检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：尚杨杨华中农业大学

学位级别：硕士

启动子是一段能起始下游基因转录的DNA调控序列,选择合适的启动子可以驱使目的基因在特定的组织表达,如消化道特异性启动子驱动植酸酶基因在消化道内表达或骨骼肌特异性启动子驱动脂肪相关基因在肌肉中表达。PPARy (Peroxisome Prolifer... 详细信息

启动子是一段能起始下游基因转录的DNA调控序列,选择合适的启动子可以驱使目的基因在特定的组织表达,如消化道特异性启动子驱动植酸酶基因在消化道内表达或骨骼肌特异性启动子驱动脂肪相关基因在肌肉中表达。PPARy (Peroxisome Proliferator-Activated Receptors y)基因作为研究肌内脂肪含量的候选主效基因,能调控脂肪细胞的分化及脂肪沉积。因此,设想通过肌肉组织特异性启动子提高PPARy在肌肉中的表达,增加肌肉中脂肪的沉积,以提高肌内脂肪的含量。本研究通过克隆,筛选及功能验证肌肉组织特异性表达基因myozl (Myozenin1)和tnnc2(Fast Skeletal Muscle Troponin C)的启动子区域,获得具有肌肉组织特异性调控功能的核心启动子,再利用核心启动子成功调控外源基因PPARy在成肌细胞中表达,为构建转基因小鼠模型提供一定的理论基础。取得结果如下： (1)根据进化印记法理论,采用软件MEME分析myozl及tnnc2的调控区域,发现myozl调控区域的保守序列集中在第一外显子5'端附近,而tnnc2调控区域的保守序列集中在第一外显子5'端上游的2000bp左右。 (2)根据MEME分析结果,将myozl及tnnc2启动子区域分别限制在-1885～+170和-2131～+182处。通过在线软件TFSEARCH分析启动子区域可能存在的转录因子结合位点,发现myozl启动子含有TATA-box结构,而tnnc2启动子无TATA-box,还发现多个与肌肉功能相关的转录因子结合位点如MyoD、MEF-2等。根据预测结果设计myozl、tnnc2启动子的缺失片段。 (3)构建启动子及缺失片段重组质粒,通过细胞水平的瞬时转染,发现猪myozl肌肉组织特异性的核心启动子位于-478～+170之间,其转录活性是阴性对照的3倍；猪tnnc2的肌肉组织特异性核心启动子区域位于-2131～-1083之间,其转录活性是阴性对照的8倍左右。随后,构建EGFP表达载体,通过荧光倒置显微镜观察细胞发光情况,发现两个基因的核心启动子均能驱动报告基因EGFP在C2C12细胞中表达。 (4)构建myozl、tnnc2核心启动子与猪PPARy基因的重组表达载体,通过定量PCR及western blot检测PPARy在C2C12细胞中的表达。结果表明,在myozl和tnnc2核心启动子的驱动下, PPARy基因RNA水平的表达量提高了2倍和3倍左右,且猪PPARy蛋白能够在C2C12细胞中成功表达。

关键词：猪 myoz1 tnnc2 启动子 PPARγ 肌内脂肪

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稀土掺杂含氮铝酸盐荧光材料的研究

稀土掺杂含氮铝酸盐荧光材料的研究

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作者：尚杨杨长春理工大学

学位级别：硕士

本论文采用SrCO3、AlN和Eu2O3为原料,通过高温固相反应法制备Sr3Al2O3N2：Eu2+荧光材料。通过实验对影响Sr3Al2O3N2：Eu2+荧光材料的发光性能的各个方面进行了研究。利用X射线粉末衍射仪和荧光分光光度计对荧光材料进行测试,并对结果进... 详细信息

本论文采用SrCO3、AlN和Eu2O3为原料,通过高温固相反应法制备Sr3Al2O3N2：Eu2+荧光材料。通过实验对影响Sr3Al2O3N2：Eu2+荧光材料的发光性能的各个方面进行了研究。利用X射线粉末衍射仪和荧光分光光度计对荧光材料进行测试,并对结果进行分析。当烧结温度为1375℃,保温时间为3h,Eu2+离子的掺杂浓度为10mol%,助熔剂NH4Cl的含量为0.3wt%时制备的荧光材料的发光性能最佳。该荧光材料可以被460nm左右的蓝光激发,发出550nm～650nm的光,发射峰为592nm。分别加入3mol%的Ce3+离子和5mol%的Dy3+离子与10mol%的Eu2+离子共掺杂,可以提高荧光材料的发光性能；引入20mol%的Ca2+离子取代Sr2+离子的格点形成固溶体,也可以提高荧光材料的发光性能。

关键词：发光 Sr3Al2lO3N2:Eu2+ 高温固相反应法

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肠道隐窝干性因子Ascl2介导肿瘤缺氧微环境形成并促进结肠癌细胞EMT发生及转移的机制研究

肠道隐窝干性因子Ascl2介导肿瘤缺氧微环境形成并促进结肠癌细胞E...

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中华医学会第十八次全国消化系病学术会议

作者：尚杨杨陆军军医大学西南医院

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Ascl2基因调节miR-200家族影响结肠癌细胞的上皮向间充质转化

Ascl2基因调节miR-200家族影响结肠癌细胞的上皮向间充质转化

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中华医学会第十七次全国消化系病学术会议暨2017中国消化病学大会

作者：尚杨杨第三军医大学第一附属医院/重庆市西南医院 400038

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结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中HIF-1α与miRNA-200b表达的相关性

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第三军医大学学报 2016年第6期38卷 545-549页

作者：郭靖尚杨杨汪荣泉第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆400038

目的探讨缺氧诱导因子HIF-1α与miRNA-200b在结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中的表达以及两者的相关性。方法采用实时定量PCR检测50例结直肠癌患者的结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α与miRNA-200b的表达。利用Co Cl_2构建结肠癌细胞系... 详细信息

目的探讨缺氧诱导因子HIF-1α与miRNA-200b在结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中的表达以及两者的相关性。方法采用实时定量PCR检测50例结直肠癌患者的结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α与miRNA-200b的表达。利用Co Cl_2构建结肠癌细胞系的缺氧诱导模型,通过实时定量PCR和Western blot分别测定缺氧的Caco-2细胞中HIF-1α和miRNA-200b基因表达并确立两者相关性。结果 HIF-1α在癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P〈0.01）,miRNA-200b在癌组织中的表达显著低于癌旁组织（P〈0.01）,且HIF-1α和miRNA-200b在癌组织中的表达呈负相关（r=-0.324,P〈0.05）。缺氧处理2 h后,HIF-1α表达升高,miRNA-200b表达降低;随着缺氧时间延长（4~12 h）HIF-1α表达逐渐降低,miRNA-200b的表达缓慢上升;缺氧16 h,HIF-1α的表达回升且达到另一个高峰,miRNA-200b的表达降至最低。Real-time PCR和Western blot联合检测发现,HIF-1α和miRNA-200b表达呈相反的趋势。结论 HIF-1α可能通过抑制miRNA-200b的表达从而参与结直肠癌上皮细胞EMT的过程。

关键词：结肠癌 HIF-1α MiRNA-200b EMT

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猪骨骼肌特异性表达基因myoz1/tnnc2启动子的克隆及功能验证

猪骨骼肌特异性表达基因myoz1/tnnc2启动子的克隆及功能验证

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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会

作者：尚杨杨蒋思文华中农业大学动物遗传育种与繁殖实验室教育部重点实验室及农业部猪遗传育种开放实验室湖北武汉430070

组织特异性启动子又称为器官特异性启动子.基因工程中利用这类启动子可以实现外源基因于某些特定的组织或器官表达,在转基因动物制药、畜禽的品种改良及各种疾病的靶向基因治疗等方面有很好的应用.本研究选取了猪的骨骼肌特异性表达基因... 详细信息

组织特异性启动子又称为器官特异性启动子.基因工程中利用这类启动子可以实现外源基因于某些特定的组织或器官表达,在转基因动物制药、畜禽的品种改良及各种疾病的靶向基因治疗等方面有很好的应用.本研究选取了猪的骨骼肌特异性表达基因myoz1和tnnc2的启动子作为研究对象,通过对其克隆、分离及功能验证获得具有肌肉组织特异性的核心启动子区域.研究表明：myozl启动子-1000左右存在的CpG岛，tnnc2启动子-970处存在的MyoD和MEF-2结合位点，推测可能是影响启动子活性的主要因素，缺失试验佐证了这一推测。通过荧光定量PCR和western-blot试验证明获得的核心启动子具有启动外源的猪PPARy基因在C2C12中表达的能力。

关键词：猪骨骼肌特异性表达基因基因启动子功能验证

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GCNT3在结直肠癌中的表达及临床意义

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第三军医大学学报 2019年第10期41卷 913-917页

作者：刘陕西叶钧尚杨杨陈颢元汪荣泉陆军军医大学西南医院全军消化病研究所重庆400038

目的探讨GCNT3在结直肠癌中表达的水平变化及其对结直肠癌患者预后的影响。方法国际癌症和肿瘤基因数据库(TCGA)中下载结直肠癌患者GCNT3基因(编码C2GnT-2)的mRNA表达数据及临床信息,整理分析其表达水平变化对结直肠癌临床相关性及预后... 详细信息

目的探讨GCNT3在结直肠癌中表达的水平变化及其对结直肠癌患者预后的影响。方法国际癌症和肿瘤基因数据库(TCGA)中下载结直肠癌患者GCNT3基因(编码C2GnT-2)的mRNA表达数据及临床信息,整理分析其表达水平变化对结直肠癌临床相关性及预后的影响,并通过细胞增殖实验观察干扰C2GnT-2合成后结直肠癌细胞增殖能力的变化情况。结果 GCNT3在癌组织中较癌旁组织低表达(P<0.001);GCNT3低表达组病人无病生存率显著低于高表达组(P<0.05);干扰C2GnT-2合成后结直肠癌细胞增殖能力显著增强(P<0.01)。结论 GCNT3在结直肠癌中低表达,其低表达可能提示直肠癌患者无病生存率低。

关键词：结直肠癌癌症和肿瘤基因数据库 GCNT3 无病生存率

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Ascl2转录调控人结肠癌上皮细胞内CDX2基因表达的研究

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第三军医大学学报 2014年第18期36卷 1867-1871页

作者：钟小莉尚杨杨潘琼李姗姗刘韵叶钧宋丽丽赵晶京彭志红汪荣泉第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆400038

目的探讨Ascl2对人结肠癌上皮细胞中CDX2基因的转录调控作用。方法预测CDX2启动子的转录因子结合位点,构建包含8个不同长度的CDX2近端启动子的荧光素酶报告基因质粒,分别命名为pGL3-CDX2-C1-8;将各质粒分别转染到shRNA-Ascl2/LS174T和sh... 详细信息

目的探讨Ascl2对人结肠癌上皮细胞中CDX2基因的转录调控作用。方法预测CDX2启动子的转录因子结合位点,构建包含8个不同长度的CDX2近端启动子的荧光素酶报告基因质粒,分别命名为pGL3-CDX2-C1-8;将各质粒分别转染到shRNA-Ascl2/LS174T和shRNA-Ctr/LS174T细胞中,检测细胞中的双荧光素酶活性。采用染色质免疫共沉淀(ChIP)技术,用Ascl2抗体免疫沉淀与CDX2启动子区DNA片段相结合的Ascl2,PCR扩增CDX2启动子的特异性序列。结果转录因子数据库预测到CDX2近端启动子区含多个E-box结合位点和潜在的Nkx-2、GATA-1、CdxA、Sox-5、SRY等顺式作用元件。双酶切及测序结果证实pGL3-CDX2-C1-8重组质粒插入片段序列均正确。重组质粒在shRNAAscl2/LS174T细胞中的荧光素酶活性明显高于shRNA-Ctr/LS174T细胞(P<0.01)。随着CDX2启动子片段的缩短,荧光素酶活性呈升高趋势。ChIP实验证实在CDX2近端启动子存在与Ascl2相结合的片段,在shRNA-Ascl2/LS174T细胞中,Ascl2与CDX2启动子区域中-841^-646、-291^-134、-7^+138片段结合的DNA片段明显少于对照shRNA-Ctr/LS174T细胞。结论 Ascl2在结肠癌上皮细胞中可能通过与CDX2近端启动子的直接结合而达到转录阻遏CDX2基因表达的目的。

关键词： Ascl2 CDX2启动子结肠肿瘤荧光素酶报告基因

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结肠癌组织miR-200c／141定量表达的临床病理学意义

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解放军医学杂志 2015年第12期40卷 987-992页

作者：孟令宽钟小莉潘琼叶钧尚杨杨郭靖汪荣泉重庆第三军医大学西南医院消化内科 400038

目的探讨结肠癌组织mi R-200c/141定量表达与患者临床病理学特征之间的联系。方法实时定量PCR检测49例结肠癌患者癌组织和癌旁组织中的mi R-200c/141的表达水平。分析mi R-200c/141表达量、联合mi R-200c和mi R-141表达量与患者临床病... 详细信息

目的探讨结肠癌组织mi R-200c/141定量表达与患者临床病理学特征之间的联系。方法实时定量PCR检测49例结肠癌患者癌组织和癌旁组织中的mi R-200c/141的表达水平。分析mi R-200c/141表达量、联合mi R-200c和mi R-141表达量与患者临床病理学特征之间的关系,以及mi R-200c/141表达量在判断患者术后1年预后中的意义。结果结肠癌组织中mi R-200c/141表达水平较癌旁组织明显降低(P=0.0002,P=0.0058)。mi R-141表达量与肿瘤大小和淋巴结转移呈负相关(P<0.05),有淋巴结转移或临床Ⅲ-Ⅳ期患者结肠癌组织中mi R-141的表达量明显低于没有淋巴结转移或临床Ⅰ-Ⅱ期患者癌组织的表达量(P=0.035,P=0.042)。mi R-200c/141表达量与肿瘤大小之间明显相关(P<0.05)。mi R-200c/141的表达量与患者术后1年的生存率无相关关系(P>0.05)。结论结肠癌组织中表达下调的mi R-200c/141与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期有关。

关键词：结肠肿瘤病理学临床微RNAs

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一种用于固定胃管的辅助装置

一种用于固定胃管的辅助装置

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作者：叶钧尚杨杨 400020 重庆市江北区建新东路29号

本实用新型公开了一种用于固定胃管的辅助装置，涉及胃管固定技术领域。本实用新型包括安装块以及安装在所述安装块上用于夹持鼻翼的夹持件，所述安装块上安装有连接杆，所述连接杆端部对称固设有垂直与所述连接杆的连接板，所述连接板... 详细信息

标准号: CN215741254U

本实用新型公开了一种用于固定胃管的辅助装置，涉及胃管固定技术领域。本实用新型包括安装块以及安装在所述安装块上用于夹持鼻翼的夹持件，所述安装块上安装有连接杆，所述连接杆端部对称固设有垂直与所述连接杆的连接板，所述连接板的端部安装有镂空件。本实用新型首先将镂空件塞入患者需要插设胃管的鼻腔内，此时气囊也位于患者鼻腔内，此时在通过夹持件将该装置夹持在患者鼻翼处，然后气囊充气使得气囊与患者的鼻腔紧贴，从而将该装置固定在患者的鼻子处，此时因为镂空件的设计使得空气可以从镂空件进入到患者的鼻腔内，实现正常呼吸，该装置与现有的相比不会因为鼻翼或面颊的油脂导致该装置脱落，从而减小了医疗事故的发生。

关键词：镂空件本实用新型安装块鼻腔气囊胃管夹持件连接板连接杆鼻翼夹持固定技术领域连接杆端部塞入辅助装置患者鼻腔患者需要装置固定鼻翼处医疗事故面颊插设充气减小紧贴鼻子对称垂直呼吸

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