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71 篇 会议

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12 篇 鸡
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作者

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鹅Mx抗TMUV病毒分子机制的研究

鹅Mx抗TMUV病毒分子机制的研究

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：曾妙汪铭书贾仁勇朱德康刘马峰孙昆峰赵新新杨乔吴英程安春陈舜四川农业大学动物医学院预防兽医研究所成都四川四川农业大学动物医学院预防兽医研究所成都四川四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心成都四川动物疫病与人类健康四川省重点实验室成都四川

Mx蛋白是在IFN诱导下产生的抗病毒蛋白质,在各物种中表现遗传多样性.目前对于Mx的研究主要集中于哺乳动物的Mx基因.迄今为止对禽类的Mx蛋白抗病毒能力及机制的研究非常有限,仅有研究显示鸡Mx蛋白可以抗流感病毒,水泡性口炎病毒以及新城...

Mx蛋白是在IFN诱导下产生的抗病毒蛋白质,在各物种中表现遗传多样性.目前对于Mx的研究主要集中于哺乳动物的Mx基因.迄今为止对禽类的Mx蛋白抗病毒能力及机制的研究非常有限,仅有研究显示鸡Mx蛋白可以抗流感病毒,水泡性口炎病毒以及新城疫病毒.本实验对鹅Mx的免疫学特性和抗病毒机制进行了研究.首先,我们对健康和坦布苏病毒(TMUV)感染的2周龄鹅的Mx进行组织差异表达分析,发现病毒感染可诱导免疫组织中Mx转录水平显著上调.在鹅胚成纤维细胞(GEF)中过表达鹅Mx蛋白可显著降低TMUV病毒的增殖.为了进一步探索Mx蛋白抗病毒分子机制,我们构建了pCDNA3.1-Mx-K125A,pCDNA3.1-Mx-T145A,pCDNA3.1-Mx-▲ L4,pCDNA3.1-Mx-K125A + ▲ LA以及 pCDNA3.1-Mx-T145A + ▲LA的突变Mx蛋白的真核表达质粒,并在GEF检测突变蛋白的抗TMUV活性.研究发现AA 125K GTP绑定位点以及L4区对Mx抗TMUV病毒至关重要,而AA 145T GTP绑定位点并不直接决定Mx抗病毒活性.另外,为了探索Mx的亚细胞定位和抗TMUV之间的关联性,我们开展如下实验：首先对GEF、HEK293T以及BHK21三种细胞系上转染Pegfp-C1-linker-Mx,发现鹅Mx蛋白同时定位于细胞核和细胞质,并呈小点状和颗粒状分布的特征;进一步,经生物信息血分析,我们初步确定Mx具备一段非经典型双核定位信号序列,基于此我们构建Pegfp-C1-goMx-NLS质粒并转染细胞,确认该序列具有弱核定位作用;最后,我们对GEF上对瞬时过表达Pegfp-C1- linker-Mx蛋白与TMUV进行共定位,发现该TMUV与Mx存在物理位置上的重叠,且Pegfp-C1-linker-Mx在24h,48h,72h均表现强抗TMUV病毒活性.综上,水禽Mx蛋白与TMUV存在相互作用,证实Mx的抗禽黄病毒的功能.

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比较分析鸭甲型肝炎病毒强毒株和疫苗株诱导成年鸭免疫应答差异的研究

比较分析鸭甲型肝炎病毒强毒株和疫苗株诱导成年鸭免疫应答差异的...

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：欧旭敏毛赛曹靖雨朱德康汪铭书贾仁勇陈舜刘马蜂孙昆峰杨乔吴英陈孝跃程安春四川农业大学动物医学院预防兽医研究所成都四川四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心成都四川动物疫病与人类健康四川省重点实验室成都四川四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心成都四川动物疫病与人类健康四川省重点实验室成都四川

由于减毒活疫苗具有良好的免疫原性和保护力,这种通过异源传代致弱的减毒疫苗株被广泛的应用到人类和动物的疾病预防控制中。然而野毒株和传代致弱的病毒株在诱导免疫应答的差异并不完全清楚。我们通过比较5株鸡胚致弱毒株和68株野毒株...

由于减毒活疫苗具有良好的免疫原性和保护力,这种通过异源传代致弱的减毒疫苗株被广泛的应用到人类和动物的疾病预防控制中。然而野毒株和传代致弱的病毒株在诱导免疫应答的差异并不完全清楚。我们通过比较5株鸡胚致弱毒株和68株野毒株我们发现,鸭甲型肝炎病毒鸡胚致弱毒株其密码子的偏嗜性发生了明显的改变,这种改变可能是鸭甲型肝炎病毒在鸡胚中长期传代与鸡胚细胞中的翻译系统相互作用的结果。进一步通过比较强毒株(H株)和鸡胚致弱毒株(CH60株)在感染成年鸭后诱导免疫应答的差异,我们发现弱毒疫苗株的非机构蛋白在鸭组织中具有较低的表达,这种翻译系统的不兼容性可能是导致病毒复制效率降低的原因。虽然两株病毒具有明显的毒力差异,但是在免疫应答的早期均可诱导强烈的先天性免疫应答以及Tc免疫应答和Th免疫应答。然而鸭甲型肝炎病毒强毒株在传代的过程中,也产生了多个单核苷酸多态性(SNPs)位点,这些位点可能导致强弱毒株诱导免疫应答的差异,尤其是非同义密码子类的SNP位点。在这个研究中我们发现弱毒株可在脾脏和胸腺诱导强烈的Tc免疫应答,强毒株可在肝脏,肺脏,法氏囊和哈氏腺诱导强烈的Tc免疫应答。通过比较分析细胞因子表达谱,我们发现强弱毒株诱导的主要差异基因是RIG-1,MDA5,IFN-β和IL-6,主要差异表达免疫器官是哈氏腺,胸腺和法氏囊。这些发现将为进一步研究鸭甲型肝炎病毒毒力对病毒宿主相互作用差异方面提供了新的信息。

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禽流感病毒NS1蛋白抑制Ⅰ型干扰素产生的机制研究

禽流感病毒NS1蛋白抑制Ⅰ型干扰素产生的机制研究

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：王俊勇曾艳徐帅杨佳运王婉冰殷雷钟波葛金英舒红兵陈化兰雷曹琦朱启运中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室兰州730046 武汉大学生命科学院医学研究院武汉430071 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069

H5N1亚型禽流感病毒(AIV)已经在16个国家和地区引起超过800人的感染病例,死亡率达53％.高致病性禽流感病毒的跨种间传播和重组,并导致动物发病或死亡是当前研究的热点.其中H5N1 AIV的非结构蛋白NS1是影响病毒毒力的重要决定因子之一.本...

H5N1亚型禽流感病毒(AIV)已经在16个国家和地区引起超过800人的感染病例,死亡率达53％.高致病性禽流感病毒的跨种间传播和重组,并导致动物发病或死亡是当前研究的热点.其中H5N1 AIV的非结构蛋白NS1是影响病毒毒力的重要决定因子之一.本研究团队前期临床分离的两株猪源H5N1亚型AIV具有高度同源的遗传背景,但对SPF鸡的致病表型却完全不同,前期研究结果表明,NS1效应区的5个氨基酸自然缺失导致其抑制Ⅰ型干扰素(IFN)产生的能力不同,并影响两株病毒在SPF鸡体内的复制水平(Zhu etal,J Virol,2008).本研究拟深入研究此5个氨基酸的自然缺失在哺乳动物或细胞中调控IFN产生的分子机制.首先,我们利用反向遗传技术将两株AIV的NS1(野生型称为NS1,缺失型称为NS1Δ)进行替换后拯救病毒,并感染A549/THP1细胞和BALB/c小鼠,结果表明NS1重组病毒抑制IFN产生的能力强于NS1Δ重组病毒.随后,利用生化实验和蛋白结构模拟实验进行分子机制研究,结果表明5个氨基酸缺失基序可通过两种途径影响IFN产生.(i)该5个氨基酸缺失导致NS1二聚体结构发生构象紊乱,导致NS1Δ结合双链RNA的能力下降,弱化对RIG-Ⅰ信号通路的抑制作用,导致宿主IFN诱生能力增强;(ii) E3泛素酶TRIM25是RIG-I分子活化的关键蛋白.NS1蛋白可以结合TRIM25分子的CCD区域,影响该抗病毒信号通路的活化.但5个氨基酸缺失减弱NS1Δ和TRIM25的相互作用以及对RIG-I信号通路活化的抑制作用,同样增强了宿主IFN的诱生能力.因此,本研究的结果表明：(i)高致病性禽流感病毒在与宿主进行相互作用的过程中,为了自己的生存,可以通过其编码蛋白NS1蛋白对其毒力进行微调,达到和宿主共生的平衡状态;(ii)本研究中鉴定的5个氨基酸缺失基序可以作为小分子药物设计的靶点,有助于流感病毒治疗或该病防控.

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表面展示H9N2亚型禽流感病毒HA2-DCpep乳酸菌的构建及免疫评价

表面展示H9N2亚型禽流感病毒HA2-DCpep乳酸菌的构建及免疫评价

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：姜延龙王棋杨桂连王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物微生态制剂工程研究中心吉林长春130118

禽流感(Avian influenza,AI)是由流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的疾病,其具有急性,高传染性,给养禽业造成严重的经济损失,也威胁着人类健康.防控禽流感有效的途径是疫苗.植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)作为新型口服粘...

禽流感(Avian influenza,AI)是由流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的疾病,其具有急性,高传染性,给养禽业造成严重的经济损失,也威胁着人类健康.防控禽流感有效的途径是疫苗.植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)作为新型口服粘膜免疫疫苗制剂在禽流感等粘膜免疫相关疾病的防制治中具有诸多优势.聚-γ-谷氨酸合成酶A(pgsA)是乳酸菌的表面展示原件,可将外源蛋白锚定在宿主菌表面,树突状细胞诱导肽(DC-targeting peptides,DCpeps)对外源抗原具有递呈功能.本试验通过pgsA'表面展示元件将禽流感病毒高度保守蛋白HA2-DCpep融合蛋白锚定于植物乳杆菌表面,并通过小鼠实验初步评价其免疫保护效果.按照预设的免疫程序喂饲6周龄BALB/c小鼠,免疫结束后,通过流式细胞术检测各免疫器官中T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖活化情况,酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测小鼠体内HA2特异性IgG和粘膜免疫抗体SIgA的及血清内细胞因子含量.对小鼠攻毒后测量监控体重并计算体重丢失率、存活率,将小鼠鼠处死后制作肺部取样进行病理切片制作观察.结果显示,重组乳酸菌可提高脾脏(SPL)SPL、肠系膜淋巴结(MLNs)MLN中CD3 + CD8 + T细胞数量及CD3 +CD4 +T细胞分泌细胞因子IL-4、IL-17、IFN-γ的细胞水平,同时增强小鼠体内CD3 + CD8+ IFN-γ + T细胞的活化,提高B220 +IgA+ B细胞水平,提高体液免疫水平,有效促进小鼠各免疫器官中T淋巴细胞和B淋巴细胞活化,提高小鼠体内及HA特异性IgG和粘膜免疫抗体SIgA的水平及细胞因子分泌水平.攻毒后PBS 组、pSIP409-pgsA 组、pSIP409-pgsA'-HA2组及pSIP409-pgsA ' -HA2-DCpep 组存活率分别为12.5％、12.5％、12.5％及25％,重组乳酸菌组与PBS对照组和空载体组相比,体重丢失率低且体重恢复快.肺部病理切片结果显示：重组乳酸菌pSIP409-pgsA' -HA2-DCpep组肺组织形态较为完整,炎性病变较轻,对禽流感病毒的感染有一定免疫保护作用.

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水禽源呼肠孤病毒的全序列测定和分型

水禽源呼肠孤病毒的全序列测定和分型

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第四届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：王丹张大丙中国农业大学动物医学院农业部人畜共患病重点开放实验室

为获得水禽源呼肠孤病毒的全基因组序列,从而明确该类病毒的分子生物学特征和分类地位。本研究采用RTPCR和5'RACE方法,测定了番鸭"白点病"病原815-12株全基因组序列以及新型鸭源呼肠孤病毒J18和091株S1基因节段的序列,并... 详细信息

为获得水禽源呼肠孤病毒的全基因组序列,从而明确该类病毒的分子生物学特征和分类地位。本研究采用RTPCR和5'RACE方法,测定了番鸭"白点病"病原815-12株全基因组序列以及新型鸭源呼肠孤病毒J18和091株S1基因节段的序列,并与已测定的鸡源、水禽源呼肠孤病毒序列进行比较。序列分析结果显示,815-12株基因组全长22969 bp,含10个基因节段,各基因节段长度为1125 bp(S4)-3958 bp(L1)。序列比对结果显示,815-12株具有禽正呼肠孤病毒(ARV)保守的5'末端六核苷酸序列(5'-GCUUUU)、3'末端五核苷酸序列(UCAUC-3')和相应的蛋白功能基序。815-12株与091株(J18株)的S组基因的多顺反子结构和基因编码策略存在差异,后者与鸡源呼肠孤病毒更为相似。不同水禽源呼肠孤病毒分离株之间、水禽源和鸡源呼肠孤病毒分离株之间,序列存在显著差异。进化分析结果显示,水禽源呼肠孤病毒可分为两个基因型;水禽源和鸡源呼肠孤病毒的M2基因节段可能存在重组;水禽源呼肠孤病毒之间,编码λA、λB、μA、μNS和σA蛋白的基因节段可能存在重组。因此,为了与禽正呼肠孤病毒属中的鸡源分离株相区别,提议将水禽源的ARV统称ARV-Wa,并将ARV-Wa分成两个基因型。

关键词：正呼肠孤病毒禽正呼肠孤病毒鸭源呼肠孤病毒基因组序列基因型

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鸭瘟病毒UL15蛋白入核机制初探

鸭瘟病毒UL15蛋白入核机制初探

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：杨琳琳杨乔汪铭书程安春朱德康刘马峰贾仁勇陈舜孙昆峰赵新新吴英陈孝跃四川农业大学预防兽医研究所四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

疱疹病毒UL15蛋白作为末端酶复合物的亚基成员之一,具有水解ATP和特异性切割基因组末端的功能,在病毒基因组的剪切和包装过程中发挥着关键作用.研究发现,在感染疱疹病毒的细胞中,UL15蛋白需定位在细胞核中才能发挥它的作用.在感染鸭瘟病...

疱疹病毒UL15蛋白作为末端酶复合物的亚基成员之一,具有水解ATP和特异性切割基因组末端的功能,在病毒基因组的剪切和包装过程中发挥着关键作用.研究发现,在感染疱疹病毒的细胞中,UL15蛋白需定位在细胞核中才能发挥它的作用.在感染鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)的细胞中虽然UL15蛋白最终定位于细胞核,但是UL15蛋白不具有引导蛋白入核的核定位信号序列(Nuclear location sig-nal,NLS),在缺乏病毒其它蛋白时不能单独进入细胞核,目前其入核机制尚不明确.本研究将UL15基因和可能与UL15蛋白存在相互作用的UL6、UL28、UL33基因分别连接至真核表达载体,构建重组表达质粒UL15-pcDNA3.1、UL6-pCMV-C-Flag、UL28-pCMV-HA、UL33-pCMV-myc.将 UL15与 UL6、UL28、UL33的真核表达质粒进行单独转染或共转染,通过间接免疫荧光检测UL15蛋白在细胞中的定位.结果发现,UL15真核表达质粒单独转染时其仅分布于细胞质中,在UL15与UL6的真核表达质粒共转染时,UL15蛋白有部分入核现象,UL15分别与UL28、UL33真核表达质粒共转染时,UL15蛋白仍然只停留在细胞质中.但是,当UL15与UL28、UL33三者共转染时,UL15蛋白则能够完全进入细胞核,而当UL15与UL28和UL6共转染或者与UL33和UL6共转染时,UL15蛋白仍然只有部分入核.可初步认为,在感染DPV的细胞中,UL15蛋白入核是在UL15与UL28和UL33蛋白形成复合物后,由UL28和UL33蛋白共同携带UL15蛋白进入细胞核.UL6蛋白在UL15蛋白的入核过程中起着一定的促进作用.

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鸭瘟病毒ICP22蛋白分子特性初步分析

鸭瘟病毒ICP22蛋白分子特性初步分析

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：李阳光吴英汪铭书程安春朱德康刘马峰贾仁勇陈舜孙昆峰赵新新杨乔陈孝跃四川农业大学预防兽医研究所四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

α疱疹病毒ICP22蛋白为疱疹病毒五个早期蛋白产物之一,其表达产物对激活病毒自身早晚期基因的转录表达起重要作用,是实现疱疹病毒裂解性增殖的基本前提.此外,ICP22蛋白还涉及与多个病毒基因或宿主细胞因子相互作用影响病毒的复制、潜伏...

α疱疹病毒ICP22蛋白为疱疹病毒五个早期蛋白产物之一,其表达产物对激活病毒自身早晚期基因的转录表达起重要作用,是实现疱疹病毒裂解性增殖的基本前提.此外,ICP22蛋白还涉及与多个病毒基因或宿主细胞因子相互作用影响病毒的复制、潜伏感染、免疫逃避、病毒粒子出芽和包膜等多个生理过程.然而鸭瘟病毒ICP22蛋白是否具备与其同源物相似的蛋白功能尚不明确.生物信息学分析显示鸭瘟病毒双拷贝US1基因编码的ICP22蛋白具备一个保守的Herpes_IE68超家族结构域、多个蛋白结合位点和一个多聚核苷酸结合位点,推测与其转录调节功能有关.进一步分析发现ICP22蛋白的N端和C端存在大量Ser和Thr磷酸化位点(分别为32个、14个),这些磷酸化位点在DNA复制过程中受酪蛋白激酶2( CK2)和蛋白激酶C(PKC)的磷酸化,参与病毒的转录调控和延长.此外,ICP22蛋白的N端和C端还存在大量无序蛋白序列,与其亲水性残基和二级结构中的无规则卷曲分布一致;而其有序区域则与疏水性残基和二级结构中的α螺旋分布一致,位于ICP22蛋白的中部超家族结构域区域,无序蛋白广泛参与信号传递、DNA的转录调控、翻译、蛋白质磷酸化、小分子存储等多个细胞内生理和病理过程.重组原核表达质粒pET32a( +)/ICP22蛋白表达结果证实ICP22重组蛋白的表观分子量比理论分子量大17kDa左右,可被His标签抗体识别,说明其在表达的过程中受到了广泛的翻译后修饰,导致其分子量发生了迁移.根据预测的ICP22蛋白功能域将其分成全长和部分重叠的8个片段,分别克隆入真核表达载体pCAGGS,转染DEF细胞后IFA检测其定位情况,结果表明ICP22蛋白全长在核质中均有分布,但缺失了305-314AA区域的重组质粒不能定位于细胞核,表明其核定位信号对ICP22蛋白的入核起引导作用.实时荧光定量PCR检测鸭瘟病毒ICP22基因的转录时相结果表明ICP22基因最早于感染后的0.5h开始转录,转录量随时间的增加持续上升并在感染后的24h达到峰值,与鸭瘟病毒立即早期基因ICP27的转录谱一致.而作为病毒真正晚期基因的UL55基因则在感染后的8h才开始被检测到,表明鸭瘟病毒ICP22蛋白与其同源物一样为一个立即早期基因.鸭瘟病毒ICP22蛋白的分子特性分析为其功能和作用机制的进一步研究奠定了基础.

关键词：

来源：评论

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坦布苏病毒弱毒株的免疫原性

坦布苏病毒弱毒株的免疫原性

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：吕俊峰曲胜华杨立新梁特张大丙中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学重点实验室北京100193

坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)是危害我国养鸭业的新发传染病病原,研发TMUV疫苗对于TMUV感染的控制具有重要意义.本研究旨在评估TMUV PS株第180代细胞适应株(PS180)的免疫原性.免疫攻毒试验结果显示,在雏鸭1日龄时,经腿肌注射途径接种... 详细信息

坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)是危害我国养鸭业的新发传染病病原,研发TMUV疫苗对于TMUV感染的控制具有重要意义.本研究旨在评估TMUV PS株第180代细胞适应株(PS180)的免疫原性.免疫攻毒试验结果显示,在雏鸭1日龄时,经腿肌注射途径接种PS180株(105PFU/只),7d后接种强毒株Y株,未见雏鸭发病和死亡,而非免疫对照组在攻毒后死亡40％.结果表明,PS180株具有良好的免疫原性.

关键词：鸭坦布苏病毒弱毒株免疫原性

来源：评论

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实时荧光定量TaqMan-PCR检测鹅细小病毒方法的建立

实时荧光定量TaqMan-PCR检测鹅细小病毒方法的建立

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第四届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：刘洋顾小雪霍斯琪刘玉良王传彬中国动物疫病预防控制中心

目的本研究旨在建立一种适用于鹅细小病毒检测的荧光定量TaqMan-PCR技术。方法根据GenBank中首次发现的鹅细小病毒SYG-61株VP3基因的全序列（序列号:DQ299421）,设计一对特异性引物及TaqMan探针,扩增位于VP3基因第1380-1459位长度为80-b... 详细信息

目的本研究旨在建立一种适用于鹅细小病毒检测的荧光定量TaqMan-PCR技术。方法根据GenBank中首次发现的鹅细小病毒SYG-61株VP3基因的全序列（序列号:DQ299421）,设计一对特异性引物及TaqMan探针,扩增位于VP3基因第1380-1459位长度为80-bp的片段。以SYG61株DNA为模板,建立检测鹅细小病毒的实时荧光定量PCR方法。构建含有上述目的片段的质粒作为标准品,10倍比稀释后建立标准曲线,测定敏感性。同时采用标准品对该方法的批内和批间重复性进行检测。与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测,并将GPV GD株毒液倍比稀释后经鸭胚接种,收获其尿囊液进行检测,以确定该方法的可行性。结果本文所构建的荧光定量TaqMan-PCR方法能在鹅细小病毒SYG61株DNA样本中检出荧光信号。最低检出量为1.56×10～1拷贝/反应;线性范围达9个数量级。采用质粒标准品10～60～2拷贝/μl这五个稀释度进行重复性检测,每个稀释度五个重复,所得批内变异系数为0.38%.74%;相同的五个样品连续三天每天复检一次,所得批间变异系数为1.23%.48%。检测禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、鸭甲型肝炎病毒1型、鸭甲型肝炎病毒3型、禽白血病病毒、鸭坦布苏病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒等非鹅细小病毒,均未出现非特异性荧光信号。将GPV GD株毒液倍比稀释为10～0、10和10,每个稀释度接种三枚9日龄鸭胚,六日内死亡率为88.9%（8/9）,收获尿囊液进行检测,GPV检出率为100%（9/9）,Ct值范围在21.03～28.55之间。结论本方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,可在获得样品后三小时以内得到检测结果,因此适用于临床样品中的鹅细小病毒快速检测。

关键词：鹅细小病毒 DNA TaqMan-PCR 鸭甲型肝炎病毒实时荧光定量

来源：评论

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鸭甲肝病毒基因3型VP1蛋白在昆虫细胞中的表达

鸭甲肝病毒基因3型VP1蛋白在昆虫细胞中的表达

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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议

作者：王名行柴莉莉钟雪峰董蕴涵宁康张大丙中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学重点实验室北京100193

本研究旨在用杆状病毒表达系统表达鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)基因3型(DHAV-3)VP1蛋白.用RT-PCR扩增DHAV-3VP1基因,用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组杆粒(rBacmid-VP1),经转染SF9细胞,获得重组杆状病毒(rBac-VP1).Western Blot和间接免疫荧光鉴定结果显示,DHAV-3抗血清可特异性识别重组蛋白.结果表明,DHAV-3VP1重组蛋白在昆虫细胞中获得表达.

关键词：鸭甲肝病毒病毒感染 VP1蛋白蛋白表达

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