目的探讨细胞自噬状态与子宫内膜异位症之间的关系及其意义。方法对内异症患者的在位及异位内膜基质细胞(n=31)及正常的子宫内膜基质细胞(n=31)行原代培养,免疫细胞化学鉴定;应用透射电镜观察组织中细胞自噬泡超微结构变化;Real-time PCR、Western blot法检测LC-3 m RNA和蛋白的表达。结果透射电镜结果显示:实验组的在位及异位内膜细胞的自噬泡数目较少。Real time-PCR及Western blot结果显示:内异症患者的在位及异位内膜的LC-3 m RNA及蛋白的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。内异症患者在位与异位内膜的LC-3 m RNA表达差异无统计学意义(P>0.05),而异位内膜的LC-3蛋白表达水平高于在位内膜(P<0.05)。结论 EMT患者的在位及异位内膜基质细胞的自噬活性降低,自噬可能参与了子宫内膜异位症的发病。
目的采用模拟供体小鼠经期的内膜组织,腹腔注射方式建立子宫内膜异位症(endometriosis,EM)小鼠模型。方法采用5只C57BL/6小鼠和4只增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)转基因小鼠作为模型供体,20只C57BL/6小...
详细信息
目的采用模拟供体小鼠经期的内膜组织,腹腔注射方式建立子宫内膜异位症(endometriosis,EM)小鼠模型。方法采用5只C57BL/6小鼠和4只增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)转基因小鼠作为模型供体,20只C57BL/6小鼠作模型受体。雌孕激素法模拟供体小鼠的月经周期,孕激素撤退后4小时,脱颈处死供体小鼠,将供体小鼠经期子宫取出,剥除肌层,将剥脱下的子宫内膜组织剪碎成1*1mm的碎片,分别注射入受体小鼠的腹腔,每只受体小鼠的腹腔注射量约为10片内膜碎片。普通模型组接受C57BL/6供体小鼠的子宫内膜碎片,EGFP模型组接受EGFP供体小鼠的子宫内膜碎片。受体小鼠术前3天连续每天皮下注射100ng 17β雌二醇,术后每3天皮下注射1次17β雌二醇(0.1 mg/kg-1),3周后模型建立成功。通过小动物活体成像、大体解剖、组织形态学观察的方式,了解此造模方法的成模情况;将2组模型小鼠内异灶大小、数量和盆腔粘连评分进行统计学比较,选择最优造模方式。结果成功地建立了EM小鼠模型(成模率达100%)。荧光穿透性较差,小动物活体成像对皮下内异灶标记敏感,对腹盆腔深部病灶的观察仍需剖腹后再行拍摄。普通模型组和EGFP模型组两组小鼠建模情况比较,无统计学差异(P>0.05)。结论用模拟经期内膜组织可成功地建立EM小鼠模型。
暂无评论