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作者

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贝伐单抗对耐顺铂肺腺癌SPC-A1/DDP裸鼠移植瘤生长的影响

贝伐单抗对耐顺铂肺腺癌SPC-A1/DDP裸鼠移植瘤生长的影响

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：戴明罗荣城梁卫江郑大勇朱其聪蔡艳军南方医科大学南方医院肿瘤中心广东 510515

目的:本研究通过贝伐单抗联合或不联合顺铂对荷SPC-A1/DDP裸鼠移植瘤的生长进行干预处理,探讨贝伐单抗对肺腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法:建立耐顺铂肺腺癌SPC-A1/DDP裸鼠移植瘤模型,将20只荷瘤裸鼠随机分成4组:空白对照组(A组);... 详细信息

目的:本研究通过贝伐单抗联合或不联合顺铂对荷SPC-A1/DDP裸鼠移植瘤的生长进行干预处理,探讨贝伐单抗对肺腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法:建立耐顺铂肺腺癌SPC-A1/DDP裸鼠移植瘤模型,将20只荷瘤裸鼠随机分成4组:空白对照组(A组);单药贝伐单抗组(B组);单药顺铂组(C组)和联合组(D组),连续用药4周。观察抑瘤率;免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度(microvessel density,MVD);RT-PCR分析各组经治疗后凋亡基因bcl-2及耐药基因(MRP、GST-Tr)mRNA表达情况。结果:与空白对照组比较,经贝伐单抗治疗组(B、D组)移植瘤生长明显受到抑制(P<0.001),抑瘤率分别为24.92％、51.83％。且联合组(D组)作用进一步增强,单药顺铂组与对照组之间无显著差异;经贝伐单抗治疗组(B、D组)微血管密度表达分别为21.0±1.58、14.4±1.14。经贝伐单抗治疗组(B、D组)bcl-2mRNA表达较对照组有显著差异(P<0.001)。但两组之间无差异;四组之间在MRP、GST-πmRNA表达上无明显差异。结论:贝伐单抗对荷SPC-Al/DDP裸鼠移植瘤有抑制作用,联合顺铂用药有显著协同作用,同时提高SPC-A1/DDP耐药细胞对顺铂的敏感性,其作用机制可能与抑制肿瘤微血管形成、诱导细胞凋亡增加有关。

关键词：肺肿瘤贝伐单抗血管内皮生长因子多药耐药性动物模型细胞凋亡

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乳腺癌IGF-IR表达的临床病理学意义

乳腺癌IGF-IR表达的临床病理学意义

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：季晨阳刘来昱罗荣城李爱民南方医科大学南方医院肿瘤科 510515 南方医科大学南方医院呼吸科 510515

目的:乳腺癌胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-IR)的表达情况与乳腺癌各种病理学指标之间的相关性,探讨乳腺癌IGF-IR表达的病理学意义。方法:120例乳腺癌组织、18例正常乳腺组织、29例乳腺癌淋巴结转移癌组织病理石蜡块,用免疫组织化... 详细信息

目的:乳腺癌胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-IR)的表达情况与乳腺癌各种病理学指标之间的相关性,探讨乳腺癌IGF-IR表达的病理学意义。方法:120例乳腺癌组织、18例正常乳腺组织、29例乳腺癌淋巴结转移癌组织病理石蜡块,用免疫组织化学的方法测定IGF-IR的表达,将表达程度分为0、1、2、3级,2和3级定义为高表达。回顾性研究120例乳腺癌病例的年龄、月经状态、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、病理学类型、组织学分级、间质反应、肿瘤分化程度。乳腺癌IGF-IR表达与各项临床病理指标比较,用统计学方法进行分析。结果:1、乳腺癌组织中IGF-IR的高表达显著高于正常乳腺组织(64.1％ vs 33.4％,P<0:01);2、IGF-IR在乳腺癌原发灶癌组织中的高表达高于淋巴结转移癌组织(64.1％ vs 41.3％,P<0.05);3、低分化乳腺癌IGF-IR高表达比高分化乳腺癌组IGF-IR高表达明显减少(50.8％ vs 77.0％,P<0.01);4、IGF-IR的表达与患者的年龄、月经状态、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、病理类型、组织学分级、间质反应无相关性;结论:1、IGF-IR在乳腺癌中的表达明显高于乳腺正常组织和淋巴结转移癌组织。这提示IGF-IR在乳腺癌的发生和转移等方面扮演了一定的角色:2、IGF-IR的高表达与乳腺癌分化状态相关。

关键词：乳腺癌胰岛素样生长因子I受体病理学指标淋巴结转移

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COX-2和VEGF-C在舌癌组织中的表达及与颈淋巴结转移的关系

COX-2和VEGF-C在舌癌组织中的表达及与颈淋巴结转移的关系

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：李伟忠丁彦青李祖国张进华南方医科大学南方医院口腔科广东广州 510515 南方医科大学病理学教研室广东广州 510515 南方医科大学病理学教研室广东广州 510515

目的:通过观察环氧化酶-2(COX-2)及血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在舌癌组织中的表达,研究两者及与新生微血管和淋巴结转移之间的相互关系。方法:采用S-P免疫组化的方法观察了46例舌鳞状细胞癌组织及颈部转移淋巴结中COX-2、VEGF-C和C... 详细信息

目的:通过观察环氧化酶-2(COX-2)及血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在舌癌组织中的表达,研究两者及与新生微血管和淋巴结转移之间的相互关系。方法:采用S-P免疫组化的方法观察了46例舌鳞状细胞癌组织及颈部转移淋巴结中COX-2、VEGF-C和CD34的表达,并以正常口腔粘膜作为对照。结果:舌癌组织中,COX-2及VEGF-C强阳性表达率分别为82.61％及73.91％,而在正常口腔粘膜的阳性表达分别为0及2例(25％)。两者之间存在显著差异(COX-2:P<0.01,VEGF-C:P=0.021)。COX-2和VEGF-C表达一致符合率为82.61％(38/46),两者之间有相关性(P=0.001),两者一致性kappa系数(K)=0.495(P=0.001)。COX-2及VEGF-C强阳性组中微血管密度值(MVD)明显高于其弱阳性组MVD值(P<0.001);COX-2的表达强弱与淋巴结的转移无明显相关(P=0.198),而VEGF-C的表达强弱则与淋巴结转移有明显相关性(P=0.031)。结论:C0×-2与VEGF-C的强阳性表达与舌鳞状细胞癌的生物学行为密切相关,COX-2和/或VEGF-C可以作为临床判断肿瘤的侵袭性、转移潜能及估计预后重要的参考指标,但其在肿瘤发生中的作用机制有待于进一步探讨。

关键词：环氧化酶-2 血管内皮生长因子-C 微血管密度鳞状细胞癌舌癌免疫组织化学颈淋巴结转移

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颌下腺移位术防治鼻咽癌放疗后口干燥症的近期疗效

颌下腺移位术防治鼻咽癌放疗后口干燥症的近期疗效

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：刘学奎曾宗渊洪明晃张爱兰崔念基陈福进中山大学肿瘤防治中心头颈科广东广州 510060 中山大学肿瘤防治中心鼻咽科广东广州 510060 中山大学肿瘤防治中心放疗科广东广州 510060

目的:探讨颌下腺移位术防治鼻咽癌放疗后口干燥症的临床应用价值。方法:实验组选择符合入选标准的鼻咽癌患者36例,在放疗前将颌下腺移位至颏下区,术后接受常规放疗,放疗时颏下区设置挡块。观察放疗中急性口腔粘膜反应、99锝核素扫... 详细信息

目的:探讨颌下腺移位术防治鼻咽癌放疗后口干燥症的临床应用价值。方法:实验组选择符合入选标准的鼻咽癌患者36例,在放疗前将颌下腺移位至颏下区,术后接受常规放疗,放疗时颏下区设置挡块。观察放疗中急性口腔粘膜反应、99锝核素扫描检测放疗前后颌下腺功能的变化、测定放疗前后唾液分泌量的变化、放疗后3个月进行口干程度问卷调查,将实验组和对照组(34例)的上述观察指标进行比较。结果:实验组急性口腔粘膜反应明显轻于对照组(P=0.007)。实验组放疗后3个月移位术侧颌下腺摄取、排泌功能均明显较未移位术侧者好,两者之间差异有非常显著性的统计学意义,P值分别为0.001和0.000;实验组颌下腺摄取、排泌功能均明显较对照组者好,两者之间差异有非常显著性的统计学意义,P值分别为0.004和0.000。实验组放疗后唾液分泌量的平均值为1.41克,而对照组放疗后唾液分泌量平均值为0.71克。对照组76.5％的患者有中度至重度的口干燥症,实验组仅13.9％的患者有中度至重度的口干燥症,两者之间差异有非常显著性的统计学意义(P=0.000)。结论:移位的颌下腺在放疗后仍具有正常或接近正常的分泌功能;颌下腺移位术防治鼻咽癌放疗后口干燥症的临床近期疗效良好,可改善鼻咽癌患者放疗后的生存质量。

关键词：鼻咽癌放射治疗口干燥症颌下腺移位粘膜反应

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VEGF和MVD在Avastin治疗结直肠癌中的价值

VEGF和MVD在Avastin治疗结直肠癌中的价值

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：郑航陈锦章廖旺军罗荣城南方医科大学附属南方医院肿瘤中心广州 510515

目的:评价最能反映微血管密度(MVD)的指标.探讨血管内皮生长因子(VEGF)和MVD在avastin治疗结直肠癌中的价值。材料与方法:根据入组和排除标准,总共入选30例南方医科大学附属南方医院2004年至2005年肿瘤科和惠侨科住院,并接受Avastin... 详细信息

目的:评价最能反映微血管密度(MVD)的指标.探讨血管内皮生长因子(VEGF)和MVD在avastin治疗结直肠癌中的价值。材料与方法:根据入组和排除标准,总共入选30例南方医科大学附属南方医院2004年至2005年肿瘤科和惠侨科住院,并接受Avastin+CPT-11方案治疗的结直肠癌患者,6个周期后评价近期临床疗效、无进展生存时间(Progression-free survival,PFS)和一年生存率。采用免疫组织化学法(IHC)检测CD31、CD34、CD105和VEGF在结直肠癌肿瘤组织中的表达情况,根据微血管计数方法计算MVD值。按照VEGF表达的范围和强度对其进行分级。结果:1、根据CD31、CD34、CD105染色结果计算的MVD值分别为35.5±3.6、47.2±8.5、21.6±3.2,三组间差异有显著性意义(P<0.05);2、CD34和CD105表达水平与组织中VEGF的表达水平显著性相关,r分别为0.645和0.702,P值分别为0.039和0.014.而CD31同VEGF的表达无相关性(P>0.05);3、MVD和VEGF与患者的性别、年龄、PS评分、病理类型及分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移和远处器官有关(P<0.001);4、MVD(CD105)值和VEGF表达水平与患者一年生存率密切相关(P<0.05).高MVD(C0105)值和VEGF高表达的患者生存率差。然而,MVD(CD105)和VEGF与Avastin治疗疗效之间却存在正相关关系,高MVD(CD105)和VEGF高表达的患者Avastin治疗的反应性较好。结论:CD105是反映肿瘤新生血管的较好指标。优于CD31和CD34。CD105与组织中VEGF的表达显著相关,根据它计算的MVD值联合VEGF表达水平可以用于预测患者Avastin治疗的疗效和生存率。本研究提示Avastin治疗晚期结直肠癌患者,其疗效的主要体现,可能是源于对高MVD(CD105)和组织中VEGF高表达,这类高危患者的临床控制率高。

关键词：结直肠癌血管内皮生长因子微血管密度临床疗效免疫组织化学法

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乳腺癌BA46基因转染树突状细胞诱导特异细胞免疫

乳腺癌BA46基因转染树突状细胞诱导特异细胞免疫

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：尤长宣苏瑾廖旺军张军一郑航 Yong Liu Paul L Hermonat 罗荣城南方医科大学附属南方医院肿瘤科广州 510515 南方医科大学附属南方医院呼吸科广州 510515 美国阿肯色大学医学院基因治疗中心小石城 72205 南方医科大学附属南方医院肿瘤科广州

目的:探讨以乳腺癌特异抗原BA46基因转染乳腺癌患者树突状细胞(DC)诱导特异细胞免疫的可行性。方法:取健康人外周血,采用密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),将细胞分为基因转移组及对照组,基因转移组感染携带BA4... 详细信息

目的:探讨以乳腺癌特异抗原BA46基因转染乳腺癌患者树突状细胞(DC)诱导特异细胞免疫的可行性。方法:取健康人外周血,采用密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),将细胞分为基因转移组及对照组,基因转移组感染携带BA46基因的重组腺相关病毒rAAV/BA46/Neo,对照组以293细胞冻融液刺激,两组细胞均采用重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)诱导DC前体细胞成熟。第7天。收集悬浮细胞(DC),显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析DC的表面标志CD80、CD86、CD40的表达情况;另取该DC与T细胞按1:20比例混合,含5％人血清蛋白的AIM-V为培养基,同时加入IL-2与GM-CSF,共育7天,诱导获得细胞毒性T淋巴细(CTL),取BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T为靶细胞,采用51Cr释放法测量杀伤效率,同时以流式细胞仪检测CTL群体中CD8/CD4和CD8/CD56的比值。结果:BA46基因转导的DC表面标志CD80、CD86、CD40的表达均明显高于对照组DC,所激活的T细胞对BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T有很好的杀伤效果,此杀伤具有抗原特异性和MHC限制性,且该T细胞中CD8/CD4和CD8/CD56的比值均明显高于对照组(裂解物冲击DC所激活的T细胞)。结论:BA46基因转导成功制备DC,并诱导特异的CTL,为乳腺癌的DC基因转导疗法打下基础。

关键词：树突状细胞基因转移乳腺癌细胞免疫基因转导疗法

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中药胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响

中药胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：李庆明阚方巨钟娃中山大学附属第二医院中西医结合研究所广州 510120

根据中医理论对胃癌的发生与脾虚、气滞、痰积、瘀毒等病理因素密切相关的认识,采用具有健脾解毒散结的中药党参、半枝莲、五灵脂等组成的胃康宁防治胃癌,取得较好疗效,对本方进行了严格、科学的临床与实验研究。现将胃康宁对胃癌细胞... 详细信息

根据中医理论对胃癌的发生与脾虚、气滞、痰积、瘀毒等病理因素密切相关的认识,采用具有健脾解毒散结的中药党参、半枝莲、五灵脂等组成的胃康宁防治胃癌,取得较好疗效,对本方进行了严格、科学的临床与实验研究。现将胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响的实验研究报告如下。目的:观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子CyclinD、E、CDK2(Cyclin dependant kinase2, CDK2)CDK4、CDK6和P16、P27mRNA及其蛋白表达的作用。方法:分别与高、中、低不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞,采用免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中CyclinD、E、CDK2、CDK4、CDK6和P16、P27蛋白的表达,RT-PCR法检测各组胃癌细胞中CyclinD、E、CDK2、4、6和P16、P27mRNA的表达。结果:免疫组化法结果显示,胃康宁高、中、低剂量组CyclinE和CDK2,CyclinD2和CDK4、CDK6灰度值均有明显升高,与空白对照组比较(P<0.05-0.01)而P27、P16灰度值则显著降低(P<0.05-0.01),RT-PCR结果显示,胃康宁高、中、低剂量组均能明显降低CyclinE、CDK2、Cy-clinD2和CDK4、CDK6OPTDl值(P<0.05-0.01),同时升高P27、P16 OPTDl值(P<0.05-0.01)。结论:中药胃康宁可抑制胃癌细胞促细胞周期相关因子CyclinD2mRNA和蛋白的表达,押制CDK4、CDK6 mRNA和蛋白的表达,增强胃癌细胞抑制因子P16蛋白的表达。同时,中药胃康宁含药血清能抑制胃癌细胞促进周期相关因子CyclinE及CDK2mRNA和蛋白的表达,增强胃癌细胞抑制因子P27mRNA和蛋白的表达。这可能是胃康宁抑制胃癌细胞生长的作用机制。

关键词：胃康宁胃癌细胞周期细胞生长免疫组化法

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姜黄素抑制胃癌细胞增殖及其机理研究

姜黄素抑制胃癌细胞增殖及其机理研究

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：梁卫江张万岱罗荣城南方医科大学南方医院肿瘤中心广东广州 510515 南方医科大学南方医院消化内科广东广州 510515

目的:姜黄素是一种植物抗癌物.能够抑制多种肿瘤细胞生长。诱导肿瘤细胞凋亡。本研究探讨姜黄素对胃癌细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法:[1]胃腺癌SGC7901细胞常规培养,给予不同浓度的姜黄素处理,用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法... 详细信息

目的:姜黄素是一种植物抗癌物.能够抑制多种肿瘤细胞生长。诱导肿瘤细胞凋亡。本研究探讨姜黄素对胃癌细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法:[1]胃腺癌SGC7901细胞常规培养,给予不同浓度的姜黄素处理,用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测细胞增殖受抑制的程度。[2]细胞给予转化生长因子-α(TGFα)和姜黄素处理,用MTT比色法检测姜黄素对TGF-α促细胞增殖作用的影响。[3]细胞用2.5％低浓度血清培养。加TGFα和姜黄素处理,用免疫荧光染色、流式细胞仪(FCM)检测cyclin D1表达变化。[4]细胞给予不同浓度姜黄素处理。用免疫荧光染色和FCM检测表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化。结果:[1]姜黄素显著抑制胃腺癌细胞增殖。并随浓度增加而作用增强。当10、20、30μmol/L姜黄素作用72h,抑制率分别为22.4％、46.9％和67.2％(均P<0.001)。[2]胃癌细胞给予5μmol/L低浓度姜黄素处理72h,细胞增殖速度无明显变化;给予30μg/LTGF-α处理,细胞增殖速度加快;同时给予5μmol/L姜黄素和30μg/LTGF-α处理.TGFα刺激的胃癌细胞增殖明显受抑制,抑制率为21.5％。[3]细胞给予30μg/LTGFα处理*** D1表达阳性率增加8.43％(P<0.001);给予20μmol/L姜黄素处理5h,cyclin D1表达阳性率下降21.37％(P<0.001);同时给予TGFα和姜黄素处理,与单加TGFα比较,cyclin D1表达下降了25.32％(P<0.01),下降程度大于单加姜黄素引起的下降程度。[4]姜黄素使胃癌细胞EGFR表达显著下降。给予10、20、30μmol/L姜黄素处理48h,EGFR表达分别下降10.5％、17.1％和30.0％(均P<0.001)。结论:[1]姜黄素显著抑制胃癌细胞增殖。[2]姜黄素可抑制TGF-α刺激的胃癌细胞增殖和cyclinD1表达,并抑制TGF-α的作用受体EGFR的表达。已知胃癌细胞具有TGF-α自分泌和旁分泌促细胞增殖环路。本研究提示,姜黄素可抑制胃癌细胞TGF-α促增殖环路。推测这是姜黄素的抗肿瘤作用机理之一。

关键词：姜黄素胃肿瘤表皮生长因子受体转化生长因子α 细胞增殖细胞凋亡

来源：评论

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贝伐单抗逆转鼻咽癌耐药的实验研究

贝伐单抗逆转鼻咽癌耐药的实验研究

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：刘辉罗荣城孙婷婷杨小民广州南方医院肿瘤科 510515 解放军201医院骨科 111000

目的:药物耐受性是肿瘤化学药物治疗失败的最重要原因之一,抗血管生成是肿瘤治疗的新思路。临床观察到贝伐单抗(bevacizumab)可以使一部分化疗失败的复发/转移的肿瘤患者恢复对化疗药物的敏感性。本实验在体外研究bevacizumab对耐药肿... 详细信息

目的:药物耐受性是肿瘤化学药物治疗失败的最重要原因之一,抗血管生成是肿瘤治疗的新思路。临床观察到贝伐单抗(bevacizumab)可以使一部分化疗失败的复发/转移的肿瘤患者恢复对化疗药物的敏感性。本实验在体外研究bevacizumab对耐药肿瘤细胞的影响,探讨是否有逆转肿瘤细胞耐药的作用。方法:以人鼻咽癌低分化细胞系CNE2及其吉西他滨(gemcitabine)耐药细胞亚系CNE2/Gem为研究对象,在体外用不同浓度的gemcitabine和,或bevacizumab处理细胞,采用四甲基偶氯唑蓝(MTT)法检测药物对CNE2和CNE2/Gem的杀伤效应,用流式细胞术测定CNE2和CNE2,Gem的凋亡率,用半定量RT-PCR法检测药物作用前后细胞中MDR1、VEGF、Bcl-2、Bax等基因表达水平的变化。采用SPSS10.0软件中One-Way Anova方法分析不同处理组间细胞杀伤率、凋亡率的差异。结果:单用10ug/ml bevacizumab时,细胞杀伤率与空白对照组相似,两者差别无统计学意义(P=0.140),而且bevacizumab浓度增加一倍但杀伤率无明显变化,高低浓度组间差别无统计学意义(P=0.531)。但无论是20ug/ml或40ug/ml gemcitabine,联合10ug/mlbevacizumab所产生的杀伤率明显高于单用gemcitabine,差异有统计学意义(P=0.026,P=0.001)。在同样的药物处理条件下,CNE2/Gem细胞的早期凋亡率明显低于CNE2细胞(8.87±1.06％VS23.50±4.21％.P=0.005);晚期凋亡率也降低(41.70±9.78％VS60.52± 9.94％,P=0.036)。对于CNE2/Gem细胞,联合20ug/ml gemcitabine和10ug/ml bevacizumab处理24h所诱导的早期凋亡率比单纯20ug/ml gemcitabine明显增高(39.87±5.85％VS 8.87±1.06％,P<0.001);而晚期凋亡率变化不大(37.64±5.11％VS 41.70±9.78％,P=0.582)。半定量RT-PCR方法检测显示CNE2、CNE2/Gem和CNE2/Gem/Bev中MDR1相对表达量分别为0.623、1.364和1.165,VEGF分别为0.241、1.652和1.547,Bcl-2分别为0.613、0.952和0.135,Bax分别为0.665、0.387和1.751。结论:Bevacizumab可以显著增加人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系CNE2/Gem对gemcitabine的敏感性。单用bevacizumab杀伤作用不明显,与gemcitabine联合可明显提高gemcitabine的细胞杀伤活性,但增加bevacizumab浓度并不能提高杀伤率。耐药细胞CNE2/Gem与其亲本细胞CNE2相比早期凋亡细胞明显减少,而bevacizumab能增加耐药细胞的早期凋亡。Bevacizumab对耐药相关基因影响不大,但可以显著影响凋亡相关基因的表达,促进耐药细胞凋亡。

关键词：鼻咽癌吉西他滨药物耐受性贝伐单抗化学药物治疗肿瘤治疗

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可分泌表达抗血管生成肽anginex重组腺病毒的生物活性研究

可分泌表达抗血管生成肽anginex重组腺病毒的生物活性研究

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第二届广州肿瘤大会——首届“csco-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

作者：李恩孝吴胤瑛施口刘俊平吴媛刘陕西杨广笑西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤中心陕西西安 710061 澳大利亚墨尔本Monash大学医学院维多利亚 3181 西安华广生物工程公司陕西西安 710061

背景:anginex是利用碱基折叠原理和掺入来自PF-4、IL-8、BP1的β-片层域短序列相结合的方法,人工设计的一种新抗血管生成肽,具有高度选择性、低毒性和高渗性的特点,通过特异性作用于活化的内皮细胞,阻滞细胞的粘连和移行,导致细胞凋亡,... 详细信息

背景:anginex是利用碱基折叠原理和掺入来自PF-4、IL-8、BP1的β-片层域短序列相结合的方法,人工设计的一种新抗血管生成肽,具有高度选择性、低毒性和高渗性的特点,通过特异性作用于活化的内皮细胞,阻滞细胞的粘连和移行,导致细胞凋亡,抑制血管生成。在体内外的研究证明其抑制肿瘤新生血管生成的作用呈剂量依赖性,对正常血管系统和处于静止期的内皮细胞无生物活性。但是,anginex分子量小和半衰期短,需要持续用药才可以产生疗效。因此,在合成并把anginex cDNA序列插入到具有信号肽和前导肽的重组原核表达载体,构建可分泌表达抗血管生成肽anginex的表达盒,再以重组腺病毒为载体,构建了AdNT4-anginex,本研究利用体内外实验观察构建的AdNT4-anginex抑制细胞移行、鸡胚血管生成和抗肿瘤生长的作用。方法:检测Ad-NT4-anginex的生物活性:[1]利用鸡胚绒毛尿囊膜试验观察AdNT4-anginex的抗血管形成作用;[2]利用划痕法观察AdNT4-anginex对人内皮细胞株ECV340移行的抑制作用;[3]对照观察AdNT4-anginex的抗移植肿瘤生长作用。15只雌性ICR小鼠接种制备的H22肝癌细胞株,待成瘤后,随机分为三组:第一组仅在一侧瘤体内注射AdNT4-anginex 0.1mg/kg;第二组双侧瘤体内注射AdNT4-anginex 0.1mg/kg;对照组不作任何治疗;[4]免疫组织化学SABC方法检测肿瘤组织内MVD,分析AdNT4-anginex抗肿瘤生长作用与肿瘤血管生成的关系。结果 :[1]划痕法观察到AdNT4-anginex液+VEGF后,ECV340细胞株的移行被明显的抑制,整个移行过程缓慢,细胞爬满划痕的时间较对照组延长70％以上。对照组在加药后6小时,细胞已经完全爬满了划痕,而实验组细胞在24小时尚未完全爬满划痕。[2]鸡胚CAM方法观察到加AdNT4-anginex后第18天CAM的血管数量、管径和长度较正常CAM和对照组明显减少,呈叶脉状分布的血管网已经消失,环内可见大片的血管稀疏及无血管区,还可看到较粗的血管明显变细及中断,对照组血管明显增多及局部出血。[3]ICR小鼠荷H22肝癌细胞瘤后,第一组左侧肿瘤生长被明显的抑制,生长速度明显较对照组缓慢,但是对侧肿瘤也发生了同样的改变,肿瘤生长较治疗前有显著性差异(F=18.118,p=0.002),全部消失达60％(6/10),不能触及。[4]在第二组双侧肿瘤注射AdNT4-anginex后,双侧肿瘤局部注射药物后肿瘤生长较治疗前有显著统计学差异(F=14.777,p=0.004),较对照组肿瘤也有显著统计学差异(F=185.255,p=0.000),到第4周时肿瘤完全消失达70％(7/10),不可触及,而1号小鼠注射药物侧肿瘤反而略增大,对侧却完全消失。[5]单侧注射与双侧注射比较对肿瘤生长抑制作用无显著性差异(确切概率法,p=0.394)。[6]免疫组化检测显示试验组肿瘤组织中MVD数量明显少于对照组。结论:AdNT4-anginex能明显的抑制人血管内皮细胞株ECV340的迁移和CAM血管生成,并发现对管径较粗的血管具有一定的破坏作用。有限的结果表明AdNT4-anginex可使anginex的稳定性提高、半衰期延长,抗血管生成和抗肿瘤生长作用增强。

关键词：抗血管生成肽重组腺病毒生物活性细胞凋亡肿瘤生长免疫组织化学

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