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机构

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作者

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18 篇 何明丰
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利用连接片段进行缺失型DMD/BMD携带者检测

利用连接片段进行缺失型DMD/BMD携带者检测

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第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者：钟敏武钢肖利民何琳南方医科大学南方医院

目的依据DMD基因缺失后断端重接可形成的一段变异的DNA序列,提出一种利用连接片段进行缺失型DMD/BMD携带者检测的新方法。方法选择2个DMD/BMD家系和1个散发病例家庭的女性亲属为研究对象。其中家系1为一个BMD家系,家系中Ⅲ1、Ⅲ4为确诊... 详细信息

目的依据DMD基因缺失后断端重接可形成的一段变异的DNA序列,提出一种利用连接片段进行缺失型DMD/BMD携带者检测的新方法。方法选择2个DMD/BMD家系和1个散发病例家庭的女性亲属为研究对象。其中家系1为一个BMD家系,家系中Ⅲ1、Ⅲ4为确诊的患者,先证者Ⅲ1(病例5)已证实为第3～5外显子缺失并已克隆其连接片段JUNCTION 5,Ⅲ1的母亲Ⅱ2、Ⅲ4的女儿Ⅳ4为肯定携带者,Ⅲ1的妹妹Ⅲ3为可能携带者;家系2为一个DMD家系,其中先证者Ⅲ2(病例3)已证实为第31～43外显子缺失并已克隆其连接片段JUNCTION 3,Ⅲ2的母亲Ⅱ3为肯定携带者;病例4为一DMD散发病例,已证实为第45～54外显子缺失并已克隆其连接片段JUNCTION 4,其母亲待检测排除为携带者。抽提制备以上检测对象外周血基因组DNA。在连接片段序列已被成功测序的情况下,对扩增以上JUNCTION 5、JUNCTION 3、JUNCTION 4的弓引物进行重新设计减短PCR产物长度,以提高常规PCR扩增连接片段的成功率。然后以相应的新设计3对引物分别对以上2个家系中女性待检测对象和病例4母亲可能存在的连接片段进行PCR扩增和测序,同时扩增先证者和正常人作为对照。结果家系1检测结果:对家系1的3例女性Ⅲ3、Ⅱ2、Ⅳ4的连接片段PCR反应均为扩增出与患者Ⅲ1、Ⅲ4一致的阳性结果,同时比较Ⅲ3、Ⅱ2、Ⅳ4与Ⅲ1、Ⅲ4的连接片段的测序结果无差异,诊断家系1的Ⅲ3、Ⅱ2、Ⅳ4均为BMD女性携带者。家系2检测结果:对家系2的1例女性Ⅱ3的连接片段PCR反应为扩增出与患者ⅢI2一致的阳性结果,同时比较Ⅱ3与ⅢI2的连接片段的测序结果无差异,诊断家系2的Ⅱ3为DMD女性携带者。病例4的母亲检测结果:对病例4的母亲的连接片段PCR反应结果为扩增阴性,而对照的病例4扩增出阳性结果,可以排除病例4的母亲为DMD女性携带者。结论尽管不同家系患者的DMD基因缺失情况各异,但一般而言同一家系DMD基因缺失的基因型相同。因此在对DMD/BMD先证者的连接片段的进行克隆和测序后,利用常规PCR技术直接检测待诊女性亲属是否带有连接片段,可以达到准确进行携带者检测的<正>目的。

关键词：携带者检测先证者 BMD DMD/BMD 缺失型

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不同剂量参附注射液对窒息型大鼠心肺复苏后脑保护作用比较研究

不同剂量参附注射液对窒息型大鼠心肺复苏后脑保护作用比较研究

引用

第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者：李章平陈寿权章杰李惠萍黄唯佳程俊彦晏平薛继可温州医学院附属第一医院急诊科

目的探讨不同剂量参附注射液对大鼠心肺复苏后脑皮质神经元特异性烯醇化酶、S100β蛋白的表达和脑组织病理损伤的影响。方法成年雄性SD大鼠160只,随机分为对照组、复苏组、小剂量参附组(10ml/kg)和大剂量参附组(20ml/kg)。建立窒息型大... 详细信息

目的探讨不同剂量参附注射液对大鼠心肺复苏后脑皮质神经元特异性烯醇化酶、S100β蛋白的表达和脑组织病理损伤的影响。方法成年雄性SD大鼠160只,随机分为对照组、复苏组、小剂量参附组(10ml/kg)和大剂量参附组(20ml/kg)。建立窒息型大鼠心肺复苏模型,每组分别于气管切开并自主循环恢复(ROSC)后0.5h、3h、6h、12h和24h共5个时间点随机选8只断头,用免疫组化法测定脑皮质神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S100β蛋白表达水平,电镜下观察大脑皮层组织病理改变。结果与对照组比较,复苏组和大、小剂量参附组大鼠皮层NSE阳性细胞数在ROSC后各对应时间点均有统计学意义差异(P<0.01)。与复苏组比较,小剂量参附组在ROSC 24h点NSE阳性细胞数有统计学意义差异(p<0.01),大剂量参附组在ROSC 3h后各对应时间点NSE阳性细胞数均有统计学意义差异(p<0.05或p<0.01)。与小剂量参附组比较,大剂量参附组在ROSC 6h后各对应时间点NSE阳性细胞数均有统计学意义差异(p<0.05或p<0.01)。与对照组比较,复苏组ROSC 3h后各对应时间点均有统计学意义差异(P<0.01),大、小剂量参附组ROSC 6h后各对应时间点均有统计学意义差异(P<0.01)。与复苏组比较,大小剂量参附组在ROSC 3h后S100β蛋白阳性细胞数就开始降低(p<0.05或p<0.01)。与小剂量参附组比较,大剂量参附组在ROSC后各对应时间点均无统计学意义差异(p>0.05)。电镜下显示大、小剂量参附组大脑皮层组织结构损害程度明显轻于复苏组且大剂量组更明显。结论参附注射液具有减轻大鼠心肺复苏后脑损伤作用,在大剂量时可能更加明显。

关键词：参附注射液小剂量大剂量心肺复苏后比较研究

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模拟超重并发脾破裂小鼠血常规和病理变化的实验研究

模拟超重并发脾破裂小鼠血常规和病理变化的实验研究

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第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者：李建忠杨鹤鸣刘志国敬华吴继华化楠肖阳李婧特种医学中心

目的在发生空难或试验任务意外时,发生冲击过载导致或加重腹部创伤是一种常见的伤情。我们利用离心机制作模拟超重并发脾破裂脾破裂的复合动物模型,研究其致伤特点,为临床救治提供参考。方法采用ICR小鼠,雄性,体重23g左右。模型制作分... 详细信息

目的在发生空难或试验任务意外时,发生冲击过载导致或加重腹部创伤是一种常见的伤情。我们利用离心机制作模拟超重并发脾破裂脾破裂的复合动物模型,研究其致伤特点,为临床救治提供参考。方法采用ICR小鼠,雄性,体重23g左右。模型制作分为三组:超重组,8只,开关腹,无脾损伤,+8Gz/3min离心机制作超重模型;脾破裂组,8只,开关腹,脾中部横夹造Ⅳ度脾损伤;超重脾破裂复合组,8只,开关腹,+8Gz/3min离心机制作超重模型,脾中部横向夹闭模拟Ⅳ度脾损伤。手术后分6h、24h、72h等三个时相。分别摘眼球取血,实验室按时相活测定外周血常规,主要观察红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)等,同时活杀取材,包括胃、小肠、肝、肾、脾,HE染色,光镜观察病理学改变。结果各组血常规中红细胞、血红蛋白数量呈进行性升高,而血小板的数量呈进行性降低,提示有不同程度的失血症状;其中超重合并脾破裂组并未见明显加重,提示在超重状态下,脾脏失血特点与常规脾破裂略有不同。病理检查发现各组标本可见脾脏部分缩小,色泽不变,裂伤组已闭合纤维化,表面光滑。部分组别标本的肝细胞肿胀,体积增大,胞浆疏松化,部分气球样变,少数细胞结构不清、胞核消失,肝窦受压变窄;在各时相分组中,超重加脾破裂复合模型组的脾脏病理改变均较其它两组略显严重些;各时相和组别的胃、肠和肾等其他脏器未见明显病理改变。结论航天航空环境和飞行器空难等特殊环境下的主要特点是重力的变化即失重(或)超重,经常发生冲击过载,其中导致或加重腹部创伤,特别是脾破裂的情况时有发生。如果创伤严重会造成失血等并发症,并累及其他脏器。实验结果提示我们:超重状态下脾破裂损伤较普通脾破裂损伤具有一定特殊性,提示超重因素对于脾破裂损伤的影响是明显存在的,但其影响权重有待进一步讨论。综上所述,研究模拟超重并发腹部失血损伤对于研究飞行空难的损伤救治和航天卫勤保障具有一定参考意义。

关键词：病理变化破裂损伤

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心肺脑复苏健康教育教学中几个重要问题

心肺脑复苏健康教育教学中几个重要问题

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第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者：何泽民邵阳学院医院急诊科

目的针对自然灾害、食物中毒、交通事故、煤矿事故等公共卫生突发事件频发和传染病疾病谱变化,带给人类生命威胁在增大和增多,通过结合《2010~心肺复苏与心血管急救指南》开展心肺脑复苏教学,使当代大学生掌握心肺脑复苏的基本知识和技... 详细信息

目的针对自然灾害、食物中毒、交通事故、煤矿事故等公共卫生突发事件频发和传染病疾病谱变化,带给人类生命威胁在增大和增多,通过结合《2010~心肺复苏与心血管急救指南》开展心肺脑复苏教学,使当代大学生掌握心肺脑复苏的基本知识和技能,培养快速应急能力,保障能及时获得现场急救,把意外事件对生命的危害降到最低限度。方法1、比较《2010`心肺复苏与心血管急救指南》与《2005`心肺复苏与心血管急救指南》的异同点开展健康教育教学。2、掌握心肺脑复苏适用对象,适用于抢救各种原因引起的猝死者,即突然发生的呼吸和/或心跳骤停。3、学会观察心跳、呼吸骤停的生命指征:(1)意识突然丧失;(2)面色苍白或紫绀;(3)呼吸停止,观察不到胸廓的呼吸运动,感受不到鼻孔有空气的吸入和气体的呼出。(4)心音及大动脉搏动消失,用耳朵直接贴近患者的心尖听不到心跳声音,摸不到颈动脉搏动;(5)双侧瞳孔散大。4、熟练掌握高质量的胸外按压:规范地做好胸外按压,提高抢救成功率。首先要保证胸外按压的频率和深度,按压频率至少100次/分,按压胸骨下陷深度至少5 cm。抢救者的双臂应绷直,两肘关节固定不动,双肩在患者胸骨上方正中,利用施救者上半身体重和肩、臂部的肌肉的力量,垂直向下用力按压。最大限度地减少胸外按压的中断,避免过度通气,保证胸廓完全回弹。4、学会迅速开放气道:常采用仰头抬颏手法:即将一只手放在患者前额上,手掌用力向后压以将头向后翘,将另一只手的手指放在靠近颏部的下颌骨下方将颏部向前抬起。对疑有颈外伤者应采用托颌而不仰头,即用双手紧抓患者下颌角托起,同时应小心地支持头部不要后仰或从一侧转向另一侧。清除气道及口内异物。5、学会人工呼吸:对无呼吸者立即进行人工呼吸:病人应处于呼吸道通畅,口部张开的状态下进行;用按于前额一手的拇指与食指捏紧鼻翼下端把病人的鼻孔捏闭;抢救者深吸一口气后把自己的口张开并紧贴病人嘴,把病人的口部完全包住,形成不透气的密闭状态,不应漏气。结果学生准确识别施救对象,掌握胸外按压(C)、开放气道(A)和人工呼吸(B)操作要领,明白C—A—B三者之间的顺序,就能完成心肺复苏急救过程中基础生命支持任务。结论通过C、A、B按程序连续操作,从外部来支持心跳、呼吸停止患者的血液循环和通气,对患者的脑、心和其他重要脏器供氧。为成功抢救生命创造必不可缺的条件。

关键词：心肺脑复苏心肺复苏心血管胸外按压开放气道教学中

来源：评论

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姜黄素治疗急性百草枯中毒的临床研究

姜黄素治疗急性百草枯中毒的临床研究

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第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者：蒋丽大连医科大学附属第一医院急诊科

目的探讨姜黄素治疗急性百草枯口服中毒的临床疗效。方法选择2007年3月～2010年3月在大连医科大学附属第一医院救治的急性百草枯口服中毒病人74例,分为常规治疗组、激素治疗组和姜黄素治疗组。常规治疗组患者于入院后立即给予洗胃、导... 详细信息

目的探讨姜黄素治疗急性百草枯口服中毒的临床疗效。方法选择2007年3月～2010年3月在大连医科大学附属第一医院救治的急性百草枯口服中毒病人74例,分为常规治疗组、激素治疗组和姜黄素治疗组。常规治疗组患者于入院后立即给予洗胃、导泻、补液、利尿,保肝等常规对症治疗,并于24小时内行血液灌流一次。激素治疗组在上述常规治疗基础上给予地塞米松25mg,静脉推注,每日一次。姜黄素治疗组在上述常规治疗基础之上给予姜黄素500mg/kg,口服,每日一次。在治疗第3天、7天、21天进行疗效评价,并对各组病例所出现的并发症进行统计。常规治疗组、激素治疗组和姜黄素治疗组均根据服毒量分组比较(20%原液或相当量<50ml组和≥50ml组)。结果中毒治疗第3日,常规治疗组存活率为47.1%(<50ml组)、28.6%(≥50ml组);激素治疗组存活率为64.7%(<50ml组)、50%(≥50ml组);姜黄素治疗组存活率为66.7%(<50ml组)、50%(≥50ml组)。治疗第7日,常规治疗组存活率为17.6%(<50ml组)、14.3%(≥50ml组);激素治疗组存活率为41.2%(<50ml组)、30%(≥50ml组);姜黄素治疗组存活率为46.7%(<50ml组)、25%(≥50ml组)。治疗第21日,常规治疗组存活率为5.9%(<50ml组)、0%(≥50ml组);激素治疗组存活率为23.5%(<50ml组)、10%(≥50ml组);姜黄素治疗组存活率为20%(<50ml组)、12.5%(≥50ml组)。各组相比较,激素治疗组及姜黄素治疗组存活率明显比常规治疗组高(P<0.05),而姜黄素治疗组生存率与激素组相比无明显差异(P>0.05)。各组并发症发生率,常规治疗组:肺纤维化25%、急性肾功衰竭45.8%、肝功衰竭20.8%、MODS 16.7%、DIC 12.5%;姜黄素治疗组:肺纤维化14.8%、急性肾功能衰竭22.2%、肝功衰竭7.4%、MODS 11.1%、DIC 3.7%;姜黄素治疗组:肺纤维化13%、急性肾功能衰竭21.7%、肝功衰竭8.3%、MODS 8.3%、DIC 4.3%。以上并发症在激素治疗组及姜黄素治疗组明显低于常规治疗组(P<0.05),而激素治疗组与姜黄素治疗组之间比较无明显差异(P>0.05)。结论对急性百草枯口服中毒患者给予姜黄素治疗,其存活率、严重并发症发生率得到一定程度的改善,初步显示较好的疗效。

关键词：姜黄素急性百草枯中毒治疗组临床研究

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Errors and patient safety in the ED

Errors and patient safety in the ED

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第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者： Eillyne Seow Department of Emergency Medicine Tan Tock Seng Hospital Singapore

急诊医务人员工作环境通常都是拥挤,混乱,紧张的;资源经常不足,重症与轻病患者混合在一起。在这些错综复杂的因素下我们极有可能作出错误的决定。

关键词： Errors and patient safety in the ED 急诊室医疗错误

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Emergency Medicine Residency Training:The United States Perspective

Emergency Medicine Residency Training:The United States Pers...

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第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者： Laura Pimentel Department of Emergency Medicine University of Maryland School of Medicine BaltimoreMaryland

The history of residency training in the United States dates back to *** first training program was initiated at the University of *** Janiak,a graduate of the University of Cincinnati College of Medicine,was the first residency trained emergency *** story is documented in Dr. Brian Zink's excellent book:Anyone,Anything,Anytime:A History of Emergency Medicine.[1]In 1982, the Residency Review Committee(RRC) for Emergency Medicine was formed,and in 1989 the American

关键词： Emergency Medicine Residency Training:The United States Perspective

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Building a Harmonised Emergency Department-Mission Impossible?

Building a Harmonised Emergency Department-Mission Impossibl...

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第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者： Chung Shun-hang Joseph Hong Kong Prince of Wales Hospital AED Associate Consultant

Introduction Emergency department(ED) is a place prone to *** patients,either walk-in or being transported by stretchers,demand immediate medical *** have a number of uncertainties in their *** patients in the wards,they may not sure about the severity of their condition,whether they should require inpatient or outpatient *** also differ from those in the outpatients clinic,either general or specialist *** do not know the prognosis of their conditions and

关键词： Building a Harmonised Emergency Department-Mission Impossible

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快速同步肾上腺素递增剂量方程与4摄氏度生理盐水及生脉注射液联合在心肺脑复苏中的应用价值研究

快速同步肾上腺素递增剂量方程与4摄氏度生理盐水及生脉注射液联...

引用

第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者：时启标郭庆争山东省单县中心医院急救中心

目的探讨肾上腺素递增剂量方程G=(K+2n-1)mg/3min[K=1、2,n=1、2、3…,G≤0.2mg/Kg]与4℃生理盐水(NS)及生脉注射液快速同步联合在心肺复苏中的应用效果及临床价值。方法把106例心跳骤停(CA)患者分成3组,即标准肾上腺素剂量对照组(SDE... 详细信息

目的探讨肾上腺素递增剂量方程G=(K+2n-1)mg/3min[K=1、2,n=1、2、3…,G≤0.2mg/Kg]与4℃生理盐水(NS)及生脉注射液快速同步联合在心肺复苏中的应用效果及临床价值。方法把106例心跳骤停(CA)患者分成3组,即标准肾上腺素剂量对照组(SDE对照组)36例、方程G=(K+2n-1)mg/3min[K=1、2,n=1、2、3…,G≤0.2mg/Kg]中首次剂量K=1mg方程1组34例及K=2mg方程2组36例,采用肘静脉多通道按下列方法应用肾上腺素和4℃生理盐水及生脉注射液:①SDE对照组首次静推肾上腺素1mg后无效,每间隔3分钟(min)重复首次剂量;②方程1组首次肾上腺素1mg无效后,每间隔3min按方程计算出的递增剂量为2mg、3mg…肾上腺素快速静推1次;同步使用4℃生理盐水(NS)在心肺复苏始与肾上腺素同步即刻按0.5ml/kg/min速度输注30ml/kg,之后按10ml/kg/h速度输注4小时;生脉注射液在心肺复苏始与肾上腺素同步即刻给予生脉注射液40ml快速静注,随后按0.9%生理盐水250ml+生脉注射液60ml静脉点滴且60min滴毕;③方程2组首次剂量为2mg肾上腺素无效后,按方程计算出来的3mg、4mg…肾上腺素每间隔3min快速iv1次,同步使用4℃生理盐水(NS)和生脉注射液方法同上;同时进行心电、平均动脉压、心率、自主循环恢复的时间、肛温、G1asgow昏迷评分等监测,并进行复苏效果评价。结果①方程2组和方程1组自主循环恢复率、24h存活率、出院存活率、出院存活Glasgow昏迷评分与SDE对照组比较均显著升高(P<0.01),方程2组和方程1组从CPR始用药到+ROSC平均时间与SDE对照组相比显著缩短(P<0.01)。②方程2、方程1和SDE对照从CPR始致+ROSC中所用肾上腺素的平均用量明显减少(P<0.05),但方程2组和方程1组达到+ROS(所需静推肾上腺素的周期数与SDE对照组相比减少非常显著(P<0.01)。结论采用肾上腺素递增剂量方程和4℃生理盐水及生脉注射液快速同步联合应用,在CPR流程中能显著提高心脏复苏率、提升存活率,并且显著缩短自主循环恢复时间,显著改善神经系统及脑功能,提高复苏时效效应,是提高心肺脑复苏成功率的又一新方法和途径。

关键词：肾上腺素心肺复苏生脉注射液生理盐水应用价值快速同步

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DMD基因缺失机制和5例中国人连接片段序列分析

DMD基因缺失机制和5例中国人连接片段序列分析

引用

第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会

作者：钟敏鲍光欣武钢肖利民南方医科大学南方医院急诊科

目的通过进行DMD基因缺失连接片段测序,分析中国人连接片段序列的一些特点并探讨DMD基因缺失和修复的机制。方法选择5例经证实的缺失型DMD/BMD患者,其中病例1、病例2、病例3、病例4为DMD,病例5为BMD。抽提制备以上患者外周血基因组DNA... 详细信息

目的通过进行DMD基因缺失连接片段测序,分析中国人连接片段序列的一些特点并探讨DMD基因缺失和修复的机制。方法选择5例经证实的缺失型DMD/BMD患者,其中病例1、病例2、病例3、病例4为DMD,病例5为BMD。抽提制备以上患者外周血基因组DNA。通过外显子PCR检测确定病例1为DMD基因第46～50外显子缺失,病例2为第51～55外显子缺失,病例3为第31～43外显子缺失,病例4为第45～54外显子缺失,病例5为第3～5外显子缺失。对各例DMD基因缺失断裂点所在的相应内含子上每间隔一定距离(一般为3 kb)设计1对引物,通过PCR步移的方法定位相应内含子上的断裂点位点。然后分别在靠近其上下游断裂点处各设计1对配对引物,以直接对各例连接片段进行长片段PCR扩增,将扩增成功的PCR产物纯化后测序。对所测5例中国人连接片段5'端和3'端断裂点两侧的序列进行重复序列、基质附着区(MARs)、回文序列、TTTAAA序列以及基因缺失后修复方式的分析。结果5例中国人连接片段的序列特点:分析发现JUNCTION 1的5'端断裂点位于第45内含子LINE/L1序列内,邻近MAR,附近存在回文序列,其3'端断裂点邻近第50内含子的MAR;JUNCTION 2的5'端断裂点附近存在回文序列,其3'端断裂点位于第55内含子LINE/L1序列内;JUNCTION 3的5'端断裂点位于第30内含子LINE/L1序列内,附近存在回文序列;JUNCTION 4的5'端断裂点位于第44内含子LINE/L1序列内,邻近MAR,其3'端断裂点两旁存在回文序列;JUNCTION 5的5'端断裂点位于第2内含子SINE/Alu序列内,其3'端断裂点邻近第5内含子的MAR,附近有TTTAAA序列。5例DMD基因缺失相连接的序列均无广泛同源性。发现JUNCTION 1具有5 bp的微小同源序列连接断裂点两端;JUNCTION 2为平端连接,另外在其5'端断裂点上游39 bp位置发现一处A→G点突变;JUNCTION 3插入7 bp序列连接断裂点两端;JUNCTION 4具有4 bp的微小同源序列连接断裂点两端;JUNCTION 5插入26 bp序列并在连接点周围形成3个13 bp的重复连接断裂点两端,且在其5'端断裂点上游20 bp位置发现一处A→G点突变。

关键词：断裂点内含子同源序列回文序列基因缺失 DMD 序列分析

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