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1 篇 医学
- 1 篇 临床医学

主题

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2 篇 细胞移植
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机构

8 篇 暨南大学附属第一...
8 篇 解放军总医院
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4 篇 南通大学
3 篇 中国医学科学院北...
2 篇 第二军医大学长海...
2 篇 甘肃省人民医院
2 篇 遵义医学院
2 篇 郑州大学

作者

9 篇 付小兵
8 篇 刘宏伟
6 篇 施萍
6 篇 庞希宁
6 篇 杨印祥
5 篇 李升红
5 篇 彭江
5 篇 肖丽玲
5 篇 郭全义
5 篇 栾佐
5 篇 余家阔
4 篇 杨辉
4 篇 罗卓荆
4 篇 解慧琪
4 篇 屈素清
4 篇 贾军
4 篇 滕华建
4 篇 杜侃
4 篇 蒋青
4 篇 江东

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股骨头骨坏死标本内成、破骨活性的区域性分布特征

股骨头骨坏死标本内成、破骨活性的区域性分布特征

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：王程王玉彭江卢世璧中国人民解放军总医院骨科研究所北京100853

目的：对人股骨头坏死标本中不同区域内骨微观结构、微观力学及成、破骨细胞活性特征进行研究，探讨股骨头骨坏死的塌陷原因及可能的应对启示.方法：收集2011年3月至201 4年5月行全髋关节置换的非创伤性股骨头坏死患者术后的股骨头标本1...

目的：对人股骨头坏死标本中不同区域内骨微观结构、微观力学及成、破骨细胞活性特征进行研究，探讨股骨头骨坏死的塌陷原因及可能的应对启示.方法：收集2011年3月至201 4年5月行全髋关节置换的非创伤性股骨头坏死患者术后的股骨头标本10例(Ficat Ⅳ期).Micro-CT扫描后，根据骨质密度的不同，将每个标本分为软骨下骨区、坏死区、硬化区、健康区，通过病理学检测、纳米压痕测试、实时荧光定量PCR、Western Blot、免疫组化染色、Trap染色、ALP染色等方法对不同区域的骨微观结构、微观力学性能及成骨、破骨细胞活性进行观察和比较.结果：Micro-CT结果显示，股骨头坏死标本软骨下骨区及坏死区的骨小梁连续性破坏;硬化区的骨小梁数目增多，间隙变窄;正常区域骨小梁结构完整，厚度分布均匀.骨计量学结果显示，软骨下骨区及坏死区骨小梁的BMD、BV/TV、Tb.N、***均低于健康区，而***高于健康区，差异具有统计学意义(P＜0.05).硬化区骨小梁的BMD、BV/TV、Tb.N、***均高于健康区，而***低于健康区，差异具有统计学意义(P＜0.05).免疫组化染色结果显示，骨形成相关因子Runx2、BMP2、BMP7、OPG在硬化区及健康区表达高于其他区域;骨吸收相关因子RANK和RANKL在软骨下骨区及坏死区表达高于其他区域.RT-PCR及Werstern Blot的结果显示，骨形成相关基因在硬化区及健康区表达高于其他区域;骨吸收相关基因在软骨下骨区及坏死区表达高于其他区域.结论：股骨头坏死塌陷过程中，骨微观结构发生明显改变，而坏死区骨小梁微观力学强度较健康区无显著降低.股骨头坏死标本中软骨下骨区及坏死区破骨细胞活性增强，硬化区成骨细胞活性增强.提示破骨细胞的活性高于成骨细胞的活性是发生骨坏死塌陷的主要原因，如能在骨坏死的进程中抑制破骨细胞的活性有可能防止股骨头塌陷.

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电刺激联合Nurr-1基因促进脂肪干细胞的神经分化

电刺激联合Nurr-1基因促进脂肪干细胞的神经分化

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：杨亚锋革军权鑫黄景辉罗卓荆第四军医大学西京医院骨科陕西西安710032

目的：将孤儿核受体相关基因1 (Nurr-1)和电刺激信号联合作用于脂肪干细胞,观察这种方法对ADSCs向神经元方向分化的潜在作用.方法：将实验分为四组：对照组、电刺激组、Nurr-1基因转染组、电刺激联合Nurr-1基因转染组.应用神经特异性标...

目的：将孤儿核受体相关基因1 (Nurr-1)和电刺激信号联合作用于脂肪干细胞,观察这种方法对ADSCs向神经元方向分化的潜在作用.方法：将实验分为四组：对照组、电刺激组、Nurr-1基因转染组、电刺激联合Nurr-1基因转染组.应用神经特异性标志物MAP-2,β-tubulin的免疫荧光染色评估其向神经方向分化的能力,并测量各组细胞的突起长度(Image-Pro Plus 6.0软件).对MAP-2,β-tubulin进行蛋白定量检测,对MAP-2、β-tubulin、OCT-4、GFAP和NF-200进行基因水平检测,扫描电镜观察实验各组细胞形态.结果：免疫荧光结果显示,对照组中MAP-2和β-tubulin几乎没有阳性表达,电刺激组,Nurr-1基因转染组和电刺激联合基因转染组均有有阳性表达,且电刺激联合Nurr-1基因转染组的MAP-2和β-tubulin的阳性率在这三组中表现最高.分别为MAP-2阳性率：54.23±3.31％,β-tubulin阳性率：65.87±5.42％.分别对各组染色细胞进行突起长度测量发现,对照组的长度为11.8±5.3 ？m,电刺激组长度为74.1±7.8 ？m,基因转染组突起长度为61.2±7.1 ？m,电刺激联合基因转染组的突起长度为174.2±8.7 ？m.蛋白检测显示,相比对照组,其他各组的MAP-2与β-tubulin蛋白表达均有显著提升;且电刺激联合Nurr-1基因组的蛋白表达量与电刺激组和基因组相比也有明显升高.基因检测显示,MAP-2,β-tubulin和NF-200的表达在电刺激组,Nurr-1基因组,电刺激联合Nurr-1基因组均升高,其中电刺激联合Nurr-1基因组升高最为显著.OCT-4与GFAP的表达在这三组中均下降,其中电刺激联合Nurr-1基因组的表达下降最明显.对实验各组进行扫描电镜观察,发现对照组细胞贴壁,胞质扩散、平铺,呈多边形.电刺激组细胞出现细胞拉长,呈两极或多极状.基因转染组细胞胞质回缩,呈球形,折光性增强.电刺激联合Nurr-1组的细胞胞质明显回缩,胞浆变长呈类轴突状,折光性较强.结论：运用电刺激联合Nurr-1基因的方法作用于脂肪干细胞能进促进其向神经方向分化,且这两种方法在神经分化方面起着协同作用,这为神经损伤后的治疗提供了新的方法.

关键词：

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脂肪源无细胞基质水凝胶原位诱导脂肪新生能力的研究

脂肪源无细胞基质水凝胶原位诱导脂肪新生能力的研究

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：谭秋雯张迪熊炳钧吕青四川大学华西医院乳腺外科四川省成都市武侯区国学巷37号四川大学华西医院 610041

背景：细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)是由组织细胞分泌的蛋白质及多糖等成分组成,不同组织来源的ECM在成分及结构上有一定差异,这些细微差异可能直接影响ECM支架对细胞行为的支持引导作用.本实验制备脂肪源无细胞基质水凝胶(Hyd... 详细信息

背景：细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)是由组织细胞分泌的蛋白质及多糖等成分组成,不同组织来源的ECM在成分及结构上有一定差异,这些细微差异可能直接影响ECM支架对细胞行为的支持引导作用.本实验制备脂肪源无细胞基质水凝胶(Hydrogel from Acellular Porcine Adipose tissue,HAPA),并以与其主要成分及理化特性相似的Ⅰ型胶原水凝胶为对照,探讨HAPA是否具有脂肪组织再生诱导特性.方法：采用匀浆-球磨联合化学脱细胞法制备猪脂肪组织无细胞基质材料(Decellular Porcine Adipose Tissue,DPAT),以DNA定量、油红O染色等方法初步评价其脱细胞脱脂效果.以DPAT为基础通过盐酸胃蛋白酶溶解法制备HAPA.体外成脂分化实验分别使用DMEM/F12完全培养基(阴性对照组)、含HAPA的条件培养基(实验组)及成脂诱导培养基(阳性对照组)培养第三代脂肪来源干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs) 14天后行油红O染色,观察细胞内成脂分化情况.动物实验以Ⅰ型胶原水凝胶为对照,根据是否添加未预成脂诱导的ADSCs为标准(2.5×105个/只)分为复合细胞A组(HAPA+ADSCs)、复合细胞B组(胶原水凝胶+ADSCs)、单纯材料A组(HAPA)、单纯材料B组(胶原水凝胶).将四组水凝胶-细胞复合物或单纯水凝胶1ml分别经注射器注入裸鼠皮下,于第1周、第2周、第4周取材行冰冻切片染色,评价植入物内脂肪形成情况.结果：HE染色及DAPI染色显示DPAT内无残余细胞核,残余DNA含量为4.01ng/mg,油红O染色未见红染的油脂成分.含HAPA的条件培养基孵育培养ADSCs14天后可见细胞内含大量红染脂滴,阳性对照组也可见阳性脂滴存在,而阴性对照组未加任何成脂分化迹象.动物实验将HAPA与ADSCs复合物皮下注射2周即可见移植复合物内有红染的脂肪细胞,单纯的HAPA植入裸鼠皮下亦可见移植物内出现红染的脂肪新生.而Ⅰ型胶原水凝胶无论是否复合ADSCs,体内植入4周未见均任何成脂现象.结论：脂肪源水凝胶HAPA能定向诱导ADSCs自发成脂分化.更重要的是,在无外源性种子细胞添加的前提下,HAPA具有原位诱导脂肪新生的特性.

关键词：组织工程无细胞基质成脂分化

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兔异体骨髓间充质干细胞抑制增生性瘢痕形成的实验研究

兔异体骨髓间充质干细胞抑制增生性瘢痕形成的实验研究

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：王达利魏在荣李修权邓呈亮章涛遵义医学院附属医院

目的：初步探讨异体骨髓间充质干细胞对活体动物增生性瘢痕形成的影响,为进一步将异体间充质千细胞用于增生性瘢痕的防治提供基础研究资料.方法：以成年6只健康雄性新西兰白兔为实验动物,于新西兰白兔双耳腹侧分别建立大小为6mm圆形增... 详细信息

目的：初步探讨异体骨髓间充质干细胞对活体动物增生性瘢痕形成的影响,为进一步将异体间充质千细胞用于增生性瘢痕的防治提供基础研究资料.方法：以成年6只健康雄性新西兰白兔为实验动物,于新西兰白兔双耳腹侧分别建立大小为6mm圆形增生性瘢痕模型,每只兔耳分别建立6个增生性瘢痕模型.随机选择6只兔左耳为实验组(共36个创面),右耳为对照组(共36个创面)：实验组分别于上皮化完成后第2日(模型建立20天左右)和上皮化完成后第10日(模型建立30天左右),取第5代经BrdU标记后生长良好的异体BMSCs0.2ml(5×105/ml)于增生性瘢痕软骨膜上层进行环形注射.对照组在上述相应时间点注射相同剂量的PBS缓冲液;实验组与对照组分别于模型建立37天(第2次细胞移植后6天左右)取材.记录各实验组增生性瘢痕的大体外观,HE及VG染色观察其组织学变化,实验组行免疫荧光染色对移植的干细胞进行示踪.实时荧光-聚合酶链式反应(Real Time-PCR, RT-PCR)检测两组增生性瘢痕组织中核心蛋白多糖(decorn,DCN)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的mRNA表达变化情况,酶联免疫吸附试验(Elisa)检测增生性瘢痕组织中DCN、TGF-β1、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的蛋白表达情况.结果：术后37天对照组瘢痕增生明显,色红质硬,突出于皮面;实验组瘢痕组织体积缩小,变平变软,色泽轻度变浅.与对照组比较,HE、VG染色显示实验组成纤维细胞及炎性细胞数量减少,胶原排列较规则,胶原之间的间隙增大.对照组胶原纤维排列紧密、紊乱或成旋涡状.免疫荧光染色观察到移植细胞在组织中能够存活.RT-PCR结果显示实验组TGF-β1mRNA表达量较对照组显著降低,DCNmRNA表达量显著升高,结果均有统计学意义(P＜0.01).Elisa结果显示实验组TGF-β1,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达量较对照组明显下调,DCN蛋白表达量较对照组明显上调,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论：兔耳创面在上皮化形成后移植异体BMSCs移植,能够通过下调TGF-β1及上调DCN的表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成,促进胶原排列有序等生物学效应,发挥抑制瘢痕增生提高创面愈合质量的作用.

关键词：增生性瘢痕骨髓间充质干细胞细胞移植实验研究

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自体SVF局部移植对兔耳增生性瘢痕形成的抑制作用研究

自体SVF局部移植对兔耳增生性瘢痕形成的抑制作用研究

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：王达利魏在荣李修权邓呈亮余丽梅

目的探讨在兔耳瘢痕形成早期瘢痕内局部移植自体脂肪基质血管成分(SVF)对增生性瘢痕形成的干预作用及其可能的机制,为临床将自体脂肪基质血管成分用于人增生性瘢痕形成的防治提供基础研究资料.方法新西兰白兔24只,按图表法随机分为实... 详细信息

目的探讨在兔耳瘢痕形成早期瘢痕内局部移植自体脂肪基质血管成分(SVF)对增生性瘢痕形成的干预作用及其可能的机制,为临床将自体脂肪基质血管成分用于人增生性瘢痕形成的防治提供基础研究资料.方法新西兰白兔24只,按图表法随机分为实验组、对照组及模型组3组,每组8只,于各组兔左耳腹侧以设计直径1cm的圆形术区,每耳4术区,制作兔耳增生性瘢痕模型,每组32个创面.于创面上皮化后(术后25天,即瘢痕增生早期),实验组取含有CM-Dil标记的自体SVF(含有核细胞数约1×106/mL)0.2ml培养基环形注射于瘢痕模型的软骨上层,对照组取培养基0.2ml同法注射.实验组、对照组每5天各重复上述方法一次,共重复3次,模型组不予任何处理.于重复3次后的第5天(术后40天),分别切取实验组和对照组及模型组瘢痕组织标本.记录增生性瘢痕的大体外观,HE及VG染色观察其组织结构变化,利用荧光显微镜观察CM-Dil标记的SVF内有核细胞成分在组织的分布及存活情况,Western Blot法检测组织中TGF-β1、Smad3、Samd7蛋白表达情况,RT-PCR检测各组瘢痕组织中TGF-β1和Smad3、Samd7mRNA水平变化.结果模型建立后创面逐渐结痂覆盖,约14天左右痂皮开始逐渐脱落,创面见上皮化,术后20±2天创面完全上皮化,此后瘢痕逐渐开始增生.模型建立40天,对照组及模型组瘢痕组织仍维持明显的增生状态,实验组瘢痕的厚度明显变平,质地稍变软、色泽变淡.与对照组及模型组比较,HE、VG染色显示实验组角质形成细胞的层数明显增多,真皮呈现有乳头层样结构,胶原排列较对照组规则,胶原之间的间隙增大,成纤维细胞及炎性细胞数量减少.对照组及模型组瘢痕组织内可见大量聚集的成纤维细胞及胶原,胶原纤维排列紧密、紊乱或成旋涡状.实验组TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白的表达明显下调(P＜0.05),Smad7 mRNA及蛋白的表达明显上调(P＜0.05),对照组与模型组TGF-β1、Smad3、Smad7 mRNA及蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 1、兔自体SVF在兔耳创面上皮化完成后瘢痕内局部移植后能存活并能抑制兔耳瘢痕的增生,提高创面愈合质量.2、兔自体SVF抑制瘢痕增生的作用与其调控TGF-β1/Smad信号传导通路有关.

关键词：脂肪基质血管成分兔增生性瘢痕 TGF-β1/Smad

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用动物固定装置观察负压封闭敷料对小型猪全层皮肤缺损创面修复的影响

用动物固定装置观察负压封闭敷料对小型猪全层皮肤缺损创面修复的...

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：周文芳黎君友孙同柱吴志谷付小兵解放军总医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的：负压封闭敷料已在临床创面修复广泛应用,并获得较好的愈合效果,但对其作用机理我们还不甚了解,本文通过自制动物固定装置,观察武汉维斯第牌负压封闭引流材料(VDS)对小型猪全层皮肤缺损创面修复作用的影响.方法：动物固定装置：由...

目的：负压封闭敷料已在临床创面修复广泛应用,并获得较好的愈合效果,但对其作用机理我们还不甚了解,本文通过自制动物固定装置,观察武汉维斯第牌负压封闭引流材料(VDS)对小型猪全层皮肤缺损创面修复作用的影响.方法：动物固定装置：由不锈钢材料构成,包括可自由移动架、两用悬吊棒、悬吊制式服装、接大小便托盘和可放置负压吸引机和吸引罐的悬挂篮组成.动物模型制备：将4月龄小型猪全麻、备皮、消毒后于脊柱两侧各制一个全层皮肤缺损创面(4.5cm×4.5cm).实验分组：A组对照组,凡士林油纱布和4层无菌纱布覆盖包扎;B组125mmHg持续负压24h,至伤后24d.伤后分别将小型猪悬挂于动物固定装置上,单笼喂养,自由饮食.通过大体观察、皮下血流监测和细菌学判断负压封闭敷料对小型猪全层皮肤缺损创面的修复作用.结果：伤后早期大体观察显示两组创面新鲜,均无脓性分泌物.A组创面渗出物较B组多,B组创面无明显分泌物、无水肿.伤后7d,两组创面上皮生长较明显,其上皮化率均能达40％～60％;两组创面有不同程度的肉芽组织生长,A组肉芽填充率＜30％较B组差,B组能达50％以上.伤后14d,两组创面基本长平,A组肉芽填充率低于90％,B组可达到90％以上.伤后21d,A组上皮化率较B组差,B组能达到80％以上.伤后24d两组创面基本愈合.皮下血流监测,伤后4d B组血流灌注量较A高.伤后7d～21d两组血流灌注量均有所下降,但B组仍高于A组.伤后28d B组血流灌注量恢复到伤前水平,A组较高.细菌监测,伤后4d和7d大多创面细菌明显增多,A组细菌量较B组高.10d～21 d两组创面细菌均逐步下降,A组略高于B组.结论：动物固定装置能满足负压封闭引流材料实验研究的需要.在28d的实验中能保证小型猪固定良好,方便更换敷料.在固定状态下小型猪能自由饮水,进食和排便;同时能保证激光多普勒成像仪和其他相关指标的正常检测.负压封闭引流下创面血流量很快增加,能够有效除去创面的渗透液,减轻创面与创周的组织水肿,促进大量新生肉芽组织形成,为上皮爬行提供了基础,负压可促进创面引流的畅通,将存留于创面局部的坏死组织、细菌、分泌物等吸出,减少了创面局部细菌的繁殖.通过连续治疗后使用负压引流的方法创面愈合效果明显较对照组好.

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基质金属蛋白酶处理猪脱细胞真皮基质移植后组织学观察及其血管化评价

基质金属蛋白酶处理猪脱细胞真皮基质移植后组织学观察及其血管化...

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：王芳石文邵阳马印东贾军辛乃军吴秋合宋国栋 250013 济南山东大学附属济南市中心医院烧伤科

目的：观察评价基质金属蛋白酶-7 (matrix metalloproteinase 7,MMP-7)处理的猪脱细胞真皮基质(porcine acellular dermal matrix,P-ADM) (P-ADM-pm)大鼠体内移植后组织学变化及其血管化过程.方法：取家猪网织层真皮62块,随机分为P-ADM...

目的：观察评价基质金属蛋白酶-7 (matrix metalloproteinase 7,MMP-7)处理的猪脱细胞真皮基质(porcine acellular dermal matrix,P-ADM) (P-ADM-pm)大鼠体内移植后组织学变化及其血管化过程.方法：取家猪网织层真皮62块,随机分为P-ADM组(A组)和P-ADM-pm组(B组),每组31块;随机取P-ADM、P-ADM-pm各1块行抽样检测(微生物检测、HE染色及免疫组织化学染色).取成年雄性Wistar大鼠30只,每只大鼠背部皮下左侧植入P-ADM(A组)、右侧植入P-ADM-pm(B组)各1块.分别于移植术后3、7、14、21、28 d随机取6只大鼠,行大体、HE染色、Masson染色、免疫组织化学染色和扫描电镜观察,分析比较移植物宿主细胞、血管浸润及组织学变化.结果：抽样检测示P-ADM毛囊内毛发、上皮根鞘、细胞核、细胞碎片样结构及波形蛋白(Vimentin)、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白仍有少量残留,而在P-ADM-pm中被基本去除,胶原纤维束及胶原纤维之间间隙较P-ADM增大.移植术后7d,肉眼观察两组移植物表面均形成一层布有少量微血管的纤维薄膜,随术后时间延长微血管增加、变粗并浸润移植物,B组较A组明显,术后21 d两组纤维薄膜微血管减少、增粗,B组移植物整体呈粉红色表现.移植术后各时间点,A组移植物呈现较重炎性反应,14 d后宿主炎性细胞浸润之处胶原纤维形态结构出现裂解等破坏性改变;B组炎性反应轻,宿主细胞尤其是成纤维细胞、微血管长入的数量均较A组明显(P＜0.05),移植物胶原纤维形态结构基本保持正常.B组浅层成纤维细胞、微血管长入分别出现于移植术后3、7d,并分别于14、21 d时贯穿移植物全层;A组成纤维细胞、微血管分别出现于术后3、14d,至21d时均未贯穿移植物全层.14d扫描电镜观察B组移植物内长入较多成纤维细胞并可见其分泌的胶原原纤维构象.结论：宿主对P-ADM-pm的反应类似于正常创伤愈合过程,P-ADM-pm作为植入性支架材料具有良好的模板引导作用.

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组织工程化房室结的体外构建

组织工程化房室结的体外构建

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：袁鑫立李玉泉张传森第二军医大学解剖教研室上海200433

目的：研究胚胎心脏祖细胞向心传导细胞的诱导分化,并以胚胎心脏祖细胞源性起搏细胞和传导细胞为种子细胞,体外构建组织工程化房室结的可行性.方法：用内皮素-1诱导胚胎心脏祖细胞的方法获得胚胎心脏祖细胞源性心起搏细胞,免疫荧光细胞... 详细信息

目的：研究胚胎心脏祖细胞向心传导细胞的诱导分化,并以胚胎心脏祖细胞源性起搏细胞和传导细胞为种子细胞,体外构建组织工程化房室结的可行性.方法：用内皮素-1诱导胚胎心脏祖细胞的方法获得胚胎心脏祖细胞源性心起搏细胞,免疫荧光细胞化学技术鉴定诱导后的细胞;用神经调节蛋白-1诱导胚胎心脏祖细胞,获得胚胎心脏祖细胞源性心传导细胞,在光镜下观察细胞形态和搏动情况的变化,细胞免疫荧光、Real-Time PCR、WB等的方法检测鉴定诱导后细胞,并用电子显微镜观察细胞超微结构的变化;用胚胎心脏祖细胞源性起搏样细胞和传导系样细胞以1∶1的浓度分别种植在胶原海绵支架和水凝胶支架上,倒置相差显微镜观察细胞支架复合体的生长状态,HE染色、透射电镜和扫面电镜检测细胞与支架的相容性和细胞之间的连接.结果：经过内皮素-1诱导后的起搏细胞的表面分子标志物HCN4、CX45、HCN2表达呈阳性,而胚胎心脏祖细胞表面标志NKX2.5、OCT-4的表达变化不大;经神经调节蛋白-1诱导后,细胞形态发生明显的变化,细长条样的细胞和簇状集落明显增多,搏动更趋于一致性,在相同条件下跳动频率由300-400次/分钟降到100-150次/分钟,诱导前后细胞活力无明显变化,在第五天时细胞达到对数生长期.细胞超微结构显示,细胞间连接有显著增高.免疫荧光细胞染色显示诱导后细胞表达传导系细胞表面标志CX40、CMYBP-C和SMHC等,而起搏细胞表面标志HCN4,CX45,CX43的表达呈弱阳性.Real-Time PCR和Western-blot的结果与免疫荧光细胞化学的结果一致.传导样细胞具有传导系细胞的基本生理功能;可观察细胞支架复合体有规律跳动,细胞之间和细胞与支架之间有较好的细胞相容性,有明显的细胞间连接可见.结论：用内皮素-1和神经调节蛋白-1的方法可分别成功将胚胎心脏祖细胞诱导成起搏细胞和心传导样细胞;并且在体外初步成功构建组织工程化房室结.

关键词：内皮素-1 起搏细胞心传导细胞神经调节蛋白-1 组织工程化房室结

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人羊膜联合rhEGF治疗皮肤Ⅲ度烧伤实验研究

人羊膜联合rhEGF治疗皮肤Ⅲ度烧伤实验研究

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：冯国纹惠学玲王钰莹王达利范振海赵玉洁肖瑜余丽梅遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003 遵义医学院附属医院烧伤整形外科贵州遵义563003

目的：探讨人羊膜(HAM)联合重组人表皮生长因子凝胶(rhEGF)治疗皮肤Ⅲ度烧伤的疗效与作用机制.方法：铜棒烫伤制备兔皮肤Ⅲ度烧伤,切痂后创面贴敷HAM、HAM+rhEG、rhEGF,观测烧伤创面愈合率、痊愈时间,创面组织病理学检查,免疫组化染色... 详细信息

目的：探讨人羊膜(HAM)联合重组人表皮生长因子凝胶(rhEGF)治疗皮肤Ⅲ度烧伤的疗效与作用机制.方法：铜棒烫伤制备兔皮肤Ⅲ度烧伤,切痂后创面贴敷HAM、HAM+rhEG、rhEGF,观测烧伤创面愈合率、痊愈时间,创面组织病理学检查,免疫组化染色与图像分析微小血管密度,双色免疫荧光染色观察人源细胞定植,Masson染色与图像分析检测皮肤组织纤维化程度,ELISA法检测创面组织细胞因子含量.结果：①切痂术后第3d、8d、18d,HAM组烧伤创面愈合率分别为(35.78±6.75)％、(71.21±6.63)％和(96.65±1.42)％,与HAM+rhEG组愈合率相当,两组均高于rhEGF组,3组不同处理的创面愈合率都高于对照组.HAM、HAM+rhEG组创面分别于18.40±1.26d和18.00±1.83d达痊愈,rhEGF组20.20±1.69d痊愈,3组痊愈时间均显著低于对照组22.13±1.25d.②HAM、HAM+rhEG组创面炎症反应明显较模型组、rhEGF组轻,并较早出现细胞增殖与创面修复,再生皮肤组织结构完整、附属器官丰富清晰,两组真皮层纤维化比率分别为(8.80±1.65)％和(8.50±1.70)％,低于正常组、对照组和rhEGF组;而皮下组织层纤维化比例为(16.48±1.86)％和(16.02±2.56)％,高于正常组,但明显低于对照组及rhEGF组.③第8d,HAM、HAM+rhEG组创面组织中,未检测到表达Cy3标记的人细胞核特异性抗原阳性的红色荧光细胞.且两组新生组织微细血管数显著高于对照组和rhEGF组,rhEGF组与对照组微细血管密度无明显差异.④第3d,HAM、HAM+rhEG、rhEGF组创面组织SDF-1表达量分别为192.63±17.39 ng/L, 157.76±8.69 ng/L and 199.21±27.77 ng/L,显著高于对照组和正常组,前两组又显著高于rhEGF组;并于第8、18d趋于正常皮肤组织水平.⑤第8d,HAM、HAM+rhEG、rhEGF组新生组织TGF-β含量分别为3441.50±125.27、3071.25±221.04和3504.00±134.41ng/L,显著高于对照组2912.50±181.68,HAM、HAM+rhEG组TGF-β含量又高于rhEGF组.⑥第8d,HAM、HAM+rhEG组创面组织EGF含量明显高于rhEGF组和对照组;第18d,HAM、HAM+rhEG组和rhEGF组新生组织EGF含量则显著低于对照组.⑦第8、18d,HAM、HAM+rhEG组和rhEGF组新生组织bFGF含量高于正常皮肤,但3组间比较无明显差异(P＞0.05).结论：HAM及其联合rhEGF治疗皮肤Ⅲ度烧伤,明显提高烧伤创面愈合率,缩短痊愈时间,改善创面组织病理学变化,作用机制涉及减轻创面炎症反应,促进新生血管形成,提高创面和新生组织SDF-1、TGF-β和EGF水平,羊膜治疗Ⅲ度烧伤的疗效及其提高创面修复质量优于传统的凡纱覆盖包扎与rhEGF凝胶治疗.

关键词：羊膜 rhEGF凝胶 Ⅲ度烧伤皮肤再生生长因子

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颜面部吸脂术与脂肪移植术在改善面部轮廓中的综合应用

颜面部吸脂术与脂肪移植术在改善面部轮廓中的综合应用

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：文辉才马丽眭云鹏简雪平南昌大学第一附属医院整形美容科 330006

目的：探讨综合应用颜面部吸脂术与脂肪移植术改善面部轮廓的有效手术方法.方法：2008年11月至2015年4月,对49例求美者通过综合应用颜面部吸脂术与脂肪移植术改善了面部轮廓,所有求美者均进行了面部皮下部位肿胀技术吸脂术+颏部脂肪移植...

目的：探讨综合应用颜面部吸脂术与脂肪移植术改善面部轮廓的有效手术方法.方法：2008年11月至2015年4月,对49例求美者通过综合应用颜面部吸脂术与脂肪移植术改善了面部轮廓,所有求美者均进行了面部皮下部位肿胀技术吸脂术+颏部脂肪移植术,其中有7例同时进行了颊脂垫脂肪切除术,9例A型肉毒毒素咬肌内注射,25例颞部脂肪移植术,15例额部脂肪转移术.面部吸脂术：于耳垂下皱褶处、下颌于颏下前部皮肤皱襞处分别作0.2cm的小切口达皮下脂肪层,注入肿胀液后行体外吸脂机辅助低压抽脂,根据求美者的脂肪厚度,抽吸量控制在20～40ml.颊脂垫切除术：在最后一颗磨牙粗隆区上颊沟处做切口,避开面神经分支、腮腺导管开口及颊脂肪垫的动、静脉支,钝性分离并充分暴露颊脂肪垫,切除颊突和体部,切除均匀一致,具体量有个体差异,控制在1.9～2.4g;脂肪颗粒采集、纯化和处理：由面部抽得的脂肪留取备用,量若不够,可由腹部以同样方法进行抽吸,将其放置于50ml空针中,针孔向下,注入生理盐水后静置,可见分层现象：上层为较大脂肪颗粒,其下为较细小颗粒脂肪,再下为液化脂肪,最下为冲洗液,从空针真头排出下部液体及液化的脂肪;面部脂肪移植术：首先以局麻液浸润麻醉需要注射的颏下部,或者颞部、额部等需要脂肪移植的部位,采用18G专用脂肪抽吸钝性针头注射针配1ml注射器由远及近呈放射状注入颗粒脂肪,使其均匀分布于每个隧道中,注意其中央部位与边缘部位之间的平滑过渡,而且在注射的同时注意增强立体感的塑型,并且要分皮下、SMAS筋膜浅及深层、骨膜上多个层次分别注射,中央部位应适当填充多一些,皮下少些,1ml尽量保证分20个点注射.结果：所有求美者面部轮廓均得到显著改善,术后随访6～24个月,效果稳定,术后并发症如面部轮廓不对称、皮肤凹凸不平、面部臃肿等经过后期处理,均在可接受范围之内.结论：通过吸脂术与脂肪移植术的综合应用改善面部轮廓,具有操作简单、创伤轻、康复快、安全性高等特点.

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