目的 应用恒温扩增芯片法快速检测呼吸道标本中常见的呼吸道病原菌,为细菌性呼吸道感染的监测和应急处理提供快速诊断手段.方法 收集呼吸道痰标本153份,其中8份为2例不明原因肺炎病例的痰标本,重症肺炎痰标本5份.提取标本中细菌核酸DNA,恒温芯片法扩增,实时荧光检测扩增产物.结果 (1)芯片的分析性特异度和敏感度检测:恒温芯片法对13种呼吸道病原菌的检测特异性在96%以上,敏感度在l01~103copies/反应之间.(2)不明原因肺炎和重症肺炎痰标本检测结果:2例确证为H7N9感染肺炎病例的8份痰标本,其中l份检测结果为耐甲氧西林葡萄球菌,其余7份均为阴性.5份来自重症肺炎患者的痰标本中,1份检测结果为铜绿假单胞杆菌,其余4份结果均为阴性.所有标本平行进行常规培养,结果与芯片结果吻合,但检测时间较芯片法晚3~4 d.
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