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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

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AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

检索范例：

范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

63 篇 会议

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63 篇 电子文献
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62 篇 医学
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- 2 篇 教育学
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主题

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机构

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3 篇 宁波市临床病理诊...
2 篇 宁波市临床病理诊...
2 篇 浙江大学医学院附...
2 篇 浙江省肿瘤医院
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2 篇 浙江大学医学院附...
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1 篇 内蒙古包头市肿瘤...
1 篇 浙江省人民医院
1 篇 福建省肿瘤医院
1 篇 复旦大学附属华山...
1 篇 东南大学附属中大...
1 篇 maxcs病理质量控制...
1 篇 江西省人民医院
1 篇 江苏省中医院
1 篇 复旦大学

作者

3 篇 黄卡特
2 篇 夏春
2 篇 印洪林
2 篇 王灿铭
2 篇 张玲娜
2 篇 宿杰阿克苏
2 篇 陆珍凤
2 篇 汪静宇
2 篇 胡锦林
2 篇 张静
2 篇 石群立
2 篇 周晓军
1 篇 杨冰泽
1 篇 王张敏
1 篇 耿艳华
1 篇 孟锦涛
1 篇 杨文涛
1 篇 倪灿荣
1 篇 吕燕博
1 篇 吴丽静

语言

63 篇 中文

检索条件"任意字段=2019年浙江省病理技术学术大会暨第六届长三角病理技术学术会议"

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排序：

浅谈验证免疫组化抗体试剂有效性的方法

浅谈验证免疫组化抗体试剂有效性的方法

引用

2019年浙江省病理技术学术大会暨第六届长三角病理技术学术会议

作者：陈丽雅温州市中心医院病理科

免疫组化为临床病理诊断提供了重要的依据。随着个性化精准医疗的发展,其在伴随诊断的地位也越发重要。由于其实验操作繁琐,实验结果影响因素众多,这就需要有严格的质量控制,并建立SOP。其第一步就是要验证所购买的试剂是否可靠,这就要... 详细信息

免疫组化为临床病理诊断提供了重要的依据。随着个性化精准医疗的发展,其在伴随诊断的地位也越发重要。由于其实验操作繁琐,实验结果影响因素众多,这就需要有严格的质量控制,并建立SOP。其第一步就是要验证所购买的试剂是否可靠,这就要求必须对所购买的试剂做有效性的验证实验。通过摸索,我科初步制定了一套验证抗体有效性的实验方法,具体如下:一、表格的制作每次购买试剂后,对厂家提供的电子清单(EXECL)进行校对,编辑和整理。厂家表格内容基本包括:产品编号、抗体名称、规格、数量、批号、生产日期、有效期,我们只需添加出入库时间,对照片编号,染色结果的文字记录以及对照蜡块的病理编号。二、对照蜡块的制作1.乳腺癌的复合对照蜡块:与乳腺癌治疗相关的有ER、PR、HER2三种复合对照蜡块。以HER2复合对照蜡块为例:收集近期日常工作中已知染色结果为(0.1.2.3),并且固定好,组织处理佳的浸润性乳腺癌标本。在不影响常规诊断的基础上,另取剩余肿瘤组织,并对其进行重复染色,其结果保持一致者方可作为对照蜡块。尽量选取阳性表达均匀集中的区域,用刀片分别将抗原表达为(0.1.2.3)的组织分割成大小为0.2*0.2cm的小方块,并按染色结果为(0.1.2.3)的顺序并排包埋成小蜡块。2.通用复合对照蜡块:同种抗体的阳性表达在不同组织上可呈现强弱不等的信号。如选用肝脏,胰腺,阑尾这3种正常组织,各取其小块组织(0.5*0.5cm大小)并排包埋,抗体CK7在这个复合蜡块的三种组织上表现弱至强阳性的胞质染色。肝脏,胰腺,阑尾这种复合蜡块能覆盖CK7,Vimentin,Syn,CgA等多种抗体。通过自由组合搭配的复合蜡块现已能覆盖常用的几十种抗体。三.对照蜡块的切片因为收集工作周期长,制作过程比较繁琐,对照蜡块来之不易,为了避免重复切片造成修片的损失,每个蜡块一次性全部切完,大概有两三百张,估算一个月阳性片的用量于4度冰箱保存,其余存放于-20℃冰箱,可防止在常温中抗原氧化而影响结果。四、对照片标签及对照信息的文字记录对照片的标签包含信息有:抗体名称(对照蜡块编号),与表格上编排相一致的对照片编号,制作对照片当天日期。对照信息文字记录(附在电子清单表格上)以CK7为例:肝脏上几乎所有胆管上皮细胞均为中至强阳性胞质染色;在胰腺上几乎所有闰管上皮细胞均为弱至中度阳性胞质染色;在阑尾上通常呈阴性染色,散在柱状上皮细胞和内皮细胞可呈弱至中度阳性胞质染色。五.蜡块的管理与保存制作对照蜡块管理手册(电子版),一种对照蜡块一个编号,从数字"1"开始往后编号。每种对照的多个蜡块再用英文字母顺序编号,如设定HER2抗体编号为1,第一批制作的HER2对照蜡块有3个,其编号则为1a,1b,1c;第二批制作的HER2对照蜡块编号则为1d,1e,1f……并记录染色结果为(0.1.2.3)对应的标本来源的病理号以及制作日期。对照蜡块的存档即按编号顺序排列,蜡块组织若全部切完,则在管理手册里记录后弃用。六,自查与持续改进显微镜下阅片,若抗体试剂存在问题,及时与厂家沟通处理。设立电子版质量持续改进表,日常工作中发现的问题及时记录,分析原因,通过不断地改进,才能逐渐提高免疫组化结果的稳定性。免疫组化质量控制标准化是发展的必然趋势,望能与广大同仁们一起努力,携手促进免疫组化质量的进步与发展,为病人的诊断及治疗提供更精准的帮助。

关键词：复合蜡电子版免疫组化

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浅谈数字PCR在精准医疗的进展及其应用

浅谈数字PCR在精准医疗的进展及其应用

引用

2019年浙江省病理技术学术大会暨第六届长三角病理技术学术会议

作者：黄燕颖楼丽美朱莉艳耿艳华杭州市红十字会医院病理科

随着精准医疗的兴起,人们对PCR的灵敏度要求也越来越高了,而数字PCR的兴起无疑在一定程度上满足了大家的需求。虽然数字PCR兴起的晚,但是它解决了不依赖于标准曲线的绝对定量并且可以将检测灵敏度提高至单个核酸分子悬而未决的问题。所... 详细信息

随着精准医疗的兴起,人们对PCR的灵敏度要求也越来越高了,而数字PCR的兴起无疑在一定程度上满足了大家的需求。虽然数字PCR兴起的晚,但是它解决了不依赖于标准曲线的绝对定量并且可以将检测灵敏度提高至单个核酸分子悬而未决的问题。所以数字PCR近些年来发展迅速,应用也越来越广泛。数字PCR是一种新的核酸检测和定量方法,借助微液滴或微坑,通过单个模板分子的PCR扩增,可实现不依赖于标准曲线和参照样本的准确、绝对定量。数字PCR使得反应更灵敏、结果更可靠、展示更直观,尤其适用于微量或痕量DNA检测与定量。一、数字PCR的进展与其他PCR相比,数字PCR表现了无与伦比的优势。与传统荧光定量PCR技术相比,数字PCR的灵敏度高,更适合常规临床使用。传统的扩增技术的灵敏度只有1%,但数字PCR可轻松实现单分子检测,灵敏度可达0.1%甚至0.001%,这对于临床上痕量核酸标本检测、复杂背景下稀有突变检测,尤其是循环肿瘤DNA检测特别适用。此外,数字PCR还可以实现绝对定量,突变扩增阻滞系统(ARMS)技术只能得到定性结果,传统的绝对或相对定量PCR的分析结果高度依赖于标准曲线或者内参基因,无法做到精准绝对定量,而数字PCR在结果判读上可实现真正意义上的绝对定量。而且与荧光定量PCR不同的是,数字PCR通过终点荧光信号计算浓度,不依赖于Ct值,因此不受扩增效率影响,能够将误差控制在5%以内,实现检测结果的高度重复性。二、数字PCR的应用数字PCR展示了巨大的临床应用前景,应用可以说是非常广泛,具体表现如下:1、肿瘤的个体化诊疗。通过检测T790M位点突变情况,可以更好地评估一代TKI药物的疗效及耐药情况并指导第三代TKI靶向药Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平台ARMS检测技术的灵敏度有限,没有办法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效准确的检测到T790M突变。这个时候数字PCR技术展现出了无与伦比的检测精度,此外,数字PCR绝对定量的优势也能充分发挥出来了,可以监控突变含量变化,做到及早发现耐药。2、液体活检。在癌症早筛时期,应用数字PCR对易感或高危人群的血液、尿液、唾液等体液标本中核酸水平的肿瘤标志物(如ctDNA、miRNA等)进行检测,以及表观遗传学的DNA甲基化定量检测,其发现疾病的时间远早于影像学或其他蛋白类标志物,大大提前了疾病发现的窗口期,可以更好地实现早诊断早治疗。此外只需微量滴定就可实现肿瘤标记物的有效检测,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突变检测、乳腺癌/胃癌的HER2基因扩增检测等,应用于肿瘤精准医学的伴随诊断。3、产前诊断。基于提高产前筛查的准确性和降低产前诊断风险性的目的,从孕妇外周血直接取样分析胎儿的遗传信息的无创产前诊断开始占据一定检测地位。比如无创产前筛查唐氏综合征、地中海贫血等,检测胎儿DNA会受到母体DNA的干扰,依靠数字PCR可提高检测准确性,更重要的是对比NGS,数字PCR技术可以提高工作效率、降低检测成本。4、病原微生物检测。数字PCR技术尤其在病原体待测标本较难获取且稀有的情况下尤为有用。它的高灵敏度可以避免对患者进行重复穿刺取样,减少患者在被穿刺取样过程中的恐惧和痛苦。而且它的高灵敏度,可以发现常规检测方法不能检测到的病原微生物。此外数字PCR还可用于肿瘤治疗的实时监控、食品安全的检测。三、数字PCR展望数字PCR具有灵敏度高、检测准确、样本用量少等优点,特别适用于qPCR依赖Ct值不能很好的分辨核酸的检测。它虽有试剂耗材昂贵、成本高、操作繁琐等诸多不足,但它在短短几年内的发展可见应用潜力是无限的,坚信数字PCR经过不断的改进和完善必定给检测带来更多便利。

关键词：绝对定量标准曲线 PCR DNA 精准医疗

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全自动载玻片打印机在病理制片中的应用体会

全自动载玻片打印机在病理制片中的应用体会

引用

2019年浙江省病理技术学术大会暨第六届长三角病理技术学术会议

作者：骆雨青杨冰泽诸暨市人民医院病理科

电子数据化制片流程在互联网和各类电子设备发展下逐步得以应用,其中病案信息电子数据化管理和包埋盒、标签打印类仪器已经成为各家医院病理科必备,为进一步提高电子数据化的制片流程应用,我科引进了一款新型全自动载玻片打印机,以求在... 详细信息

电子数据化制片流程在互联网和各类电子设备发展下逐步得以应用,其中病案信息电子数据化管理和包埋盒、标签打印类仪器已经成为各家医院病理科必备,为进一步提高电子数据化的制片流程应用,我科引进了一款新型全自动载玻片打印机,以求在制片效率及病理归档上取得显著改善。这款Lica HistoCore PERMA S Slide Printer载玻片打印机与市面上运用较多的标签打印机相比省去粘贴标签的时间和铅笔标记的时间,在一定程度上节省制片时间,也避免了标签粘贴错误及标记错误,同时为病理归档也提供了便利,但在成本方面与标签打印机相比略高,且对载玻片也有一定要求,由于这款机器在省内的普及率不高,在该仪器正式投入大批量使用前,其色带打印效果及对各类试剂的耐受性有待考量,需试验其性能,现经过一段时间在此分享使用该仪器的一些心得和体会与大家交流。1.材料与方法1.1材料Lica HistoCore PERMA S Slide Printer载玻片打印机;世泰磨砂面载玻片;世泰漆面载玻片;汇达喷墨型漆面载玻片;汇达热敏型漆面载玻片;二甲苯;无水酒精;染片架;试剂缸1.2方法使用Lica HistoCore PERMA S Slide Printer载玻片打印机打印标签端至四款不同类型厂家的载玻片上各五张三组,将打印好的载玻片按组分别放入二甲苯、无水酒精、二甲苯无水酒精混合液中,测试其打印至不同载玻片上的字体在常规使用的试剂中的耐受性。1.2.1打印这款载玻片打印机打印载玻片的方式和现常用的包埋盒打印机打印方式相同,且系统操作简单基本可满足我科所需的序列号。操作方式:①装载空白清洁的载玻片;②系统输入需要打印的病理号,可选择单号重复或病理号连打,点击打印即可;③完成打印,一张玻璃片打印时间基本耗费在10-15s。按照其操作指南要求,该载玻片打印机属于热转印打印机,装载打印的载玻片要求必须有涂层颜色且对载玻片涂层要求较高,为了试验其对各种类型载玻片的适用性,我们也选取不同种类的载玻片进行打印测试。(表1)1.2.2试剂测试将四种类型的载玻片分五张三组同一时间放入试剂缸中观察载玻片上打印的字体对不同试剂的耐受性,结果见(表2-表3)其中二甲苯酒精混合液实验结果同(表2)。2.结果四种类型的载玻片在二甲苯、酒精及混合液中浸泡五天后适应性最好的是汇达热敏型漆面载玻片,白色漆面打印字迹清晰完整,在二甲苯中放置五天涂层粘附仍然牢固,比较符合载玻片打印机的配套使用,本科后期大批量制片也选取此款载玻片,其次效果较好的为世泰漆面载玻片,虽然在二甲苯中久置涂层有软化的可能性,但一般常规HE处理的载玻片在二甲苯中放置不会超过3h,而汇达喷墨型漆面载玻片则不建议使用,其涂层表面虽为白色漆状,但其涂层化学性质还是适合与喷墨型打印机配套使用,如和此款载玻片打印机联合使用其表面字体在二甲苯中15min中基本就可全部脱光,同时也不推荐使用磨砂类型的载玻片,磨砂类型玻璃片在配合仪器打印时效果不太理想,出现字体迷糊缺损,长期使用有损坏仪器的可能性,在试剂中也不稳定,基本涂层都有脱落的可能性。3.分析讨论此次实验主要分析了Lica HistoCore PERMA S Slide Printer载玻片打印机在使用的过程中打印的速度是否满足日常工作需要,配套的色带油墨是否耐受各类化学试剂,以及打印的配套耗材载玻片类型,在经过一系列的基础实验后,主要问题仍在于打印至载玻片端的油墨字体在二甲苯中浸泡后会脱落的现象,其余试剂对字体则无影响,而导致问题主要方向基本为两点①色带油墨对二甲苯不耐受,在载玻片进入二甲苯后字体脱落;②与打印的载玻片类型有关。再结合本次实验使用的四类载玻片,其中字体完全脱落的只有汇达喷墨型漆面载玻片,其余三类的载玻片字体无脱落现象出现,由此可证明其提供色带油墨对二甲苯具有耐受性,后续实验中也观察到,字体脱落后并没有溶解,油墨字体仍然漂浮在二甲苯中,更可完全排除第一个因素耐受性。第二个问题,打印的载玻片类型,此次实验随机选择的载玻片主要不同点即每张载玻片前段三分之一处的涂层(coating)分别为四种类型,最常用的蒙砂涂层,白色漆面涂层,特制的热敏型涂层和喷墨型涂层,结合这台仪器使用的热转印技术,蒙砂涂层表面的粗糙质感基本不符合其打印要求,蒙砂涂层表面过于粗糙在热转印过程中色带油墨层与粗糙的蒙砂面仅为附着,在化学试剂中久置即会出现涂层软化甚至是字体脱落的现象。包括特定的喷墨型涂层载玻片,其涂层材质仅适合喷墨型打印机,使用热转印打印喷墨涂层的载玻片,油墨几乎不能与涂层很好的粘附,且二甲苯这类有机溶剂对油墨色带化学兼容性本就要求较高。为避免出现打印载玻片字体油墨脱落的现象出现,建议购入该仪器时进行载玻片打印测试,或咨询载玻片厂家其涂层针对性,再投入大量制片。这款Lica HistoC

关键词：四种类型病理制片二甲苯打印机应用体会

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