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陈熟普洱茶中菌株YN3的分离鉴定

陈熟普洱茶中菌株YN3的分离鉴定

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：牛莉莉宋磊唐天羿熊梦洁上海大学生命科学学院/上海市能源作物培育与应用重点实验室上海 200444 中国普通微生物菌种保藏管理中心北京 100101

应用稀释涂布平板法,采用100倍稀释的LB培养基为分离培养基,从一款5年熟普洱茶中分离到一株具有蛋白酶活性的细菌菌株YN3.该菌株为好氧的革兰氏阳性芽孢杆菌.菌体大小为0.5-0.6 tm× 1.0-2.6 μm,以周生鞭毛运动.其生长温度范围为20...

应用稀释涂布平板法,采用100倍稀释的LB培养基为分离培养基,从一款5年熟普洱茶中分离到一株具有蛋白酶活性的细菌菌株YN3.该菌株为好氧的革兰氏阳性芽孢杆菌.菌体大小为0.5-0.6 tm× 1.0-2.6 μm,以周生鞭毛运动.其生长温度范围为20℃-50℃,最适生长温度为30C-37℃,生长pH范围为4.0-8.0,最适生长pH为***耐受范围为0-9％.G+C含量为38.7mol％.细胞膜主要呼吸醌为MK-7.菌体细胞壁含内消旋二氨基庚二酸(meso-Dpm),细胞壁类型为Alγ型.细胞脂肪酸主要组分为anteiso-C15∶0、 anteiso-17：0和C18∶1ω7c. 16S rDNA基因序列分析表明,菌株YN3是Pullulanibacillus属的一个新成员,与Pullulanibacillus naganoensis DSM 10191T(相似性为95.8％)和Pullulanibacillus uraniitolerans DSM 19429T较为接近(相似性为95.4％).通过生物学特性和系统发育分析,确定菌株YN3应是Pullulanibacillus属的一个新种,命名为Pullulanibacillus pueri,模式菌株为YN3T(CGMCC1.12777T=JCM30075T.)

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中国不同油藏微生物多样性研究

中国不同油藏微生物多样性研究

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：田燕万云洋穆红梅董海良洪宁孙午阳张枝焕中国石油大学(北京)地球科学学院油气资源与探测国家重点实验室油气污染防治北京市重点实验室北京102249 中国地质大学(北京)地球科学与资源学院生物地质与环境地质国家重点实验北京100083

石油微生物多样性已经广受重视,但迄今仍没有对我国油藏微生物有系统研究。本文首次系统对胜利油田、大港油田、大庆油田、新疆油田、江汉油田、延长油田以和辽河油田的微生物多样性进行比对和分析。由表1可知,大港油田(2个菌门)和江汉... 详细信息

石油微生物多样性已经广受重视,但迄今仍没有对我国油藏微生物有系统研究。本文首次系统对胜利油田、大港油田、大庆油田、新疆油田、江汉油田、延长油田以和辽河油田的微生物多样性进行比对和分析。由表1可知,大港油田(2个菌门)和江汉油田(3个菌门)的微生物多样性不如其他五个油田的高,并都无古菌。新疆油田(5个菌门)的细菌多样性很好,但未见古菌。胜利油田(5个菌门,其中3个细菌门,2个古菌门)、大庆油田(5个菌门,其中4个细菌菌门,1个古菌菌门)、延长油田(5个菌门,其中4个细菌菌门,1个古菌菌门)和辽河油田(28个菌门,其中26个细菌菌门,2个古菌菌门,本文只列出14个菌门)的微生物多样最好,且均有古菌。辽河油田存在一些含量较高但其他油田未见的菌门,如疣微菌门、酸杆菌门、蓝藻门、绿弯菌门及芽单胞菌门。在细菌菌门中,变形菌门在各油藏中都是优势菌门,占各油田总微生物量的69％以上,古菌中广古菌门为优势菌门。各油藏中微生物多样性的差异与油藏原始地层温度的相关性不明显,这可能是由于其他地质条件或者人工干预的影响,正在进一步研究。

关键词：微生物多样性油藏菌门细菌古菌

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贵州10个玉米品种根际土壤芽胞杆菌的多样性

贵州10个玉米品种根际土壤芽胞杆菌的多样性

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：刘国红朱育菁刘波车建美唐建阳潘志针陈泽辉福建省农业科学院农业生物资源研究所福建福州350003 贵州省农业科学院旱粮研究所

[目的]为了了解玉米品种根际芽胞杆菌种群的多样性信息,[方法]采用稀释平板法,对10个玉米品种根际的芽胞杆菌进行了分离,并对其16S rRNA序列进行了分析.[结果]从10个玉米品种根际共分离到69个形态差异的芽胞杆菌菌株.16S rRNA序列分析表... 详细信息

[目的]为了了解玉米品种根际芽胞杆菌种群的多样性信息,[方法]采用稀释平板法,对10个玉米品种根际的芽胞杆菌进行了分离,并对其16S rRNA序列进行了分析.[结果]从10个玉米品种根际共分离到69个形态差异的芽胞杆菌菌株.16S rRNA序列分析表明,69个菌株鉴定为23个种,归属于3个属Bacillus、Lysinibacillus和Psychrobacillus,其中芽胞杆菌属的种类和数量最多.不同玉米品种根际的芽胞杆菌的种类数量不同,QB662×QB2219和QB 1013×QB446根际分离到的芽胞杆菌种类最多,而J106×QB572的芽胞杆菌菌落含量最高.玉米根际的优势种群主要为***、***、***和***,其他芽胞杆菌种类仅在一种或少数的玉米品种出现.QB662×QB2219根际的芽胞杆菌种类香农多样性指数最大,QB948×QB48根际的芽胞杆菌种群香农多样性指数其次高,但均匀度指数最高,J 106×QB572的多样性指数和均匀度指数皆最低.分离菌株中,FJAT-17411、FJAT-17472、FJAT-17430和FJAT-17442等4株与GenBank中己报道16S rRNA基因序列的相似性从97％到98％不等,可能代表着芽胞杆菌新种.[结论]这表明玉米根际具有较为丰富的芽胞杆菌种群多样性,并存在一些潜在的新的微生物菌种资源.

关键词：芽胞杆菌玉米根际土壤多样性

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海绵放线菌FIM06022及其产生的次级代谢产物

海绵放线菌FIM06022及其产生的次级代谢产物

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：赵薇彭飞陈玉英王传喜王海龙陈名洪连云阳江红福建省微生物研究所福建省新药(微生物)筛选重点实验室福州

菌株FIM06022是从东海福建海域的海绵中分离得到的放线菌.经形态观察、培养特征和生理生化特性研究、菌株16S rRNA基因序列分析,表明菌株FIM06022归属于疣孢菌属.其16S rRNA基因序列与同样来自海洋的疣孢菌属菌株Verrucosispora marls A...

菌株FIM06022是从东海福建海域的海绵中分离得到的放线菌.经形态观察、培养特征和生理生化特性研究、菌株16S rRNA基因序列分析,表明菌株FIM06022归属于疣孢菌属.其16S rRNA基因序列与同样来自海洋的疣孢菌属菌株Verrucosispora marls AB-18-032同源性最高.采用一菌多素(OSMAC)的策略选择多种发酵培养基对该菌进行发酵培养,通过HPLC-DAD-MS等方法对其次级代谢产物进行分析.用现代色谱技术分离纯化获得化合物,并对化合物进行结构鉴定.从菌株FIM060022不同发酵产物的乙酸乙酯提取物中共分离得到7个化合物,根据化合物的光谱特征(ES I-MS、1D-NMR和2D-NMR)和理化性质进行结构鉴定.化合物FW06022-1为desferrioxamine的类似物,属于铁载体类,是一个新结构的化合物;FW06022-2为抗MRSA和VRSA的多环聚酮类抗生素Abyssomicin C;FW06022-3和4分别为Abyssomicin B和H;FW06022-5为呋喃类抗肿瘤化合物Proximicin A;FW06022-6为蒽酮类化合物Lurnichrome,这是首次从微生物中获得的具有诱导海鞘幼虫蜕变的化合物;FW06022-7为腺嘌呤核苷Adenosine.海洋疣孢菌FIM06022具有产生多种类型次级代谢产物的能力,值得进一步研究.

关键词：

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广西北仑河红树林植物内生放线菌的分离鉴定及活性研究

广西北仑河红树林植物内生放线菌的分离鉴定及活性研究

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：杨桂柳吴家法杨立芳姜明国广西民族大学海洋与生物技术学院广西高校微生物与植物资源利用重点实验室广西南宁 530008

[目的]本研究对广西北仑河红树林植物内生放线菌进行分离鉴定并检测其抗菌活性。[方法]采集5种红树林植物生长良好的根、茎、叶,用14种培养基进行分离纯化。随机选取30株菌提取DNA,并用16s rDNA系统发育分析的方法构建系统进化树,初步...

[目的]本研究对广西北仑河红树林植物内生放线菌进行分离鉴定并检测其抗菌活性。[方法]采集5种红树林植物生长良好的根、茎、叶,用14种培养基进行分离纯化。随机选取30株菌提取DNA,并用16s rDNA系统发育分析的方法构建系统进化树,初步确定其分类地位。以6种细菌和20株真菌为指示菌,采用滤纸片法进行抗菌活性检测实验。[结果]共得到200个内生放线菌分离株,其中从白骨壤上分离得到菌株65株,在5种采集到的红树中出菌率最高;从2216E培养基上得到32株,在14种培养基中出菌率最高。鉴定的30株菌隶属于链霉菌属、拟诺卡氏菌属、假诺卡氏菌属、壤球菌属、栖白蚁菌属的放线菌。去重后的106株内生放线菌中筛选出38株至少对1种病原细菌有抗菌活性,39株内生放线菌对至少一种指示病原真菌有抗菌活性,其中9株菌都能抑制十种以上检定真菌的生长。[结论]首次对广西北仑河红树林进行内生放线菌的研究,表明其内生放线菌菌种资源丰富并且具有很好的抗菌活性,值得深入研究,为后续分离培养新的植物内生放线菌、寻找更多的海洋天然产物提供有效的实践指导。

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益生菌及其代谢产物对凡纳滨对虾消化酶活性的影响

益生菌及其代谢产物对凡纳滨对虾消化酶活性的影响

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：沙玉杰王宝杰刘梅蒋克勇辛芳王雷中国科学院海洋研究所生物技术中心山东青岛 266071

以初始体重为3.5±0.06 g的凡纳滨对虾为研究对象，在30±2.C培养环境下于水族箱中养殖4周，研究饲料中添加益生菌及代谢产物对凡纳滨对虾肝胰腺和肠道消化酶活性的影响.以基础饲料为对照组，在基础饲料中分别添加粪肠球菌NRW-2...

以初始体重为3.5±0.06 g的凡纳滨对虾为研究对象，在30±2.C培养环境下于水族箱中养殖4周，研究饲料中添加益生菌及代谢产物对凡纳滨对虾肝胰腺和肠道消化酶活性的影响.以基础饲料为对照组，在基础饲料中分别添加粪肠球菌NRW-2(Enterococcus faecium NRW-2)、戊糖乳杆菌HC-2(Lactobacillus pentosus HC-2)、戊糖乳杆菌HC-2的代谢产物，最终每克基础饲料中含有1.0×107 CFU益生菌或此菌量所对应的代谢产物，共配制3种实验饲料.实验结果如下：与对照组相比，实验饲料投喂组可使肠道中蛋白酶活力显著提高(P＜0.05)，但对肝胰腺中蛋白酶活力无显著差异;饲料中添加粪肠球菌NRW-2的实验组与对照组相比使肠道和肝胰腺中淀粉酶和脂肪酶活力均有显著提高(P＜0.05)，戊糖乳杆菌HC-2投喂组对肝胰腺中淀粉酶及肠道中脂肪酶的活力较对照组有显著提高(P＜0.05)，而戊糖乳杆菌HC-2代谢产物的添加仅显著提高了凡纳滨对虾肠道淀粉酶的活性.上述实验结果表明，饲料中添加益生菌及其代谢产物可以提高凡纳滨对虾肠道及肝胰腺中消化酶的活力，其中益生菌的作用优于代谢产物.

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微生物修复石油污染中的生物演化作用

微生物修复石油污染中的生物演化作用

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：陈丽华西北民族大学

以长庆油田石油污染为背景,分别用A5、A6、D4、F1、F2 5种菌株处理石油污染土壤,研究了处理过程中对烷烃的降解效果及生物标志物的演化情况.实验结果表明：对正构烷的降解：F2对大部分正构烷烃降解率高于D4;两种菌种均对于高碳数烷烃的... 详细信息

以长庆油田石油污染为背景,分别用A5、A6、D4、F1、F2 5种菌株处理石油污染土壤,研究了处理过程中对烷烃的降解效果及生物标志物的演化情况.实验结果表明：对正构烷的降解：F2对大部分正构烷烃降解率高于D4;两种菌种均对于高碳数烷烃的降解明显优于低碳数的降解;F1、A5、A6菌种对于正构烷烃的降解曲线相似呈W型,降解率A6＞A5＞ F1.对藿烷的降解：F2的平均降解率高于F1和D4,F2总体降解比较彻底,而F1与D4适合用于降解高碳数藿烷,F2对于低碳数藿烷降解比高碳数彻底,F1和D4对高碳数藿烷降解比低碳数有优势.各菌株降解正构烷烃生物标志物特征显示：各菌降解石油表现出先降解高碳数正构烷烃为低碳数正构烷烃,高碳数正构烷烃中奇数碳向偶数碳正构烷烃演化的规律;原油中类异戊二烯烷烃在混合菌7天的作用过程中发生了明显的降解,使部分植烷(C20H42 M=282)脱去一个甲基转化为姥鲛烷(C19H40 M=268),姥植比;原油受混合菌7天作用过程中烷烃受到较明显的降解,类异戊二烯烷烃则比较稳定,降解速率：正构烷烃大于霍烷.姥植比、烷烃值是生物标志物演化主要参数.

关键词：生物标志物生物演化姥植比烷烃值

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海洋氨氧化古菌的培养和代谢机制研究

海洋氨氧化古菌的培养和代谢机制研究

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：申婷婷耿继亚厦门大学化学化工学院福建厦门 361005

氨氧化古菌是一种在氮循环中可以将氨转化为亚硝酸盐的一类古菌，近几年来国外一些学者在水族馆、温泉、土壤、废水等环境中成功发现了氨氧化古菌，并发现它对氮循环中硝化途径有重要作用。目前全球共获得3株纯培养的氨氧化古菌，仅一... 详细信息

氨氧化古菌是一种在氮循环中可以将氨转化为亚硝酸盐的一类古菌，近几年来国外一些学者在水族馆、温泉、土壤、废水等环境中成功发现了氨氧化古菌，并发现它对氮循环中硝化途径有重要作用。目前全球共获得3株纯培养的氨氧化古菌，仅一个为海洋来源。本课题组引进此株海洋来源的纯种氨氧化古菌并培养成功，之后对它的代谢机制进行了初步研究。此株菌利用铵态氮氧化产生能量进行化能无机自养，我们通过测量氨的消耗量以及亚硝酸根的生成量来检测它的生长状况，做出标准曲线，为进一步培养及保种提供信息。本实验室对比了土壤中及其他文献报道的氨氮测量方法制定出了适合测量此株菌的氨氮测量方法。此外，在不同铵盐浓度培养基中培养此株氨氧化古菌，通过上述氨氮测量方法找出它的最适生长浓度，实现最优培养，高密度培养。同时，利用三维超景深显微镜计数技术和气相色谱技术，更加准确监测它在各样条件下的生长状况以及此株菌在不同生长阶段的耗氧量。在此基础上，本课题组正着力于研究此氨氧化古菌的产电性及在污水处理中的作用。

关键词：氨氧化古菌氮循环硝化途径

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利用宏基因组学技术分析煤层水中微生物的多样性

利用宏基因组学技术分析煤层水中微生物的多样性

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：刘建民王保玉胡斌白建平韩作颖晋城无烟煤矿业集团有限责任公司晋城 048006 河南理工大学资源环境学院焦作 454000 晋城无烟煤矿业集团有限责任公司国家能源煤与煤层气共采技术重点实验室晋城 048006 晋城无烟煤矿业集团有限责任公司晋城 048006 晋城无烟煤矿业集团有限责任公司国家能源煤与煤层气共采技术重点实验室晋城 048006 河南理工大学资源环境学院焦作 454000

煤层气是一种重要的能源资源,有生物成因和热成因两种类型.生物成因煤层气是在煤层微生物的作用下形成的.通过向煤层气井中注入培养基,采用宏基因组学技术对煤层水中微生物菌群的组成多样性进行分析.结果表明,在培养基注入前后,煤层水... 详细信息

煤层气是一种重要的能源资源,有生物成因和热成因两种类型.生物成因煤层气是在煤层微生物的作用下形成的.通过向煤层气井中注入培养基,采用宏基因组学技术对煤层水中微生物菌群的组成多样性进行分析.结果表明,在培养基注入前后,煤层水中微生物均具有较丰富的多样性,注入前丛毛单胞菌科、甲基球菌科、假单胞菌科、鞘氨醇单胞菌科和嗜甲基菌科的微生物为优势菌种.注入三个月后,优势菌种主要为链球菌科、丛毛单胞菌科、嗜甲基菌科、红环菌科.注入六个月后,红环菌科和甲基球菌科的丰度最高.主成分分析显示,红环菌科、甲基球菌科、弯曲杆菌科、鞘氨醇单胞菌科、假单胞菌科、丛毛单胞菌科、嗜甲基菌科和链球菌科等8个科的微生物对生物成气过程有重要影响.细菌菌群的α多样性从chao1,ACE,Shannon,npShannon和Simpson指数进行分析,结果表明,培养基的注入能显著增加物种的多样性.

关键词：煤层气微生物菌群生态多样性宏基因组学技术

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吸水链霉菌CPCC 200291产生的除草霉素新组分

吸水链霉菌CPCC 200291产生的除草霉素新组分

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：赵薇江冰娅南艳妮余利岩刘红宇魏玉珍山广志左利民武临专中国医学科学院医药生物技术研究所北京100050

吸水链霉菌具有丰富的次级代谢产物生物合成能力.吸水链霉菌CPCC 200291(Streptomyces hygroscopicus CPCC 200291)是中国医学科学院医药生物技术研究所从海南土壤中分离到的一株吸水链霉菌,其发酵产物显示抗细菌与真菌活性.我们对CPCC ...

吸水链霉菌具有丰富的次级代谢产物生物合成能力.吸水链霉菌CPCC 200291(Streptomyces hygroscopicus CPCC 200291)是中国医学科学院医药生物技术研究所从海南土壤中分离到的一株吸水链霉菌,其发酵产物显示抗细菌与真菌活性.我们对CPCC 200291所产生的脂溶性次级代谢产物进行了研究,发现了洋橄榄叶素(elaiophylin)、尼日利亚菌素(nigericin)和除草霉素(herbimycin).文献报道洋橄榄叶素和尼日利亚菌素具有抗革兰阳性菌等活性,除草霉素具有抗真菌等活性.特别是,除草霉素属于苯醌型安莎类抗生素,与格尔德霉素(geldanamycin)结构相似,为人热休克蛋白Hsp90抑制剂,并作为抗肿瘤药物研究的一个先导化合物.CPCC 200291产生的除草霉素,主要组分为除草霉素A,其次是除草霉素C.我们对CPCC 200291产生的脂溶性次级代谢产物进行了系统的化学分析包括TLC显色和LC-MS等,并结合对除草霉素生物合成机制的推理与分析,有目的地发现并鉴定了除草霉素新组分多个,例如15-羟基除草霉素B.我们对这些除草霉素新组分进行了分离纯化、结构解析和肿瘤细胞毒活性测定,期望获得水溶性提高、相对抗肿瘤细胞活性不降低的除草霉素新组分;同时,对这些除草霉素新组分的生物合成机制进行推理或证实.

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