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冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究

冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究

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第二届泛长江流域骨科新进展研讨会

作者：王洪周游李宝兴马亮袁文旗李艳军崔树北华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科武汉430022 中国核辐射防护研究院组织工程生物研究所太原030006

目的：观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。方法：共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成供体组、实验组和对照组,每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死... 详细信息

目的：观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。方法：共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成供体组、实验组和对照组,每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死。实验组将经程序深低温冷冻保存的同种异体胫骨内侧髁移植，对照组将取下的胫骨内侧髁原位植入。所有实验动物在术后12周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化,软骨缺损的组织学评分以半定量的改良Wakitani score法评估,内容包括：细胞种类、髓质染色、表面完整性、软骨的厚度、移植软骨在受体周围组织的完整性5个方面,采用0、1、2、3、4评分,最大总分14分。观察两组动物的大体标本、X线片、组织学检查、Wakitani score评分及免疫组织化学检查结果。结果：①移植软骨的大体观察:两组动物关节活动度正常,关节腔无粘连、无积液,实验组移植软骨颜色及高度与周围关节软骨大致相同,关节面较平整,基底部界限模糊.对照组关节软骨面平整、无塌陷,厚度不变。②两组动物关节X线片均见骨折线已模糊,对位、对线良好。③组织学检查：两组动物关节软骨均已被透明软骨覆盖,细胞排列有序,软骨基质大量分泌,未见淋巴细胞和浆细胞浸润。④两组动物关节软骨Wakitaniscore评分结果无显著性差异,总评分相近(4.7,4.3,P＞0.05)。⑤两组修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强阳性。结论：冻存同种异体骨软骨移植后可完全修复大面积关节软骨缺损,并与自体骨软骨块修复兔的关节软骨缺损在组织学上相近,未见免疫排斥反应。

关键词：关节软骨软骨缺损软骨移植免疫排斥

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冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究

冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究

引用

第二届泛长江流域骨科新进展研讨会暨上颈椎伤病新理论新技术学习班

作者：王洪周游李宝兴马亮袁文旗李艳军崔树北华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科中国核辐射防护研究院组织工程生物研究所

目的观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。方法共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成供体组、实验组和对照组,每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死;实验组将... 详细信息

目的观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。方法共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成供体组、实验组和对照组,每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死;实验组将经程序深低温冷冻保存的同种异体胫骨内侧髁移植;对照组将取下的胫骨内侧髁原位植入。所有实验动物在术后12周处死。应用苏木精.伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化,软骨缺损的组织学评分以半定量的改良 Wakitani score 法评估,内容包括:细胞种类、髓质染色、表面完整性、软骨的厚度、移植软骨在受体周围组织的完整性5个方面,采用0、1、2、3、4评分, 最大总分14分。观察两组动物的大体标本、X 线片、组织学检查、Wakitani score 评分及免疫组织化学检查结果。结果①移植软骨的大体观察:两组动物关节活动度正常,关节腔无粘连、无积液,实验组移植软骨颜色及高度与周围关节软骨大致相同,关节面较平整,基底部界限模糊。对照组关节软骨面平整、无塌陷,厚度不变。②两组动物关节 X 线片均见骨折线已模糊,对位、对线良好。③组织学检查:两组动物关节软骨均已被透明软骨覆盖,细胞捧列有序,软骨基质大量分泌,未见淋巴细胞和浆细胞浸润。④两组动物关节软骨 Wakitani score 评分结果无显著性差异,总评分相近(4.7,4.3,P>0.05)。⑤两组修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强阳性。结论冻存同种异体骨软骨移植后可完全修复大面积关节软骨缺损,并与自体骨软骨块修复兔的关节软骨缺损在组织学上相近,未见免疫排斥反应。

关键词：关节软骨移植同种异体

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FLK-1单克隆抗体抑制实验性视网膜血管新生的实验研究

FLK-1单克隆抗体抑制实验性视网膜血管新生的实验研究

引用

中国眼底病论坛·全国眼底病专题学术研讨会

作者：张含刘哲丽张洋孙鹏杨德琪孙昱昭谷峰中国医科大学附属第一临床学院眼科

目的观察血管内皮生长因子受体2(FLK-1)单克隆抗体(anti-FLK1 mAb)对视网膜新生血管形成(RNV)的抑制作用,同时分析其对缺血性视网膜病变的影响。方法将生后第7天的C57BL/6幼鼠置于高氧箱中饲养5 d后取回至正常空气环境诱导RNV模型,生后... 详细信息

目的观察血管内皮生长因子受体2(FLK-1)单克隆抗体(anti-FLK1 mAb)对视网膜新生血管形成(RNV)的抑制作用,同时分析其对缺血性视网膜病变的影响。方法将生后第7天的C57BL/6幼鼠置于高氧箱中饲养5 d后取回至正常空气环境诱导RNV模型,生后第12、13、15天利用腹腔注射的方法给与实验组小鼠anti-FLK1 mAb 500μg(对照组给与等量的大鼠免疫球蛋白),生后第17天处死动物行视网膜铺片和免疫组织化学染色检查,测量视网膜血管无灌注区的面积,计数RNV内皮细胞核数目。定量分析anti-FLK1 mAb对于缺血性视网膜

关键词：缺血性视网膜病变单克隆抗体 FLK-1 实验性

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新的内源性保护物质Intermedin抑制大鼠血管钙化及其机制

新的内源性保护物质Intermedin抑制大鼠血管钙化及其机制

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第六届国际骨矿研究学术会议暨第八届国际骨质疏松研讨会

作者：蔡嫣徐明江陈丽王宪唐朝枢齐永芬北京大学医学部生理学与病理生理学系北京大学第一医院心血管病研究所

血管钙化(vascular calcification)是忠动脉粥样硬化、高血压、糖尿病血管病变、血管损伤和慢性肾病及老化等疾病的病人中普遍存在的共同的临床病理表现。Intermedin/adrenomedullin 2(IMD/ADM2)是2004年发现的降钙素基因相关肽(CGRP)... 详细信息

血管钙化(vascular calcification)是忠动脉粥样硬化、高血压、糖尿病血管病变、血管损伤和慢性肾病及老化等疾病的病人中普遍存在的共同的临床病理表现。Intermedin/adrenomedullin 2(IMD/ADM2)是2004年发现的降钙素基因相关肽(CGRP)超家族的新成员,具有舒张血管、降低血压和增强心肌收缩力的作用,对缺血心肌和心脏缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。但是这一新发现的小分子生物活性肽及其受体在大鼠血管钙化中的变化和可能的作用尚不清楚。本工作在Vit D3和尼古丁建立的大鼠血管钙化模型上观察内源性IMD及其受体系统一降钙素受体样受体(CRLR)和受体活性修饰蛋白(RAMP)的变化,并通过渗透泵连续给予IMD(2.4 ug/d)持续28天,观察外源性IMD对血管钙化的影响。Realtime PCR结果显示钙化血管IMD、RAMP1、2、3 mRNA的含量较对照组分别降低17.1%,26.7%、30.3%和25.3%(P<0.05),免疫组织化学染色和放射免疫检测结果显示钙化血管的IMD含量明显减少,提示钙化血管内源性IMD及其受体系统均下调。原子吸收分光光度法测定结果显示钙化组大鼠血管组织钙含量为对照组的12.96倍(P<0.01);血清和血管碱性磷酸酶(ALP)活性分别为对照组的10.67倍和3.49倍(P<0.01)。而给予IMD治疗后,大鼠血管钙含量较单纯钙化组降低76.7%(P<0.01):血浆及血管碱性磷酸酶活性分别较单纯钙化组降低86.7%(P<0.01)和64.2%(P<0.01)。von Kossa染色进一步证实IMD治疗组大鼠血管中膜棕黑色颗粒沉积显著减少。IMD逆转钙化时平滑肌α-actin的表达减少。进一步的实验发现IMD可以上调钙化大鼠血管组织基质-Gla-蛋白(MGP)的表达,同时下调钙化转录因子核心蛋白结合因子a-1(Cbfa-1)的基因表达,而骨形态发生蛋白2(BMP2)及骨桥蛋白(0PN)的表达没有明显的改变。上述结果提示IMD可能通过上调MGP的表达,从而抑制血管组织的钙盐沉积,同时通过抑制BMP2信号通路,下调Cbfa-1的基因转录,从而抑制VSMC向成骨样细胞表型转化来抑制血管钙化。

关键词： vascular calcification VSMC peptide calcitonin receptor-like receptor

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亚急性外源性锰中毒对大鼠海马的影响

亚急性外源性锰中毒对大鼠海马的影响

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第四届全国解剖与临床学术研讨会

作者：许晓利向赟江汉大学医学与生命科学学院武汉 430056 江汉大学医学与生命科学学院武汉 430056 中国科学院波谱与原子分子物理国家重点实验室武汉 430071

目的：为研究外源性锰中毒对大鼠海马的影响，经腹腔注射途径给SD大鼠染锰，采用动物磁共振成像和免疫组织化学的方法对大鼠海马进行研究。结果：(1)染锰组(50mg/Kg)大鼠在连续四大氯化锰腹腔注射后，出现好睡、食欲减退、虚弱无力... 详细信息

目的：为研究外源性锰中毒对大鼠海马的影响，经腹腔注射途径给SD大鼠染锰，采用动物磁共振成像和免疫组织化学的方法对大鼠海马进行研究。结果：(1)染锰组(50mg/Kg)大鼠在连续四大氯化锰腹腔注射后，出现好睡、食欲减退、虚弱无力、肢体乏力(后肢为甚)及血性腹水等表现：(2)染锰后大鼠T1加权成像和翻转恢复磁共振成像(Maganetic resonance imaging，MRI)可发现大鼠海马区域信号强度显著增强;(3)苏木素-伊红(H.E)染色未发现海马区域明显的神经元坏死，而免疫组织化学染色显示，海马区域胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达明显增强。结论：海马对锰具有高度亲和性并大量沉积，锰可导致大鼠海马胶质细胞的活化。

关键词：亚急性锰中毒海马神经元磁共振成像免疫组织化学胶质细胞活化

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人胚胎嗅鞘细胞与神经干细胞联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤

人胚胎嗅鞘细胞与神经干细胞联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤

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第四届全国解剖与临床学术研讨会

作者：尹国栋汤逊林月秋徐永清周田华解放军成都军区昆明总医院骨科昆明 650032 中国科学院昆明动物研究所

目的：探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)与神经干细胞(hNSCs)联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法：制作wistar火鼠脊髓全横断模型，9～10d后，分别将取材自人胎脑的hOECs和hNSCs移植剑脊髓损伤处(联合移植组)，并设hOECs移植组... 详细信息

目的：探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)与神经干细胞(hNSCs)联合移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法：制作wistar火鼠脊髓全横断模型，9～10d后，分别将取材自人胎脑的hOECs和hNSCs移植剑脊髓损伤处(联合移植组)，并设hOECs移植组、hNSCs移植组和对照组，移植术后第1、2、4、6、8、10周进行B阴运动功能评分，取材行荧光化学(Hoechst33342)和免疫组织化学染色(P75、NF-200、GFAP、Synaptophysin)观察。结果：术后4～10W，hNSCs组、hoECs组和联合移植组的BBB评分较对照组明显提高(P＜0.05)，其中，联合移植组的运动功能改善更显著。免疫组化染色显示，hNSCs可以在损伤脊髓内存活10W以上，并分化为神经元或星形胶质细胞，联合移植组和hOECs组P75染色呈阳性反应，hOECs与hNSCs联合移植可促进神经突触的形成，恢复神经元之间的联系。结论：hOECs和hNSCss联合移植可促进脊髓全横断损伤大鼠神经突触的再生，改善其肢体运动功能。

关键词：脊髓损伤人胚胎嗅鞘细胞神经干细胞 BBB评分联合移植修复运动功能

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人胚胎嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓全横断损伤

人胚胎嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓全横断损伤

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第四届全国解剖与临床学术研讨会

作者：尹国栋汤逊林月秋徐永清周田华解放军成都军区昆明总医院骨科昆明 650032 中国科学院昆明动物研究所

目的：探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法：分离、培养并鉴定人胚嗅鞘细胞。24只Wistar大鼠，随机分为实验组和对照组，均行T10节段脊髓全横断。术后第9～10d，实验组、对照组分别移植Hoechst3334... 详细信息

目的：探索人胚胎嗅鞘细胞(hOECs)移植修复大鼠脊髓全横断损伤的可行性。方法：分离、培养并鉴定人胚嗅鞘细胞。24只Wistar大鼠，随机分为实验组和对照组，均行T10节段脊髓全横断。术后第9～10d，实验组、对照组分别移植Hoechst33342标记的hOECs 5ul(2.5×106个细胞)、DMEM-F12培养基5ul。移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能评分，取材行荧光化学(Hoechst33342)和免疫组织化学染色(P75、NF200、Synaptophysin)。双盲条件下进行数据统计。结果：移植的hOECs可以在损伤脊髓内存活10w以上，可向损伤脊髓头尾两端迁移;术后4～10周实验组的BBB运动功能评分明显高于对照组(P＜0.01);P75染色实验组呈阳性反应：NF-200和Synaptophysin免疫组化染色，实验组神经纤维、突触数目和密度都较对照组高。结论：hOECs移植对脊髓全横断损伤大鼠运动功能恢复具有促进作用。

关键词：脊髓损伤人胚胎嗅鞘细胞细胞移植 BBB评分功能恢复

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人胚胎神经干细胞移植修复大鼠脊髓全横断损伤

人胚胎神经干细胞移植修复大鼠脊髓全横断损伤

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第四届全国解剖与临床学术研讨会

作者：尹国栋汤逊林月秋徐永清周田华解放军成都军区昆明总医院骨科昆明 650032 中国科学院昆明动物研究所

目的：探索利用人胚胎神经干细胞(hNSC)移植修复人鼠脊髓全横断损伤。方法：分离、培养和鉴定hNSC。将培养的hNSC植入脊髓全横断wistar大鼠损伤局部，并设DMEM-F12培养液注射对照组。移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能... 详细信息

目的：探索利用人胚胎神经干细胞(hNSC)移植修复人鼠脊髓全横断损伤。方法：分离、培养和鉴定hNSC。将培养的hNSC植入脊髓全横断wistar大鼠损伤局部，并设DMEM-F12培养液注射对照组。移植术后第1、2、4、6、8、10周进行BBB运动功能评分，观察脊髓功能恢复情况。并行免疫组织化学染色法鉴定，了解双苯亚甲胺(Hoechst)标记的移植细胞在体内存活和分化情况。结果：体外扩增人量hNSC;免疫组化结果提示移植的hNSC在损伤脊髓内可存活10w以上，分化形成神经元和神经胶质细胞，并向损伤脊髓头尾两侧迁徙：实验组的BBB运动功能评分较对照组明显提高(P＜0.01)。结论：hNSC移植后仍保持其多向分化能力： hNSC移植可促进脊髓全横断损伤大鼠运动功能恢复。

关键词：脊髓全横断损伤人胚胎神经干细胞细胞移植 BBB评分运动功能恢复

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Ki-67、cyclinA及P27对食管鳞癌预后的影响研究

Ki-67、cyclinA及P27对食管鳞癌预后的影响研究

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江苏省抗癌协会化疗专业委员会第六届年会、中日肿瘤治疗研讨会暨第二届全国肿瘤化疗进展学习班

作者：黄俊星宋振湘钱荣誉江苏省泰州市人民医院肿瘤科江苏省泰州市人民医院病理科江苏省泰州市人民医院病理科

背景:细胞周期的控制研究,不但能更深入地理解癌症的本质,而且在临床上可以判断癌症病人的预后,随着分子靶向治疗的成功,细胞周期的调控也成为寻找癌症分子靶向治疗的作用点;研究证明,细胞周期调节蛋白Ki-67、细胞周期蛋白A(cyclinA)及 ... 详细信息

背景:细胞周期的控制研究,不但能更深入地理解癌症的本质,而且在临床上可以判断癌症病人的预后,随着分子靶向治疗的成功,细胞周期的调控也成为寻找癌症分子靶向治疗的作用点;研究证明,细胞周期调节蛋白Ki-67、细胞周期蛋白A(cyclinA)及 P27的表达程度是食管鳞癌的独立预后因素,我们的研究也表明食管鳞癌的Ki-67及细胞周期蛋白A的表达要明显高于正常食管粘膜,且与其癌细胞分化相关,P27在食管鳞癌表达缺失。目的:研究细胞周期调节蛋白Ki-67、细胞周期蛋白A及P27生物因子对食管鳞预后的影响。方法:共计80例食管鳞状上皮癌(简称食管鳞癌),其中63例男性,17例女性,鼠单克隆抗人Ki-67抗体,;兔多克隆抗人细胞周期蛋白A抗体;兔多克隆抗鼠源p27抗体,行免疫组织化学染色。结果:Ki-67高表达者的累积生存率(≥16．4;3年生存率18．6％)明显低于低表达者(<16．4;3年生存率57．2％,p<0．01。在细胞周期蛋白A高表达者的生存率(≥7．1;3年生存率22．2％)显著地低于低表达者(<7．1;3年生存率53．3％,p<0．05。另外,发现其生存率在p27尽管不同,但差异无显著性(阴性;3年生存率32．5％。阳性;3 年生存率43．6％)。结论:上述发现提示Ki-67及细胞蛋白A的过度表达是一个有价值的预后指标。在寻找食管SCC新的预后因子中有其应用意义。紫杉醇对G2和M期细胞敏感,而周期蛋白A主要出现在G2和M期,将来研究周期蛋白A与紫杉醇药物敏感性的关系,其在临床的应用价值将得到进一步拓展。

关键词：食管鳞癌 Ki-67 P27 cyclinA

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凋亡在梗阻性黄疸心肌损伤的作用及基因表达

凋亡在梗阻性黄疸心肌损伤的作用及基因表达

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孟宪民基金会首届学术研讨会暨第十二届全国普外基础与临床进展学术大会

作者：巩鹏孙林谭广王忠裕大连医科大学一院普外二科

本项研究应用流式细胞仪、电镜等技术检测梗黄大鼠心肌细胞凋亡,并通过免疫组织化学方法检测Fas/FasL、TNFa、Bcl-2的表达,探索梗黄心肌损伤的发生机制.

关键词：梗阻性黄疸心肌损伤细胞凋亡

来源：评论