检索结果-内蒙古大学图书馆

来源于铜绿假单胞菌GF31的拟除虫菊酯降解酶在大肠杆菌细胞的功能性表面展示

应用与环境生物学报 2023年第2期29卷 334-339页

作者：陆柳萃李青云刘幽燕袁晓黎白雪唐爱星广西大学化学化工学院南宁530004 广西生物炼制重点实验室南宁530007

拟除虫菊酯类农药由于其高疏水性和高分子质量,难以被微生物吸附、摄取和降解,如何提高此类底物的生物可及性是环境生物修复的关键之一.利用细胞表面展示技术将拟除虫菊酯降解酶展示到大肠杆菌细胞表面,构建新型全细胞催化剂,克服拟除... 详细信息

拟除虫菊酯类农药由于其高疏水性和高分子质量,难以被微生物吸附、摄取和降解,如何提高此类底物的生物可及性是环境生物修复的关键之一.利用细胞表面展示技术将拟除虫菊酯降解酶展示到大肠杆菌细胞表面,构建新型全细胞催化剂,克服拟除虫菊酯类农药的吸附-摄取限制.将丁香假单胞菌冰核蛋白InaK的N-末端作为锚定基序与来自铜绿假单胞菌GF31的拟除虫菊酯降解酶基因融合,转化大肠杆菌Rosetta-gami,构建全细胞催化剂.结果表明在0.05mmol/L的IPTG条件下诱导培养12 h后,该全细胞催化剂的氨基肽酶活性达到0.25 U/OD_(600)/mL,对高效氯氰菊酯农药底物的降解速率达到35.9μmol L^(-1)d^(-1),且对5种常用拟除虫菊酯类农药均具有降解能力.通过细胞的分级分离和免疫荧光分析确定了功能蛋白在细胞膜上的正确位置.该全细胞催化剂经过10次重复反应,残余活性仍能保持在70%以上,具有较好的稳定性.本研究实现了拟除虫菊酯降解酶在大肠杆菌细胞表面上的功能性展示,为高疏水性有机农药的环境修复提供了一种方法.

关键词：细菌表面展示拟除虫菊酯降解酶大肠杆菌冰核蛋白

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叔丁醇体系中化学酶法催化α-蒎烯环氧化

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化工进展 2022年第6期41卷 3002-3009页

作者：刘永飞苏伟梁琪琪李青云刘幽燕唐爱星广西大学化学化工学院广西南宁530004 广西生物炼制重点实验室广西南宁530007

采用叔丁醇作为α-蒎烯环氧化的反应溶剂,使过氧化氢水溶液和其他疏水性反应底物形成均相,构建单相体系以代替传统有机-水“双相”系统。首先在摇瓶中对单相体系进行优化,在α-蒎烯浓度为0.3mol/L时,乙酸乙酯的最适浓度为3.5mol/L,过氧... 详细信息

采用叔丁醇作为α-蒎烯环氧化的反应溶剂,使过氧化氢水溶液和其他疏水性反应底物形成均相,构建单相体系以代替传统有机-水“双相”系统。首先在摇瓶中对单相体系进行优化,在α-蒎烯浓度为0.3mol/L时,乙酸乙酯的最适浓度为3.5mol/L,过氧化氢的最适浓度为0.5mol/L,束酸剂为柠檬酸三钠,在40℃下,反应90min,环氧化转化率为92%,收率为88%。此工艺条件下Novozym435重复使用6次后,仍保持64%的相对活力。然后以摇瓶实验为基础,构建了一种连续搅拌釜式反应器(CSTR),探索反应器的最适运行条件,测试了其长期运行性能,结果表明:当Novozym435酶量为2.0g、过氧化氢浓度为0.5mol/L、停留时间为3h时,釜式反应器的运行效果最好,其转化率可达83%,收率可达79%,在此条件下反应器连续运行十天后依然可以保持70%以上的转化率和55%以上的收率。

关键词：溶剂蒎烯催化环氧化化学反应器

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铝工业大修渣总氰化物的无害化处理

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中国环境科学 2023年第11期43卷 5884-5891页

作者：陈昱光李青云沈慧婷杜建嘉林宏飞刘幽燕广西大学化学化工学院广西南宁530004 广西博世科环保科技股份有限公司广西南宁530007

以大修渣(SPL)水浸液为处理对象,探讨了生物除氰无害化的可行性,具体开展碳氮比、接种量、装液量和氰浓度对生物降解的影响,以及降解菌群宏基因组学的功能基因分析研究.结果表明,降解菌群能以铁氰络合物(水浸液中总氰化物的主要形式)为... 详细信息

以大修渣(SPL)水浸液为处理对象,探讨了生物除氰无害化的可行性,具体开展碳氮比、接种量、装液量和氰浓度对生物降解的影响,以及降解菌群宏基因组学的功能基因分析研究.结果表明,降解菌群能以铁氰络合物(水浸液中总氰化物的主要形式)为唯一氮源生长,在碳氮比为6:1、接种量为10%即OD600值为(0.860±0.010)、75mL装液量条件下,对总氰浓度为50mg/L大修渣水浸液的降解率7d达到(65.2%±2.1%).在宏基因组中发现菌群有潜在的氰水合酶、硫代硫酸硫转酶和细胞色素bo等降解关键酶基因.本研究为大修渣工业危险废物氰的无害化处理提供了新的选择.

关键词：大修渣工业危险废物总氰化物无害化处理生物降解

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塔宾曲霉F12胞外聚合物的提取及其吸附Pb^(2+)特性

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广西大学学报（自然科学版） 2023年第4期48卷 997-1008页

作者：关亚铭李青云唐爱星董友情刘幽燕广西大学化学化工学院广西南宁530004 广西大学生物炼制重点实验室广西南宁530004

为了更高效地提取塔宾曲霉的紧密结合型胞外聚合物(tightly bound extracellular polymeric substances,TB-EPS),并研究其对Pb^(2+)的吸附特性,比较了5种方法的提取效率,并研究了吸附时间、pH、温度、初始Pb^(2+)浓度和EPS剂量对TB-EPS... 详细信息

为了更高效地提取塔宾曲霉的紧密结合型胞外聚合物(tightly bound extracellular polymeric substances,TB-EPS),并研究其对Pb^(2+)的吸附特性,比较了5种方法的提取效率,并研究了吸附时间、pH、温度、初始Pb^(2+)浓度和EPS剂量对TB-EPS吸附Pb^(2+)规律的影响。结果表明:采用EDTA-加热法提取TB-EPS的效率最高,且对细胞破坏作用小,最佳提取时间和温度分别为20 min、70℃。pH在3~7范围内,当pH=5时吸附效果较好。温度在25~45℃范围内,温度越高,吸附能力越强。当TB-EPS质量浓度为0.15 g/L时,EPS对Pb^(2+)的去除率最高。当反应时间为90 min时,TB-EPS对Pb^(2+)的吸附即可达到吸附平衡。吸附过程符合拟二级动力学模型和Langmuir吸附等温模型,EPS对Pb^(2+)的吸附以化学吸附为主并且是单层吸附,热力学结果显示吸附过程为自发吸热反应,FTIR光谱显示多糖和蛋白质均参与了对Pb^(2+)离子的吸附。

关键词：胞外聚合物提取吸附铅离子

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水相中合成木质素环氧树脂及其在木材胶黏剂中的应用

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过程工程学报 2022年第5期22卷 671-679页

作者：王勇殷亚庆李青云唐爱星赵磊刘幽燕广西大学化学化工学院广西南宁530000

以木质素为原料,在水相中合成一种适用于木材胶黏剂的木质素环氧树脂。为了考察木质素环氧化反应条件对木质素环氧树脂的羟基和环氧基的影响,以及对胶合板的胶合强度的影响,采用FT-IR和31PNMR对木质素环氧树脂结构进行表征,并用TG和DTG... 详细信息

以木质素为原料,在水相中合成一种适用于木材胶黏剂的木质素环氧树脂。为了考察木质素环氧化反应条件对木质素环氧树脂的羟基和环氧基的影响,以及对胶合板的胶合强度的影响,采用FT-IR和31PNMR对木质素环氧树脂结构进行表征,并用TG和DTG对木质素环氧树脂的热稳定性进行分析。结果表明,环氧化反应主要发生在酚羟基上,在反应过程中,相比环氧氯丙烷,NaOH的加入量对木质素环氧树脂结构和胶合板的胶合强度影响更大。随NaOH加入量增加,木质素环氧树脂中环氧基团逐渐增多,胶合板的胶合强度呈现先升高、后降低的趋势。当木质素的羟基与NaOH摩尔比为1:1时,由木质素环氧树脂制得的胶合板胶合强度达到最大,湿强度达1.61 MPa,超过国家标准II类板的要求(≥0.7 MPa)。采用扫描电镜研究了黏接机理,发现环氧化程度提高时,固化后的木质素环氧树脂的结构更加稳定且致密,导致胶合板的胶合强度也提高。但过高的环氧化程度会增大胶黏剂的粒径,导致胶黏剂与木板不能形成更好的机械互锁结构,从而降低胶合板的胶合强度。还进一步简化了木质素环氧树脂木材胶黏剂的合成工艺,使环氧化反应后的体系无需处理即可直接应用于木材胶黏剂,减少了胶合板生产工艺流程。此外,经过30天的储存期,胶黏剂黏合强度没有明显下降。通过与商业脲醛树脂木材胶黏剂对比,其黏接强度可以达到商业脲醛树脂的水平。

关键词：木质素木质素环氧树脂木材胶黏剂胶合板环氧当量

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粪产碱杆菌DN25基因组分析与功能挖掘

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基因组学与应用生物学 2022年第9期41卷 1893-1902页

作者：蒋汉语沈慧婷李青云唐爱星刘幽燕广西大学化学化工学院南宁530004 广西生物炼制重点实验室南宁530004

产碱杆菌属(Alcaligenes)是一类在环境污染修复领域应用较广泛的革兰氏染色阴性细菌。本研究以1株由课题组筛选获得的能降解氰化物、苯酚的粪产碱杆菌(***)DN25为研究对象,通过全基因组测序分析,探讨该菌株的潜在功能。结果表明:DN25基... 详细信息

产碱杆菌属(Alcaligenes)是一类在环境污染修复领域应用较广泛的革兰氏染色阴性细菌。本研究以1株由课题组筛选获得的能降解氰化物、苯酚的粪产碱杆菌(***)DN25为研究对象,通过全基因组测序分析,探讨该菌株的潜在功能。结果表明:DN25基因组大小为4143808 bp,GC占比为56.51%。通过COG、GO和KEGG数据库对DN25基因组进行功能注释,共注释3805个蛋白编码基因,发现DN25基因组以代谢功能基因为主,同时还拥有较多表达外界防御系统和自我调节系统的基因。通过与其他菌株基因组的比较,发现DN25与*** MUB14、*** P156、*** SCSIO.B001和*** ZD02都具有良好的共线性。本研究工作为后续深入开展产碱杆菌DN25生物催化功能研究提供了基因组信息和基因资源。

关键词：产碱杆菌属全基因组测序比较基因组学基因功能挖掘

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产碱杆菌DN25苯酚羟化酶基因及酶特性分析

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生物技术 2025年第2期35卷 146-151,158页

作者：宋文红李青云颜少慧刘幽燕广西大学化学化工学院广西南宁530004 广西生物炼制重点实验室广西南宁530004

[目的]分析产碱杆菌DN25编码的苯酚羟化酶基因及氨基酸序列,并探究K亚基对酶活性的影响。[方法]使用NCBI分析产碱杆菌DN25与其他菌属中苯酚羟化酶基因结构与编码氨基酸序列的相似性。通过PCR扩增获取基因簇与K亚基缺失基因序列,构建重... 详细信息

[目的]分析产碱杆菌DN25编码的苯酚羟化酶基因及氨基酸序列,并探究K亚基对酶活性的影响。[方法]使用NCBI分析产碱杆菌DN25与其他菌属中苯酚羟化酶基因结构与编码氨基酸序列的相似性。通过PCR扩增获取基因簇与K亚基缺失基因序列,构建重组质粒与重组菌。使用SDS-PAGE对重组菌进行表达分析,测定酶液中苯酚羟化酶活性。通过温度、pH因素考察酶特性及K亚基缺失对酶活性的影响。[结果]产碱杆菌DN25编码多组分苯酚羟化酶的基因与其他菌株中同类基因遗传结构相同,氨基酸序列相似性在43.12%~86.63%之间。完整苯酚羟化酶与K亚基缺失酶的活性分别为174.5 U/mg、82.8 U/mg。完整酶在20~50℃、pH 6~9范围内的活性均在60%以上,而K亚基缺失的酶活性仅在20~40℃、pH 6~7范围较高。[结论]产碱杆菌DN25编码的多组分苯酚羟化酶氨基酸序列与其他菌属有一定差异。K亚基缺失不会使苯酚羟化酶失活,但会使苯酚羟化酶活性以及温度、pH值稳定性降低。

关键词：产碱杆菌多组分酶苯酚羟化酶基因分析基因重组基因缺失原核表达亚基

来源：评论

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基于苯酚降解的粪产碱杆菌Alcaligenes faecalis JF101的全基因组分析

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生物技术通报 2023年第10期39卷 292-303页

作者：张傲洁李青云宋文红颜少慧唐爱星刘幽燕广西大学化学化工学院南宁530004 广西生物炼制实验室南宁530004

粪产碱杆菌属对芳香族类物质表现出广泛的降解能力,本研究对1株粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)JF101开展苯酚降解基因解析,并进一步挖掘其潜在功能。通过对菌株JF101全基因组测序、组装和功能注释,分析其降解苯酚的功能基因,并与5株... 详细信息

粪产碱杆菌属对芳香族类物质表现出广泛的降解能力,本研究对1株粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)JF101开展苯酚降解基因解析,并进一步挖掘其潜在功能。通过对菌株JF101全基因组测序、组装和功能注释,分析其降解苯酚的功能基因,并与5株近缘菌株开展比较基因组学研究。结果表明,JF101基因组大小为4 143 816 bp,GC含量为57.44%,含有3 804个编码蛋白基因和55个tRNA、9个r RNA、5个sRNA,在COG、GO、KEGG数据库中分别注释到3 040、2 529、2 415个基因。鉴定了11个苯酚降解基因。比较基因组学表明,菌株JF101没有质粒,与同属的5株菌株有2 008个共有同源基因家族和5个特异基因家族。此外发现菌株JF101含有与相容性溶质转运相关的Trk、Kdp等基因,实验测定了其耐盐能力。通过对菌株JF101全基因组的解析,为进一步阐释其苯酚降解机制及发展实际工程应用奠定了基础。

关键词：粪产碱杆菌苯酚降解全基因组测序生物学信息

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聚氨酯泡沫固定化生物体系对活性蓝4的吸附脱色

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纺织学报 2022年第8期43卷 132-139页

作者：杨文博张傲洁刘幽燕李青云广西大学化学化工学院广西南宁530004

为构建长效作用的生物脱色体系,采用聚氨酯泡沫(PUF)材料对生物吸附剂黄曲霉菌Aspergillus flavus A5p1进行固定化,以蒽醌染料活性蓝4(RB4)为模型底物,开展了生物吸附剂固定化前后的吸附动力学、不同RB4质量浓度和NaCl质量浓度对脱色的... 详细信息

为构建长效作用的生物脱色体系,采用聚氨酯泡沫(PUF)材料对生物吸附剂黄曲霉菌Aspergillus flavus A5p1进行固定化,以蒽醌染料活性蓝4(RB4)为模型底物,开展了生物吸附剂固定化前后的吸附动力学、不同RB4质量浓度和NaCl质量浓度对脱色的影响、重复使用脱色等实验的对比研究。结果表明:菌株经过固定化之后显著加快了对染料RB4的脱色,20 min时对200 mg/L染料RB4的吸附率达到77.8%,而未固定化的游离细胞90 min的吸附率为62.8%,脱色过程可采用颗粒内扩散动力学模型来描述;PUF-固定化细胞体系对2000 mg/L染料RB4的吸附量约是游离细胞体系的2.5倍,并且能耐受NaCl质量浓度为50 g/L的高盐条件进行脱色;PUF-固定化细胞体系重复使用7次仍能保持89%的脱色率,而游离细胞体系则下降至74.3%,该PUF-固定化细胞体系展示出对提高RB4生物脱色的有效性及可靠性。

关键词：生物脱色黄曲霉菌蒽醌染料活性染料聚氨酯吸附

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黄曲霉A5p1对偶氮染料的降解特性和降解途径

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中国环境科学 2020年第8期40卷 3367-3374页

作者：程宁李青云刘幽燕广西大学化学化工学院广西南宁530004 广西生物炼制重点实验室广西南宁530003

以黄曲霉菌株A5p1为生物材料,研究其脱色染料的广谱性,并选择偶氮染料直接蓝71(DB71)为模型底物,探讨脱色特性及降解产物.该菌株对15种染料的脱色测试结果表明,染料浓度为100mg/L时脱色效率为61.7%~100%.该菌对偶氮染料DB71具有生物吸... 详细信息

以黄曲霉菌株A5p1为生物材料,研究其脱色染料的广谱性,并选择偶氮染料直接蓝71(DB71)为模型底物,探讨脱色特性及降解产物.该菌株对15种染料的脱色测试结果表明,染料浓度为100mg/L时脱色效率为61.7%~100%.该菌对偶氮染料DB71具有生物吸附和生物降解的双重作用,在pH值7.0,温度30℃,染料浓度300mg/L,蔗糖为碳源时对DB71脱色率为100%.酶分析显示葡萄糖氧化酶和锰过氧化物酶参与染料的降解.FTIR、GC-MS和LC-MS分析确定代谢终产物为萘胺、叠氮萘、2-羟基-6-草酰-苯甲酸和1-萘酚.

关键词：真菌染料降解酶

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