检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：何怡宁广西大学

学位级别：博士

鸡传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)是冠状病毒科Gamma冠状病毒属的成员,其引起的鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是鸡的一种急性高度接触传染性呼吸道疾病。IBV基因组容易变异,导致病毒血清型... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)是冠状病毒科Gamma冠状病毒属的成员,其引起的鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是鸡的一种急性高度接触传染性呼吸道疾病。IBV基因组容易变异,导致病毒血清型和致病性多样化,各血清型之间交叉保护作用有限,给养禽业带来很大的经济损失。因此,做好该病的防控具有极其重要的意义。IBV感染致病与免疫机制是IB防控研究的主要方向之一。天然(固有)免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线,在宿主防御IBV中起重要作用。研究表明冠状病毒调控天然免疫反应具有多样性和复杂性,导致冠状病毒致病性和免疫性的差异,不同IBV毒株对不同组织的致病性可能与病毒引起的固有免疫反应有关。因此,深入研究不同致病性IBV感染宿主后不同靶组织的天然免疫反应具有重要意义。IBV有多种临床致病型,其中呼吸型和肾型为两种主要的致病型。本课题应用不同血清型的呼吸型和肾型IBV毒株分别感染SPF鸡,并对感染鸡气管和肾脏TLR3和TLR7信号通路进行研究,同时研究此两种IBV感染对核转录因子IRF7和NF-κB p65表达的影响,并在此基础上,通过过表达或敲低表达研究Viperin和IFIT5对IBV复制的影响。一、IBV感染对鸡气管和肾脏TLR3和TLR7信号通路的影响本研究应用不同血清型IBV的呼吸型M41株和肾型GX-YL5株分别感染SPF鸡,观察感染后气管黏膜和肾脏组织病理变化,同时检测病毒载量、TLR3和TLR7信号通路关键分子、炎症相关细胞因子、Ⅰ型IFN和干扰素刺激基因(ISG)的mRNA以及TLR3和细胞因子蛋白表达的变化。结果显示,M41和GX-YL5株感染气管黏膜均在1-11 dpi出现病变,病毒载量迅速上升,M41株感染肾脏病变轻微,病毒载量较低,而GX-YL5株感染肾脏出现严重肾炎和很高的病毒载量;TLR3和TLR7信号通路关键分子的mRNA在M41和GX-YL5株感染气管黏膜中在1-21 dpi均显著上调表达,但在肾脏中大部分变化不明显,TLR3蛋白均表达和分布于这两种组织;IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白表达在M41株感染气管黏膜以及GX-YL5株感染气管黏膜和肾脏组织中显著上调;IFN-α在气管黏膜上调而在肾脏下调,IFN-β主要在M41株感染气管黏膜和GX-YL5株感染肾脏组织表达,ISG在M41株和GX-YL5株感染的气管黏膜和肾脏组织均显著上调。本研究表明M41株和GX-YL5株感染引起的气管黏膜和肾脏组织病理变化程度与病毒载量呈正相关,TLR3和TLR7信号通路应答存在组织差异,IL-1β和IL-6表达与组织炎症损伤相关,IFN-α表达存在组织差异,IFN-β表达既存在组织差异又存在毒株差异,ISG均上调表达从而发挥抗病毒效应。本研究解析了不同IBV感染对靶组织TLR3和TLR7信号通路的不同影响,为不同致病型IBV毒株感染的天然免疫应答提供科学依据。二、IBV感染对核转录因子IRF7和NF-KB p65表达的影响核转录因子是宿主天然免疫TLR和RLR信号通路的关键信号分子,负责启动Ⅰ型IFN、促炎症因子和趋化因子的转录。为了探讨IBV感染对核转录因子IRF7和NF-κB p65的影响,为IBV致病及免疫机制研究提供理论依据,本研究分别应用荧光定量PCR和Western Blot检测IBV M41和GX-YL5株感染SPF鸡气管和肾脏组织IRF7和NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平,以及应用免疫组织化学方法观察IRF7和NF-κB p65在气管和肾脏组织的分布,同时检测IBV的N蛋白表达变化。结果显示,M41株感染3-8 dpi气管黏膜和肾脏组织中IRF7的mRNA和蛋白表达显著上调和明显上升;GX-YL5株感染气管黏膜和肾脏组织中IRF7的mRNA和蛋白在1-21 dpi均显著上调和上升。M41株感染早期气管黏膜中NF-κB p65的mRNA和蛋白表达显著上调和明显上升;GX-YL5株感染气管黏膜中NF-κB p65的mRNA和蛋白在1-3 dpi显著上调和上升；但M41和GX-YL5株感染后肾脏组织中NF-κB p65的mRNA显著下调或变化不明显,Western Blot未检测到NF-κB p65蛋白。免疫组化的结果显示IBV感染后气管黏膜和肾脏组织中IRF7和NF-κB p65的蛋白表达明显上升,与病毒载量和N蛋白变化一致,在病毒复制高峰期IRF7和NF-κB p65大量转移至细胞核。本研究表明M41和GX-YL5毒株感染均激活了IRF7和NF-κB p65信号,IRF7和NF-κB p65在抗IBV天然免疫反应中发挥重要作用。三、Viperin和IFIT5对IBV体外复制的影响第二章的研究

关键词：传染性支气管炎病毒 TLR信号通路核转录因子 ISG 病毒复制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒黏膜免疫研究进展

引用

中国兽医杂志 2013年第9期49卷 56-59页

作者：何怡宁郑衍生磨美兰广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）引起的鸡传染性支气管炎（IB）是一种具有高度传染性的病毒性呼吸道疾病，主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿生殖系统和消化系统，不同日龄均能感染，雏鸡最易感。尽管广泛使用疫苗，但IB仍频繁发生。因此，做好I... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）引起的鸡传染性支气管炎（IB）是一种具有高度传染性的病毒性呼吸道疾病，主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿生殖系统和消化系统，不同日龄均能感染，雏鸡最易感。尽管广泛使用疫苗，但IB仍频繁发生。因此，做好IB的预防控制具有极其重要的意义。IBV致病机制的研究是IB防控的主要方向之一，而IBv是典型的嗜黏膜病原，主要通过呼吸道黏膜途径感染机体，因此黏膜免疫研究是IBV致病机制研究的重中之重。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒黏膜免疫呼吸道疾病致病机制 IBV 呼吸系统消化系统生殖系统

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

2012～2013年鸡传染性支气管炎病毒广西分离株S1基因序列分析与血清型鉴定

引用

病毒学报 2016年第1期32卷 62-69页

作者：张丽华吴翠兰张志鹏何怡宁李和鸣秦丽莉韦天超磨美兰韦平广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

为继续跟踪了解近年来广西鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）的流行状况及抗原变异情况,本研究对2012~2013年的15个广西IBV分离株S1基因进行了相似性比较、进化树和重组分析,同时鉴定了分离株的血清型。结果表明... 详细信息

为继续跟踪了解近年来广西鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）的流行状况及抗原变异情况,本研究对2012~2013年的15个广西IBV分离株S1基因进行了相似性比较、进化树和重组分析,同时鉴定了分离株的血清型。结果表明,15个IBV毒株之间的S1基因氨基酸序列相似性为54.3%~99.6%,与参考株的相似性为43.3%~99.3%;除GX-YL130025外,其余14个毒株与疫苗株H120的相似性均较低（65.1%~81.4%）;进化树分析表明,15个IBV分离株分属8个基因型,其中New-type II为优势基因型;重组分析表明,分离株GX-NN130048的S1基因来源于4/91疫苗株和LX4型野毒株的重组;血清分型结果表明,15个IBV分离株分属7个血清型,与生产上广泛使用的疫苗株H120血清型一致的仅有1株,重组毒株GX-NN130048的血清型不同于其亲代血清型。本研究表明,近年广西地区IBV不管是在基因型还是血清型上都发生了明显的变异,同时存在多个基因型和血清型的流行;基因重组可导致新血清型的出现,这可能是导致免疫失败的主要原因。本研究为全面阐述IBV变异规律和分子机制以及为新疫苗的研发提供依据。

关键词：传染性支气管炎病毒病毒中和试验基因分型血清型重组

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一株重组鸡传染性支气管炎病毒的分离及结构蛋白基因变异和血清型分析

引用

畜牧兽医学报 2015年第5期46卷 815-823页

作者：吴翠兰何怡宁李和鸣孙新宽谭渝才韦天超磨美兰韦平广西大学动物科学技术学院南宁530005

为进一步了解鸡传染性支气管炎病毒(IBV)流行株的遗传变异情况,对2013年从免疫失败的广西某鸡场中分离到的一株IBV(GX-NN130048)进行S1、E、M和N基因的扩增、测序、相似性比较、系统进化树绘制和重组分析以及血清型鉴定。基因序列分析... 详细信息

为进一步了解鸡传染性支气管炎病毒(IBV)流行株的遗传变异情况,对2013年从免疫失败的广西某鸡场中分离到的一株IBV(GX-NN130048)进行S1、E、M和N基因的扩增、测序、相似性比较、系统进化树绘制和重组分析以及血清型鉴定。基因序列分析结果表明,分离株GX-NN130048的S蛋白裂解位点序列为RRSRR,S1、E、M和N基因与参考株核苷酸相似性分别在60.8%~90.1%、81.0%~94.2%、86.1%~93.8%和86.0%~93.3%;进化树分析显示,分离株GX-NN130048的S1基因与疫苗毒株4/91同属一群,而E、M和N基因则与毒株LX4属于同一群;重组分析显示,分离株GX-NN130048的S1基因来源于疫苗毒株4/91和GX-HC1006野毒株(LX4型)的重组;血清型分析表明,该分离株的血清型不同于疫苗株H120和4/91。研究表明分离株GX-NN130048是一株重组毒株,其结构基因和血清型均发生变异。本研究再次提供证据说明,疫苗株4/91越来越多参与到IBV流行株通过基因重组导致的遗传变异事件当中,并可能由此导致新血清型的出现。这可能是现场免疫失败的一个主要原因。有必要继续加强对IBV的监测和新疫苗的研发。

关键词：传染性支气管炎病毒重组基因血清型变异

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎的诊断—理念和技术的综述

引用

广西畜牧兽医 2012年第5期28卷 315-317页

作者：何怡宁孙新宽磨美兰广西大学动物科学技术学院南宁530005

1引言自1931年鸡传染性支气管炎（IB）被发现以来，该病被定义为一种接触传染性疾病，主要影响种鸡、蛋鸡和肉鸡的肾脏、呼吸、生殖和消化系统。IB的病原IBV血清型众多，呈世界性分布。IB造成严重的经济损失在于：产蛋量减少、蛋质量下... 详细信息

1引言自1931年鸡传染性支气管炎（IB）被发现以来，该病被定义为一种接触传染性疾病，主要影响种鸡、蛋鸡和肉鸡的肾脏、呼吸、生殖和消化系统。IB的病原IBV血清型众多，呈世界性分布。IB造成严重的经济损失在于：产蛋量减少、蛋质量下降、假母鸡、生长迟缓、增加继发感染的易感性以及在某些情况下造成中度至重度的死亡率。

关键词：鸡传染性支气管炎综述技术诊断传染性疾病 IBV 消化系统经济损失

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三黄鸡MAVS基因克隆及生物信息学分析

引用

南方农业学报 2016年第7期47卷 1216-1221页

作者：曹艳杰何怡宁王海勇唐宁张丽华韦平韦天超磨美兰广西大学动物科学技术学院南宁530005

【目的】掌握三黄鸡线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)基因的生物信息学,为MAVS基因诱导表达及禽类固有免疫相关机制研究打下基础。【方法】根据Gen Bank中已公布的原鸡MAVS基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR扩增三黄鸡MAVS基因,并应用相... 详细信息

【目的】掌握三黄鸡线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)基因的生物信息学,为MAVS基因诱导表达及禽类固有免疫相关机制研究打下基础。【方法】根据Gen Bank中已公布的原鸡MAVS基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR扩增三黄鸡MAVS基因,并应用相关生物软件进行序列分析及其蛋白结构预测。【结果】三黄鸡MAVS基因编码区(CDS)全长1926 bp,编码641个氨基酸,与Gen Bank中已发表的原鸡MAVS氨基酸序列(NP_001012911.1)比对,三黄鸡MAVS氨基酸序列在第440、488、506和606位存在4个氨基酸差异,分别为440A→T、488P→L、506I→L和606E→K。三黄鸡MAVS基因与原鸡的相似性最高,达99.0%;与日本鹌鹑的相似性次之,为91.0%;与斑马鱼的相似性最低,仅37.6%。三黄鸡MAVS蛋白分子质量为67.79 ku,理论等电点(p I)为5.04,属于跨膜蛋白,无信号肽序列;其二级结构中折叠占0.5%,无规则卷曲占88.7%,螺旋占10.8%。【结论】三黄鸡MAVS基因序列表现出高度的保守性,可作为今后研究三黄鸡抗病毒机制的重要指标之一。

关键词：三黄鸡 MAVS基因克隆生物信息学相似性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

干扰素刺激基因在鸡传染性支气管炎病毒感染雏鸡气管黏膜中表达的动态变化

引用

动物医学进展 2016年第3期37卷 19-24页

作者：谢智文曹艳杰何怡宁李和鸣戴锦龙张志鹏韦平韦天超磨美兰广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

为了解鸡干扰素刺激基因（ISG）在鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染雏鸡气管黏膜中的表达情况,采用实时荧光定量PCR检测IBV M41株感染SPF鸡后不同时相气管黏膜中β干扰素（IFN-β）和干扰素刺激基因mRNA转录水平和IBV病毒载量变化。结... 详细信息

为了解鸡干扰素刺激基因（ISG）在鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染雏鸡气管黏膜中的表达情况,采用实时荧光定量PCR检测IBV M41株感染SPF鸡后不同时相气管黏膜中β干扰素（IFN-β）和干扰素刺激基因mRNA转录水平和IBV病毒载量变化。结果显示,鸡气管黏膜中IFN-β和干扰素刺激基因Mx、PKR、OAS、Viperin、IFITM3和IFIT5mRNA转录水平在感染后（DPI）第1~14天显著（P〈0.05）或极显著（P〈0.01）上调,且均在5DPI达到峰值;鸡气管黏膜中IBV病毒载量在1DPI急剧升高,在5DPI达到峰值,14DPI病毒载量急剧下降。结果表明,IFN-β、干扰素刺激基因Mx、PKR、OAS、Viperin、IFITM3和IFIT5mRNA转录水平与IBV病毒载量变化趋势一致,提示IFN-β、干扰素刺激基因Mx、PKR、OAS、Viperin、IFITM3和IFIT5在抵御IBV入侵、抑制IBV复制、增殖以及病毒清除中发挥重要作用。试验结果丰富了宿主抗IBV感染的固有免疫应答机制,为IBV感染的预防和控制提供了理论依据。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒气管黏膜干扰素刺激基因 β干扰素病毒载量

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三黄鸡STING胞外区基因克隆及原核表达

引用

南方农业学报 2016年第8期47卷 1401-1405页

作者：曹艳杰何怡宁唐宁王海勇张志鹏谢智文韦平韦天超磨美兰广西大学动物科学技术学院南宁530005

【目的】克隆鸡干扰素基因刺激蛋白(STING)胞外区基因并进行原核表达,为了解STING蛋白的生物学功能及探讨禽类的固有免疫机制打下基础。【方法】采用RT-PCR扩增鸡STING胞外区基因,与原核表达载体p GEX-4T-1连接构建重组表达质粒,再转化B... 详细信息

【目的】克隆鸡干扰素基因刺激蛋白(STING)胞外区基因并进行原核表达,为了解STING蛋白的生物学功能及探讨禽类的固有免疫机制打下基础。【方法】采用RT-PCR扩增鸡STING胞外区基因,与原核表达载体p GEX-4T-1连接构建重组表达质粒,再转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后进行12%SDS-PAGE和Western blotting鉴定分析。【结果】三黄鸡STING胞外区基因全长951 bp,与原核表达载体p GEX-4T-1可成功构建重组表达质粒p GEX-4T-1-STING,转化BL21(DE3)感受态细胞后经1.0 mmol/L IPTG诱导表达4 h,12%SDS-PAGE电泳检测得到一个带GST标签约62 ku的融合蛋白,采用抗GST多克隆抗体进行Western blotting鉴定,约在62 ku处可见一条明显的蛋白印迹条带,表明目的蛋白原核表达正确,且特异性较高。【结论】从三黄鸡外周血淋巴细胞中克隆获得的STING胞外区基因片段可在原核细胞中高效表达,且纯化后的融合蛋白可用于制备鸡STING多克隆抗体。

关键词：三黄鸡干扰素基因刺激蛋白(STING) 克隆原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性支气管炎病毒MM41株感染雏鸡的组织病理学研究

引用

中国家禽 2015年第23期37卷 16-21页

作者：戴锦龙曹艳杰李和鸣韦英益张丽华何怡宁谢智文韦天超韦平磨美兰广西大学动物科学与技术学院广西南宁530005

为全面了解鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染引起雏鸡多个器官组织病理损伤情况,研究对IBV M41株人工感染SPF雏鸡后不同时间的气管、肺脏、肾脏、哈德氏腺、胸腺、法氏囊、脾脏、肝脏、胰腺和十二指肠进行病理组织学变化观察,同时应用... 详细信息

为全面了解鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染引起雏鸡多个器官组织病理损伤情况,研究对IBV M41株人工感染SPF雏鸡后不同时间的气管、肺脏、肾脏、哈德氏腺、胸腺、法氏囊、脾脏、肝脏、胰腺和十二指肠进行病理组织学变化观察,同时应用实时荧光定量PCR方法对气管和肾脏中IBV载量进行检测。结果显示,IBV M41株主要侵害鸡呼吸器官气管和肺脏,分别在感染后第1、3天开始出现病变并持续2~3周。肾脏主要表现为肾小管上皮细胞轻度变性和少量淋巴细胞浸润,从第5天持续到第28天。感染后第5天,免疫器官哈德氏腺、胸腺和法氏囊开始出现不同程度的细胞变性,其中哈德氏腺最严重。感染后第3~21天,脾脏白髓面积增大,局部出现少量异嗜性细胞,病变轻微。感染5 d后,肝脏、胰腺和十二指肠先后出现轻度细胞变性,少量淋巴细胞浸润,持续到第28天。感染后第1~11天气管和肾脏病毒载量维持较高水平,分别在第5、8天达到峰值,气管病毒载量较肾脏高。结果表明,IBV M41株主要侵害鸡呼吸系统,对泌尿、免疫和消化系统也有亲嗜性;不同器官组织损伤程度和持续时间存在差异;气管和肾脏的病毒载量与组织损伤存在相关性。研究首次对IBV M41株感染雏鸡进行系统的组织病理学观察,为了解疾病发展过程、IBV致病机理和病理学诊断提供参考。

关键词：传染性支气管炎病毒雏鸡组织病理学病毒载量

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

番鸭细小病毒与鹅细小病毒鉴别诊断方法的建立及初步应用

引用

中国家禽 2014年第22期36卷 20-23页

作者：范文胜吴阳开方文棋朱雷何怡宁磨美兰清远容大生物工程有限公司广东清远511517 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 东乡县圩上桥镇农经办江西抚州331801

根据GenBank登录的番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的同源序列区域结构基因REP以及非同源序列区域结构基因VP3,设计了2对引物,建立了一种鉴别诊断MDPV和GPV的二重PCR方法。该方法对GPV能同时扩增出220 bp和443 bp的两条片段,... 详细信息

根据GenBank登录的番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的同源序列区域结构基因REP以及非同源序列区域结构基因VP3,设计了2对引物,建立了一种鉴别诊断MDPV和GPV的二重PCR方法。该方法对GPV能同时扩增出220 bp和443 bp的两条片段,对MDPV只能扩增出443 bp的一条片段,对其它常见鸭病病原均无特异性扩增。应用建立的方法对36份临床病料进行检测,结果5份呈阳性,其中1份为GPV阳性,4份为MDPV阳性,病毒分离结果与病料检测结果吻合。因此,本试验所建立的鉴别诊断MDPV与GPV的PCR方法具有潜在的临床应用价值。

关键词：番鸭细小病毒鹅细小病毒聚合酶链式反应鉴别诊断

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：