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显微外科修复手肌腱损伤的临床研究

显微外科修复手肌腱损伤的临床研究

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：蔚芃明伟蒋科杨鑫川北医学院附属医院骨科

目的：肌腱损伤手术后粘连是常见的临床难题之一,预防肌腱粘连也是手外科医生们致力于研究的课题.本研究旨在探讨手部肌腱损伤的显微外科修复的临床疗效,以期寻找防止肌腱断裂修复术后粘连的有效方法.方法对象：本研究随机选取201 1年1... 详细信息

目的：肌腱损伤手术后粘连是常见的临床难题之一,预防肌腱粘连也是手外科医生们致力于研究的课题.本研究旨在探讨手部肌腱损伤的显微外科修复的临床疗效,以期寻找防止肌腱断裂修复术后粘连的有效方法.方法对象：本研究随机选取201 1年12月到2014年4月在川北医学院附属医院骨科进行肌腱损伤修复术并符合筛选标准的68例患者(共133个手指,148条手指肌腱)其中Ⅴ区8例,Ⅳ区11例,m区18例,Ⅱ区96例.其中刀伤26例,玻璃划伤17例,电锯伤10例,机器伤7例,砸伤6例,车祸伤2例.均为单纯肌腱损伤者.受伤时间在1-12h,平均6h.手术方法：臂丛或局部神经阻滞麻醉,气压止血带止血下进行,均为急诊手术.术中应用显微外科技术对其进行清创修复,应用张力性强的不可吸收缝合线,肌腱缝合于偏掌侧采用5-0单线作改良Kessler缝合,线结置于肌腱断端内,肌腱外膜用7-0无损伤缝合线,使肌腱表面光滑,整齐,如鞘管损伤,应予以修复,彻底止血,细致地缝合皮下皮肤组织.术后处理及功能锻炼：规于肌腱修复术后用石膏托外固定,如果吻合在手v区,石膏远端不超过掌指关节范围,便于手指早期活动.术后第2天观察伤口时,指导其伤指活动,每天1-2次,仅仅活动近、远侧两指间关节.5天后让其做轻微的掌指关节活动,并逐渐加大两指间关节的活动范围.6周后开始进行握拳抗阻力训练.其中Ⅱ区、m区、Ⅳ区术后以限制屈腕、屈掌指关节及手指伸直的前臂及手背侧石膏夹板,使腕关节屈曲45度,掌指关节屈65度,指间关节完全伸直.从手术指的指端到前臂掌侧远端装一弹性牵引,当功能锻炼时去除石膏夹板背侧托,掌侧托保护,手指放松,弹力治疗可把手指维持在彻底掌曲位,自主伸手指不用大力,可说明力度合适.即时在掌横纹周围定制旋转滑轴,调整牵引方向,扩大手指远指间关节自主区间.术后24-48h在手臂石膏夹板具的固定下及正规专业医师指导下进入可控制的自主功能锻炼.锻炼过程中指导病人自主伸指,当伸直到背侧固定物时,由弹性引力将手指被动屈曲,6-8次/日,每次做4-5个屈指锻炼.及时采取早期功能锻炼,并对随访资料进行疗效评定.本研究采用(关节主动活动度)TAM系统评定法、手指功能损伤评定以及(手部整体功能评定)Carroll功能评定等作为评定标准.所有患者术后进行功能训练并随访至第12周,分别记录4周和12周的有关指标.结果：(1)TAM％评价系统：疗效优者45例,良15例,可5例,差3例.优良率达88.2％;(2)手指功能损伤评定：4周和12周所测手指功能损伤评定百分率为分别为(19.87±1.96)和(7.34±0.62),(F9.2,P＜0.05).该结果提示,随着时间的推移,经显微外科治疗的肌腱损伤表现出功能的好转;(3) Carroll上肢功能评定：对入院的所有患者进行随访,第4周和第12周所得昀Carroll上肢功能评分,分别为(94.56+7.26)和(96.12+6.44),二者差别无统计学意义,提示本次治疗方法对上肢功能评定的影响不随时间的推移而发生变化.结论：1.手部屈肌腱修复术后的病人得到正确专业的康复功能锻炼,可降低肌腱粘连、避免造成局限性粘连,促使肌腱的内源性修复,提升手指的关节活动度,改进修复至完善恢复手功能.2.防止外伤后,手部屈肌腱术后粘连,只有使用显微外科技术,加用高质量的肌腱吻合措施,手术后再由专业医师指导下早期功能训练,效果是肯定的.3.手部屈肌腱修复术后,功能训练对去除炎性肿胀,恢复手指关节活动度,增加手指主动活动度,降低手指自主活动损伤百分数、增强修复手部功能有非常明显的治疗效果.

关键词：肌腱损伤显微外科康复

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组配式半骨盆假体置换治疗骨盆Ⅱ区肿瘤性骨缺损临床研究

组配式半骨盆假体置换治疗骨盆Ⅱ区肿瘤性骨缺损临床研究

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：罗翼屠重棋段宏周勇邹昌闵理石锐张闻力

[背景与目的]骨盆肿瘤性骨缺损的外科治疗一直是骨肿瘤医生面临的难题和巨大挑战,如何既完整切除肿瘤,又保留良好的肢体功能是当前治疗的首要问题.侵及骨盆Ⅱ区肿瘤行肿瘤完整切除、半骨盆假体置换重建骨缺损时,由于骨盆切除范围不同,... 详细信息

[背景与目的]骨盆肿瘤性骨缺损的外科治疗一直是骨肿瘤医生面临的难题和巨大挑战,如何既完整切除肿瘤,又保留良好的肢体功能是当前治疗的首要问题.侵及骨盆Ⅱ区肿瘤行肿瘤完整切除、半骨盆假体置换重建骨缺损时,由于骨盆切除范围不同,假体安放后髋臼位置即髋关节旋转中心不易确定.本文总结了2004年1月至2013年1月在我院行组配式半骨盆假体治疗的骨盆肿瘤患者,探讨骨盆Ⅱ区肿瘤的特点、手术切除与重建方式、术后并发症、术后功能及预后等,以及综合分析患者髋关节旋转中心的位置及与术后功能的关系等方面.[方法]2004年1月至2013年1月期间,共45例患者在我院行骨盆Ⅱ区肿瘤切除组配式半骨盆假体重建,42例符合研究标准,男性25例,女性17例.年龄12～69岁,平均年龄(37.98±14.77)岁.随访时间12～86月,平均随访(36.36±20.40)月.收集患者基本资料、肿瘤特点、术后并发症以及术后1月、3月、6月和12月患侧肢体功能等并进行分析.测量假体髋关节旋转中心的位置,以理想旋转中心的位置作参照,在水平方向上将其分成内移组、正常组和外移组,在纵轴方向上将其分为上移组、正常组和下移组等亚组,并分析假体髋关节旋转中心的偏移与患者术后功能的关系.采用SPSS 17.0进行统计学分析,检验水准P＜0.05,表示差异有统计学意义.[结果]本组病例手术持续时间平均(262.38±40.47) min,术中出血平均(1107.38±567.96) ml,术后输血量平均(561.90±545.02) ml,平均住院日为(16.24±3.58)d.术后共13例发生并发症(31.0％),其中10例出现切口相关并发症(23.8％),3例发生患侧髋关节脱位(7.1％).术后1月MSTS评分平均为14.5;术后3月MSTS评分平均为19.8,优良率达100％;术后6月MSTS评分平均为20.9,优良率达97.6％;术后12月MSTS评分平均为21.3,优良率达100％.术后1月、3月、6月功能逐渐好转,MSTS评分呈递增趋势,3个时间点的MSTS评分比较,差异有统计学意义(P＜0.05);术后6月、12月功能改善不明显,2个时间点的MSTS评分比较,差异无统计学意义(P＞0.05).术后1年生存率95.2％、2年生存率83.6％、3年生存率69.4％、5年生存率43.7％.亚组分析发现,内移组、正常组和外移组3组间比较,术后1月、3月、6月和12月MSTS评分差异无统计学意义(P＞0.05).同样,上移组、正常组和下移组3组间比较,术后1月、3月、6月和12月MSTS评分比较差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]组配式半骨盆假体重建骨盆Ⅱ区肿瘤是一种较为安全有效的方式,患者术后功能好、并发症少,疗效满意.制定详细的康复计划并早期进行有效的功能锻炼,有利于提高患者术后肢体功能.骨盆Ⅱ区肿瘤切除时由于髂骨不同程度的缺损,术中假体髋臼定位困难,不易将其固定在实际解剖位置.在进行假体固定时,需综合考虑多种因素,假体可与实际解剖位置发生一定程度的偏移,将其固定在最易牢固固定、软组织可充分覆盖、髋周肌肉易于重建和股骨偏心距得到一定程度恢复的位置.尽管该研究尚不能证实髋关节旋转中心的位置与术后功能的关系,但并不说明这种影响不存在.

关键词：组配式半骨盆假体切除重建旋转中心功能评价骨盆肿瘤

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负压封闭引流(VSD)在下肢开放性骨折合并软组织缺损治疗中的应用

负压封闭引流(VSD)在下肢开放性骨折合并软组织缺损治疗中的应用

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：杨鑫明伟蔚芃蒋科川北医学院附属医院骨科

目的：目前临床上对于下肢开放性骨折合并严重软蛆织损伤患者创面的早期处理主要是一期清创闭合创面或换药治疗二期闭合剖面.上述处理治疗周期长,治疗费用高,并可能出现深部引流不畅继发创面感染、骨髓炎等处理较为棘手.本研究旨在探讨... 详细信息

目的：目前临床上对于下肢开放性骨折合并严重软蛆织损伤患者创面的早期处理主要是一期清创闭合创面或换药治疗二期闭合剖面.上述处理治疗周期长,治疗费用高,并可能出现深部引流不畅继发创面感染、骨髓炎等处理较为棘手.本研究旨在探讨治疗下肢开放性骨折合并软组织缺损创面的有效方法.方法：对象：自2011年10月至2014年5月,我院采用创面负压封闭引流(VSD)治疗开放性下肢骨折35例.其中男26例,女9例,年龄18-62岁,平均36.2岁.致伤原因为车祸伤及高处坠落伤,受伤至入院时间1-48 h.其中股骨干骨折5例,胫腓骨骨折30例.软组织缺损面积3cm×5 cm-10 cm＞＜18 cm有不同程度骨外露.材料：负压封闭吸引装置①VSD材料(含多侧孔引流管和三通接头)聚乙烯酒精泡沫为武汉维斯第医用科技有限公司生产.②半透性粘贴薄膜英国Smith Nephew公司生产,具有单向透气功能,主要成分为聚氨酯和丙烯酸.负压源：采用中心负压吸引,压力在-125-450 mmHg.治疗方法：术前处理：评估伤情,如合并其他创伤则首先处理危及生命的创伤,所有患者均在生命体征平稳后根据全身情况、创面、X线片制定手术方案.如受伤超过8h,创面常规细菌培养、药敏试验,并预防性应用抗生素.手术时间为伤后2-24 h,平均7-8h.术中处理：手术在连续硬膜外麻醉或全身麻醉下进行,先进行彻底清创,切除所有失活及污染严重的小碎骨片和软组织,尽可能保留未游离的大块碎骨片周围软组织以免破坏骨片血运,污染的游离大块碎骨片清洗后用0.5％碘伏漫泡10 min放回原位.彻底清创后再对骨折断端复位应用外固定支架、石膏或行骨牵引固定.最后根据创面大小和形状将VSD材料进行剪裁有创腔者按创腔的大小修剪后填入.VSD材料边缘与周围正常皮肤缝合固定用半透性粘贴薄膜将VSD与引流管覆盖密封引流管连接中心负压持续吸引.术后处理：创面面封闭后无需再做其他处理,经常观察负压状况,如皱缩的VSD恢复原状或薄膜下出现积液提示负压失效应立即处理.5-7天后拆去VSD.创面肉芽组织生长良好、无骨外露者游离植皮修复;创面清洁骨外露、创缘周边有肉芽组织生长者选用皮瓣移植修复.创面肉芽组织生长不良或引流出较多脓性分泌物者,再次清创后更换VSD负压吸引.治疗过程中可采集创面分泌物做细菌培养及药敏实验,选用敏感抗菌药物.结果：35例患者创面经1-3次VSD治疗后无一例出现毒性及过敏反应.创面肉芽组织平坦、新鲜,毛细血管丰富,剖面有渗血,肉芽无水肿外露骨面上有新鲜肉芽生长创腔基本消灭.本组病例中20例无骨外露,肉芽组织生长良好,创面游离植皮.12例骨外露面积小,肉芽组织覆盖骨外露后游离植皮创面愈合;另3例骨外露面积大者经VSD治疗后,再次清创,去除异物及炎性坏死组织,更换VSD,根据药敏试验结果使用敏感抗菌药物,骨外露创缘周边有肉芽组织生长,移植皮瓣后,创面愈合.骨折愈合时间4-9个月,平均6.5个月.其中6个月内愈合合28例(80.0％),8-9个月愈合5例(14.28％),骨折不愈合2例(5.72％).浅表感染6例(17.14％),深部感染和骨髓炎发生2例(5.72％),钉道感染4例(11.42％).结论：VSD在治疗下肢开放性骨折合并软组织缺损中,能安全有效地封闭创面,缩短二期创面修复时间,促进骨折愈合,减少并发症.

关键词：负压封闭引流开放性下肢骨折

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非水泥全髋关节置换术中不同髋臼重建方式对髋臼杯位置的影响

非水泥全髋关节置换术中不同髋臼重建方式对髋臼杯位置的影响

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：谭伦林旭吴超郭勇曹林虎自贡市第四人民医院

目的：研究髋臼骨缺损患者非水泥全髋关节置换术中不同髋臼重建方式对髋臼杯位置的影响.方法：2008年2月至2014年2月,78例(78髋)髋臼骨缺损患者行非骨水泥全髋置换术,男32例,女46例;年龄51-76岁,平均66岁,其中翻修术21例,初次置换57例(... 详细信息

目的：研究髋臼骨缺损患者非水泥全髋关节置换术中不同髋臼重建方式对髋臼杯位置的影响.方法：2008年2月至2014年2月,78例(78髋)髋臼骨缺损患者行非骨水泥全髋置换术,男32例,女46例;年龄51-76岁,平均66岁,其中翻修术21例,初次置换57例(先天性髋关节脱位41例、严重股骨头坏死10例、扁平髋骨关节6例).全部患者术中根据卵圆窝行髋臼中心化技术.后上方挤压打实植骨组(A组)：39髋,嵌合臼杯时挤压后上方植骨,然后打实,用于臼杯仅上缘裸露深度＜10mm,宽度小于2个点(时钟法),为PaproskyⅡ型;后上方结构性植骨组(B组)：24髋,后上方大块植骨内固定再造,用于臼杯上缘裸露深度＜20mm,宽度在2-5个点间(时钟法),一般是PaproskyⅢ型骨缺损;腔隙打压植骨组(C组)：10髋,对臼内各壁腔隙缺损用异体骨打实植骨,为Paprosky Ⅰ型;内壁钛网重建植骨组(D组)：5髋,内壁钛网支撑后再打实植骨,为ⅡC型骨缺损：术后DR片上根据Pagnano法测量臼杯旋转中心(臼杯中心与真实旋转中心在X、Y轴上的位移),术后CT片上测量臼杯的前倾角和外展角(正常(45°±5°abduction,15°±10° anteversion).结果：全部患者均获随访,时间3-25个月,平均12个月,术后均无感染、松动等相关并发症.术后臼杯旋转中心：A组X轴2.16±3.12mm、Y轴5.49±3.33mm;B组X轴2.00±3.08mm、Y轴5.42±3.06mm;C组X轴2.00±3.27mm、Y轴7.90±3.31mm;D组X轴2.20±3.19mm、Y轴8.80±2.78mm.用SPSS19.0统计学软件对各组间术后旋转中心进行对比分析：A组与B组X轴：t 0.191,P0.849,Y轴：t 0.084,P 0.933,差异无统计学意义;A组与C组X轴：t 0.138,P 0.891,Y轴：t-2.045,P0.046,两组间Y轴差异有统计学意义;A组与D组X轴：t-0.031,P 0.975,Y轴：t-2.125,P 0.040,两组间Y轴差异有统计学意义;B组与C组X轴：t 0.000,P 1.000,Y轴：t 3.920,P 0.000,两组间Y轴差异有统计学意义;B组与D组X轴：t-0.131,P 0.896,Y轴：t-2.277,P 0.031,两组间Y轴差异有统计学意义;C组与D组X轴：t-0.113,P 0.912,Y轴：t-0.520,P 0.61,差异无统计学意义.术后前倾角和外展角：A组前倾角20.100±5.210、外展角51.540±7.200;B组前倾角27.880±5.770、外展角42.080±4.600;C组前倾角19.500±5.440、外展角40.300±4.030;D组前倾角21.00±4.950、外展角38.60±4.930.用SPSS19.0统计学软件对各组间术后前倾角和外展角进行对比分析：A组与B组前倾角：t-5.524,P0.000,外展角：t 5.747,P 0.000,两者间前倾角和外展角差异均有统计学意义;A组与C组前倾角：t 0.324,P 0.748,外展角：t 4.728,P 0.000,两组间外展角差异有统计学意义;A组与D组前倾角：t-0.365,P 0.717,外展角：t 3.885,P 0.000,两组间外展角差异有统计学意义;B组与C组前倾角：t 3.920,P 0.000,外展角：t 1.066,P 0.294,两组间前倾角差异有统计学意义;B组与D组前倾角：t 2.474,P 0.020,外展角：t 1.525,P 0.139,两组间前倾角差异有统计学意义;C组与D组前倾角：t-0.517,P 0.614,外展角：t 0.717,P 0.486,差异均无统计学意义.结论：后上方非结构植骨(A组)的臼杯外展角大,后上方结构植骨(B组)的臼杯前倾角大,臼内腔隙植骨(C组和D组)的臼杯有上移和内移,术中应针对不同髋臼重建方式选择高边臼杯的位,保持软组织合适的张力以减少臼杯上移引起的下肢短缩.

关键词：人工全髋关节置换骨缺损旋转中心髋臼重建

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护理风险管理在危重症患者转运中的应用

护理风险管理在危重症患者转运中的应用

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：刘淳四川大学华西医院骨科

目的：在危重症患者的转运中应用护理风险管理，以确保患者安全.方法：1、正确评估患者转运前的病情：骨科病人通过转运完成治疗时，容易发生神经、呼吸、心血管系统不同程度的并发症.病人转运前必须充分评估病人病情，考虑转运过程中...

目的：在危重症患者的转运中应用护理风险管理，以确保患者安全.方法：1、正确评估患者转运前的病情：骨科病人通过转运完成治疗时，容易发生神经、呼吸、心血管系统不同程度的并发症.病人转运前必须充分评估病人病情，考虑转运过程中可能发生的各种意外和可能的处理议案，根据此准备相应的急救物资和人员安排，向病人及家属解释清楚转运相关事项.危重病人转入ICU必须有医护人员陪同，转运过程中必须持续氧气吸入、保持ECG、SP02和BP监测.2、转运前做好充分准备：①、通知治疗的科室，并简单汇报病情，完善各项检查，确保接收科室做好充分准备.转运前10分钟电话通知该科室并交代需要的特殊准备(如监护仪、微量注射泵等).②、检查并完善各项医疗文件，包括：医嘱、体温单、护理记录、转科记录及医疗病历，并按要求填写患者转科交接记录单.③、保证各种管道通畅，妥善固定，防滑脱、逆流，预防感染.④、转运过程中动作轻柔娴熟，使病员及家属有安全感.4、加强转运途中的监护：①、转运时上好护栏，保证患者安全、舒适，转运过程中保持各种管道通畅、有效，途中避免剧烈震荡.②、转运过程中严密监测生命体征及神志情况，尤其注意观察患者呼吸频率、节律及深度.③、做好应急情况的紧急处理，若患者在转运途中出现异常，应立即就地处理或到最近科室处理.④、做好转运记录，记录内容包括患者的监测指标数值、意识状态、治疗期间情况以及转运过程中发生意外的救治措施等，有助于转运护士判断患者在转运过程中的病情变化.5、转运到目的地后的管理：将患者转运到目的地，护士协助搬运并详细交接班，包括病情、药品、引流管情况、皮肤情况、治疗及护理情况、各项医疗文件及物品.交接完毕后转运护士及接收科室护士均应在转科交接单上签字.结果：通过正确的转运前评估、有效的转运前准备、转运途中的监护以及转运到目的地后的管理，主动规避各种护理风险.危重症患者在转运过程中无意外、无死亡，均安全送达接收科室，转运按规范流程进行，接收科室满意率得到较大提高.结论：护理风险是指医院内病人在护理过程中有可能发生的不安全事件.风险管理是管理学的内容之一，它主要运用医疗知识和专长，采取相关措施，减少生命财产和声誉损失.完整有效的护理风险管理措施，大大提高了转运安全性.院内转运患者虽然时间不长，却存在着许多安全隐患，除患者本身病情变化外，还包括环境、运输工具、职业道德、技术、责任心等，具体表现为：护士责任心不强，运送方法不当，没有保持有效的静脉通道，氧气供给中断，发现病情变化不能及时处理，转运前未提前通知相关科室做好接收准备，出科前未测量生命体征等.针对患者转运中的隐患建立完整有效护理风险管理措施，提高运送中的安全性.加强知识培训提高风险的识别.运送前通过风险评估，建立健全安全管理机制，降低途中意外发生，规避医疗护理安全隐患.与患者及家属有效沟通有利于医患互动，风险共同承担，减少纠纷发生.将转运风险评估结果告知患者及家属，使患者或家属理解并签字同意，从法律的角度尊重患者的知情权，使其有思想准备.做出转运决定后，通知接收科室，并简单汇报病情，转运前10分钟电话通知该科室并交代需要的特殊准备(如监护仪、微量注射泵等).检查各种管道是否通畅，连接处是否紧密并妥善固定，清空尿袋.转运前清除患者气道内分泌物，保持气道通畅.护士在转运准备过程中保持有条不紊，动作熟练.转运中密切观察病情，护士站在病人的头侧，严密观察患者的意识、瞳孔、呼吸、脉搏、血压等生命体征的变化，重视患者的主诉，及时发现问题，如有病情变化应及时处理，医生同行可及时发现及时处理.严格执行各项规章制度及技术操作规程，客观、真实、及时、准确填写各种护理记录单，重视护理文书的准确、及时和法律效力，记录内容包括患者的监测指标数值、意识状态、检查和治疗期间情况以及转运过程中发生意外的救治措施等.做好转运交接，到达目的地后，护送人员与接诊护士一起将患者搬至病床，做好给氧、监护、管道、生命体征的详细交接班，双方交接人员签名，协调好相关的工作.质量持续改进可以促进护士自觉进行专业培训，提高护士责任心及急救技能和水平，确保护理安全.

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BMP-7/PLGA缓释微球的制备及其对兔骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响

BMP-7/PLGA缓释微球的制备及其对兔骨髓间充质干细胞增殖和分化的...

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：项舟黄富国岑石强陈家磊刘明段鑫四川大学华西医院骨科

目的：制备负载骨形态发生蛋白-7 (bone morphogenesis protein-7,BMP-7)的聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物(poly(lactide-co-glycolide),PLGA)缓释微球并评估该微球的质量.通过体外实验考察负载BMP-7的PLGA缓释微球对兔骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSC)增殖和分化的影响,为进一步软骨组织工程研究提供新选择.方法：1.负载BMP-7的PLGA缓释微球的制备及其质量评估：采用复乳化-液中干燥法制备BMP-7/PLGA缓释微球用扫描电镜观察微球表面形态,并随机计数200个微球粒径,获得粒径分布特征;采用检测BSA含量以评估微球载药量及包封率;采用测定微球释放液中的吸光值计算累积释药百分数并绘制释放曲线.2.兔骨髓间充质干细胞的分离、传代、培养及诱导：应用离心法与贴壁法相结合的方法分离纯化骨髓MSC,放置于37℃,5％二氧化碳的孵箱中进行体外培养,通过成软骨诱导培养基进行成软骨诱导.通过倒置相差显微镜观察MSC的细胞形态,对诱导后的细胞进行番红O染色、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色以鉴定其成软骨分化.应用MTT法测定MSC增殖活性.***-7/PLGA缓释微球对兔骨髓间充质干细胞增殖及软骨方向分化的影响：比较BMP-7/PLGA微球组与空白对照组中兔骨髓间充质干细胞的增殖和成软骨分化情况.其中,BMP-7/PLGA微球组以200μ l BMP-7/PLGA缓释微球体外释放液培养,空白对照组使用等体积软骨诱导培养液培养.采用MTT法测定各组在第1、3、7、14、21天的细胞数;应用阿利新蓝法测定糖胺聚糖含量,并对第21天的软骨诱导细胞进行番红O染色、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色.结果：1、BMP-7/PLGA缓释微球成球良好,球体表面光滑致密,多数微球几乎没有孔隙,少数微球表面呈现一定程度的孔隙,但有极个别较大的球体破裂,未能成球.BMP-7/PLGA缓释微球的平均粒径为14.45±5.97μ m,微球粒径范围在2.5μ m～28.2μ ***-7/PLGA缓释微球的平均载药率为11.1％,平均包封率为70.6％.BMP-7/PLGA缓释微球在初期释放速度较快,呈突释性释放,第1、3、5天的BSA累积释放量分别为0.18±0.01mg、0.29±0.02mg、0.37±0.02mg,累积释放率分别为16.47±1.10％、26.43±0.96％、33.73±1.56％.然后,释放曲线逐渐趋于平稳,但累积释放量不断增加,第28天BSA的累积释放量为0.50±0.03mg,累积释放率为45.17±1.75％.2.兔骨髓间充质干细胞分离纯化良好,贴壁后细胞形态多样,呈长棱形、多角形及多边形,接近融合时细胞平行排列,并呈涡旋状甚至密集多层生长.生长曲线显示第三代细胞有较强的增殖能力.成软骨诱导分化后,番红O染色细胞核出现鲜艳的红色,甲苯胺蓝染色细胞核出现异染性紫红色,Ⅱ型胶原免疫组化染色细胞出现棕黄色,为阳性表达.***-7/PLGA微球组细胞呈持续高增殖,经成软骨诱导21天后BMP-7/PLGA微球组细胞较空白对照组细胞数目更多,且变得宽大扁平,胞浆丰富,局部细胞集聚形成团块结晶.番红O染色下,BMP-7/PLGA微球组可见几乎所有细胞核被染成鲜艳的红色,而对照组仅有部分细胞核为红色,有部分细胞核未被染色.甲苯胺蓝染色下,BMP-7/PLGA微球组可见几乎所有细胞核出现异染性紫红色,部分细胞甚至出现蓝色,而对照组仅有部分细胞核异染,极少数细胞核为蓝色.Ⅱ型胶原免疫组化染色下,BMP-7/PLGA微球组可见绝大多数细胞核呈现黄色或棕黄色,Ⅱ型胶原表达为强阳性,部分细胞周围也可见弱阳性信号表达,而对照组中仅有部分细胞为弱阳性表达,细胞周围也没有阳性信号表达.同时,阿利新蓝法测定培养液中GAG含量表明BMP-7/PLGA微球组呈持续高分泌状态,在第14天和第21天中,BMP-7/PLGA微球组GAG含量分别为41.35±2.04μ g/ml和58.22±2.54μ g/ml,而对照组分别为33.99±1.95μ g/ml和46.12±2.21μ g/ml,各组间差异均有统计学差异.结论：复乳-液中干燥法制备的BMP-7/PLGA缓释微球形貌良好,载药率及包封率较高,具备了对BMP-7的缓释作用.离心法及贴壁培养法结合可以有效分离纯化兔骨髓间充质干细胞,分离纯化后的兔骨髓间充质干细胞具备良好的分化潜能.BMP-7/PLGA缓释微球在体外可通过持续释放BMP-7不断促进兔骨髓间充质干细胞的增殖和向软骨细胞方向分化.

关键词： BMP-7 PLGA 缓释微球骨髓间充质干细胞

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辛伐他汀对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖、分化及运动功能恢复的研究

辛伐他汀对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖、分化及运动功能...

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：周云龙冯大雄泸州医学院附属医院脊柱外科

目的：探讨辛伐他汀对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖、分化及运动功能恢复的研究.方法：选健康雌性SD (Sprague-Dawley SD)大鼠80只,随机选择60只按WD法制成T9-T10平面以下完全性截瘫模型.取造模成功大鼠随机分为三组,每组20只,A... 详细信息

目的：探讨辛伐他汀对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖、分化及运动功能恢复的研究.方法：选健康雌性SD (Sprague-Dawley SD)大鼠80只,随机选择60只按WD法制成T9-T10平面以下完全性截瘫模型.取造模成功大鼠随机分为三组,每组20只,A组于术后当日开始连续7天相同时间点腹腔注射5mg/kg辛伐他汀溶液;B组于术后当日开始连续7天相同时间点腹腔注射10mg/kg辛伐他汀溶液;C组于术后当日开始连续7天相同时间点腹腔注射5ml生理盐水;假手术组20只,仅咬开椎板,不损伤脊髓.分别于术前、术后7d、14d、21d、28d BBB评分法观察大鼠后肢功能恢复情况,监测大鼠感觉诱发电位并随机选择各组5只大鼠处死取受损部位脊髓行HE染色;第28d免疫组织化学方法观察NF200和GFAP阳性面积的表达.所得数据均用±s表示,用SPSS11.5软件作单因素方差分析,以P＜0.05为有统计学意义.结果：术前BBB评分A、B、C、D组均为21分,无统计学意义(P＞0.05).术后7d,A组为7.68±1.83,B组为7.72±1.11,C组为7.24±0.79,D组为21,A、B、C三组BBB评分无明显差异,无统计学意义(P＞0.05).术后14d,A组为9.49±1.29,B组为9.81±0.98,C组为9.15±0.79,D组为21,A、B、C三组BBB评分无明显差异,无统计学意义(P＞0.05).术后21d,A组为13.53±1.24,B组为14.01±0.87,C组为10.76±0.88,D组为21,A、B组BBB评分明显高于C组,有统计差异(P＜0.05),而A、B组间无明显差异(P＞0.05).术后28d,A组为15.21±0.91,B组为15.01±1.01,C组为11.03±0.46,D组为21,A、B组BBB评分明显高于C组,有统计差异(P＜0.05),A、B组间无明显差异(P＞0.05).在各个时间点,D组BBB评分无差异;术后7d,感觉诱发电位发现潜伏期(ms)A组为36.68±3.52,B组为35.23±3.14,C组为36.42±3.35,D组为14.46±4.31,A、B、C三组潜伏期无明显差异,无统计学意义(P＞0.05).术后14d,A组为30.62±2.74,B组为30.24±4.01,C组为31.36±3.99,D组17.02±3.5;A、B、C三组潜伏期无明显差异,无统计学意义(P＞0.05).术后21 d,A组为23.32±3.97,B组为22.61±2.54,C组为30.74±2.95,D组为15.64±2.54,A、B组潜伏期明显低于C组,有统计差异(P＜0.05),B组潜伏期稍低于A组,但两者无明显统计学差异(P＞0.05).术后28d,A组为18.25±4.12,B组为17.56±3.44,C组为27.94±4.16,D组为14.74±2.47,A、B组潜伏期明显低于C组,有统计差异(P＜0.05),而B组潜伏期稍低于A组,但两者无明显统计学差异(P＞0.05).术后7d,波幅A组为2.06±0.27,B组为2.12±0.11,C组为1.76±0.13,D组为15.67±1.88,A、B、C三组波幅无明显差异,无统计学意义(P＞0.05).术后14d,A组为2.25±0.31,B组为2.45±0.27,C组为1.85±0.58,D组为16.28±2.34;A、B、C三组波幅无明显差异,无统计学意义(P＞0.05).术后21d,A组为5.87±1.38,B组为6.02±1.13,C组为2.08±0.47,D组为16.08±1.78;A、B组波幅明显高于C组,有统计差异(P＜0.05),B组波幅高于A组,但两者无明显统计学差异(P＞0.05).术后28d,A组为6.12±0.98,B组为6.73±1.56,C组为2.14±0.57,D组为1 6.32±1.44,A、B组波幅明显高于C组,有统计差异(P＜0.05),B组波幅高于A组,两者无明显统计学差异(P＞0.05).术后7d,HE染色观察到,A、B、C三组水肿较明显,均有胶质细胞增生、巨噬细胞浸润及神经元数目减少,C组巨噬细胞浸润较A、B组更为明显;C组灰白质空洞比例及体积明显高于A、B组;A、B组可见更多的毛细血管存在.术后14d、21d、28d,三组水肿消退明显,有更多胶质瘢痕形成,巨噬细胞比例较损伤7d时减少,但A和B组神经元细胞数多于C组,A和B组巨噬细胞比例明显低于C组.术后28d NF200免疫组化阳性表达面积：A组为2171.32±187.3,B组为2201.46±165.5,C组为1661.04±146.2,D组为3351±121.3,A和B组NF200阳性表达面积明显高于C组,有统计学意义(P＜0.05),A和B

关键词：脊髓损伤内源性神经干细胞分化辛伐他汀

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膝关节陈旧性固定性脱位医源性病因及治疗方法探讨

膝关节陈旧性固定性脱位医源性病因及治疗方法探讨

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：李箭李棋唐新郑果王飞四川大学华西医院骨科成都610041

[目的]分析膝关节陈旧性固定性脱位的医源性病因,探讨其治疗方法并观察临床疗效.[方法]回顾性分析2009年1月至2013年12月收治的14例膝关节陈旧性固定性脱位患者的临床资料,14例患者中男性13例,女性1例,年龄19-62岁,平均36岁;左膝8例,右... 详细信息

[目的]分析膝关节陈旧性固定性脱位的医源性病因,探讨其治疗方法并观察临床疗效.[方法]回顾性分析2009年1月至2013年12月收治的14例膝关节陈旧性固定性脱位患者的临床资料,14例患者中男性13例,女性1例,年龄19-62岁,平均36岁;左膝8例,右膝6例;入院时间为伤后1-17个月,平均6.9个月.14例患者通过病史、体征及影像学检查(X线、三维CT及MRI)诊断为膝关节陈旧性固定性脱位.其发生固定性膝关节脱位/半脱位原因如下：3例受伤后急性期诊断为膝关节软组织损伤,未按脱位进行固定等处理;3例膝关节脱位合并神经血管损伤,急性期仅处理神经血管损伤,未完全恢复膝关节对合关系;3例急性期为膝关节内侧纽扣卡锁旋转脱位,手法复位未能完全恢复胫股关节对合;2例急性期为开放性脱位,急诊仅行创面处理,未恢复胫股关节正常对合关系;3例为严重的膝关节骨折脱位,急诊仅行骨折复位固定手术,未恢复关节对合关系.综上所述,造成膝关节陈旧性固定性脱位/半脱位的主要原因为：(1)急性期对膝关节脱位认识不够,误诊为软组织损伤、骨折等,固定治疗或手术均未恢复胫股关节对合关系;(2)对于无法手法复位的膝关节纽扣卡锁旋转脱位认识不够,急诊时误认为已经将脱位手法复位,实际并未纠正旋转脱位;(3)初诊时认识到了膝关节脱位,但由于存在开放损伤、骨折、神经血管损伤等,急诊手术时未重建PCL,或错误地仅重建了ACL等,术后仍无法维持胫股关节恢复正常对合关系;(4)急性期诊断了膝关节脱位,但治疗时同时重建包括PCL、ACL等在内的所有韧带,调节多组韧带张力平衡时未达到恢复正常的胫股关节对合关系——如ACL过紧等,造成陈旧性膝关节固定性脱位/半脱位.膝关节陈旧性固定性脱位/半脱位的主要特点：患膝不能承重或不能完全承重,无法正常行走;患膝活动范围受限,通常屈伸活动均明显受限;患膝反复肿痛.入院时主动关节活动度伸膝0°-50°(平均23°),屈膝15°-95° (平均63°);Lysholm评分12-26分(平均21分).14位患者均行手术治疗,具体手术方式根据患者不同病情及术中切开松解复位、维持复位的困难程度等情况不同,采取了不同的治疗手段,总体手术原则如下：(1)最为重要的是膝关节周围软组织彻底广泛松解,以恢复膝关节伸直0°位、增加膝关节屈膝度,同时恢复伸膝及最大屈曲位时胫股关节对位关系保持正常,特别注意就诊旋转,术中须结合C型臂X光机监视复位情况;(2) PCL对于保持膝关节正常解剖位置、正常活动度具有非常重要的作用,如有损伤,一定需要重建,恢复并保持胫股关节正常对位关系;(3)如术中复位困难,或复位不满意、不能维持复位的患者采用分期手术,即一期行切开松解、关节复位,外固定支架固定,6周后取外固定支架锻炼关节活动度,待活动度恢复后行稳定性重建手术治疗;对于松解彻底,松解后容易维持复位的患者则采用松解、复位后一期重建稳定性;(4)无论是否重建PCL及其他韧带,在关节松解后,必须维持膝关节处于正常的对位关系,如果有必要则采用外支架维持或保护重建、修复的韧带;(5)手术后6周开始关节活动度锻炼(取出外支架),术后6-7周达到0-90°;密切随访关注术后功能康复锻炼(6)对于合并有骨折、骨软骨损伤、半月板损伤的患者,一期行骨折复位、植骨、关节清理、半月板修整等处理;如关节面骨折、缺损,软骨破坏严重,无法恢复关节活动功能,则可采用关节融合术,为关节置换创造条件.随访时观察并记录术后患者并发症,膝关节活动度,稳定性,运动能力,Lysholm评分.[结果]所有患者手术顺利,术后顺利出院,无血管神经损伤及感染等并发症;其中1例患者因术后一周重建的后交叉韧带松弛,关节出现了复位丢失,因此住院期间进行了再次手术,收紧重建的后交叉韧带,外固定支架固定.全部13例患者随访时间4-47个月,平均23.6个月;至最后一次随访时8例膝关节伸直0°,屈曲120°-135°;4例主动膝关节伸直10-15°,屈曲90°-100°;1例患者残留膝关节后向不稳定,后抽屉试验(+);1例患者外翻应力试验阳性.所有患者运动能力均低于受伤前,2例患者运动能力明显受限.但所有患者运动能力明显高于本次治疗前,Lysholm评分62-90分,较术前明显提高.[结论]膝关节陈旧性固定性脱位患者膝关节功能极差,为挽救膝关节功能应积极手术治疗.具体手术方式应该根据患者的不同病情及术中切开松解复位、维持复位的困难程度等情况不同,采取不同的治疗手段.总体上手术难度大,术后患膝功能康复时间长,但最终膝关节功能可得到较好恢复,不同的治疗方法及其指针尚需对比研究.

关键词：膝关节手术治疗陈旧性脱位固定性脱位

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γ-分泌酶抑制剂DAPT封闭Notch信号通路对新生大鼠神经干细胞增殖分化影响的体外研究

γ-分泌酶抑制剂DAPT封闭Notch信号通路对新生大鼠神经干细胞增殖...

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第二届海峡两岸医药卫生交流协会骨科学术论坛暨四川省医学会第十八次骨科学术会议

作者：周庆忠冯大雄泸州医学院附属医院脊柱外科

目的：观察γ-分泌酶抑制剂DAPT在不同时间点封闭Notch信号通路后NSC增殖、分化的情况,探究选择封闭Notch信号通路的最佳时机.方法：(1) NSC的培养与鉴定：④用弯头手术刀将分离出的新生SD大鼠(2-3天内)脑组织切成小碎块(约1 mm3),经20... 详细信息

目的：观察γ-分泌酶抑制剂DAPT在不同时间点封闭Notch信号通路后NSC增殖、分化的情况,探究选择封闭Notch信号通路的最佳时机.方法：(1) NSC的培养与鉴定：④用弯头手术刀将分离出的新生SD大鼠(2-3天内)脑组织切成小碎块(约1 mm3),经200目尼龙网过滤形成的单细胞悬液在含有生长因子的无血清专用培养基内悬浮培养,并且使用TrypLTM Express消化联合机械吹打法进行传代.②对传至第5代的培养细胞,通过免疫荧光染色法鉴定神经干细胞的特异性表面标志物Nestin及经5％胎牛血清诱导分化后NSE、GFAP的表达.(2)脊髓提取液的制备：随机将15只健康的雌性成年SD大鼠分成三组,每组5只：瘫痪组用WD法制作T9平面完全性截瘫的SD大鼠脊髓损伤模型,假手术组在相同节段仅做椎板开窗,正常组不做处理,造模5d后制备各组脊髓提取液.(3)取第5代NSC随机分成七组：A组-空白对照组(即培养基中加入PBS液共同培养),B组-正常组(即培养基中加入正常脊髓提取液共同培养),C组-假手术组(即培养基中加入假手术脊髓提取液共同培养),D组-瘫痪组(即培养基中加入瘫痪脊髓提取液共同培养),E组-正常+DAPT组(即NSC培养基中加入正常脊髓提取液共同培养24h后加入DAPT),F组-假手术+DAPT组(即培养基中加入假手术脊髓提取液共同培养24h后加入DAPT)及G组-瘫痪+DAPT组(即培养基中加入瘫痪脊髓提取液共同培养24h后加DAPT).各组培养1d、2d、3d、4d、5d后,用细胞计数法测量各组神经干细胞的增殖情况,且各组分别于培养24 h、48h后提取神经干细胞的总RNA,采用逆转录-多聚酶联反应法(RT-PCR)测量神经干细胞Notch信号通路中的Notch1和Hes1 mRNA的表达水平.(4)取NSC随机分成两组：Ⅰ组对照组(培养基中加入瘫痪脊髓提取液共同培养)和Ⅱ组处理组(培养基中加入瘫痪脊髓提取液共同培养,分别于共同培养1d、2d、3d、5d、7d时加入γ-分泌酶抑制剂DAPT封闭Notch信号通路,DAPT终浓度为50umol/L),5％胎牛血清诱导分化48小时后,计算各组各封闭时间NSE阳性细胞(神经元)以及GFAP阳性细胞(星形胶质细胞)所占的百分率和剩余干细胞数.各个指标用±s即均数±标准差表示,统计学分析采用SPSS11.5统计软件进行.结果：(1)神经干细胞的培养及鉴定结果：新生SD大鼠(2-3天内)脑源性细胞在体外可以大量扩增、形成球状团聚物,而且可以连续的、稳定的传代.培养到第5代的细胞Nestin免疫荧光染色(+),诱导分化后可出现GFAP、NSE免疫荧光染色呈阳性的细胞.(2)封闭notch信号通路后,与A、B、C组比较,E、F组在各时间点的细胞数和Notch1、Hes1mRNA的表达量明显降低(P＜0.05);与D组比较,G组在各时间点的细胞数和Notch1、Hes1 mRNA的表达量明显降低(P＜0.05);与E、F组比较,G组在各时间点的细胞数和Notch1、Hes1 mRNA的表达量较高(P＜0.05);而A、B、C组之间在各时间点的细胞数和Notch1、Hes1 mRNA的表达量无明显差异(P＞0.05);E、F组之间在各时间点的细胞数和Notch1、Hes1 mRNA的表达量无明显差异(P＞0.05);D组、G组24h的Notch1与Hes1 mRNA的平均表达量均低于48h的,但差别没有统计学意义(P＞0.05).(3)封闭notch信号通路后,与Ⅰ组对照组相比,Ⅱ组处理组在各个时间点的干细胞数较少(P＜0.05),Ⅱ组处理组在共同培养2d、3d时加入DAPT,NSE阳性细胞(神经元)的百分率较高、GFAP阳性细胞(星形胶质细胞)的百分率较低(P ＜0.05);Ⅱ组处理组组内数据分析：在共同培养1d时加入DAPT的干细胞数明显少于共同培养2d、3d、5d、7d时加入DAPT (P ＜0.05),而在共同培养5d、7d时加入DAPT,其分化细胞数明显少于共同培养2d、3d时加入DAPT (P ＜0.05).结论：1.新生SD大鼠脑源性细胞不仅拥有扩增更新、分化成多类神经细胞的能力,而且原始神经细胞的表面标记物Nestin表达阳性,符合NSC的判定.2.瘫痪脊髓提取液可以上调神经干细胞Notch1和Hes1 mRNA的表达水平、促进NSC的增殖,可以较好的模拟SCI后的微环境.***可下调NSC Notch1和Hes1 mRNA的表达水平、抑制NSC的增殖;DAPT适时(在本实验条件下,在48-72小时封闭)封闭Notch信号可以促进NSC向神经元分化.

关键词：脊髓损伤细胞培养 Notch信号细胞增殖 γ-分泌酶抑制剂

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