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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

125 篇 会议
8 篇 期刊文献

馆藏范围

133 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

81 篇 农学
- 80 篇 兽医学
- 1 篇 畜牧学
68 篇 医学
- 36 篇 公共卫生与预防医...
- 25 篇 基础医学(可授医学...
- 21 篇 药学(可授医学、理...
- 9 篇 临床医学
- 1 篇 护理学（可授医学、...
3 篇 理学
- 2 篇 生物学
- 1 篇 化学
3 篇 工学
- 1 篇 建筑学
- 1 篇 土木工程
- 1 篇 化学工程与技术
- 1 篇 石油与天然气工程
- 1 篇 交通运输工程
2 篇 管理学
- 2 篇 公共管理

主题

15 篇 狂犬病
10 篇 狂犬病病毒
6 篇 弓形虫
5 篇 人兽共患病
4 篇 jev
4 篇 流行特征
4 篇 流行病学
3 篇 免疫原性
3 篇 分析
3 篇 三带喙库蚊
3 篇 原核表达
3 篇 血吸虫病
3 篇 监测
3 篇 布病
3 篇 乙脑病毒
3 篇 禽流感病毒
3 篇 库蚊黄病毒
3 篇 狂犬病毒
3 篇 疫情
2 篇 狂犬病疫苗

机构

13 篇 中国疾病预防控制...
10 篇 吉林农业大学
9 篇 中国农业科学院上...
8 篇 军事医学科学院军...
6 篇 中国疾病预防控制...
6 篇 吉林大学
5 篇 四川农业大学
5 篇 中国农业大学
4 篇 华中农业大学
3 篇 中国食品药品检定...
3 篇 云南省地方病防治...
3 篇 山东省疾病预防控...
3 篇 前郭尔罗斯蒙古族...
3 篇 农业部兽用药物与...
3 篇 延边大学
3 篇 中国疾病预防控制...
3 篇 中国科学院微生物...
2 篇 吉林省地方病防治...
2 篇 剑桥大学
2 篇 安徽农业大学

作者

16 篇 梁国栋
12 篇 付士红
9 篇 王环宇
7 篇 李浩
5 篇 陶晓燕
5 篇 曹玉玺
4 篇 马志永
4 篇 王力华
4 篇 曹三杰
4 篇 何英
4 篇 唐青
4 篇 文心田
4 篇 刘文军
4 篇 仇旭升
4 篇 涂长春
4 篇 张海林
4 篇 刘全
4 篇 高晓艳
4 篇 丁铲
3 篇 雷晓思

语言

133 篇 中文

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猪源附红细胞体rnpB基因的克隆与序列比较

猪源附红细胞体rnpB基因的克隆与序列比较

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：王向佩周鹏米荣升沈莉萍黄燕王晓娟杨晓娇石凯刘宇轩雷晓思陈兆国赵权吉林农业大学动物科学技术学院中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心上海市动物疫病预防控制中心

RNA酶P RNA(RNase P RNA,rnpB)基因在微生物中是编码单一RNA的内切核糖核酸酶P,相比16S rRNA序列,rnpB基因具有较高的核苷酸变异率,更适合用于分类单元相近微生物之间的系统发育分析。为了解猪源附红细胞体(Mycoplasmaspp.)rnpB基因序... 详细信息

RNA酶P RNA(RNase P RNA,rnpB)基因在微生物中是编码单一RNA的内切核糖核酸酶P,相比16S rRNA序列,rnpB基因具有较高的核苷酸变异率,更适合用于分类单元相近微生物之间的系统发育分析。为了解猪源附红细胞体(Mycoplasmaspp.)rnpB基因序列变异状况,探讨其在附红细胞体分类中的作用,将实验室保存的经16S rRNA基因序列分析鉴定的53份猪源附红细胞体阳性DNA样品用于进行rnp B基因的扩增,扩增产物克隆到pMD18-T载体并进行序列测定。将获得的序列与GenBank登录的猪附红细胞体(Mycoplasma suis)德国分离株rnpB基因序列(登录号EF523602)进行分析和比对,利用MEGA5.0软件构建系统发育树,并与16S rRNA判定结果进行比较。结果共得到42条猪附红细胞体rnpB基因和11条小附红细胞体(M. parvum)rnpB基因序列。猪附红细胞体上海分离株rnpB基因与GenBank登录的猪附红细胞体德国分离株rnpB基因之间的核苷酸序列一致性在98.1%～100.0%;小附红细胞体上海分离株rnpB基因与猪附红细胞体德国分离株rnpB基因序列的一致性为91.0%,与猪附红细胞体上海分离株rnpB基因序列一致性在90.0%～91.0%之间。系统进化分析显示猪附红细胞体rnp B基因与小附红细胞体rnp B基因分布在不同聚簇上,与16S rRNA基因序列鉴定结果一致。

关键词：附红细胞体分离株基因序列序列比较

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四川芦山地震灾区血吸虫病防治效果阶段性评估

四川芦山地震灾区血吸虫病防治效果阶段性评估

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：刘阳徐保华陈琳吴子松肖志勇王朝富谢明康张奕陆定徐亮毛勇李荣智杨羽徐佳万佳嘉邱东川钟波四川省疾病预防控制中心四川省卫生厅四川省芦山县疾病预防控制中心四川省天全县血吸虫病防治站

目的评估4.20四川芦山地震灾区灾后血吸虫病防控措施阶段性效果及中长期血吸虫病流行风险,为下阶段防控工作提出建议。方法根据芦山、天全两县血吸虫病历史流行资料及现场调查情况,结合地震受灾情况,每县在受灾严重且历史流行程度较重... 详细信息

目的评估4.20四川芦山地震灾区灾后血吸虫病防控措施阶段性效果及中长期血吸虫病流行风险,为下阶段防控工作提出建议。方法根据芦山、天全两县血吸虫病历史流行资料及现场调查情况,结合地震受灾情况,每县在受灾严重且历史流行程度较重的乡镇中抽取2-3个乡镇、每个乡镇选择1个流行村作为评估调查村。对评估村的螺情,居民和外来人员的血防知识、疫水接触情况、相关卫生行为等情况进行调查。同时,对两县外来人员进行病情监测并排查可疑发热病人。综合分析、评估灾后血防措施效果。结果芦山县和天全县的5个评估村活螺平均密度为0.41只/0.1m2,未发现感染性钉螺。对655名外来人员进行病情检测,血阳率2.14%,未发现感染血吸虫病的病人。排查两县发热病人484人,未发现急性血吸虫病病人。经过单因素和多因素非条件Logistic检验,发放宣传资料的健康教育形式更适宜当地居民,而对于外来人员,树立警示牌宣传效果更好。结论经过落实有效防控措施,地震灾后芦山县和天全县的血防工作取得阶段性成绩,但仍需不断深入开展有针对性的健康教育宣传,加强疫情监测,应采取事宜的防控措施,阻断血吸虫病传播途径,力争如期实现阻断血吸虫病的规划目标。

关键词：血吸虫病地震效果评估芦山四川

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利用PiggyBac转座系统构建稳定表达鹅RIG-I的DF-1细胞系

利用PiggyBac转座系统构建稳定表达鹅RIG-I的DF-1细胞系

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：胡跃孙英杰王晓旭仇旭升宋翠萍谭磊胡桂学丁铲吉林农业大学动物科技学院中国农业科学院上海兽医研究所安徽农业大学

维甲酸诱导基因I型(retinoic acid inducible gene-I,RIG-I)是最近几年才发现的一种细胞内的模式识别受体,能够特异性的识别并结合病毒的RNA,进而发挥抗病毒效应,是机体先天性免疫的重要组成部分。在病毒感染机体、在细胞内复制增殖时,R... 详细信息

维甲酸诱导基因I型(retinoic acid inducible gene-I,RIG-I)是最近几年才发现的一种细胞内的模式识别受体,能够特异性的识别并结合病毒的RNA,进而发挥抗病毒效应,是机体先天性免疫的重要组成部分。在病毒感染机体、在细胞内复制增殖时,RIG-I能特异性地识别并结合这一过程中所产生的RNA,改变自身构象,与下游接头分子结合,开启信号通路,最终使机体发挥先天性免疫作用。RIG-I在进化中是保守的,鸡基因组内没有RIG-I基因,鸭和鹅则具有完整的RIG-I基因。新城疫和禽流感每次爆发都造成鸡的大面积感染,RIG-I可以识别并结合这两种病毒在细胞内复制时产生的RNA,这两者中是否存在联系,引起了很多研究人员的兴趣。本试验利用PiggyBac转座子系统,构建稳定表达鹅源RIG-I基因的鸡胚成纤维细胞(DF-1)系,为后续的试验研究奠定基础。本试验主要内容和结果如下:1.稳定表达鹅源RIG-I的鸡胚成纤维细胞的构建根据GenBank上的RIG-I序列,结合PiggyBac-513B-1载体序列设计出引物,以质粒Flag-RIG-I为模板进行PCR扩增,经酶切后将RIG-I与载体PiggyBac-513B-1相连,转染入细胞后使用嘌呤霉素进行筛选,经两次亚克隆获得单细胞株,将单细胞持续传代,收集样品验证稳定性。2.稳定表达细胞系的鉴定经两次亚克隆的细胞株持续传代,在第1代、第5代、第10代、第15代、第20代、第30代收取样品,分别用RT-PCR及Western Blot验证m RNA水平和蛋白水平RIG-I基因的表达情况,再以免疫荧光辅助验证,结果表明构建的细胞系持续传代性良好,可用于后续试验。

关键词： RIG-I 细胞系鹅 DF-1 PiggyBac

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甘肃省河西走廊地区2011-2012年虫媒病毒调查

甘肃省河西走廊地区2011-2012年虫媒病毒调查

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：付士红于德山査冰梁国栋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所甘肃省疾病预防控制中心

为了解甘肃省河西走廊地区蚊虫种类及其携带虫媒病毒特征等,本研究连续两年夏季(2011-2012年)在甘肃省河西走廊地区7个县(市)(武威、张掖、酒泉、兰州、白银、庆阳和金昌)采集蚊虫标本。蚊虫分类鉴定后液氮保存并运送至实验室备检。蚊... 详细信息

为了解甘肃省河西走廊地区蚊虫种类及其携带虫媒病毒特征等,本研究连续两年夏季(2011-2012年)在甘肃省河西走廊地区7个县(市)(武威、张掖、酒泉、兰州、白银、庆阳和金昌)采集蚊虫标本。蚊虫分类鉴定后液氮保存并运送至实验室备检。蚊虫标本研磨后采用组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定,利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。本项目共采集到蚊虫标本3属6种27760只,其中淡色库蚊和刺扰伊蚊为优势蚊种,淡色库蚊占采集总数的37.3%(10367/27,760),刺扰伊蚊其次占28.5%(7914/27,760),采集的蚊虫还还包括三带喙库蚊、中华按蚊、凶小库蚊、黄背伊蚊及蠓。2011年蚊虫标本分为339批研磨,分离到1株在BHK细胞引起病变的病毒分离物,分子生物学鉴定为盖塔病毒。此外,在32批蚊虫标本中检测到3种病毒核酸阳性,其中19批为库蚊黄病毒,4批为盖塔病毒,9批为辽宁病毒。其中酒泉和庆阳采集的蚊虫标本病毒阳性检出率最高。2012年蚊虫标本分为75批研磨,细胞培养法分离到35株病毒分离物,血清学及分子生物学系统鉴定发现其中32株为库蚊黄病毒,3株为辽宁病毒,其中武威蚊虫的病毒阳性检出率最高。库蚊黄病毒主要分离自淡色库蚊,少量分离自三带喙库蚊,辽宁病毒2株分离自淡色库蚊,1株分离自伊蚊。通过2年连续调查,发现甘肃省河西走廊地区8月份的优势蚊种为淡色库蚊和刺扰伊蚊。研究发现当地蚊虫中存在库蚊黄病毒、盖塔病毒和辽宁病毒等虫媒病毒。本研究还首次从当地蠓标本中分离到库蚊黄病毒。

关键词：虫媒病毒蚊虫库蚊黄病毒盖塔病毒辽宁病毒

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米尔贝肟对犬钩虫的体外作用研究

米尔贝肟对犬钩虫的体外作用研究

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：徐倩倩李继昌郭时金沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东绿都安特动物药业有限公司东北农业大学动物医学院

犬钩虫（Ancylostoma caninum）是犬胃肠道内最主要的致病性寄生虫之一,同时也是伴侣动物的主要寄生虫,其典型后遗症为消瘦和贫血,持续的慢性感染也会导致死亡。犬钩蚴可感染人类,引起皮蚴游走症,即幼虫移行性匍行疹,对人类公共卫生有... 详细信息

犬钩虫（Ancylostoma caninum）是犬胃肠道内最主要的致病性寄生虫之一,同时也是伴侣动物的主要寄生虫,其典型后遗症为消瘦和贫血,持续的慢性感染也会导致死亡。犬钩蚴可感染人类,引起皮蚴游走症,即幼虫移行性匍行疹,对人类公共卫生有重要意义。米尔贝肟（milbemycin oxime）是美贝霉素类抗体内外寄生虫药物,是米尔贝霉素A3和A4的肟衍生物,主要用做犬的驱虫药。米尔贝肟对控制和预防大部分常见寄生虫病都有很好的效果,通常用来预防恶丝虫病,控制线虫、钩虫引发的犬、猫疾病及犬的鞭虫病。为了评价犬钩虫对米尔贝肟的体外敏感性,试验设空白对照组、米尔贝肟高、中、低剂量组及伊维菌素对照组,考察了药物对犬钩蚴三期幼虫形态和活力的影响及对其移行能力的影响。结果显示,未添加药物的钩蚴大部分保持笔直,而几乎没有弯曲或者卷曲,而在药物添加组,部分钩蚴出现大于45°角的弯曲,弯曲程度远远大于未添加药物的正常虫体;米尔贝肟用药量在10g·mL时,8h杀虫率达100%,米尔贝肟用药量为10g·mL时杀灭犬钩虫幼虫的显效时间及杀虫效果与伊维菌素组差异不显著（p>0.05）;米尔贝肟和伊维菌素对对犬钩蚴的移行有显著的抑制作用。结果表明,犬钩虫对米尔贝肟在体外具有一定的敏感性。综上所述,米尔贝肟在浓度为10 g/L时对犬钩蚴的形态、活力及移行能力均有明显的影响,与伊维菌素对照组相比差异不显著,而与空白对照组相比差异显著,说明犬钩虫对米尔贝肟具有较高的敏感性,同时,随着药物浓度和作用时间的延长,药物对蚴虫的作用加强,但考虑到长时间用药易引发虫体耐药,高浓度用药可能引起个别动物的毒性反应,而在药物动力学研究中,一次给药在动物体内的血药浓度为10g/L的时间可维持8h,兽医可根据试剂情况调整用药。

关键词：犬钩虫米尔贝肟体外敏感性

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牛γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用

牛γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：黄健黄大卢邹海涛杭柏林邵红霞叶建强钱琨金文杰秦爱建扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室扬州大学动物重要疫病与人畜共患病防控协同创新中心

IFN-γ是由NK细胞和T细胞在一些诱导剂诱导作用下分泌产生的细胞因子,具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节的作用,由此,γ-干扰素一直成为生物科学关注的热点,至今用于预防和控制人类疾病的γ-干扰素主要是利用基因工程技术生产的,并且人γ-... 详细信息

IFN-γ是由NK细胞和T细胞在一些诱导剂诱导作用下分泌产生的细胞因子,具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节的作用,由此,γ-干扰素一直成为生物科学关注的热点,至今用于预防和控制人类疾病的γ-干扰素主要是利用基因工程技术生产的,并且人γ-干扰素比动物γ-干扰素得到更多的关注。但从1986年Cerretti报道牛IFN-γ基因后,就陆续有学者对其进行相关方面的研究。二十世纪九十年代,Wood等通过对IFN-γ的诊断建立了一种快速诊断牛结核病的方法,即在体外用特异性的牛型结核菌素刺激全血,然后用抗牛IFN-γ的单抗通过免疫学的方法检测释放到全血上清中的INF-γ水平,以此来诊断牛结核病。目前牛γ-干扰素检测牛结核的商用ELISA试剂盒在澳大利亚和欧美一些国家得到了广泛的应用,其特异性好灵敏度高,已被广泛的认可。本研究应用2株抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体6E5和3E1研制了牛γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法,并对最佳工作浓度、最佳作用时间进行了摸索和优化。结果建立以3E1为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记的6E5为酶标抗体最佳组合的双抗体夹心ELISA检测方法;最佳包被浓度2.5μg/ml;最佳酶标抗体工作浓度0.09μg/ml;样本和酶标抗体孵育时间均为60min。特异性良好,只与天然牛γ-干扰素和原核表达的His-BoIFN-γ反应。灵敏性较高,检测原核表达的His-BoIFN-γ的下限可达1.5ng/ml。包被酶标板批内重复系数和批间重复系数均小于10%,在允许的范围内。临床样本检测,与进口试剂盒符合率达96%,表明该方法能够有效地检测牛结核病,为我国牛结核病的检疫和根除提供一种实用、快速、有效的检测方法,具有重大的公共卫生意义。

关键词：牛结核牛γ-干扰素双夹心ELISA

来源：评论

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弓形虫酰基COA结合蛋白ACBP1和ACBP2的分析与原核表达

弓形虫酰基COA结合蛋白ACBP1和ACBP2的分析与原核表达

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：傅勇刘晶刘群中国农业大学动物医学院

酰基COA结合蛋白(Acyl-CoA-binding protein,ACBP)是一类高度保守的胞浆蛋白,广泛地存在于真核生物中,能够高特异性、高亲和力地结合不同长度的长链脂酰COA,发挥多种功能。本研究利用生物信息学在线分析工具对弓形虫ACBP1和ACBP2的氨基... 详细信息

酰基COA结合蛋白(Acyl-CoA-binding protein,ACBP)是一类高度保守的胞浆蛋白,广泛地存在于真核生物中,能够高特异性、高亲和力地结合不同长度的长链脂酰COA,发挥多种功能。本研究利用生物信息学在线分析工具对弓形虫ACBP1和ACBP2的氨基酸理化性质、信号肽、跨膜区、结构域、二级结构、三级结构等进行分析预测。结果显示,ACBP1编码区全长288bp,编码95个氨基酸;ACBP1蛋白亲水性较强,等电点7.78,不含有信号肽与跨膜区,二级结构中主要含有52.63%的α螺旋,29.47%的无规卷曲。ACBP2编码区全长936bp,编码311个氨基酸;ACBP2蛋白疏水性较强,等电点5.12,含有信号肽,不含跨膜区,二级结构中α螺旋占44.37%,无规卷曲占30.55%。ACBP1与ACBP2均含有一个结合脂酰COA的ACBP结构域,ACBP2还含有一个锚蛋白重复序列结构域,可能参与蛋白质之间的相互作用。利用同源建模的方式获得的ACBP1以及ACBP2的三级结构,显示ACBP1以及ACBP2的ACBP结构域均由4个α螺旋簇构成。构建了重组表达质粒pGEX-6P-1-ACBP1以及p GEX-6P-1-ACBP2。SDS-PAGE分析显示融合蛋白GST-ACBP1大小为36kD左右,GST-ACBP2大小为60kD左右,与预期分子量大小一致。以弓形虫RH株c DNA为模板,扩增ACBP1和ACBP2的编码序列,分别连接原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组表达质粒pGEX-6P-1-ACBP1和pGEX-6P-1-ACBP2,转化大肠杆菌感受太细胞Transetta(DE3),进行诱导表达,获得纯化重组蛋白ACBP1和ACBP2,为进一步研究ACBP蛋白家族的生物学功能奠定基础。

关键词：弓形虫 ACBP 脂肪酸代谢

来源：评论

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JEV入侵BHK-21细胞内吞途径的初步研究

JEV入侵BHK-21细胞内吞途径的初步研究

引用

第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：曹三杰黄恒刘凯石双艳黄小波文心田四川农业大学预防兽医研究所猪病研究中心四川农业大学动物医学院人兽共患病研究室农业部兽用药物与兽医生物技术四川科学观测实验站

目的利用Real-timeRT-PCR检测技术,对乙型脑炎病毒入侵细胞的内吞途径进行初步研究。方法将BHK细胞接种于96孔细胞培养板,选用氯丙嗪、制霉菌素和细胞松弛素D3种药物分别处理细胞,以分别阻滞网格蛋白介导内吞途径、细胞膜穴样内陷途径... 详细信息

目的利用Real-timeRT-PCR检测技术,对乙型脑炎病毒入侵细胞的内吞途径进行初步研究。方法将BHK细胞接种于96孔细胞培养板,选用氯丙嗪、制霉菌素和细胞松弛素D3种药物分别处理细胞,以分别阻滞网格蛋白介导内吞途径、细胞膜穴样内陷途径和巨胞饮途径,然后进行JEV感染实验。将样品处理收集后,抽提总RNA,并反转录成c DNA。通过Real-time RT-PCR方法测定感染后1 h、12 h、24 h细胞内的病毒拷贝数。读取样品c DNA模板的Ct值,然后通过标准曲线公式Y=-0.3007X+10.53计算出模板初始拷贝数。换算为样品模板拷贝数的平均对数值(log10 copies)后,所得数据用软件SPSS 13.0进行统计学分析。结果与仅实施感染实验、未进行药物处理的对照组比较,3种药物处理组的细胞内病毒拷贝数在感染后各时相点均呈现不同程度的下降,在感染1 h、12 h和24 h后,氯丙嗪处理组细胞内病毒拷贝数分别下降了59.58%,53.34%和61.35%;细胞松弛素D组细胞内病毒拷贝数分别下降了23.59%,30.77%和30.14%;制霉菌素组细胞内病毒拷贝数分别下降了35.56%,34.40%和34.40%,氯丙嗪+制霉素处理组分别下降了48.50%,68.56%,67.11%;氯丙嗪+细胞松弛D处理组分别下降了58.10%,60.30%,75.97%;制霉素+细胞松弛素D处理组分别下降了24.27%,51.20%,49.42%;氯丙嗪+制霉素+细胞松弛素D处理组分别下降了68.27%,73.00%,79.19%。结果显示:当3种药物单独作用时氯丙嗪处理的细胞测得病毒数量相比对照组下降最多;当两种药物组合作用时,含有氯丙嗪的药物组病毒数量下降最多;当三种药物组合作用时,测得病毒数量最少,对病毒入侵抑制效果最强。结论乙型脑炎病毒主要利用网格蛋白介导内吞途径进入BHK-21细胞,这与同属于黄病毒属的西尼罗病毒、登革热病毒进入宿主细胞的内吞方式一致。

关键词：乙型脑炎病毒实时荧光定量RT-PCR 内吞途径

来源：评论

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日本乙型脑炎病毒Pr MΔE与tPA信号肽融合基因DNA疫苗的研究

日本乙型脑炎病毒Pr MΔE与tPA信号肽融合基因DNA疫苗的研究

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：刘凯孟丽军张亮黄小波文心田曹三杰四川农业大学预防兽医研究所猪病研究中心四川农业大学动物医学院人兽共患病研究室农业部兽用药物与兽医生物技术四川科学观测实验站

本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrMΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrMΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。采用RT-PCR方法和重叠PCR方法分别扩增出日本乙型脑炎病毒PrMΔE基因... 详细信息

本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrMΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrMΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。采用RT-PCR方法和重叠PCR方法分别扩增出日本乙型脑炎病毒PrMΔE基因和tPA信号肽序列,并分别将其克隆至pMD 19-T载体,经鉴定正确后亚克隆至真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-tPA-PrMΔE,对构建的重组质粒经鉴定正确后转染COS-7细胞,并利用间接免疫荧光试验检测质粒在细胞中的瞬时表达情况,同时利用制备的质粒免疫昆明小鼠,检测其JEV特异性血清IgG抗体水平、促脾淋巴细胞增长率,并以JEV CZ1株进行小鼠模型下的攻毒保护试验,进行DNA疫苗的攻毒保护率研究。结果显示,以RT-PCR方法和重叠PCR方法分别成功扩增出目的片段,通过对构建的重组质粒进行质粒PCR、酶切及测序鉴定,表明真核表达质粒pVAX-tPA-PrMΔE构建成功;间接免疫荧光试验结果显示重组质粒pVAX-tPA-PrMΔE在COS-7细胞中的表达产物可与鼠抗日本乙型脑炎病毒单克隆抗体发生特异性反应,显示出较好的反应原性;JEV特异性血清IgG结果显示,tPA信号肽序列的加入能明显增强PrMΔE基因DNA疫苗的特异性血清Ig G水平,且在42d后差异极显著(p<0.01);小鼠脾T淋巴细胞特异性增殖试验结果显示p VAX-tPA-PrMΔE组与空质粒对照组相、空白对照组相比差异极显著(p<0.01);攻毒试验结果显示本研究构建的重组DNA疫苗具有较好的攻毒保护率,能强有力的抵抗强毒株CZ-1的攻击。本研究成功构建了日本乙型脑炎病毒PrMΔE基因与tPA信号肽序列融合基因DNA疫苗(pVAX-tPA-PrMΔE),为日本乙型脑炎病毒基因工程疫苗的进一步研究及应用奠定了基础。

关键词：日本乙型脑炎病毒 PrMΔE基因 tPA信号肽序列 DNA疫苗免疫原性

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中国乙型脑炎参比实验室网络

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：王环宇李艺星付士红曹玉玺高晓艳何英尹遵栋梁国栋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中国疾病预防控制中心免疫规划中心

流行性乙型脑炎(Japaneseencephalitis,JE)简称乙脑,是由于蚊虫叮咬引起的人类严重中枢神经系统急性传染病,其病原体为流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)。我国于1951年将乙脑纳入传染病报告系统,属于法定报告乙类... 详细信息

流行性乙型脑炎(Japaneseencephalitis,JE)简称乙脑,是由于蚊虫叮咬引起的人类严重中枢神经系统急性传染病,其病原体为流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)。我国于1951年将乙脑纳入传染病报告系统,属于法定报告乙类传染病。2008年,乙脑纳入我国计划免疫后,乙脑报告病例显著下降,但每年仍有3千例左右,报告的乙脑病例仍以临床诊断病例为主。随着乙脑疫苗的广泛使用,乙脑的流行地域、流行趋势、年龄构成均发生了一定的变化。真实掌握我国乙脑发病的情况,急需提高乙脑报告病例的实验室诊断率,建立中国乙脑参比实验室网络势在必行。2011年11月由中国疾病预防控制中心发文正式组建以国家乙脑实验室为核心,涵盖贵州、四川、河南、上海、山东、浙江、广东、重庆、广西、云南,共10个省、市、自治区的乙脑实验室的中国乙型脑炎参比实验室网络。在2年的运行中,通过电话会议和实验室网络年度工作会议,逐步完善网络运行;通过实验室手把手培训、质控考核、标本复核检测等强化质量控制,标准化实验室检测方法,提高实验室检测质量及检测能力;通过现场评估与考核,进一步促进各省级乙脑参比实验室工作。目前,中国乙脑参比实验室网络建立并开始良性运转,乙脑报告病例的实验室检测率得到大幅提升,总体在85%以上。各省质控考核正确率和标本复核检测一致率均达到100%。中国乙脑参比实验室网络已经在乙脑报告病例的实验室检测率、质控考核正确率、标本复核检测一致率等等上升到新的水平。下一步重点是建立省内乙脑参比实验室网络,加强对各地、市、州级实验室培训,将乙脑检测工作推广到基层实验室,实验室检测工作前移从而提高乙脑报告病例标本采集率和实验室检测率。同时,通过考核评估后逐步纳入其他省级乙脑参比实验室进入网络,全面提高我国乙脑防控工作。

关键词：乙型脑炎参比实验室网络

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