及30mW/cm,6min/次,3次/周,持续辐射6周。于辐射后1-4d,14d,28d实施Morris水迷宫定位航行实验检测大鼠空间学习记忆能力,于辐射后14d采用BIOPAC MP-150（USA）多导生理记录及分析系统对Wistar大鼠进行脑电图记录,并分析脑电功率谱。结果:（1）空间学习记忆能力的改变:Morris水迷宫定位航行实验中,假辐射组大鼠入水后,游水路线顺畅,并多集中于平台周围,而辐射组大鼠入水后游水路线多反复,并多沿着迷宫池壁游水或试图跳出迷宫水池。辐射后1-4d各组大鼠均随着实验次数增加,平均逃避潜伏期呈逐渐缩短趋势。至训练结束时（即辐射后第4d）,各组平均逃避潜伏期均达一稳定状态,表明各组大鼠均以学会找到平台,其中各辐射组大鼠逃避潜伏期均高于各时间点对照组（P<0.05）。辐射后14d,10及30 mW/cm辐射组大鼠平均逃避潜伏期较假辐射组延长（P<0.05）。辐射后28d,30 mW/cm辐射组大鼠平均逃避潜伏期较假辐射组延长（P<0.05）,其他各剂量辐射组大鼠平均逃避潜伏期均与假辐射组无明显差异（P>0.05）。（2）脑电图的改变:辐射后14d,与假辐射组比较,5、10、20及30mW/cm组大鼠脑电图的波幅增加、频率降低、δ频段功率百分比增加（P<0.05）;与5mW/cm组比较,10、20mW/cm组脑电波波幅及δ频段功率百分比明显增加（P<0.05）;30mW/cm组脑电波波幅及δ频段功率百分比与其它各剂量组比较均有明显增加（P<0.05）。结论:微波长期辐射可引起大鼠空间学习记忆能力降低,大鼠脑电活动受抑制,且存在一定的剂量依赖性。

关键词：微波长期辐射学习记忆脑电图

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Cdk5调节磷酸化突触素I在微波辐射致GABA释放障碍中的作用研究

Cdk5调节磷酸化突触素I在微波辐射致GABA释放障碍中的作用研究

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者：乔思默胡向军王丽峰彭瑞云高亚兵赵黎王水明王长振邹勇李海娟军事医学科学院放射与辐射医学研究所

目的和意义:近年来,随着微波技术的广泛应用,针对微波辐射的生物效应及有效防护的研究已迫在眉睫。中枢神经系统是微波辐射最为敏感的靶器官之一,微波辐射可引起学习记忆能力下降等中枢神经系统症状,其机制仍有待研究。突触可塑性是学... 详细信息

目的和意义:近年来,随着微波技术的广泛应用,针对微波辐射的生物效应及有效防护的研究已迫在眉睫。中枢神经系统是微波辐射最为敏感的靶器官之一,微波辐射可引起学习记忆能力下降等中枢神经系统症状,其机制仍有待研究。突触可塑性是学习记忆的神经生物学基础,其实质是突触连接结构和突触传递效能的可塑性,其中突触间信号传递通过神经递质的释放来实现。磷酸化突触素Ⅰ调节突触前神经递质释放,启动突触前的囊泡胞吐递质过程。Cdk5可磷酸化其突触前底物突触素Ⅰ参与囊泡胞吐神经递质过程,以维持正常突触连接功能。Cdk5的异常激活是由于钙依赖性蛋白酶calpain所引起的Cdk5激活物p35向p25的转化,CdkS/p25复合物带来神经毒性的同时,也会诱导疾病的发生。本研究针对微波辐射后Cdk5调节磷酸化突触素Ⅰ表达,参与调控氨基酸递质释放的机制作深入探究。材料和方法:采用30mW/cm微波辐射Wistar大鼠和经NGF诱导的PC12细胞,辐射时间为5min。于辐射后6h,1d,3d,7d,14d及28d,以免疫印迹法检测大鼠海马Cdk5、激活因子p35/p25、钙蛋白酶calpain及ser-553位点磷酸化突触素Ⅰ的蛋白表达。PC12细胞于辐射前加入Cdk5的抑制剂Roscovitine,在辐射并给予抑制剂后6h,采用免疫荧光检测其Cdk5及ser-553位点磷酸化突触素Ⅰ的表达,采用高效液相色谱法检测其氨基酸递质释放量。实验结果:（1）微波辐射后大鼠海马磷酸化突触素Ⅰ及其相关激酶的表达:30mW/cm辐射后,ser-553位点的磷酸化突触素Ⅰ表达于辐射后3d明显减少（p<0.01）,7d和14d明显增加（p<0.01）;Cdk5于辐射后6h、3d和7d明显增加,辐射后14d明显减少（p<0.05或p<0.01）,Calpain于辐射后3d表达明显增加（p<0.01）,14d表达明显减少（p<0.05）;p25于辐射后1d表达明显减少（p<0.05）,3d和7d表达明显增加（p<0.01）;p35表达未见明显异常。（2）Roscovitine对微波辐射后PC12细胞磷酸化突触素Ⅰ表达及氨基酸递质释放的影响:单纯微波辐射后Cdk5表达增强（p<0.05）,给予Roscovitine后Cdk5表达减少（p<0.01）,照射并给予抑制剂与单纯照射后相比明显减少（p<0.01）。ser-553位点突触素Ⅰ磷酸化在单纯微波辐射后减少（p

关键词：微波学习记忆磷酸化突触素Ⅰ γ-氨基丁酸周期依赖性调节激酶5

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Long term effects of microwave radiation on the learning and memory and the expression of NMDA receptors

Long term effects of microwave radiation on the learning and...

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者： Hui Wang Ruiyun Peng Li Zhao Shuiming Wang Yabing Gao Lifeng Wang Hongyan Zuo Ji Dong Xinping Xu Hongmei Zhou Zhentao Su Department of Experimental Pathology and Division of Radiation Protection and Health Physics BeijingInstitute of Radiation Medicine

Purpose:In the present study,we intended to investigate whether the high power microwave could cause the continuous disorders of learning and memory inWistarrats and to explore the underlying *** and methods:80Wistar rats were exposed to a microwave source at a power density of0mW/cmand50 mW/cm microwave for 6 *** spatial memory ability,the structure of the hippocampus,contents of amino acids neurotransmitters in hippocampus andthe expression of N-methyl-D-aspartic acid receptors（NMDAR） subunit 1,2A and 2B（NR1,NR2 A and NR2B）were detected at 1 m,3 m,6 m,9 m,12 m and 18 m after microwave ***:Our results showed that the microwave exposed rats showed consistent deficiencies in spatial learning and *** level of amino acid neurotransmitters also decreased after microwave *** ratio of glutamate（Glu） and gammaaminobutyric acid（GABA）significantly decreased at 6 ***,the hippocampus showed varying degrees of degeneration of neurons,increased postsynaptic density and blurred synaptic clefts in the exposure *** NRland NR2 B expression showed a significant decrease,especially the NR2 B ***:This studyindicated that the content of amino acids neurotransmitters,the expression of NMDAR subunits and the variation of hippocampal structure might contribute to the long term cognitive impairment after microwave exposure.

关键词： Microwave learning and memory NMDAR hippocampus rats

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普通大鼠移植性骨转移动物模型的建立与观察

普通大鼠移植性骨转移动物模型的建立与观察

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者：于顺禄许文兰于淑兰卢勇谈志龙天津市天津医院骨研所

目的:人类常见肿瘤的骨转移模型己在多种啮齿类动物复制成功,然而建立一种完整反映肿瘤骨转移的动物模型依然比较困难。随着具有人类疾病特征的转基因性骨转移移植鼠模型逐渐受到重视,这一类模型的临床疾病研究需求正逐渐增加。本实验... 详细信息

目的:人类常见肿瘤的骨转移模型己在多种啮齿类动物复制成功,然而建立一种完整反映肿瘤骨转移的动物模型依然比较困难。随着具有人类疾病特征的转基因性骨转移移植鼠模型逐渐受到重视,这一类模型的临床疾病研究需求正逐渐增加。本实验采用接种性骨转移模型,应用于普通清洁级Wistar大鼠取得成功,现介绍如下。材料方法:大鼠骨肉瘤模型的制备:由液氮保存的大鼠骨肉瘤细胞系（UMR106）,迅速置37℃复苏后,用含10%胎牛血清1640培养液稀释细胞浓度为1×10～6/ml,接种25ml培养瓶,隔日换液,经0.2%胰蛋白酶消化、传代、繁殖直至足够接种大鼠的细胞量为止,取对数生长期的骨肉瘤细胞,用无血清1640培养液稀释细胞成5×10～6/ml注射大鼠,每只0.2ml,采用速眠新II号麻醉动物,大鼠后肢股骨远端或胫骨近端的骨髓腔中注射,共接种一个月月龄Wistar大鼠30只,雌雄各半。动物模型影像学、病理组织学UMR106细胞系接种大鼠1周后,每天观察肢体肿胀度,成瘤后拍X线片,CT检查,1个月后分批处死大鼠,取大鼠肢体瘤组织（骨需脱钙）、以及肺、肝、肾、脑组织,10%中性福尔林固定石蜡包埋切片HE染色组织学观察。结果:接种30只大鼠,有4只未成瘤（雌3只,雄1只）,成瘤率86.7%,肺转移率96.2%。大鼠成瘤后体重明显减轻,与未接种大鼠体重相差50-800克。在接种后,两周即可触摸到不同程度大小的肿物,一个月达高峰,最大肿瘤为2.9×2.0×1.8cm。两周后X线片变化不明显,只出现骨膜反应,一个月可见溶骨变化,之后溶骨显著多发生病理骨折且出现肺转移,大体瘤体剖面呈粉红色鱼肉样,质地柔软,转移肺脏表面布满粟粒大小灰白色结节,剖面见结节布满整个肺脏。显微镜下见骨皮质及骺板、软骨均被瘤细胞所侵蚀、破坏并侵及骨周围肌肉,瘤细胞呈梭形、卵圆形核分裂多见,瘤组织中血运丰富,其间可见淡粉色骨样组织、钙化颗粒及残留骨及肿瘤坏死细胞。肺组织内可见多灶性转移瘤,部分肿瘤细胞钙化、坏死。肝、肾、脑组织未见转移灶。结论:采用移植法建立骨肉瘤模型,特别需要在细胞接种浓度、接种部位、鼠龄大小,由其在不同品系之间,进行大量实验探索以找出最佳的实验方案。本方法采用UMR106细胞系,接种月龄Wistar大鼠骨股远端,接种细胞量5×10～6/ml浓度0.2ml注射,移植成功率86.7%,未见雌雄差异,X线片,CT可见到骨膜反应、溶骨性破坏。病理组织学检查,可见到生长旺盛的瘤组织细胞,瘤组织中血管丰富,部分瘤组织坏死、钙化。肺转移96.2%,肺部有不同程度的转移灶,有的充满整个肺组织,把正常肺泡组织完全排挤掉,以致动物死亡。

关键词： UMR106细胞系骨肉瘤模型骨转移

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miR-219调控NMDAR通路在微波辐射致突触可塑性损伤中的作用研究

miR-219调控NMDAR通路在微波辐射致突触可塑性损伤中的作用研究

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第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议、第八届全军定量病理学学术会议

作者：熊璐彭瑞云赵黎孙成峰高亚兵张静王水明徐新萍周红梅王丽峰左红艳董霁姚斌伟军事医学科学院放射与辐射医学研究所

目的:微波技术在给人们带来极大益处的同时,其生物危害越来越受到关注,可造成包括突触可塑性在内的脑损伤,但致伤机制未明。miRNA是一类单链小分子RNA,具有非常广泛的生物功能,可通过对NMDAR通路的调节影响突触可塑性,但其在微波辐射损... 详细信息

目的:微波技术在给人们带来极大益处的同时,其生物危害越来越受到关注,可造成包括突触可塑性在内的脑损伤,但致伤机制未明。miRNA是一类单链小分子RNA,具有非常广泛的生物功能,可通过对NMDAR通路的调节影响突触可塑性,但其在微波辐射损伤中的作用研究尚属空白。因此,本研究为深入认识微波辐射致突触可塑性损伤的分子机制、探寻生物标志物和防治靶标提供新思路。方法:（1）采用0和30mW/cm微波辐射Wistar雄性大鼠48只,隔日辐射1次,共3次,10min/次,于末次辐射后1d、7d、14d和28d,采用Real-time PCR检测海马组织miR-219的表达,原位杂交检测海马组织中miR-219分布特点。（2）采用0和30mW/cm微波辐射经NGF诱导的PC12细胞,于辐射后1h、6h、12h和24h采用Real-time PCR检测PC12细胞中miR-219的表达。（3）利用靶基因预测数据库（TargetScan、miRanda和miRDB）对miR-219靶基因进行预测,通过Gene Ontology（GO）和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）分别对靶基因进行功能分类和通路分析;双荧光素酶活性分析确认miR-219靶基因;稳定转染miR-219过表达和沉默载体至PC12细胞,Western Blot检测微波辐射后6h miR-219靶基因CaMKIIγ及NMDAR通路分子NRl、NR2A、NR2B、CREB及P-CREB的表达变化。结果:（1）大鼠海马组织中miR-219分布及表达变化:假辐射组miR-219主要分布于海马颗粒细胞和锥体细胞的胞浆和胞核;辐射后7d,miR-219于上述部位减少（P<0.05或P<0.01）,14d未见明显改变;（2）PC12细胞miR-219变化:辐射后6h及12h可见miR-219下调（P<0.05或P<0.01）;（3）miR-219靶基因预测及功能分析:共预测到14个miR-219靶基因,涉及到与突触可塑性相关的生物过程包括钙离子转运、神经递质转运、谷氨酸分泌、长时程增强和长时程抑制等,7个预测出的miR-219靶基因涉及到与突触可塑性相关的通路:（4）miR-219靶基因确认:经Dual-1uciferase确认CaMKIIγ为miR-219靶基因（P<0.05）;（5）miR-219与靶基因CaMKIIγ相互作用,及对NMDAR通路分子表达的影响:辐射后6h,miR-219过表达组CaMKIIγ、NR1、NR2A和P-CREB表达显著降低（P<0.05）,miR-219沉默组CaMKIIγ、NR1和P-CREB表达显著增加（P<0.05或P<0.01）。结论:（1）预测到14个与微波辐射致突触可塑性损伤相关的miR-219靶基因,其中7个参与突触可塑性相关信号通路;30mW/cm微波辐射后miR-219下调可能通过增加靶基因表达促进突触可塑性损伤。（2）30mW/cm微波辐射可致PC12细胞突触可塑性损伤;微波辐射后miR-219下调可通过增加靶基因CaMKIIγ表达,增强NMDAR信号通路活化,可能是微波辐射造成突触可塑性损伤的重要机制。

关键词：微波大鼠海马 PC12细胞突触可塑性 miR-219 NMDAR信号通路

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