检索结果-内蒙古大学图书馆

肝胆胰外科杂志 2025年第1期37卷 18-25页

作者：安然任昊桢管文贤南京大学医学院附属鼓楼医院胃与疝外科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆与肝移植外科江苏南京210008

目的探讨过量肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝细胞增殖能力的影响以及间充质干细胞(MSCs)促进肝细胞增殖的具体机制。方法体外使用过量TNF-α作用于小鼠肝细胞系AML12并使用MSCs治疗。转录组测序分析阴性对照(NC)组和TNF-α组AML12细胞的差... 详细信息

目的探讨过量肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝细胞增殖能力的影响以及间充质干细胞(MSCs)促进肝细胞增殖的具体机制。方法体外使用过量TNF-α作用于小鼠肝细胞系AML12并使用MSCs治疗。转录组测序分析阴性对照(NC)组和TNF-α组AML12细胞的差异表达基因(DEGs)以及基因功能富集和增殖通路的变化。使用公共数据库Gene Transcription Regulation Database(GTRD)预测转录因子(TF)并与DEGs交集,进一步分析调控增殖信号通路的关键因子。利用染色质免疫共沉淀(ChIP)、荧光素酶报告基因实验、蛋白免疫印迹(WB)、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)以及CCK-8检测目标TF及其调控的下游靶基因和信号通路对肝细胞增殖的影响。结果转录组分析提示TNF-α组肝细胞增殖受限,经典的Wnt信号通路被显著负调控,其中β-catenin的转录受限,下游通路被抑制。通过GTRD预测β-catenin的TF并于DEGs交集发现,广泛调控细胞存活、增殖、迁移等生物学行为的TF特异蛋白1(SP1)的转录也受到抑制。慢病毒转染敲低AML12细胞SP1的表达后WB和qRT-PCR结果显示β-catenin及其下游增殖相关分子的蛋白和mRNA水平降低;ChIP-qRT-PCR和荧光素酶报告实验表明处理后SP1参与调控β-catenin的转录。对过量TNF-α处理后的AML12细胞进行WB、qRT-PCR、ChIP-qRT-PCR和荧光素酶报告实验发现,由SP1/β-catenin轴介导的细胞增殖被抑制。MSCs治疗提高了AML12细胞内SP1和β-catenin的蛋白含量,但被SP1抑制剂普卡霉素(MrA)显著抑制。qRT-PCR观察到相似的趋势,但MSCs治疗后AML12细胞内SP1的mRNA含量并未增加,提示MSCs并非通过促进SP1的转录发挥治疗作用。鉴于MSCs传递生物活性物质的功能,使用短发夹敲低SP1表达的MSCs进行治疗,结果表明,敲低SP1导致MSCs的上述治疗作用被显著抑制。结论过量TNF-α导致肝细胞内Wnt信号通路介导的增殖被抑制,MSCs通过传递SP1上调肝细胞β-catenin的表达发挥促进增殖的作用。

关键词：间充质干细胞肿瘤坏死因子α 转录因子特异蛋白1 急性肝功能衰竭肝细胞增殖小鼠

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肝脏脱细胞支架在组织工程肝脏中的应用实验研究

肝脏脱细胞支架在组织工程肝脏中的应用实验研究

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作者：任昊桢南京大学

学位级别：博士

第一部分、肝脏脱细胞支架的建立与鉴定　　目的：比较两种不同脱细胞方法对肝脏脱细胞支架材料的影响，为肝脏组织工程寻找合适的支架材料。　　方法：采用1％SDS和l%TritonX-100溶液分别经门静脉灌注，建立大鼠肝脏脱细胞支架，并... 详细信息

第一部分、肝脏脱细胞支架的建立与鉴定　　目的：比较两种不同脱细胞方法对肝脏脱细胞支架材料的影响，为肝脏组织工程寻找合适的支架材料。　　方法：采用1％SDS和l%TritonX-100溶液分别经门静脉灌注，建立大鼠肝脏脱细胞支架，并对其进行形态学检查，通过血管铸型了解血管网络情况，细胞外基质成分免疫荧光染色，胶原含量，弹力蛋白含量，氨基葡聚糖含量和肝细胞生长因子含量测定来了解细胞外基质成分保留情况，最后选出适合的支架材料。　　结果：SDS和TritonX-100溶液都能去除肝脏中细胞成分，并且保留血管网络。免疫荧光染色显示两种方法对支架细胞外基质成分影响不同。两种方法处理的支架中胶原含量无差别，TritonX-100处理的支架中弹力蛋白含量，氨基葡聚糖含量和肝细胞生长因子含量分别为SDS处理支架中的3倍、4.4倍和2.9倍。　　结论：SDS和TritonX-100溶液均能从肝脏中获得脱细胞支架。TritonX-100处理的支架较好的保留细胞外基质成分，有望成为组织工程肝脏备选材料。　　第二部分、肝脏脱细胞支架对肝细胞生长的影响　　目的：比较两种不同支架材料对肝细胞生长的影响，寻找出适于肝细胞粘附和生长的支架材料。　　方法：大鼠原代肝细胞分别接种于纤连蛋白(对照组)和脱细胞支架中(实验组)，通过测定细胞活性、粘附情况以及合成代谢功能，了解不同支架对肝细胞生长的影响。　　结果：体外培养结果显示，实验组肝细胞呈聚集体生长，脱细胞支架极大地促进了细胞活性与粘附率，对照组肝细胞呈早单层分散生长，细胞活性与粘附率均不如实验组。实验组白蛋白分泌、尿素合成、细胞色素P450活性及细胞色素P450相关mRNA水平均显著高于对照组。　　结论：与纤连蛋白相比，脱细胞支架增加肝细胞粘附率，促进肝细胞呈聚集体生长，肝细胞代谢合成功能明显增强，脱细胞支架是构建组织工程肝脏的理想材料。　　第三部分、可移植组织工程肝脏的构建及其治疗肝衰竭大鼠的实验研究　　目的：体外构建拥有血液流入、流出道的可移植组织工程肝脏，将其应用于急性肝功能衰竭大鼠体内，评价其治疗效果。　　方法：采用肝素固化的方法肝素化脱细胞支架血管网络，然后植入肝细胞体外培养24h，构建可移植组织工程肝脏。建立90%肝切除大鼠模型，分为可移植组织工程肝脏移植治疗组和单纯肝切组，每组各10只，观察治疗后大鼠一般情况与生化指标并绘制生存曲线。　　结果：脱细胞支架血管网络经肝素固化后表现出良好的抗凝特性。移植组大鼠较肝切组大鼠存活时间明显延长，具有统计学差异(P<0.01)。肝切组大鼠术后36h全部死亡，移植组72h时仍有2只存活，且移植后60h血氨出现明显下降。　　结论：本实验构建的可移植组织工程肝脏对肝衰竭大鼠具有较好的治疗效果，为肝衰竭的治疗方法提供一条新的思路。

关键词：肝脏脱细胞支架细胞外基质肝细胞生长急性肝功能衰竭组织工程

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缓释bFGF胶原膜修复猪胆管缺损的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2013年第2期27卷 212-218页

作者：陶亮李强任昊桢戴建武丁义涛南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科南京210008 中国科学院遗传与发育生物学研究所

目的探讨采用缓释bFGF胶原膜修复猪胆管缺损的效果。方法中华实验用猪28只,雌雄不限,体重15～30 kg;根据处理方法不同,将其随机分为3组,其中实验组12只,空白对照组12只,正常对照组4只。正常对照组不作处理;实验组和空白对照组制备胆管... 详细信息

目的探讨采用缓释bFGF胶原膜修复猪胆管缺损的效果。方法中华实验用猪28只,雌雄不限,体重15～30 kg;根据处理方法不同,将其随机分为3组,其中实验组12只,空白对照组12只,正常对照组4只。正常对照组不作处理;实验组和空白对照组制备胆管壁缺损模型(长2 cm,宽1/3～2/3胆管周径)后,分别采用2.0 cm×1.0 cm×0.5 mm缓释bFGF胶原膜和空白胶原膜缝合修复。术后观察实验动物存活情况,并于术后1、2、3个月检测肝功能变化,处死动物后行大体观察;取胆管组织经HE及免疫组织化学染色,行微血管密度(microvessel density,MVD)及黏膜下腺体计数;术后3个月行经胆囊胆管胆道造影观察。结果术后实验动物均存活至实验完成。术后1个月实验组及空白对照组腹腔粘连均较严重,随着时间延长,实验组粘连较空白对照组明显缓解。肝功能检测示,除ALP在术后2、3个月实验组及空白对照组均较正常对照组显著下降(P<0.05)外,其余各指标,如谷丙转氨酶、总胆红素和白蛋白术后各时间点组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。组织学及免疫组织化学染色观察示,实验组胆管腺体再生和上皮再生速度快于空白对照组,2个月即完成胆管上皮覆盖,3个月与正常对照组相似,相应组织水肿和炎性浸润均较空白对照组轻。术后1个月实验组黏膜下腺体计数及MVD值均显著高于两个对照组(P<0.05),2个月后下降并稳定于正常对照组水平;空白对照组随时间延长呈上升趋势,术后1、2个月显著低于实验组和正常对照组(P<0.05),3个月时达到并稳定于正常对照组水平。相关性分析表明,正常对照组、实验组和空白对照组术后各时间点黏膜下腺体计数与MVD之间均成正相关(P<0.01)。术后3个月造影显示,实验组、空白对照组均无胆管扩张及结石形成。结论缓释bFGF胶原膜可通过促进新生血管再生等方式促进猪胆管缺损愈合。

关键词：组织工程胆管缺损缓释bFGF 胶原微血管密度猪

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缓释碱性成纤维细胞生长因子预防胆管损伤修复术后胆管瘢痕形成的实验研究

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南京大学学报（自然科学版） 2012年第6期48卷 797-803页

作者：陶亮李强任昊桢戴建武丁义涛南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科南京210008 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100109

探讨缓释碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对胆管损伤修复术后胆管瘢痕形成的预防作用.通过分组实验,制备猪胆管部分缺损模型,运用加载缓释bFGF胶原膜及空白胶原膜修复缺损.比较术后1、2、3个月的肝功能变... 详细信息

探讨缓释碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对胆管损伤修复术后胆管瘢痕形成的预防作用.通过分组实验,制备猪胆管部分缺损模型,运用加载缓释bFGF胶原膜及空白胶原膜修复缺损.比较术后1、2、3个月的肝功能变化并用病理切片和免疫组化染色比较胆管愈合、胶原增生及肌成纤维母细胞(myofibroblast,MFB)的表达情况.术后6个月胆道造影观察狭窄形成情况.结果显示:经缓释bFGF治疗后,胆管未出现瘢痕性狭窄.与空白胶原膜组相比,胆汁淤积酶学指标中GGT和TBA显著降低,免疫组化提示MFB的表达显著降低,胶原排列及结构更接近于正常胆管.证明运用缓释bFGF胶原膜治疗胆管缺损可通过加速胆管愈合及下调MFB的表达有效的预防胆管损伤修复术后胆管瘢痕的形成.

关键词：肝外胆管组织工程肌成纤维母细胞碱性成纤维细胞生长因子

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CXCR4转染的骨髓间充质干细胞靶向治疗急性肝衰竭

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世界华人消化杂志 2014年第16期22卷 2229-2236页

作者：马虎成施晓雷任昊桢袁献温丁义涛南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科江苏省南京市210008

目的:提高骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植治疗急性肝衰竭时在肝脏的定植率及疗效.方法:采用慢病毒转染使MSC过表达CXCR4基因,RT-PCR和细胞流式检测CXCR4表达.ELISA实验检测肝衰竭裸鼠肝脏MSC向基质衍生因子-1α(strom... 详细信息

目的:提高骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植治疗急性肝衰竭时在肝脏的定植率及疗效.方法:采用慢病毒转染使MSC过表达CXCR4基因,RT-PCR和细胞流式检测CXCR4表达.ELISA实验检测肝衰竭裸鼠肝脏MSC向基质衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)水平.迁移实验检测转染的SDF-1α趋化能力.20%(V/V)四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液8μL/g腹腔注射诱导裸鼠急性肝衰竭模型,24 h后尾静脉注射CXCR4转染的间充质干细胞(CXCR4-MSC)和未转染的间充质干细胞(Null-MSC).于注射后各时间点活体示踪MSC分布情况、裸鼠肝功能、生存率、组织病理学改变和肝细胞增殖情况.结果:CXCR4-MSC高表达CXCR4基因和CXCR4蛋白,肝衰竭裸鼠肝脏SDF-1α水平升高,与正常裸鼠相比有统计学差异.体外迁移实验证实CXCR4-MSC比Null-MSC具有向SDF-1α更好的迁移能力.体内活体成像显示移植后5 d CXCR4-MSC主要定植在肝脏,而Null-MSC在肝脏和脾脏都有定植.高定植率使得转染组裸鼠比未转染组裸鼠肝细胞受损更轻且具有更长的生存期,同时转染组裸鼠肝细胞增殖明显多于未转染组,两者有统计学差异.我们的实验证实转染CXCR4基因的骨髓间充质干细胞能够更好地促进肝再生.结论:基因修饰使骨髓间充质干细胞过表达CXCR4基因能够促进干细胞在肝脏的定植,改善肝功能,提高肝细胞的再生和裸鼠的生存率,为干细胞移植治疗肝功能衰竭提供了更广阔的应用途径.

关键词：急性肝衰竭细胞移植间充质干细胞趋化因子受体4 基因修饰

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基于微流控的仿生细胞封装

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Science China Materials 2024年第8期67卷 2414-2426页

作者：王经琳黄丹青方壹乐任昊桢赵远锦 Division of Hepatobiliary and Transplantation Surgery Department of General SurgeryNanjing Drum Tower Hospital(The Affiliated Hospital of Nanjing University Medical School)Nanjing 210008China State Key Laboratory of Bioelectronics School of Biological Science and Medical EngineeringSoutheast UniversityNanjing 210096China

将细胞封装在生物材料中用于器官修复或疾病治疗是一个新兴领域.目前,微流控技术被用于精确控制封装细胞的数量、大小和支架结构.微流控技术提供了设计生物仿生形态的能力,增强封装细胞的活性和功能,从而提高疾病治疗的效果.本文报道了... 详细信息

将细胞封装在生物材料中用于器官修复或疾病治疗是一个新兴领域.目前,微流控技术被用于精确控制封装细胞的数量、大小和支架结构.微流控技术提供了设计生物仿生形态的能力,增强封装细胞的活性和功能,从而提高疾病治疗的效果.本文报道了微流控技术在仿生细胞封装方面的最新进展.我们首先简要概述了各种天然衍生的促进细胞功能的仿生结构,如受到细胞、植物、动物和自然反应启发的结构;之后讨论了基于微技术的最新细胞封装方法,并详细描述了相关过程;最后提出了仿生细胞封装在疾病治疗和临床应用中面临的挑战和未来方向.

关键词：微流控技术封装方法仿生结构仿生形态疾病治疗未来方向支架结构精确控制

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训练免疫在相关疾病中的研究进展

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南京医科大学学报（自然科学版） 2021年第11期41卷 1695-1701页

作者：苏可王经琳任昊桢施晓雷南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科江苏南京210008

训练免疫(trained immunity,TI)是不依赖T、B细胞的,区别于传统固有免疫特征的一种记忆性固有免疫应答,在机体初次感染后对相同或不同病原体再次感染表现高反应性。训练免疫作为一种新兴的观点,具体机制涉及固有免疫、代谢及表观遗传之... 详细信息

训练免疫(trained immunity,TI)是不依赖T、B细胞的,区别于传统固有免疫特征的一种记忆性固有免疫应答,在机体初次感染后对相同或不同病原体再次感染表现高反应性。训练免疫作为一种新兴的观点,具体机制涉及固有免疫、代谢及表观遗传之间的交互作用。基于此,本文总结了脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、卡介苗(bacille calmette-guerin,BCG)、激素等刺激对单核/巨噬细胞、自然杀伤细胞等先天免疫细胞以及非经典免疫细胞的表观遗传和代谢修饰的影响,并探讨了调节训练免疫在炎症、神经系统疾病以及新冠肺炎等方面的作用。

关键词：训练免疫固有免疫免疫记忆代谢重组表观遗传重编程

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机器人、腹腔镜以及开腹肝切除术治疗肝内胆管结石的对比研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2021年第1期41卷 82-87页

作者：王帅任昊桢汤宁张玉衡施晓雷南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科江苏南京210008

目的:探讨比较机器人、腹腔镜、开腹肝切除术治疗肝内胆管结石的安全性和有效性。方法:回顾性分析2019年5月—2020年4月在南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科接受达芬奇机器人辅助肝段切除手术治疗的肝内胆管结石患者23例,同时纳入腹... 详细信息

目的:探讨比较机器人、腹腔镜、开腹肝切除术治疗肝内胆管结石的安全性和有效性。方法:回顾性分析2019年5月—2020年4月在南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科接受达芬奇机器人辅助肝段切除手术治疗的肝内胆管结石患者23例,同时纳入腹腔镜手术(20例)、开腹手术(25例)治疗的肝内胆管结石患者作为对照,比较3组患者基本临床信息、手术时间、失血量、输血情况、肝门阻断情况、术后住院时间、术后肛门排气时间、术后进食时间、下床活动时间、视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、肝功能、并发症等情况。结果:机器人组手术时间与腹腔镜组相近,均长于开腹组;由于机器人装机消耗一定时间,去除装机时间以后,机器人组实际手术操作时间与开腹组相近。术中出血方面,机器人组出血量最少,腹腔镜组次之,开腹组最多。全肝门阻断方面,机器人组和腹腔镜组的肝门阻断比例明显低于开腹组。此外,机器人与腹腔镜在促进术后恢复方面整体优于开腹手术,包括术后住院时间更短、肛门通气更快、术后进食更早、下床活动更快以及VAS更低。3组患者的术后肝功能以及并发症发生率没有统计学差异。结论:机器人手术以及腹腔镜手术能够有效减少肝内胆管结石肝切除手术出血量,降低全肝门阻断率,促进术后恢复。尤其在缩短手术操作时间、降低出血量、加快术后出院方面,机器人手术明显优于腹腔镜手术。

关键词：肝内胆管结石肝切除术机器人手术

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细胞薄片组织工程及其临床转化的研究进展

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东南大学学报（医学版） 2022年第1期41卷 148-154页

作者：俞杭王经琳任昊桢施晓雷南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院江苏南京210046 南京大学医学院附属鼓楼医院普外科江苏南京210008

细胞移植是一种很有前景的治疗受损组织或器官并促进其再生的手段。常规的细胞疗法是直接将细胞注射至受损组织,但其将细胞输送到靶部位的效率有限。“细胞薄片组织工程”是一种新兴的无支架组织工程技术,利用温度敏感型聚合物制造出的... 详细信息

细胞移植是一种很有前景的治疗受损组织或器官并促进其再生的手段。常规的细胞疗法是直接将细胞注射至受损组织,但其将细胞输送到靶部位的效率有限。“细胞薄片组织工程”是一种新兴的无支架组织工程技术,利用温度敏感型聚合物制造出的组织状细胞单层(即“细胞薄片”)可以被输送到受损部位,并且不需要支架,定植效果强大。目前,细胞薄片组织工程已经被应用于多种器官的组织再生。因此,本综述从细胞薄片的制备以及其在临床应用等多个方面进行系统的归纳和阐述。

关键词：细胞薄片组织工程组织再生细胞移植温度响应综述

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运用bFGF融合活性修复因子预防胆管损伤后纤维化的实验研究

运用bFGF融合活性修复因子预防胆管损伤后纤维化的实验研究

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2012中国器官移植大会

作者：李强陶亮任昊桢戴建武丁义涛南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科中国科学院遗传与发育生物学研究所

【目的】探讨bFGF融合活性修复因子(CBD-bFGF)对胆管狭窄形成的预防作用。【方法】15-30kg中华实验用猪28只,随机分为对照组(4只),实验组(24只)。实验组随机分成胶原膜修复组(n=12只)和CBD-bFGF胶原膜组(n=12只)。对照组为非手术组,直... 详细信息

【目的】探讨bFGF融合活性修复因子(CBD-bFGF)对胆管狭窄形成的预防作用。【方法】15-30kg中华实验用猪28只,随机分为对照组(4只),实验组(24只)。实验组随机分成胶原膜修复组(n=12只)和CBD-bFGF胶原膜组(n=12只)。对照组为非手术组,直接处死获取胆管。实验组中的两组均行腹正中切口暴露胆总管,切除胆总管前壁长度为2cm,宽度为1/3～2/3胆管周径的梭形区域,建立模型之后,先置入胆道内引

关键词：胆管损伤 CBD 胶原膜修复因子纤维化

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