目的:评价实验室长期多次传代对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)标准菌株26695 cagA启动子基因稳定性的影响.方法:PCR方法扩增54个不同批次保存的经过多次传代的*** 26695克隆子的cagA启动子,并进行测序,使用Vector NTI Suite 6软...
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目的:评价实验室长期多次传代对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)标准菌株26695 cagA启动子基因稳定性的影响.方法:PCR方法扩增54个不同批次保存的经过多次传代的*** 26695克隆子的cagA启动子,并进行测序,使用Vector NTI Suite 6软件比对序列.结果:54个*** 26695克隆子的cagA启动子序列有22个(40.74%)与NCBI公布的序列完全一致,32个(59.26%)在不同位点发生碱基置换、缺失、插入等突变,其中第17位碱基有5个(15.63%)发生T→C突变,第199位碱基有14个(43.75%)发生A→C的变异,在159-160重复碱基A处有12个(37.5%)发生缺失1个或者2个A,还有一个多出2个A.结论:长期多次传代会导致*** cagA启动子突变,实验室使用标准菌株要注意传代记录,建立不同等级实验室质控,根据使用标准菌株研究内容的水平决定实验室质控的等级.
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