蛋白A(Staphylococcal protein A)层析是当前单抗药物制备工艺的核心技术和"金标准".蛋白A与抗体在固液界面的结合机制的深刻阐述是开发高效蛋白A层析技术的基本前提.本文在利用表面等离子共振仪(SPR)、石英晶体纳米微天平(QC...
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蛋白A(Staphylococcal protein A)层析是当前单抗药物制备工艺的核心技术和"金标准".蛋白A与抗体在固液界面的结合机制的深刻阐述是开发高效蛋白A层析技术的基本前提.本文在利用表面等离子共振仪(SPR)、石英晶体纳米微天平(QCM-D)和原子力显微镜(AFM)技术观察了蛋白A与不同抗体分子(hIgG和mIgG2a)在固液界面的结合行为及其分子形貌特征.SPR结果显示,C端固定于芯片表面的Z结构域呈现出最高的抗体亲和性,N端固定的Z结构域次之.抗体在石英晶体芯片表面的吸附容量随着蛋白A配基密度升高而增大;但当蛋白A配基密度大于~80 ng/cm2时,配基利用率下降.此外,抗体的吸附亦受到pH值影响,在其等电点处的表现出最大的饱和吸附量.液相AFM结果进一步从单分子水平上表明,结合于C端固定在DNA折纸表面的Z结构域上的抗体分子呈现出side-way on的取向.
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