目的:探讨人类肿瘤抗原MAGE-A4对p53转录活性的影响。方法:选用p53缺失型人类肺癌细胞系H1299,采用荧光素酶报告剂分析、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western-blot、克隆形成实验及TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling)染色等方法研究MAGE-A4对p53转录活性的影响。结果:荧光素酶报告剂分析结果显示,转染p53基因(25ng)可以使p21启动子介导的荧光素酶表达增加(p<0.01);共转染恒定量(25ng)的p53基因和逐渐增加量(100ng、200ng、400ng)的MAGE-A4基因后,p21启动子介导的荧光素酶表达均明显高于单独转染p53基因时的表达(p<0.01)。RT-PCR和Western-blot结果也显示,转染p53基因可以使p21mRNA和蛋白表达水平增加(p<0.01),共转染MAGE-A4基因和p53基因后,p21mRNA和蛋白表达水平均明显高于单独转染p53基因时的表达水平(p<0.01)。克隆形成实验及TUNEL染色结果显示,转染p53基因可以使H1299细胞克隆形成数减少及凋亡细胞数增加(p<0.01),共转染MAGE-A4基因和p53基因以后,H1299细胞克隆形成数与单独转染p53基因组相比更为减少,凋亡细胞数也比单独转染p53基因组更为增加(p<0.01)。结论:MAGE-A4可以增加p53的转录活性及功能发挥。
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