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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

130 篇 会议
8 篇 期刊文献

馆藏范围

138 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

82 篇 农学
- 81 篇 兽医学
- 1 篇 畜牧学
73 篇 医学
- 39 篇 公共卫生与预防医...
- 26 篇 基础医学(可授医学...
- 21 篇 药学(可授医学、理...
- 10 篇 临床医学
- 1 篇 医学技术（可授医学...
- 1 篇 护理学（可授医学、...
3 篇 理学
- 2 篇 生物学
- 1 篇 化学
3 篇 工学
- 1 篇 建筑学
- 1 篇 土木工程
- 1 篇 化学工程与技术
- 1 篇 石油与天然气工程
- 1 篇 交通运输工程
2 篇 管理学
- 2 篇 公共管理

主题

15 篇 狂犬病
10 篇 狂犬病病毒
6 篇 弓形虫
5 篇 人兽共患病
4 篇 布鲁氏菌病
4 篇 jev
4 篇 流行特征
4 篇 流行病学
3 篇 疫苗
3 篇 免疫原性
3 篇 分析
3 篇 三带喙库蚊
3 篇 原核表达
3 篇 血吸虫病
3 篇 监测
3 篇 布病
3 篇 乙脑病毒
3 篇 禽流感病毒
3 篇 库蚊黄病毒
3 篇 狂犬病毒

机构

13 篇 中国疾病预防控制...
10 篇 吉林农业大学
9 篇 中国农业科学院上...
8 篇 军事医学科学院军...
6 篇 中国疾病预防控制...
6 篇 吉林大学
5 篇 四川农业大学
5 篇 中国农业大学
4 篇 华中农业大学
3 篇 中国食品药品检定...
3 篇 云南省地方病防治...
3 篇 山东省疾病预防控...
3 篇 前郭尔罗斯蒙古族...
3 篇 农业部兽用药物与...
3 篇 延边大学
3 篇 中国疾病预防控制...
3 篇 中国科学院微生物...
2 篇 吉林省地方病防治...
2 篇 剑桥大学
2 篇 安徽农业大学

作者

16 篇 梁国栋
12 篇 付士红
9 篇 王环宇
7 篇 李浩
5 篇 陶晓燕
5 篇 曹玉玺
4 篇 马志永
4 篇 王力华
4 篇 曹三杰
4 篇 何英
4 篇 唐青
4 篇 文心田
4 篇 刘文军
4 篇 仇旭升
4 篇 涂长春
4 篇 张海林
4 篇 刘全
4 篇 高晓艳
4 篇 丁铲
3 篇 雷晓思

语言

138 篇 中文

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甘肃省河西走廊地区2011-2012年虫媒病毒调查

甘肃省河西走廊地区2011-2012年虫媒病毒调查

引用

第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：付士红于德山査冰梁国栋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所甘肃省疾病预防控制中心

为了解甘肃省河西走廊地区蚊虫种类及其携带虫媒病毒特征等,本研究连续两年夏季(2011-2012年)在甘肃省河西走廊地区7个县(市)(武威、张掖、酒泉、兰州、白银、庆阳和金昌)采集蚊虫标本。蚊虫分类鉴定后液氮保存并运送至实验室备检。蚊... 详细信息

为了解甘肃省河西走廊地区蚊虫种类及其携带虫媒病毒特征等,本研究连续两年夏季(2011-2012年)在甘肃省河西走廊地区7个县(市)(武威、张掖、酒泉、兰州、白银、庆阳和金昌)采集蚊虫标本。蚊虫分类鉴定后液氮保存并运送至实验室备检。蚊虫标本研磨后采用组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定,利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。本项目共采集到蚊虫标本3属6种27760只,其中淡色库蚊和刺扰伊蚊为优势蚊种,淡色库蚊占采集总数的37.3%(10367/27,760),刺扰伊蚊其次占28.5%(7914/27,760),采集的蚊虫还还包括三带喙库蚊、中华按蚊、凶小库蚊、黄背伊蚊及蠓。2011年蚊虫标本分为339批研磨,分离到1株在BHK细胞引起病变的病毒分离物,分子生物学鉴定为盖塔病毒。此外,在32批蚊虫标本中检测到3种病毒核酸阳性,其中19批为库蚊黄病毒,4批为盖塔病毒,9批为辽宁病毒。其中酒泉和庆阳采集的蚊虫标本病毒阳性检出率最高。2012年蚊虫标本分为75批研磨,细胞培养法分离到35株病毒分离物,血清学及分子生物学系统鉴定发现其中32株为库蚊黄病毒,3株为辽宁病毒,其中武威蚊虫的病毒阳性检出率最高。库蚊黄病毒主要分离自淡色库蚊,少量分离自三带喙库蚊,辽宁病毒2株分离自淡色库蚊,1株分离自伊蚊。通过2年连续调查,发现甘肃省河西走廊地区8月份的优势蚊种为淡色库蚊和刺扰伊蚊。研究发现当地蚊虫中存在库蚊黄病毒、盖塔病毒和辽宁病毒等虫媒病毒。本研究还首次从当地蠓标本中分离到库蚊黄病毒。

关键词：虫媒病毒蚊虫库蚊黄病毒盖塔病毒辽宁病毒

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牛γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用

牛γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：黄健黄大卢邹海涛杭柏林邵红霞叶建强钱琨金文杰秦爱建扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室扬州大学动物重要疫病与人畜共患病防控协同创新中心

IFN-γ是由NK细胞和T细胞在一些诱导剂诱导作用下分泌产生的细胞因子,具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节的作用,由此,γ-干扰素一直成为生物科学关注的热点,至今用于预防和控制人类疾病的γ-干扰素主要是利用基因工程技术生产的,并且人γ-... 详细信息

IFN-γ是由NK细胞和T细胞在一些诱导剂诱导作用下分泌产生的细胞因子,具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节的作用,由此,γ-干扰素一直成为生物科学关注的热点,至今用于预防和控制人类疾病的γ-干扰素主要是利用基因工程技术生产的,并且人γ-干扰素比动物γ-干扰素得到更多的关注。但从1986年Cerretti报道牛IFN-γ基因后,就陆续有学者对其进行相关方面的研究。二十世纪九十年代,Wood等通过对IFN-γ的诊断建立了一种快速诊断牛结核病的方法,即在体外用特异性的牛型结核菌素刺激全血,然后用抗牛IFN-γ的单抗通过免疫学的方法检测释放到全血上清中的INF-γ水平,以此来诊断牛结核病。目前牛γ-干扰素检测牛结核的商用ELISA试剂盒在澳大利亚和欧美一些国家得到了广泛的应用,其特异性好灵敏度高,已被广泛的认可。本研究应用2株抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体6E5和3E1研制了牛γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法,并对最佳工作浓度、最佳作用时间进行了摸索和优化。结果建立以3E1为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记的6E5为酶标抗体最佳组合的双抗体夹心ELISA检测方法;最佳包被浓度2.5μg/ml;最佳酶标抗体工作浓度0.09μg/ml;样本和酶标抗体孵育时间均为60min。特异性良好,只与天然牛γ-干扰素和原核表达的His-BoIFN-γ反应。灵敏性较高,检测原核表达的His-BoIFN-γ的下限可达1.5ng/ml。包被酶标板批内重复系数和批间重复系数均小于10%,在允许的范围内。临床样本检测,与进口试剂盒符合率达96%,表明该方法能够有效地检测牛结核病,为我国牛结核病的检疫和根除提供一种实用、快速、有效的检测方法,具有重大的公共卫生意义。

关键词：牛结核牛γ-干扰素双夹心ELISA

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弓形虫酰基COA结合蛋白ACBP1和ACBP2的分析与原核表达

弓形虫酰基COA结合蛋白ACBP1和ACBP2的分析与原核表达

引用

第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：傅勇刘晶刘群中国农业大学动物医学院

酰基COA结合蛋白(Acyl-CoA-binding protein,ACBP)是一类高度保守的胞浆蛋白,广泛地存在于真核生物中,能够高特异性、高亲和力地结合不同长度的长链脂酰COA,发挥多种功能。本研究利用生物信息学在线分析工具对弓形虫ACBP1和ACBP2的氨基... 详细信息

酰基COA结合蛋白(Acyl-CoA-binding protein,ACBP)是一类高度保守的胞浆蛋白,广泛地存在于真核生物中,能够高特异性、高亲和力地结合不同长度的长链脂酰COA,发挥多种功能。本研究利用生物信息学在线分析工具对弓形虫ACBP1和ACBP2的氨基酸理化性质、信号肽、跨膜区、结构域、二级结构、三级结构等进行分析预测。结果显示,ACBP1编码区全长288bp,编码95个氨基酸;ACBP1蛋白亲水性较强,等电点7.78,不含有信号肽与跨膜区,二级结构中主要含有52.63%的α螺旋,29.47%的无规卷曲。ACBP2编码区全长936bp,编码311个氨基酸;ACBP2蛋白疏水性较强,等电点5.12,含有信号肽,不含跨膜区,二级结构中α螺旋占44.37%,无规卷曲占30.55%。ACBP1与ACBP2均含有一个结合脂酰COA的ACBP结构域,ACBP2还含有一个锚蛋白重复序列结构域,可能参与蛋白质之间的相互作用。利用同源建模的方式获得的ACBP1以及ACBP2的三级结构,显示ACBP1以及ACBP2的ACBP结构域均由4个α螺旋簇构成。构建了重组表达质粒pGEX-6P-1-ACBP1以及p GEX-6P-1-ACBP2。SDS-PAGE分析显示融合蛋白GST-ACBP1大小为36kD左右,GST-ACBP2大小为60kD左右,与预期分子量大小一致。以弓形虫RH株c DNA为模板,扩增ACBP1和ACBP2的编码序列,分别连接原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组表达质粒pGEX-6P-1-ACBP1和pGEX-6P-1-ACBP2,转化大肠杆菌感受太细胞Transetta(DE3),进行诱导表达,获得纯化重组蛋白ACBP1和ACBP2,为进一步研究ACBP蛋白家族的生物学功能奠定基础。

关键词：弓形虫 ACBP 脂肪酸代谢

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ncRNARli87基因缺失对单核细胞增生李斯特菌环境应激的影响

ncRNARli87基因缺失对单核细胞增生李斯特菌环境应激的影响

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：谢堃乔军孟庆玲彭叶龙赵海龙宋雪梅陈创夫才学鹏石河子大学动物科技学院动物疾病防控兵团重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种革兰氏阳性、兼性厌氧胞内寄生菌。该菌广泛存在于自然界中,易污染各种食品(肉、奶、海产品及蔬菜等),对环境的耐受性强,可在高盐浓度(可高达40%Na C1)以及宽泛的pH值(p H 3-12)... 详细信息

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种革兰氏阳性、兼性厌氧胞内寄生菌。该菌广泛存在于自然界中,易污染各种食品(肉、奶、海产品及蔬菜等),对环境的耐受性强,可在高盐浓度(可高达40%Na C1)以及宽泛的pH值(p H 3-12)和温度范围(0～45℃)环境中生长,是一种重要的人畜共患病原菌和四大食源性致病菌之一。最近的研究发现,非编码RNAs (non-coding RNAs, ncRNAs)对LM毒力和环境应激也发挥着重要的调控作用。为了解ncRNArli87对单核细胞增生李斯特菌环境应激的影响,本实验将rli87基因进行敲除,并利用同源重组技术构建ncRNArli87缺失株,将该缺失株在不同条件下进行培养测定其对环境适应能力。用单菌落计数的方法通过人工模拟高温、低温、高渗透压、酒精、酸碱性和氧化环境等应激反应,对比rli87缺失株与SB5野毒株活菌量。结果发现,与野毒株相比,rli87基因缺失株在低温、高温和常温的环境下OD600有上升趋势,表明rli87基因在温度应激中有着重要作用;两株菌在酸性环境下出现生长停滞;当pH=7环境下培养时,前4h缺失株的活菌量高于野毒株,6h开始野毒株活菌量明显高于缺失株;而碱性环境培养中的缺失株活菌量在整个时间段均高于野毒株,表明rli87基因在碱性环境应激中有上调的作用;根据活菌量计数,在高渗环境中野毒株与缺失株的生长差异不显著;在氧化环境下,两株菌出现生长停滞,活菌量计数随着时间的变化出现下降;3.8%ethanol环境中培养的12h内,缺失株的活菌量计数多于野毒株,前8h明显,后4h无明显差异;rsbV、rsbW、hpt、clp P、ctsR等环境应激基因转录水平均升高。本实验结果提示,rli87基因在LM对环境应激反应中有着重要的调控作用。

关键词：单核细胞增生李斯特菌同源重组 ncRNArli87基因环境应激

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JEV入侵BHK-21细胞内吞途径的初步研究

JEV入侵BHK-21细胞内吞途径的初步研究

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：曹三杰黄恒刘凯石双艳黄小波文心田四川农业大学预防兽医研究所猪病研究中心四川农业大学动物医学院人兽共患病研究室农业部兽用药物与兽医生物技术四川科学观测实验站

目的利用Real-timeRT-PCR检测技术,对乙型脑炎病毒入侵细胞的内吞途径进行初步研究。方法将BHK细胞接种于96孔细胞培养板,选用氯丙嗪、制霉菌素和细胞松弛素D3种药物分别处理细胞,以分别阻滞网格蛋白介导内吞途径、细胞膜穴样内陷途径... 详细信息

目的利用Real-timeRT-PCR检测技术,对乙型脑炎病毒入侵细胞的内吞途径进行初步研究。方法将BHK细胞接种于96孔细胞培养板,选用氯丙嗪、制霉菌素和细胞松弛素D3种药物分别处理细胞,以分别阻滞网格蛋白介导内吞途径、细胞膜穴样内陷途径和巨胞饮途径,然后进行JEV感染实验。将样品处理收集后,抽提总RNA,并反转录成c DNA。通过Real-time RT-PCR方法测定感染后1 h、12 h、24 h细胞内的病毒拷贝数。读取样品c DNA模板的Ct值,然后通过标准曲线公式Y=-0.3007X+10.53计算出模板初始拷贝数。换算为样品模板拷贝数的平均对数值(log10 copies)后,所得数据用软件SPSS 13.0进行统计学分析。结果与仅实施感染实验、未进行药物处理的对照组比较,3种药物处理组的细胞内病毒拷贝数在感染后各时相点均呈现不同程度的下降,在感染1 h、12 h和24 h后,氯丙嗪处理组细胞内病毒拷贝数分别下降了59.58%,53.34%和61.35%;细胞松弛素D组细胞内病毒拷贝数分别下降了23.59%,30.77%和30.14%;制霉菌素组细胞内病毒拷贝数分别下降了35.56%,34.40%和34.40%,氯丙嗪+制霉素处理组分别下降了48.50%,68.56%,67.11%;氯丙嗪+细胞松弛D处理组分别下降了58.10%,60.30%,75.97%;制霉素+细胞松弛素D处理组分别下降了24.27%,51.20%,49.42%;氯丙嗪+制霉素+细胞松弛素D处理组分别下降了68.27%,73.00%,79.19%。结果显示:当3种药物单独作用时氯丙嗪处理的细胞测得病毒数量相比对照组下降最多;当两种药物组合作用时,含有氯丙嗪的药物组病毒数量下降最多;当三种药物组合作用时,测得病毒数量最少,对病毒入侵抑制效果最强。结论乙型脑炎病毒主要利用网格蛋白介导内吞途径进入BHK-21细胞,这与同属于黄病毒属的西尼罗病毒、登革热病毒进入宿主细胞的内吞方式一致。

关键词：乙型脑炎病毒实时荧光定量RT-PCR 内吞途径

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日本乙型脑炎病毒Pr MΔE与tPA信号肽融合基因DNA疫苗的研究

日本乙型脑炎病毒Pr MΔE与tPA信号肽融合基因DNA疫苗的研究

引用

第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：刘凯孟丽军张亮黄小波文心田曹三杰四川农业大学预防兽医研究所猪病研究中心四川农业大学动物医学院人兽共患病研究室农业部兽用药物与兽医生物技术四川科学观测实验站

本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrMΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrMΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。采用RT-PCR方法和重叠PCR方法分别扩增出日本乙型脑炎病毒PrMΔE基因... 详细信息

本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrMΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrMΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。采用RT-PCR方法和重叠PCR方法分别扩增出日本乙型脑炎病毒PrMΔE基因和tPA信号肽序列,并分别将其克隆至pMD 19-T载体,经鉴定正确后亚克隆至真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-tPA-PrMΔE,对构建的重组质粒经鉴定正确后转染COS-7细胞,并利用间接免疫荧光试验检测质粒在细胞中的瞬时表达情况,同时利用制备的质粒免疫昆明小鼠,检测其JEV特异性血清IgG抗体水平、促脾淋巴细胞增长率,并以JEV CZ1株进行小鼠模型下的攻毒保护试验,进行DNA疫苗的攻毒保护率研究。结果显示,以RT-PCR方法和重叠PCR方法分别成功扩增出目的片段,通过对构建的重组质粒进行质粒PCR、酶切及测序鉴定,表明真核表达质粒pVAX-tPA-PrMΔE构建成功;间接免疫荧光试验结果显示重组质粒pVAX-tPA-PrMΔE在COS-7细胞中的表达产物可与鼠抗日本乙型脑炎病毒单克隆抗体发生特异性反应,显示出较好的反应原性;JEV特异性血清IgG结果显示,tPA信号肽序列的加入能明显增强PrMΔE基因DNA疫苗的特异性血清Ig G水平,且在42d后差异极显著(p<0.01);小鼠脾T淋巴细胞特异性增殖试验结果显示p VAX-tPA-PrMΔE组与空质粒对照组相、空白对照组相比差异极显著(p<0.01);攻毒试验结果显示本研究构建的重组DNA疫苗具有较好的攻毒保护率,能强有力的抵抗强毒株CZ-1的攻击。本研究成功构建了日本乙型脑炎病毒PrMΔE基因与tPA信号肽序列融合基因DNA疫苗(pVAX-tPA-PrMΔE),为日本乙型脑炎病毒基因工程疫苗的进一步研究及应用奠定了基础。

关键词：日本乙型脑炎病毒 PrMΔE基因 tPA信号肽序列 DNA疫苗免疫原性

来源：评论

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中国乙型脑炎参比实验室网络

中国乙型脑炎参比实验室网络

引用

第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：王环宇李艺星付士红曹玉玺高晓艳何英尹遵栋梁国栋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中国疾病预防控制中心免疫规划中心

流行性乙型脑炎(Japaneseencephalitis,JE)简称乙脑,是由于蚊虫叮咬引起的人类严重中枢神经系统急性传染病,其病原体为流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)。我国于1951年将乙脑纳入传染病报告系统,属于法定报告乙类... 详细信息

流行性乙型脑炎(Japaneseencephalitis,JE)简称乙脑,是由于蚊虫叮咬引起的人类严重中枢神经系统急性传染病,其病原体为流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)。我国于1951年将乙脑纳入传染病报告系统,属于法定报告乙类传染病。2008年,乙脑纳入我国计划免疫后,乙脑报告病例显著下降,但每年仍有3千例左右,报告的乙脑病例仍以临床诊断病例为主。随着乙脑疫苗的广泛使用,乙脑的流行地域、流行趋势、年龄构成均发生了一定的变化。真实掌握我国乙脑发病的情况,急需提高乙脑报告病例的实验室诊断率,建立中国乙脑参比实验室网络势在必行。2011年11月由中国疾病预防控制中心发文正式组建以国家乙脑实验室为核心,涵盖贵州、四川、河南、上海、山东、浙江、广东、重庆、广西、云南,共10个省、市、自治区的乙脑实验室的中国乙型脑炎参比实验室网络。在2年的运行中,通过电话会议和实验室网络年度工作会议,逐步完善网络运行;通过实验室手把手培训、质控考核、标本复核检测等强化质量控制,标准化实验室检测方法,提高实验室检测质量及检测能力;通过现场评估与考核,进一步促进各省级乙脑参比实验室工作。目前,中国乙脑参比实验室网络建立并开始良性运转,乙脑报告病例的实验室检测率得到大幅提升,总体在85%以上。各省质控考核正确率和标本复核检测一致率均达到100%。中国乙脑参比实验室网络已经在乙脑报告病例的实验室检测率、质控考核正确率、标本复核检测一致率等等上升到新的水平。下一步重点是建立省内乙脑参比实验室网络,加强对各地、市、州级实验室培训,将乙脑检测工作推广到基层实验室,实验室检测工作前移从而提高乙脑报告病例标本采集率和实验室检测率。同时,通过考核评估后逐步纳入其他省级乙脑参比实验室进入网络,全面提高我国乙脑防控工作。

关键词：乙型脑炎参比实验室网络

来源：评论

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旋毛虫ES抗原对DC2.4细胞TLR4、NF-κB和AP-1 mRNA表达及细胞因子水平的影响

旋毛虫ES抗原对DC2.4细胞TLR4、NF-κB和AP-1 mRNA表达及细胞因子...

引用

第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：刘畅韩彩霞李巍路义鑫李晓云宋铭忻东北农业大学动物医学学院

旋毛虫是一种常见的重要人畜共患线虫,主要由于生食或半生食含有旋毛虫幼虫包囊的猪肉或者其他温血动物肉类而感染。经胃液和肠液的消化幼虫逸出,发育成的成虫所产生的新生幼虫随血液和淋巴循环迁移,最终侵入宿主肌细胞形成包囊,完成寄... 详细信息

旋毛虫是一种常见的重要人畜共患线虫,主要由于生食或半生食含有旋毛虫幼虫包囊的猪肉或者其他温血动物肉类而感染。经胃液和肠液的消化幼虫逸出,发育成的成虫所产生的新生幼虫随血液和淋巴循环迁移,最终侵入宿主肌细胞形成包囊,完成寄生的生活史。旋毛虫在肌细胞中的寄生过程中,排泄分泌抗原(ES)通过与免疫活性细胞如树突状细胞相互作用,不断刺激、调控宿主免疫系统来适应宿主环境。目的研究旋毛虫ES抗原对小鼠树突状细胞表面受体TOLL样受体家族的TLR4、转录因子家族的NF-κB和AP-1m RNA表达水平以及细胞因子IL-6、IL-10、IL-12、NO和TNF-α分泌情况的影响,为进一步探讨ES抗原调整树突状细胞免疫状态的分子机制建立基础。方法以细胞系DC2.4为研究对象,旋毛虫ES抗原和TLR4阳性刺激剂LPS为作用物质,分别设立以下组别:PBS组(空白对照组);LPS组;ES抗原组、ES抗原+LPS/ES抗原组和LPS+LPS/ES抗原组。在建立Gapdh(管家基因)、TLR4、NF-κB和AP-1 mRNA荧光定量PCR检测方法基础上,采用实时荧光定量PCR(Real-time FQ-PCR)技术检测DC2.4 TLR4、NF-κB和AP-1基因m RNA相对表达水平变化,同时用ELISA方法检测细胞上清液中IL-6、IL-10、IL-12、NO和TNF-α分泌情况变化。结果成功建立Gapdh、TLR4、NF-κB和AP-1 mRNA荧光定量PCR检测方法(染料法),ES抗原和LPS预作用组的TLR4、NF-κB和AP-1 m RNA表达水平较ES抗原和LPS单作用组均降低,且差异显著(P﹤0.05);IL-6、IL-10、IL-12、NO和TNF-α分泌水平分别较ES和LPS单作用组均降低,且差异显著(P﹤0.05)。结论实验证实,DC2.4细胞受ES抗原和LPS持续作用或者双重作用均可诱导小鼠DC2.4细胞TLR4、NF-κB和AP-1 mRNA表达水平以及IL-6、IL-10、IL-12、NO和TNF-α分泌水平的降低,可能诱致DC2.4细胞免疫耐受。

关键词：旋毛虫ES抗原 TLR4 转录因子细胞因子实时荧光定量PCR

来源：评论

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我国分离到基因V型乙脑病毒

我国分离到基因V型乙脑病毒

引用

第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：李铭华付士红王环宇曹玉玺梁国栋中国疾病预防中心病毒病预防控制所病毒性脑炎室

乙脑病毒(Japanese Encephalitis virus, JEV)属于黄病毒科黄病毒属,为单股正链的RNA病毒。利用乙脑病毒E基因区段的1500 nt对JEV进行基因分型,将JEV分为基因Ⅰ～Ⅴ型,使JEV基因型的分布更具地域性和准确性,并得到广泛应用。我国JEV基... 详细信息

乙脑病毒(Japanese Encephalitis virus, JEV)属于黄病毒科黄病毒属,为单股正链的RNA病毒。利用乙脑病毒E基因区段的1500 nt对JEV进行基因分型,将JEV分为基因Ⅰ～Ⅴ型,使JEV基因型的分布更具地域性和准确性,并得到广泛应用。我国JEV基因型年代分布研究表明,在近30年间我国JEV发生了从基因Ⅲ型到基因Ⅰ型的演变。基因Ⅴ型JEV (Maur株)于1952年首次分离自马来西亚的脑炎病人标本。2009年8月在西藏自治区墨脱县采集的三带喙库蚊中分离到1株病毒(XZ0934株),经过血清学和分子生物学试验鉴定为基因V型乙脑病毒,这是时隔57年后该基因型JEV的再次出现。至此,在中国大陆至少有3个基因型(I, III, V型)JEV的循环。对XZ0934株的分子生物学特征分析表明,该病毒基因组全长为10983nt,从第96-10397位是一个单一开放读码框(ORF),长度为10302nt,编码3433个氨基酸。XZ0934病毒株与G I-G IV乙脑病毒全基因组核苷酸同源性为78.4%(G I KV1899)-79.7%(G III CC27-L1),差异达20.3%-21.6%;氨基酸同源性为90.0%(GIKV1899)-91.8%(GIIIK87P39),差异达8.2%-10.0%。与目前已知的4个基因型别乙脑病毒全序相比,XZ0934株在开放读码框NS4a区段比其他JEV都要多3个核苷酸(AGC),相应地多编码1个氨基酸(丝氨酸)。XZ0934病毒株3’UTR区较其他基因型JEV在终止密码子下游插入多个核苷酸。XZ0934病毒在E基因区段的3个功能结构域存在多个氨基酸变异,因此研究这些差异位点对病毒生物学和对机体免疫应答方面的反应以及现有疫苗对基因V型JEV的保护等是急需开展的研究课题。2010年韩国在采集的蚊虫中也检测到基因Ⅴ型JEV的核酸。时隔50多年后在中国和韩国再次分离和检测到基因Ⅴ型JEV,提示该病毒已经开始在世界重新流行。由于Muar株JEV首先分离自病毒性脑炎病例患者标本,提示该病毒具有较强致病力,因此该基因型病毒感染所引起的疾病负担是值得十分关注的课题。

关键词：乙脑病毒基因型核苷酸 JEV

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蚊虫中坦布苏病毒的分离及病毒全基因组序列分析

蚊虫中坦布苏病毒的分离及病毒全基因组序列分析

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第四届全国人畜共患病学术研讨会 2014年中国狂犬病年会中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会

作者：雷雯雯郭晓芳付士红周红宁梁国栋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所云南省寄生虫病预防控制所

2012年在云南省南部中老缅边境地区采集三带喙库蚊标本中分离到两株病毒(YN12115和YN12193),病毒可以引起蚊虫细胞和哺乳动物细胞规律病变,通过病毒分子生物学方法,和生物信息学等对这两株病毒基因组进行核苷酸序列测定和分析,结果显示... 详细信息

2012年在云南省南部中老缅边境地区采集三带喙库蚊标本中分离到两株病毒(YN12115和YN12193),病毒可以引起蚊虫细胞和哺乳动物细胞规律病变,通过病毒分子生物学方法,和生物信息学等对这两株病毒基因组进行核苷酸序列测定和分析,结果显示,这两株病毒属于坦布苏病毒(Tembusuvirus,TMUV)。负染电镜观察显示,病毒粒子直径为50nm。YN12115和YN12193病毒基因组编码区全长均为10278nt,含有一个开放阅读框,编码3425aa,两株病毒间核苷酸同源性为94%,推导氨基酸同源性为98.2%。基因组编码区和病毒E基因序列分析显示,YN12115和YN12193株与东南亚(马来西亚、泰国)TMUV分离株核苷酸和推导氨基酸同源性最高。其中,YN12115与1955年分离自马来西亚的TMUV原型株MM1775株的编码区同源性最高,核苷酸同源性为91.8%,氨基酸为98.4%;YN12193与MM1775株的编码区氨基酸同源性最高,为97.5%。YN12115、YN12193与泰国分离的蚊媒TMUV(Thai-MLO305株、Thai-JSL385株、ThCar105/92株)和禽源TMUV(AFRIMS-D129-014/157株、AFRIMS-D099-014/161株、AFRIMS-D119-014/150株)间的E基因同源性最高,核苷酸同源性均在95%以上,氨基酸同源性均在97.4%以上。编码区和E基因系统进化分析结果表明,YN12115和YN12193株与2010年以前分离的东南亚(马来西亚、泰国)TMUV同处一个进化分支,而2010年以后分离的中国禽源和蚊媒TMUV共同构成一个进化分支。本研究结果首次证明了TMUV分为两个进化分支,一个为TMUV中国大陆分支,一个为TMUV东南亚分支。该研究结果对TMUV的遗传进化及跨物种传播机制的理解具有重要意义。

关键词：坦布苏病毒三带喙库蚊基因组进化分析

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