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排序：

Developments of Chemotherapy and Biological Treatment in Colorectal Cancer

Developments of Chemotherapy and Biological Treatment in Col...

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：孙伟劲美国宾西法尼亚大学

Colorectal cancer (CRC) is one of the most common gastrointestinal tract malignancies worldwide, especially in North America and Europe. The incidence of CRC has increased in China and Asia. In the past several years, tremendous advances have been achieved in the treatment of the disease at both metastatic and adjuvant settings with developments of new cytotoxic and novel molecular oriented agents. These improvements have not only changed the survival statistics and prospect of the disease, but also quality of life for those patients CRC.

关键词： CRC Developments of Chemotherapy and Biological Treatment in Colorectal Cancer agent

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光叶番荔枝中二萜类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721生长抑制及其机制的研究

光叶番荔枝中二萜类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721生长抑制及其...

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：夏国豪章永红潘良熹冯继峰江苏省肿瘤医院内科南京中医药大学江苏省肿瘤医院内科江苏省肿瘤医院内科

目的研究光叶番荔枝中二萜类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用及其机制。方法以MTT法检测SMMC-7721细胞经5 μM-25μ M的二萜类化合物作用后的生长抑制率,用透射电镜、扫描电镜观察其形态变化,用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率... 详细信息

目的研究光叶番荔枝中二萜类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用及其机制。方法以MTT法检测SMMC-7721细胞经5 μM-25μ M的二萜类化合物作用后的生长抑制率,用透射电镜、扫描电镜观察其形态变化,用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率及MDR1的表达水平。结果5 μM-25μM的二萜类化合物对 SMMC-7721细胞有较强的抑制作用,与浓度呈线性相关,并呈时间依赖性,72 小时IC50为19．41umol／L,20 μ M的药物作用于SMMC-7721细胞48小时,在流式细胞仪上可见亚G0／G1峰,使细胞周期阻滞于G0-G1期,细胞凋亡率为24．95％;在透射电镜、扫描电镜下观察到细胞凋亡的特征形态改变,如细胞体积缩小,胞膜皱缩,表面微绒毛消失,核固缩、沿核膜分布等,MDR1表达明显下调,且随药物浓度的增加MDR1表达水平逐渐下降。结论光叶番荔枝中二萜类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721有显著的抑制作用,诱导SMMC-7721癌细胞凋亡,明显下调MDR1基因的表达,具有逆转多药耐药性的作用。

关键词：光叶番荔枝二萜类化合物肝癌细胞株细胞凋亡 MDR1基因

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维生素D3类似物治疗前列腺癌的实验研究

维生素D3类似物治疗前列腺癌的实验研究

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：王晓民哈尔滨医科大学附属肿瘤医院

目的:在我们的这个实验中,我们拟通过新的一类维生素D3类似物(EB -1089)对体内外对人类前列腺癌细胞系(PC-3)抑制作用研究,以扩展这些新的发现。方法:采用对照组的方法,利用细胞培养技术。在普通培养液培养2．4小时后再用含有维生素D3... 详细信息

目的:在我们的这个实验中,我们拟通过新的一类维生素D3类似物(EB -1089)对体内外对人类前列腺癌细胞系(PC-3)抑制作用研究,以扩展这些新的发现。方法:采用对照组的方法,利用细胞培养技术。在普通培养液培养2．4小时后再用含有维生素D3类似物EB-1089的培养液置换普通培养液, 分别培养7天和12天,而对照组中用不含有维生素D3类似物的同样培养液和方法分别培养,再加入放射性同位素氚进行标记和培养5小时,然后用5％三氯醋酸凝固沉淀细胞, 最后细胞的放射性能力通过闪烁放射性测定仪测量。对 nu／nu鼠移植瘤用EB-1089进行治疗,动态观察肿瘤体积的大小变化,通过与对照组比较,计算其肿瘤生长抑制率。结果:与同组对照组比较,在用含有维生素D3类似物EB-1089培养的细胞生长在培养7天和12天后受到了与剂量有关的明显抑制。其与放射性同位素氚的结合率变化从40％到70％,而抑制肿瘤细胞最高药物的浓度值为1umol/L。 (两者的P值均小于0．01)当EB-1089药液浓度较高时,细胞培养的时间越长,其影响效果越大。而体内实验表明:EB- 1089对前列腺癌有抑瘤效应。表现为实验组肿瘤较对照组肿瘤增长缓慢,并且随着治疗时间的延长这种差异越明显。结论: 维生素D3类似物EB-1089体内外对前列腺癌均有较强的抑制作用,提示EB-1089治疗前列腺癌可能有效。

关键词：维生素D3类似物EB-1089 前列腺癌细胞系PC-3 体外组织细胞培养 nu／nu鼠肿瘤／移植

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丹参水溶性类似物对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用的实验研究

丹参水溶性类似物对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用的实验研究

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：杨华冼励坚中山大学肿瘤防治中心实验研究部中山大学肿瘤防治中心实验研究部

目的:丹参是我国传统中药中常用的活血化瘀药,常用于心血管系统疾病的治疗。丹参水溶液中分离到的天然苯并呋喃类化合物5-(3-羟基丙基)-7- 甲氧基-2-(3-甲氧基-4-羟基)3-苯并[b]呋哺甲醛,能使有丝分裂受阻,作用靶点可能是细胞的微管,具... 详细信息

目的:丹参是我国传统中药中常用的活血化瘀药,常用于心血管系统疾病的治疗。丹参水溶液中分离到的天然苯并呋喃类化合物5-(3-羟基丙基)-7- 甲氧基-2-(3-甲氧基-4-羟基)3-苯并[b]呋哺甲醛,能使有丝分裂受阻,作用靶点可能是细胞的微管,具有潜在的抗肿瘤作用。对该天然化合物进行侧链基团的改造,得到一个2-芳基取代的苯并呋喃化合物,本研究的目的是探讨该化合物体外抗肿瘤细胞增殖作用,研究其对微管的作用,从而初步明确该化合物的作用靶点与机理。方法:MTT法检测化合物对多种人肿瘤细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测MCF-7细胞在化合物作用后细胞周期的改变;Giemsa染色法观察化合物作用后MCF-7细胞胞核的形态变化;比浊法测定化合物对体外纯化的牛脑微管蛋白聚合活性的影响;Western Blot法检测化合物对细胞周期调控蛋白 cyclinB1表达的影响。结果:化合物作用于KB-3-1细胞、CA-120细胞、MGC803 细胞及MCF-7细胞的IC50值分别为4．75 μM、6．00μM、6．25μM及8．25μM;流式细胞术结果提示化合物诱导MCF-7细胞发生G2/M期阻滞,5 μ M和10μ M作用下G2／M期细胞由对照24．1％分别上升为31．9％和76．2％;Giemsa染色发现化合物作用后MCF-7细胞核膜消失,染色质浓染且结构松散,呈现有丝分裂阻滞的典型形态,且处于有丝分裂期的细胞数量明显增加,对照细胞核膜完整;5μM 化合物轻度抑制微管蛋白的聚合,10μM时对微管蛋白聚合活性的抑制程度与5 μ M秋水仙发素持平;Western Blot发现,化合物能引起cyclinB1表达下调,呈剂量依赖性。结论:结构改造后的苯并呋喃化合物具有抗微管作用,能抑制微管蛋白的聚合,使肿瘤细胞阻滞于有丝分裂期,引起细胞周期调控蛋白发生相应变化,从而抑制肿瘤细胞的生长。

关键词：丹参 MCF-7细胞微管细胞周期

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胰腺癌的中西医综合治疗

胰腺癌的中西医综合治疗

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：刘鲁明复旦大学附属肿瘤医院

近年来胰腺癌发病率呈上升趋势。胰腺癌很难早期发现,治疗疗效差, 生存期短。近10年来,中医药治疗胰腺癌显示有其独到之处,尤其是胰腺癌中西医综合治疗取得疗效,值得关注。胰腺癌治疗原则: 早期:手术治疗为主:早期手术切除胰腺癌是最理... 详细信息

近年来胰腺癌发病率呈上升趋势。胰腺癌很难早期发现,治疗疗效差, 生存期短。近10年来,中医药治疗胰腺癌显示有其独到之处,尤其是胰腺癌中西医综合治疗取得疗效,值得关注。胰腺癌治疗原则: 早期:手术治疗为主:早期手术切除胰腺癌是最理想的方法。术后适当化疗结合长期中医中药治疗,有可能取得良好疗效。中期:手术治疗为主,如手术不能切除,可行胆囊空肠吻合术以缓解黄疸。也可采用放疗+化疗+中药治疗。晚期:中医中药和对症治疗为主, 或结合小剂量化疗。中医认为胰腺癌的病机乃气机不畅,气化不利,脾湿困郁, 郁久化热,湿热蕴结,日久成毒,湿热毒三者交阻,湿浊内生,邪毒留滞,积而成癌。治疗应根据疾病不同阶段或攻、或补、或攻补兼施,临床目前仍以辨证论治为主。已有的文献提示,中西医结合已取得一定的疗效。我们近年来采用中医清热理气,化痰散结之法为主治疗胰腺癌,治疗结果显示:化疗组与中药化疗组治后生存率比较发现,中药化疗组治后治后1年生存率55．37％;2年生存率 34．61％;3年生存率25．96％;中位生存期16．3月;而化疗组治后1年生存率21．95％±27．54％,2年生存率7．31％±27．54％,3年生存率为0％;中位生存期7．5月;两组差异显著(P=0．004)。进一步分析发现,中药化疗组肿瘤缩小以及主症好转情况均明显优于化疗组(P=0．049,P=0．002),提示单纯结合中药治疗组疗效明显优于中药加化疗组。中药治疗组病例还提示少数病人在服用中药一年以后,肿瘤有了明显的缩小,个别患者CT检查甚至发现剖腹探查证实的胰腺肿块基本消失,这与以往认为的中医药在胰腺癌治疗中的作用主要是改善症状、延长生存期,对肿瘤本身作用并不明显概念有异,值得重视并进一步加以研究。

关键词：胰腺癌中西医综合治疗

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“龙血胶囊”对移植性肿瘤的治疗作用

“龙血胶囊”对移植性肿瘤的治疗作用

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：高凌顾奎兴亢寿海张琴芬钱新华张能芳江苏省肿瘤防治研究所江苏省肿瘤防治研究所江苏省肿瘤防治研究所江苏省肿瘤防治研究所江苏省肿瘤防治研究所江苏省肿瘤防治研究所

目的:通过研究龙血胶囊(LXS)对小鼠移植性肝癌Heps、艾氏实体癌EC的抑制作用及联合放、化疗作用,验证其临床抗癌疗效。方法: 采用抗移植性肿瘤实验方法。取健康、肿瘤生长旺盛的荷瘤小鼠,颈椎脱臼处死,无菌取瘤块,制备单细胞悬液,接种... 详细信息

目的:通过研究龙血胶囊(LXS)对小鼠移植性肝癌Heps、艾氏实体癌EC的抑制作用及联合放、化疗作用,验证其临床抗癌疗效。方法: 采用抗移植性肿瘤实验方法。取健康、肿瘤生长旺盛的荷瘤小鼠,颈椎脱臼处死,无菌取瘤块,制备单细胞悬液,接种一定浓度于健康小鼠皮下。接种后24小时后随机分组,分对照组,给药组(给予不同剂量的LXS或LXS加化疗药)和阳性药对照组,并开始灌胃给药,每日给药一次,连续8-10日;放疗组于给药第4日一次性给予60Co 500rad照射。停药24小时后先眼眶采血, 后颈椎脱臼处死小鼠,称体重,解剖剥离瘤块、脾脏、胸腺,计算抑瘤率。抑瘤率≥30％可判断有抗癌作用,t检验统计处理。结果:龙血胶囊250 mg／Kg灌胃给药对Heps的最大实验抑瘤率达58．57％,以2000 mg／Kg灌胃给药对EC实验抑瘤率为42．70％(p<0．01)。龙血胶囊250 mg／Kg,5-FU单独给药,对Heps的抑制作用分别为41．86％和52．56％,二者联合给药抑瘤率达到 62．33％(p<0．001),说明龙血胶囊与5-FU有显著的增效减毒作用。龙血胶囊 250 mg／Kg、CTX和5-FU单独给药对EC的抑制作用分别为32．02％、37．64％和 39．89％(p<0．05),龙血胶囊分别与CTX、5-FU联合给药,抑瘤率则达到43．26％或45．51％(p<0．01),说明龙血胶囊与CTX或5-FU联合化疗对EC有显著的增效减毒作用。龙血胶囊250 mg／Kg或钴-60 500rad对Heps的抑制作用分别为58．57％、54．58％;二者联合使用,抑瘤率达到64．54％(p<0．001),说明龙血胶囊与钴-60有显著的增敏减毒作用。结论:龙血胶囊对移植性肿瘤Heps、EC有较好的抑瘤效果:龙血胶囊与放、化疗联合治疗移植性肿瘤,有显著的增效减毒作用。龙血胶囊由血竭、三七、乌贼骨、大黄、法半夏等传统中药精制而成。是由江苏省名中医顾奎兴研究员的临床验方,本试验为龙血胶囊的临床作用提供了理论依据。

关键词：龙血胶囊抗肿瘤 Heps EC

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天花粉蛋白下调K562细胞P210蛋白与增强格列卫对K562细胞杀伤作用的研究

天花粉蛋白下调K562细胞P210蛋白与增强格列卫对K562细胞杀伤作用...

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：许建华张昆仲吴丽贤黄秀旺温彩霞福建医科大学药学院福建医科大学药学院福建医科大学药学院福建医科大学药学院福建医科大学药学院

目的:天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是一种I型核糖体失活蛋白 (ribosome-inactivating protein,RIP),它具有RNA N-糖苷酶活性,可以专一地水解真核细胞核糖体60S大亚基的28S rRNA第4324位上的腺嘌呤碱基与核糖之间的N-糖苷键,导致rRNA的... 详细信息

目的:天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是一种I型核糖体失活蛋白 (ribosome-inactivating protein,RIP),它具有RNA N-糖苷酶活性,可以专一地水解真核细胞核糖体60S大亚基的28S rRNA第4324位上的腺嘌呤碱基与核糖之间的N-糖苷键,导致rRNA的4324位脱嘌呤,从而阻遏了延长因子EF-2与核糖体的结合,抑制蛋白质的生物合成。已知TCS可诱导p210hcr-abl阳性的人慢粒白血病细胞株K562凋亡, 本研究探讨TCS与格列卫合用对CML细胞的协同抗癌作用,并进一步证实TCS抑制CML 细胞株K562增殖、诱导细胞凋亡与下调p210hcr-abl蛋白、抑制p210hcr-abl蛋白酪氨酸激酶活性的关系。方法:以台盼兰排染法及MTT法观察药物对的细胞增殖的影响,以会氏公式评价药物的联合作用效果。以免疫印迹法察药物对的细胞p210蛋白以及胞浆蛋白的酪氨酸磷酸化的影响。结果:TCS与Gleevec对人慢粒白血病K562细胞有明显的协同抑制作用,协同指数>1;TCS诱导p210hcr-abl阳性的人慢粒白血病细胞株 K562凋亡,并能下调K562细胞的p210hcr-abl蛋白、抑制胞浆蛋白的酪氨酸磷酸化, 这些作用均呈剂量与时间依赖性。可见,TCS诱导K562凋亡、增强格列卫对K562细胞杀伤作用。均与其下调p210蛋白、抑制胞浆蛋白的酪氨酸磷酸化有关。TCS、姜黄素(Curcumin ,Cur) 可能通过不同的机理下调K562细胞p210hcr-abl蛋白,我们观察到, TCS与Cur合用对K562细胞p210hcr-abl蛋白的下调以及胞浆蛋白酪氨酸磷酸化的抑制作用均呈增强作用,并且发现TCS、姜黄素与Gleevec三者合用对人慢粒白血病细胞 K562产生更显著的协同作用。结论: TCS、姜黄素可增强Gleevec对人慢粒白血病细胞株K562细胞的杀伤作用,TCS、姜黄素与Gleevec三者合用对K562细胞产生更显著的协同杀伤作用。这些作用均与TCS、姜黄素协同下调K562细胞的p210蛋白、抑制K562胞浆蛋白质酪氨酸的磷酸化作用有关。

关键词：天花粉蛋白 K562细胞格列卫姜黄素协同

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Novel Targeted-Therapy of Liver Cancers and Liver Diseases

Novel Targeted-Therapy of Liver Cancers and Liver Diseases

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者： John Yeuk-Hon Chan Ph．D．University of Texas M．D．Anderson Cancer Center and Acclaim Biotechnology Houston TX．USA

Liver diseases such as hepatitis and liver cancers are major public health problems in the developing nations in the world as well as in industrialized nations. Worldwide, a vast number of people (350 million) including many in Asia, are affected by viral induced liver disease (hepatitis) and liver cancer, and the market is enormous, around $ 20-40 billion/year. Most of the drugs being used suffered from high instability and non-targeting to the affected hepatocytes. Thus, the rate of sustained clinical response remains suboptimal. We have developed a receptor-mediated delivery technology to combat these problems. The concept is to deliver drugs linking to a liver-targeting protein, Circumsporozoite (CS) protein, derived from the malarial parasite. CS protein recognizes receptors located on the surface of hepatocytes and liver cancer cells. Initial studies using CS protein fused to the anti-viral drug, Interferon, forming Interferon-CS (IFN-CS) protein, is a novel therapy for HBV and HCV induced Hepatitis. In addition, fusion with an enzyme, cytosine deaminase (CD), which converts a nontoxic prodrug, 5-fluorocytosine (5FC), into the toxic metabolite, 5-fluorouracil (5-FU), can target the liver cancers. Since 5-FU is preferentially toxic to the proliferating tumor cells, the non-tumor liver tissues and other organs are not affected. This CD-CS + 5-FC therapy is effective in tumor-killing in animal models. Thus, this patented liver-targeting therapy is simple, specific, efficacious, safe and with enormous commercial potentials.

关键词： Novel Targeted-Therapy of Liver Cancers and Liver Diseases

来源：评论

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大鼠轻链单域抗体与力达霉素强化融合蛋白的构建及其抗肿瘤作用

大鼠轻链单域抗体与力达霉素强化融合蛋白的构建及其抗肿瘤作用

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第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：李英尚伯杨甄永苏中国医学科学院医药生物技术研究所中国医学科学院医药生物技术研究所中国医学科学院医药生物技术研究所

目的:为实现抗体药物小型化以增加抗体药物在肿瘤中的穿透性,本研究构建了大鼠轻链单域抗体与力达霉素的强化融合蛋白,并对其抗肿瘤效果进行了研究。方法:利用RT～PCR从杂交瘤中获得大鼠抗肝癌轻链单域抗体,将其与抗肿瘤药物力达霉素LD... 详细信息

目的:为实现抗体药物小型化以增加抗体药物在肿瘤中的穿透性,本研究构建了大鼠轻链单域抗体与力达霉素的强化融合蛋白,并对其抗肿瘤效果进行了研究。方法:利用RT～PCR从杂交瘤中获得大鼠抗肝癌轻链单域抗体,将其与抗肿瘤药物力达霉素LDM的辅基蛋白LDP的基因相连接,在原核生物表达体系中诱导表达得到重组融合蛋白VL-LDP,将发色团AE组装到VL-LDP中,得到强化重组蛋白VL-LDP-AE。通过Western Blot、ELISA、免疫细胞化学方法检测单域抗体VL 和融合蛋白VL-LDP的免疫结合活性。MTT法检测强化重组蛋白对肝癌22(H22)细胞的体外杀伤作用,HE染色检测VL-LDP-AE对肝癌细胞BEL-7402、结肠癌细胞 HT29的形态影响。用H22接种小鼠检测强化重组蛋白VL-LDP-AE的体内抗肿瘤效果,在动物肿瘤接种的第3天,按照不同剂量对种瘤小鼠尾静脉注射给药,观察动物生存延长状况和肿瘤生长变化。结果:极限稀释培养得到的高亲和力抗体分泌杂交瘤3F5,得到目的基因的Blast结果表明该基因与大鼠kappa链具有高度同源性,同源性达到78．9％以上。经过诱导物浓度优化和诱导时间选择,VL表达量占整个菌体的46％左右,VL-LDP的表达量占整个菌体的51％左右。Western blot、 ELISA、免疫细胞化学方法表明VL单域抗体保持了和全抗平行的免疫结合特异性, VL-LDP和VL表现出相同的结合特性。强化融合蛋白VL-LDP-AE对H22的IC50为1．02 ×10-11M。BEL-7402N胞、HT29细胞经过强化融合蛋白处理后均出现核仁增大, 核内发生多颗粒性凝集等细胞凋亡的细胞形念学变化。动物试验结果表明强化融合蛋白VL-LDP-AE体内有显著疗效,在0．4 mg／kg、0．2 mg／kg、0．1 mg／kg剂量下可明显抑制H22皮下瘤的生长,其抑瘤率分别为83．3％、67．5％、56．3％,而游离力达霉素LDM 0．05 mg／kg组的抑瘤率为65．7％,VL-LDP 0．8mg／kg混合LDM 0．05 mg／kg的抑瘤率为71．4％,丝裂霉素MMC 1 mg／kg的抑瘤率为16．4％。对照组、LDM 0．05 mg／kg组、MMC 1mg／kg组、VL-LDP-AE 0.4mg／kg组动物的中位生存时间在别是28天、40天、36天、50天。结果显示VL-LDP-AE明显延长试验动物的中位生存时间,并且在试验治疗期间动物的体重无明显变化,可耐受所用剂量。结论: 本研究的大鼠轻链单域抗体和力达霉素的强化融合蛋白表现出显著的抗肿瘤活性和良好的应用前景。同时做为一种新型的、小型化的靶向分子,单域抗体为抗体基础药物提供了新的构建平台。

关键词：肝癌单域抗体力达霉素融合蛋白

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功能基因芯片在重组人P53腺病毒逆转顺铂耐药分子机制研究中的应用

功能基因芯片在重组人P53腺病毒逆转顺铂耐药分子机制研究中的应用

引用

第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议

作者：苏丹吕汪霞冯建国马胜林浙江省肿痛医院浙江省肿痛医院浙江省肿痛医院浙江省肿痛医院

背景和目的我们前期的实验结果证实细胞内p53功能的丧失与非小细胞肺癌顺铂耐药密切相关,人p53腺病毒(Adp53)可恢复耐约细胞H1299对顺铀的敏感性,然而其分子作用机制不太明确。Adp53作用涉及基因多,顺铂耐药机制复杂,检测几个基因的改... 详细信息

背景和目的我们前期的实验结果证实细胞内p53功能的丧失与非小细胞肺癌顺铂耐药密切相关,人p53腺病毒(Adp53)可恢复耐约细胞H1299对顺铀的敏感性,然而其分子作用机制不太明确。Adp53作用涉及基因多,顺铂耐药机制复杂,检测几个基因的改变可能难以全面阐明。因此,为了能比较全面地了解Adp53逆转顺铂耐药的作用机制,我们采用了p53信号传导通路芯片和 DNA损伤信号通路芯片来分析其可能的逆转机制。方法实验分为4组,转染p53(150MOI)48小时的H1299细胞组,转染p53 48小时后加顺铂(5ug／ml) 作用 48小时的H1299细胞组,顺铂(10ug／ml)作用48小时的H1299细胞组,以未做任何处理的H1299细胞为空白对照。分别提取各组细胞的总RNA,反转录合成cDNA生物素标记探针。空白对照组和转染p53 H1299细胞组分别与p53信号传导通路芯片杂交,转染p53 后加顺铂作用的H1299细胞组和顺铂单独作用的H1299细胞组分别与DNA损伤信号通路芯片杂交。经化学发光检测,和图象采集,最后进行数据分析。结果p53信号传导通路芯片结果显示转染p53后H1299细胞内p53、Mdm2、E2F基因的表达明显升高,细胞周期调控蛋白p21、PIG8、 Hsp70表达升高,信号传导分子蛋白激酶C、有丝分裂原激活蛋白酶8作用蛋白2(JIP2)被大量激活。我们前期的实验结果显示H1299在浓度为10ug／ml的顺铂作用下,细胞杀伤率仅为27．5％,而转染p53的H1299细胞在浓度为5ug／ml的顺铂作用下, 细胞杀伤率可达50％。比较这两组DNA损伤信号通路芯片的结果显示转染p53的H1299 在顺铂损伤时,损伤识别主要由CDS1、FOX03A基因完成,DNA损伤诱导转录子3、Stratifin、 p53、Mdm2、Wip1基因大量表达。在凋亡通路中大部分基因被激活,其中以BAX、凋亡蛋白酶激活因子(APAF1)、TNFR超家族蛋白为主。在损伤修复通路中GADD45A、RRM2B、 ERCC1、ERCC6表达上调。结论Adp53逆转顺铂耐约的机制主要是p53恢复了细胞内对损伤刺激的信号通路,诱导了由肿瘤坏死因子受体超家族蛋白、Bcl-2／Bax所介导的凋亡通路。

关键词：信号通路信号传导通路 P53 DNA 耐药分子机制功能基因芯片

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