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文献类型

362 篇 会议

馆藏范围

362 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

312 篇 农学
- 294 篇 兽医学
- 19 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
18 篇 医学
- 9 篇 临床医学
- 8 篇 基础医学(可授医学...
- 4 篇 公共卫生与预防医...
- 3 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
- 1 篇 中西医结合
- 1 篇 中药学(可授医学、...
9 篇 历史学
- 9 篇 中国史
4 篇 工学
- 1 篇 计算机科学与技术...
- 1 篇 化学工程与技术
- 1 篇 食品科学与工程（可...
- 1 篇 软件工程
- 1 篇 生物工程
2 篇 理学
- 2 篇 生物学
1 篇 教育学
- 1 篇 教育学
1 篇 管理学
- 1 篇 公共管理

主题

26 篇 病理学诊断
15 篇 蛋白表达
14 篇 动物医学
13 篇 病理组织学
11 篇 犬疾病
11 篇 生物学特性
9 篇 基因克隆
8 篇 原核表达
8 篇 临床症状
8 篇 病理诊断
8 篇 临床诊断
7 篇 致病机制
7 篇 基因表达
7 篇 细胞凋亡
6 篇 组织病理学观察
6 篇 组织病理学
6 篇 布鲁氏菌
6 篇 病理形态学
6 篇 免疫抑制
6 篇 病例分析

机构

71 篇 中国农业大学
29 篇 河南科技大学
23 篇 四川农业大学
19 篇 山东农业大学
17 篇 内蒙古农业大学
17 篇 东北农业大学
15 篇 华中农业大学
14 篇 甘肃农业大学
13 篇 西北农林科技大学
10 篇 贵州大学
9 篇 南京农业大学
9 篇 吉林大学
8 篇 石河子大学
8 篇 农业部动物临床诊...
8 篇 中国农业科学院哈...
7 篇 新疆石河子大学
7 篇 新乡学院
7 篇 贵州省动物疫病研...
6 篇 中国畜牧兽医学会...
5 篇 河南科技学院

作者

32 篇 赵德明
27 篇 龙塔
24 篇 周向梅
22 篇 佘锐萍
21 篇 程相朝
15 篇 陈创夫
15 篇 程国富
15 篇 毛晶晶
14 篇 谷长勤
14 篇 彭西
13 篇 赵战勤
13 篇 胡薛英
13 篇 马龙欢
13 篇 杨利峰
12 篇 杨涛
12 篇 崔恒敏
12 篇 张万坡
12 篇 方静
12 篇 刘淑英
12 篇 孙恩成

语言

343 篇 中文
19 篇 英文

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排序：

BVDV诱导MDBK细胞产生凋亡的分子机制研究

BVDV诱导MDBK细胞产生凋亡的分子机制研究

引用

2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：王讲德肖红冉张辉盛金良王鹏雁柳建新陈创夫新疆石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

本研究通过构建MDBKCs和BMDBKCs两个样品的cDNA文库，利用Solexa高通量测序技术和生物信息学鉴定miRNA的表达谱，利用qRT-PCR技术对表达差异显著的miRNA进行验证;通过荧光显微镜观察。pBVDV感染的MDBK细胞形态变化，利用流式细胞仪检测... 详细信息

本研究通过构建MDBKCs和BMDBKCs两个样品的cDNA文库，利用Solexa高通量测序技术和生物信息学鉴定miRNA的表达谱，利用qRT-PCR技术对表达差异显著的miRNA进行验证;通过荧光显微镜观察。pBVDV感染的MDBK细胞形态变化，利用流式细胞仪检测细胞凋亡率;通过qRT-PC R检测cpBVDV感染的MDBK中miR-33a的表达水平;构建重组载体pMD18-MAP3K3 3’UTR和双荧光素酶重组表达载体pmirGLO-MAP3K3 3'UTR，限制性核酸内切酶SACⅠ/XHOⅠ进行双酶切鉴定并进行测序;利用Targetscan软件预测获得miR-33a的潜在靶基因并通过双荧光素酶基因检测法进行验证;通过qRT-PCR检测miR-33a NC和miR-33a mimic、转染的MDBK中miR-33a的表达水平;分别采用qRT-PCR技术和Western blot检测靶基因MAP3K3和抗凋亡基因BCL-2的转录水平以及蛋白水平;通过流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果鉴定出221个已注释miRNA、和239个新miRNA、以及miRNAs的表达谱，qRT-PCR验证结果与Solexa高通量测序结果基本一致;cpBVDV感染的MDBK细胞形态发生改变，细胞凋亡率随感染时间延长而升高;cpB-VDV感染的MDBK细胞中miR-33a的表达水平升高;获得miR-33a的靶基因MAP3K3，重组载体pMD18-MAP3K3 3'UTR和双荧光素酶重组表达载体pmirGLO-MAP3K3 3' UTR构建成功，miR-33a可直接靶向MAP3K3;转染miR-33a mimics的MDBK细胞中miR-33a的表达水平随时间延长而升高;转染miR-33amimics的MDBK细胞中靶基因MAP3K3和抗凋亡基因BCL-2的转录水平和蛋白水平均显著降低;转染miR-33a mimics的细胞凋亡率明显升高。以上结果表明miRNA-33a通过靶向MAP3K3并作用于下游的抗凋亡基因BCL-2诱导MDBK细胞产生凋亡。本研究为开发针对病毒感染更高效的生物治疗方法提供了新的思路和发展前景。

关键词：牛病毒性腹泻病毒细胞凋亡分子机制生物治疗

来源：评论

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重组chIL2表达纯化

重组chIL2表达纯化

引用

2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：邓晨张玉静艾永兴郑海南吴山力吕岩张鑫吴涵王梦云薛春玲金雯吉林大学长春136000

为了进一步探索chIL2的生物学活性，设计一对包含Nde I和EcoRI限制性内切酶识别位点的引物，以本实验室保存的pMD-18T-chIL2重组质粒为模板进行常规聚合酶链式反应(PCR);分别对pET28a和PCR回收产物进行双酶切，酶切产物在T4 Ligase催化... 详细信息

为了进一步探索chIL2的生物学活性，设计一对包含Nde I和EcoRI限制性内切酶识别位点的引物，以本实验室保存的pMD-18T-chIL2重组质粒为模板进行常规聚合酶链式反应(PCR);分别对pET28a和PCR回收产物进行双酶切，酶切产物在T4 Ligase催化下连接过夜;连接产物转化Top10大肠杆菌进行重组质粒扩增，提取pET28a-chIL2重组质粒转化BL21(DE3)大肠杆菌，IPTG低温(16℃)诱导目的蛋白表达，超声破碎细胞，镍柱亲和层析纯化目的蛋白，SDS-PAGE电泳检测目的蛋白;琼脂糖凝胶电泳结果显示PCR产物大小约为450bp，与预期455bp一致;pET28a-chIL2重组质粒经双酶切鉴定、PCR扩增鉴定和碱基序列测定，结果均显示其正确性，chIL2基因碱基序列与GenBank中发表序列一致;转化获阳性重组子，挑取单菌并于37℃震荡培养至菌液OD600为0.6时，添加0.2mMIPTG并于16℃诱导表达4h。5OOOg离心3 min收集菌体细胞，超声破碎，12 000g离心10 min，得到上清和沉淀。上样缓冲液平衡镍柱，至蛋白纯化仪透过率T=100、吸光值O.5A=0;将Ni-NTA Agarose与离心上清混合并于翻转仪4℃翻转结合1h。结合完成后重装柱，50倍柱体积缓冲液快速淋洗，至吸光值为0。再分别用含有不同浓度咪唑(10 mM,30 mM,80 mM,250 mM)缓冲液进行洗脱，1mL/管收集各流出组分。SDS-PAGE电泳检测结果表明:重组目的蛋白经诱导在大肠杆菌中获得了高效表达，分子量大小约为18 kDa，目的蛋白含量占菌体总蛋白的28.5％。且以两种形式存在，即可溶形式存在于超声上清和包涵体形式存在于超声沉淀;30 mM咪哩浓度洗脱液能很好的洗脱与Ni-NTA Agaros。非特异结合的杂蛋白;5个柱体积的80 mM咪哩浓度洗脱组分目的蛋白条带，带宽而深;250 mM咪哩浓度洗脱结果显示无目的蛋白条带，说明80 mM咪哩浓度洗脱液具有很好的目的蛋白洗脱能力。PBS(含10%甘油)透析、PEG20 000浓缩，得重组蛋白，纯度达90.1%，浓度为0.54 mg/ml。

关键词：重组鸡白细胞介素2 生物学活性蛋白表达质粒纯化

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绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离培养与鉴定

绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离培养与鉴定

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：王专家张宇飞刘淑英内蒙古农业大学呼和浩特010018

本试验为得到较高纯度的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞,材料取自妊娠中期的蒙古绵羊胎盘(含子宫)组织,采用胰蛋白酶和胶原酶两步消化法分离培养滋养层细胞.将胎盘子叶组织机械剪碎(成糊状),用胰蛋白酶和胶原酶将剪碎的组织消化分散成单个细... 详细信息

本试验为得到较高纯度的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞,材料取自妊娠中期的蒙古绵羊胎盘(含子宫)组织,采用胰蛋白酶和胶原酶两步消化法分离培养滋养层细胞.将胎盘子叶组织机械剪碎(成糊状),用胰蛋白酶和胶原酶将剪碎的组织消化分散成单个细胞进行培养.绵羊绒毛膜滋养层细胞是单层贴壁细胞，待细胞长满培养瓶表面，用胰蛋白酶将细胞从培养瓶壁上分离下来，进行传代培养。倒置相差显微镜观察滋养层细胞的形态学特点，常规H·E染色和免疫组织化学染色，透射电镜技术鉴定细胞。结果显示，倒置相差显微镜下，可见滋养层细胞为双核及多核细胞且细胞形态为上皮样形态，呈片状铺展生长。经H·E染色后，在普通光学显微镜下能看到绵羊胎盘子叶组织的绒毛膜合胞体滋养层和细胞核大而圆的双核及多核滋养层细胞，体外培养的滋养层细胞爬片也可清晰看到双核及多核细胞，细胞呈平铺状且为多边形。绵羊胎盘子叶组织与培养的滋养层细胞爬片的细胞角蛋白免疫组织化学染色，滋养层双核及多核细胞为深棕色阳性信号，其余单核细胞基本没被染色，为阴性。透射电镜可见单个或多个双核滋养层细胞体积较大，表面微绒毛发达可见较多被膜小凹，胞质中线粒体大而多，游离核糖体丰富，高尔基复合体明显，细胞核膜清晰核仁明显，胞浆内可见较多膜包小泡及丰富的微丝和脂滴，也可见多个核的合体滋养层细胞，细胞内可见桥粒等细胞连接样结构和一些局部的细胞间隙。由此证实，该培养方法能分离培养得到具有生物学活性的绵羊多核绒毛膜滋养层细胞，可以进一步通过传代培养得到较高纯度的多核滋养层细胞。这将使研究人员能够利用该滋养层进行细胞层次的实验，从而有助于揭示病毒与宿主相互作用的分子机制，进而为本实验室的体外研究提供一定的基础。

关键词：绵羊种群多核绒毛膜滋养层细胞分离培养生物学特性

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牛外周血中性粒细胞干扰素诱导基因在牛结核病感染中的转录水平变化

牛外周血中性粒细胞干扰素诱导基因在牛结核病感染中的转录水平变...

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：王进周向梅徐镔蕊中国农业大学动物医学院北京100193

目的:着眼于牛结核患病牛全血中白细胞中关于干扰素诱导基因的表达差异研究,对中性粒细胞在牛结核病中的致病机制提供新的补充。方法:1、结核阴性牛和阳性牛的确定:采用PPD结核菌素皮试反应和全血γ干扰素酶联免疫试剂盒进行双检测;2、... 详细信息

目的:着眼于牛结核患病牛全血中白细胞中关于干扰素诱导基因的表达差异研究,对中性粒细胞在牛结核病中的致病机制提供新的补充。方法:1、结核阴性牛和阳性牛的确定:采用PPD结核菌素皮试反应和全血γ干扰素酶联免疫试剂盒进行双检测;2、牛外周血中性粒细胞的分离和提取:采用密度梯度分离液进行分离。3、RNA的提取:细胞总RNA的提取使用Promega公司的RNA提取试剂盒,使用Fermentas公司的反转录试剂盒合成cDNA,荧光定量PCR采用SYBER Green1的方法,检测基因包括IFN-γ相关(6个:CXCL10,IFI44,STAT1,TAP2,CD274,PD-1)和typeⅠIFN-α/β(5个:IFI6,IRF7,STAT1,STAT2,OAS1).4、数据统计:采用双Δt进行双尾T检验数据分析。结果:1.牛结核感染阴性牛和阳性牛的确定:上述两种进行双检测,双阳性者判定为牛结核感染牛。2.中性粒细胞体外感染牛结核分支杆菌后干扰素诱导基因的表达水平变化:牛外周血中性粒细胞进行体外牛结核杆菌的感染,分别在感染6h和18h后检测干扰素诱导基因的表达。结果发现:上调的基因都包含在γ干扰素相关的转录基因中,而typeⅠIFN-α/β中,只有STAT2的基因表达变化显著。3.牛结核阳性牛的中性粒细胞其干扰素诱导基因的表达水平激活:根据结果1,将待测样本分为三组:阴性牛,牛结核感染阳性牛,禽结核与牛结核共同感染牛。其检测结果显示:牛结核阳性牛中的待检基因与阴性牛相比,表达水平差异,其中8个基因上调,2个基因下调(TAP2和PD-1).共同感染牛与结核感染牛的表达相比,趋势类似,但是程度不强烈。结核感染牛中3个IFN-γ相关的CD274、STAT1、CXCL10以及Ⅰ型干扰素相关的IFI6、IRF7、STAT2和OAS1的表达显著上调。4.牛结核感染过程中中性粒细胞的PTX3和MPO的表达变化:牛结核感染牛中中性粒细胞上PTX3和MPO的表达也有很大的差异,表现在MPO的表达在结核感染牛中的表达显著升高,但是PTX3的表达显著下降。结论:与健康牛相比,牛结核阳性牛中其全血中中性粒细胞中的干扰素诱导基因包括IFN-γ和typeⅠFN-α/β的通路过量表达,验证了之前的假设,为牛结核病的诊断和治疗提供新的靶点。

关键词：牛结核病病理机制中性粒细胞干扰素诱导基因

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Identification of Animal Rabies in Inner Mongolia and Analysis of the Etiology Characteristics

Identification of Animal Rabies in Inner Mongolia and Analys...

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者： YIN JingFeng TANG Qing WANG FengLong WANG JinLing DING YuLin TAO XiaoYan LI Hao SONG Miao GUO ZhenYang SHEN XinXin LIANG GuoDong College of Veterinary Medicine Inner Mongolia Agricultural UniversityHuhhot010018Inner MongoliaChina Key Laboratory for Medical VirologyMinistry of HealthInstitute for Viral Disease Control and PreventionChinese Center for Disease Control and Prevention(IVDCChina CDC)Beijing 102206China State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and ControlInstitute for Viral Disease Control and PreventionChinese Center for Disease Control and Prevention(IVDCChina CDC)Beijing102206China

Objective We performed pathological observation and etiological identification on specimens collected from cow, cattle and dog which were suspected of rabies in Inner Mongolia, in 2011, and analyzed their etiology and characteristics. Methods Pathological observation was conducted on the brain specimens of three infected animals with Hematoxylin-Eosin staining, followed by confirmation using immunofluorescence and nested RT-PCR methods. Finally, phylogenetic analysis was conducted using the virus N gene sequence amplified from three specimens. Results Eosinophilic and cytoplasmic inclusion bodies were seen in neuronai cells of the CNS; and rabies non-characteristic histopathological changes were also detected in the CNS. The three brain specimens were detected positive. N gene nucleotide sequence of these three isolates showed distinct sequence identity, therefore they fell into different groups in the phylogenetic analysis. N gene in the cow and dog had higher homology with that in Hebei isolate, but that in the beef cattle had higher homology with that in Mongolian lupine isolate and Russian red fox isolate. Conclusion Rabies were observed in the dairy cow, beef cattle and canine in the farm in Inner Mongolia, in 2011, which lead to a different etiology characteristics of the epidemic situation.

关键词：

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Localization and expression of Hsp27 and α B-crystallin in rat primary myocardial cellsduring heat stress in vitro

Localization and expression of Hsp27 and α B-crystallin in ...

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者： Shu Tang Rehana Buriro Zhijun Liu Miao Zhang Islam Ali Abdelnasir Adam J(o)rg Hartung Endong Bao College of Veterinary Medicine Nanjing Agricultural UniversityNanjing 210095China College of Animal Science and Technology Jinling Institute of TechnologyNanjing 210038China Institute for Animal Hygiene Animal Welfare and Farm Animal BehaviourUniversity of Veterinary Medic

Neonatal rat primary myocardial cells were subjected to heat stressin vitro,as a model for investigating the distribution and expression of Hsp27 and αB-crystallin. After exposure to heat stress at 42 ℃ for different durations,the activities of enzymes expressed during cell damage increased in the supernatant of the heat-stressed myocardial cells from 10 min,and the pathological lsions were characterized by karyopyknosis and acute degeneration. Thus,cell damage was induced at the onset of heat stress. Immunofluorescence analysis showed stronger positive signals for both Hsp27 and αB-crystallin from 10 min to 240 min of exposure compared to the control cells. According to the Western blotting results,during the 480 min of heat stress,no significant variation was found in Hsp27 and αB-crystallin expression;however,significant differences were found in the induction of their corresponding mRNAs. The expression of these small heat shock proteins (sHsps) was probably delayed or overtaxed due to the rapid consumption of sHsps in myocardial cells at the onset of heat stress. Our findings indicate that Hsp27 and αB-crystallin do play a role in the response of cardiac cells to heat stress,but the details of their function remain to be investigated.

关键词： Hsp27 αB-crystallin heat stress myocardial cells

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Expression and Distribution of Laminin Receptor Precursor/Laminin Receptor in Rabbit Tissues

Expression and Distribution of Laminin Receptor Precursor/La...

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者： Huinuan Wang Xiangmei Zhou Xiaomin Yin Yunsheng Wang Deming Zhao Lifeng Yang Mohammed Kouadir Rongrong Tan Wenyu Wu Huarong Zou Jin Wang Sher Hayat Khan Dongfeng Li State Key Laboratories for Agrobiotechnology Key Lab of Animal Epidemiology and ZoonosisMinistry of State Key Laboratories for Agrobiotechnology Key Lab of Animal Epidemiology and ZoonosisMinistry of National Engineering Laboratory for Animal Breeding and MOA Key Laboratory of Animal Genetics and Br

The 37/67-kDa laminin receptor precursor (LRP)/laminin receptor (LR) is a cell surface receptor for cellular prion proteins and misfolded pathological prions. Previous research has shown that blocking or decreasing LRP/LP levels by anti-LRP/LR antibodies or small interfering RNAs (siRNAs) can prolong the incubation phase of experimental prion infection. This study aimed to investigate potential mechanisms contributing to prion resistance/susceptibility by using the rabbit,a species unsusceptible to prion infection,as a model. We investigated the expression level and distribution of LRP/LR in rabbit tissues by real-time polymerase chain reaction and by immunochemical analysis with a monoclonal anti-67 kDa LR antibody. Our results showed LRP/LR mRNA expression in all the tissues examined. Very low LRP/LR expression levels were observed in central nervous system (CNS) tissues, whereas high expression levels were observed in reproductive and digestive tissues,which differed from the expression patterns that have been reported for prionsusceptible animals. The immunochemical staining results were generally consistent with the mRNA findings,although no LR protein was detected in CNS tissues. Our findings provide a basis for further studies on prion resistance in rabbits and other animal species.

关键词： Laminin receptor precursor/laminin receptor Rabbit Expression Distribution Prion

来源：评论

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深切缅怀朱宣人先生

深切缅怀朱宣人先生

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